Professional Documents
Culture Documents
2. Rpta
4. Principales normas de cuidado y utilizacin del microscopio ptico
El microscopio es un instrumento de precisin que debe tratarse con cuidado y debe manejarse
correctamente para evitar errores, cansancio y prdida de tiempo. Tenga en cuenta las
siguientes consideraciones:
1. Debe mantenerse en un lugar estable. El observador debe colocarse de espaldas a los focos
de luz, prefirindose la luminosidad amortiguada, lejos de las ventanas y sobre una mesa negra
para eliminar luces parsitas y evitar una fatiga innecesaria.
2. Debe colocarse lejos del extremo del mesn, para evitar que se vuelque. La mayora de los
desperfectos se producen por golpes.
3. El microscopio se transporta verticalmente, sujeto por la empuadura con una mano y por la
base con la palma de la otra. El transporte incorrecto puede descansar todo el peso sobre
el control de enfoque micromtrico, erosionando sus muescas.
4. Debe estar cubierto mientras no se usa y no debe sacrsele el ocular. El polvo desgasta los
componentes y se deposita en las lentes.
5. No deben tocarse los lentes oculares, objetivos ni condensador con los dedos. Las manchas
de grasa y sudor los dada.
6. Las lentes deben soplarse enrgicamente con una pera de goma, no deben limpiarse con un
pao seco (las partculas de polvo pueden rayarlas), ni soplando con la boca (una pelcula
lquida es muy difcil de eliminar), ni con los dedos. Si queda polvo debe
emplearse papel especial o pincel que se carga electrostticamente acercndolo a una ampolleta
encendida, lo cual permite recoger las partculas.
7. Para observar hay que sentarse cmodo, en posicin descansada. Las malas posiciones
causan cansancio y dolores musculares.
8. Debe observarse con ambos ojos abiertos. Al estar un ojo cerrado prolongadamente, la
contraccin muscular y la presin sobre el globo ocular causan cansancio y a veces dolor ocular
o de cabeza.
9. Debe mirarse a travs del microscopio, no "en" el microscopio. Si el observador mira como si
la imagen estuviese junto al ojo, la vista se cansa innecesariamente y puede producirse dolor
ocular.
10. Debe haber una distancia adecuada entre el ojo y el ocular. Acrquese desde algunos
centmetros poco a poco hasta observar el campo visual grande y definido.
11. Toda observacin comienza con lupa y pasa ordenadamente a mayores aumentos. Esto
facilita centrar y enfocar, da un campo visual inicial amplio que proporciona visin de
conjunto, facilita la interpretacin y permite ubicar fcil y rpidamente las estructuras. La zona
de la preparacin que desea observarse debe quedar en el centro del campo antes de pasar al
siguiente aumento.
12. El condensador est regulado cuando se encuentra en su posicin ms alta o un poco ms
bajo. Para aumentar el contraste no conviene descenderlo excesivamente ni cerrar el
diafragma, es preferible regular la iluminacin con el control deslizable.
13. No debe colocarse ni retirarse una preparacin estando el objetivo mayor o el objetivo a
inmersin en posicin de trabajo, porque pueden rayarse las lentes frontales.
14. Los movimientos de los mandos de enfoque deben ser lentos y suaves. El control
macromtrico se acciona con precaucin para no chocar el objetivo con la preparacin, lo cual
estropea la lente frontal del objetivo y rompe la preparacin. No debe utilizarse el control
macromtrico con inmersin. El control micromtrico debe mantenerse en posicin central y
accionarse un poco hacia un lado u otro. Se llega al extremo de su recorrido y se insiste, se
pueden romper sus muescas, lo cual obligarla a cambiarlo.
15. La preparaciones se colocan con el cubreobjetos hacia arriba. Si la preparacin est al revs,
al tratar de enfocar choca el objetivo con la preparacin y se daa. Antes de colocar la
preparacin sobre la platina compruebe la posicin del cubreobjetos con la ua.
16. Si la preparacin carece de cubreobjetos no debe observarse con un objetivo mayor a 10X,
de lo contrario el objetivo puede chocar con la preparacin y se puede rayar.
17. No debe colocarse aceite de inmersin sobre objetivos secos (lupa, menor, mayor) ni
utilizarse el objetivo a inmersin como objetivo seco, porque se puede rayar.
18. Para sacar de los lentes el aceite de inmersin debe utilizarse un pao humedecido
ligeramente con ter o xilol, no debe usarse alcohol, que disuelve el adhesivo de las lentes, ni
algodn, que deja fibrillas pegadas al vidrio dificultando la visin.
19. No deben derramarse lquidos sobre el microscopio, si esto sucediera accidentalmente debe
secarse de inmediato. No debe manejarse el microscopio con los dedos hmedos.
20. No debe dejarse el microscopio junto a un mechero encendido, por razones obvias.
21. El microscopio no debe estar encendido mientras no se usa, debe evitarse as su
calentamiento excesivo. Recuerde adems que su ampolleta es de alto costo y tiene una vida
til limitada.
22. Las lentes estn montadas en forma muy precisa, slo se deben limpiar externamente, sin
desmontarlas. Slo un tcnico especializado puede hacerlo para una limpieza completa.
23. No se debe invertir ni ladear el microscopio sin quitar previamente el ocular, que entra por
deslizamiento.
24. Cada vez que el microscopio se deja de usar debe guardarse en forma adecuada: a)
ubicacin lejos del borde del mesn, b) lmpara apagada, c) cable de la lmpara desenchufado,
d) platina limpia y ubicada al tope superior, e) objetivo lupa en posicin de trabajo, f) carro en
posicin central, g) condensador en su posicin ms alta, h) diafragma abierto.
5. Partes del microscopio ptico
Los microscopios pticos constan de dos tipos de componentes, la parte mecnica y la
parte ptica. A los componentes bsicos se agregan accesorios opcionales.
A) Componentes mecnicos ("Montura"): Piezas fijas, que sirven como soporte para
el sistema ptico (estativo), y piezas mviles, que intervienen en la ubicacin adecuada de la
preparacin (enfoque y centrado).
1. Base o Pie: pieza horizontal maciza, de forma variable, pesada, situada en la parte inferior del
microscopio, al que sirve de apoyo y da estabilidad. Generalmente lleva asociada la fuente
luminosa.
2. Empuadura o Brazo: pieza vertical ms o menos curva que se une al tubo, a la platina y a la
base. Sirve para tomar al microscopio durante su traslado y lleva los controles de enfoque. En
algunos modelos corresponde a dos piezas independientes: el brazo, en la parte superior, y la
columna, inferior, que se unen mediante una charnela, articulacin que permite inclinar al
microscopio en mayor o menor grado y adaptarlo a la altura de la vista.
3. Cabezal: pieza hueca, tpicamente cilndrica (cuando es as se le denomina "tubo") en la que
se insertan los tubos portaoculares y el portaobjetivos. A travs del cabezal se observa
la imagen microscpica, sirviendo para sostener a los componentes pticos y mantenerlos a la
distancia correcta. Puede ser monocular o binocular. En los modelos binoculares cada montura
de los tubos portaoculares est rodeada por anillos que permiten ajustar la longitud del tubo, y
los tubos portaoculares pueden desplazarse horizontalmente, lo que permite graduar su
distancia.
4. Portaobjetivos mltiple (revlver): pieza giratoria que sostiene a los tubos portaobjetivos de
diferente aumento. Se desplaza horizontalmente para colocar en posicin de observacin a
cualquiera de ellos.
5. Platina lisa o fija: pieza plana horizontal ubicada entre el objetivo y el condensador, con un
orificio central circular que permite el paso de los rayos luminosos provenientes del
condensador, y sobre el cual se coloca la preparacin para ser observada.
6. Platina mecnica o mvil (Carro): dispositivo acoplado a la platina lisa que sujeta al
portaobjetos y permite su desplazamiento. Es un sistema de piones que actan sobre
cremalleras ubicadas perpendicularmente entre s, produciendo desplazamiento horizontal en
sentido lateral y anteroposterior, lo cual permite ubicar y fijar la zona de la preparacin que
desea observarse. lleva incorporadas dos pinzas que entran a presin y sujetan la preparacin y
escalas graduadas para medir sus desplazamientos.
7. Subplatina: Conjunto de piezas situadas bajo la platina y que soportan al aparato de
iluminacin. Su composicin vara segn el modelo, pero en general consiste en un aro que
sostiene al condensador, el que se mueve de arriba-abajo mediante un tornillo, y tambin
contiene anillos portafiltros, que alojan cristales que mantienen la luz adecuada constante, y un
diafragma-iris, que regula la entrada de la luz y se controla con una palanca lateral, lo que
permite obtener distintos tamaos del cono luminoso que entra en el condensador.
8. Controles de enfoque: dos o cuatro botones ubicados en la empuadura o columna que
desplazan a la platina fija o al cabezal, segn el modelo, lo cual permite enfocar con precisin.
Corresponden a uno o dos botones macromtricos, o de enfoque aproximado, y uno o dos
botones micromtricos, de enfoque fino. Los botones o mandos macromtricos son ms
grandes y de avance rpido, sirven para buscar rpidamente un punto aproximado al del
enfoque. Si hay dos botones macromtricos se enfrentan a ambos lados del brazo y estn
sincronizados, basta mover a uno de ellos. Los botones o mandos micromtricos producen
movimientos lentos y permiten obtener un enfoque exacto. Si son dos, tambin estn
sincronizados. En algunos modelos de microscopios existe un solo botn que
cumple funciones de macromtrico y micromtrico: a igual velocidad de giro el movimiento de
la platina es ms rpido cuanto ms lejos se halla la preparacin del plano de enfoque.
B) Componentes pticos ("Tren ptico"): Piezas implicadas en la formacin de la imagen.
Incluye tres sistemas de lentes que funcionan armnicamente entre s y una fuente de
iluminacin.
1. Condensador: Sistema de lentes convergentes de gran abertura que concentra la luz visible y
la proyecta uniformemente sobre una muestra de tejido convenientemente preparada. Se
encuentra montado en un armazn metlico sujeto a la parte inferior de la platina fija y puede
subirse y bajarse a voluntad accionando un control ubicado lateralmente.
2. Sistema de objetivos: Complejo sistema de lentes (a veces hasta 10) ubicados prximos al
objeto, que acta como una sola lente convergente que recoge las longitudes heterocromticas
de la luz visible, entregando mayores aumentos que los del ocular y produciendo inversin de la
imagen. Los objetivos participan en la primera etapa de ampliacin: producen una imagen
ampliada del objeto y la proyectan sobre un plano ubicado en el interior del cabezal. Cada
objetivo, ubicado en el interior de un tubo (tubo portaobjetivo), puede estar formado por una
lente o por un complejo sistema de lentes convergentes. Los modelos actuales presentan tres o
cuatro objetivos ubicados en sendos tubos, cuya longitud se relaciona con su poder de
aumento. Existen objetivos en seco y de inmersin. Los objetivos en seco ("lupa", "aumento
menor", "aumento mayor") se utilizan dejando aire entre ellos y la preparacin, en cambio el
objetivo de inmersin se emplea colocando una gota de lquido ("aceite de inmersin"), cuyo
ndice de refraccin es superior al del aire.
3. Sistema ocular: Formado por dos lentes plano-convexas centradas y empotradas en un tubo
metlico ms o menos corto (tubo portaocular), al que se acerca el ojo del observador, en cuya
retina proyecta la segunda imagen aumentada. La lente superior se denomina propiamente
lente ocular y la inferior lente de campo o frontal. Lentes adicionales corrigen las aberraciones
cromticas y esfricas. Los oculares son intercambiables y pueden tener diferentes aumentos.
Permiten observar varias veces ms amplificada la imagen que forma el objetivo.
4. Fuente luminosa: Antiguamente era un espejo, en la actualidad se utiliza mucho ms una
lmpara con filamento de tungsteno incandescente enrollado, de 6 a 12 V, montada sobre un
portalmparas especial ubicado en la base del microscopio. La intensidad luminosa se regula
en forma continua girando un botn o moviendo una palanca de control deslizante.
C) Accesorios
Se fabrican accesorios opcionales para colocar en los modelos modernos de microscopios
compuestos, los que pueden colocarse temporalmente en los microscopios compuestos para
desarrollar funciones especiales, otorgndole mayor flexibilidad al aparato. Entre ellos se
cuentan accesorios para la observacin simultnea de dos personas, condensadores de campo
obscuro, obturador central para campo obscuro, accesorio de polarizacin, iluminador vertical,
ocular graduado, accesorios para dibujo, accesorios para fotomicrografa.
6. Problemas frecuentes en el manejo del microscopio
Defectos de Iluminacin:
a) Campo obscuro, sin imagen. Causas probables: l) Falta de luz. Correccin: Accione el
interruptor, enchufe el cable, verifique si hay energa elctrica o si la lmpara esta quemada. 2)
Objetivo fuera de lugar. Correccin: Gire el objetivo a su posicin de enfoque.
b) Campo ovalado, iluminado parcialmente. Causa probable: Objetivo fuera de lugar.
Correccin: Gire el objetivo a su posicin de enfoque.
c) Imagen muy obscura. Causas probables: l) Diafragma cerrado. Correccin: Desplace la
palanca lateral del diafragma. 2) Condensador muy bajo. Correccin: Accione el control que
sube el condensador. 3) Condensador defectuoso. Correccin: Avise para que lo repare un
tcnico.
d) Imagen muy clara. Causas probables: l) Diafragma muy abierto. Correccin: Desplace la
palanca lateral del diafragma. 2) Condensador muy alto. Correccin: Accione el control que
baja el condensador.
Defectos de Enfoque:
a) Falta de imagen. Causas probables: l) Preparacin mal centrada. Correccin: Accione los
controles del carro. 2) Preparacin mal enfocada. Correccin: Accione el mando macromtrico.
b) Imagen borrosa. Causas probables: l) Preparacin mal enfocada. Correccin: Accione el
mando micromtrico. 2) Preparacin al revs. Correccin: Coloque la preparacin hacia arriba.
3) Suciedad en la preparacin, ocular u objetivo. Correccin: Lmpielos.
Imgenes extraas:
a) Manchas o enturbiamientos irregulares, que se desplazan al mover la preparacin. Causa
probable: Suciedad en el cubreobjetos. Correccin: Limpie la preparacin.
b) Manchas o enturbiamientos irregulares que se desplazan al mover el ocular. Causa probable:
Suciedades en el ocular. Correccin: Limpie la lente ocular.
c) Manchas o enturbiamientos que desaparecen al cambiar el objetivo. Causa probable:
objetivo sucio o con aceite. Correccin: Limpie el objetivo.
d) Manchas o enturbiamientos que no se desplazan ni desaparecen al mover el ocular, objetivo
o preparacin. Causa probable: Suciedad en la lente superior del condensador. Correccin:
Limpie el condensador.
e) Lneas finas brillantes. Causa probable: Rayaduras en las lentes o trizaduras en la
preparacin. Correccin: De cuenta al profesor.
f) Otras alteraciones de la imagen (espacios blancos, espacios finos y rectos, grumos
intensamente tenidos, bandas obscuras, crculos con bordes obscuros, etc.). Causa probable:
defectos en las preparaciones (retraccin del tejido, muescas en el cuchillo del micrtomo,
fijador o colorante precipitado, tejido plegado, burbujas de aire, etc.). Correccin: Examine un
sector de la preparacin no alterado o solicite otra preparacin.
7. Bibliografa
Abramowitz, M. 1985 Microscope basics and Beyond. Olympus Corporationm, Lake Success,
N.Y.
Aguilar Peris, J. 1965 Teora y prctica del microscopio, Ed. Saber, Valencia.
Barer, R. 1955 Phase contrast, interference contrast and polarizing microscopy. In: R. Mellors
(edit), Analytical Cytology, 3, Mc Graw Hill, N.Y.
Barrio , R.A. 1982 Formacin de imgenes en el microscopio electrnico, Cuadernos del
Instituto de Investigacin en materiales, Univ. Nacional Autnoma, Mxico.
Binning, G. y H. Rohrer 1985 El microscopio de efecto tnel. Investigacin y Ciencia 109:30-37.
Bradbury, S. 1984 An introduction in the optical microscope. Oxford University Press, N.Y.
Casartelli, J.D. 1968 Microscopa terico-prctica, Ed. Urmo, Bilbao.
Grave, E.V. 1991 Using the microscope: a Guide for Naturalists, Dover Publications.
Grimstone, A.V. 1981 El microscopio electrnico en biologa, ed. Omega.
Hamashima, Y. 1982 The Use of the Olympus Fluorescence Microscope. Olympus Optical Co.,
Tokyo.
Healey, P. 1971 Microscopios y vida microscpica, Ed. Bruguera, Barcelona.
Hearle, J.W.S; J.T Sparrow y P.M. Cross 1972 The use of the scanning electron microscope,
Pergamon Press, N.Y.
Ipohorski, M. y M.R. Marrapodi 1973 Microscopa electrnica de barrido, Comisin Nacional
de Energa Atmica, Bs. Aires.
James, J. 1976 Light microscopic Techniques in Biology and medicine, Ed. Martinus Nijhoff,
The Hague.
Locquin, M. y M. Langeron 1985 Manual de microscopa, Ed. Labor, Barcelona.
Lpez, M.L. 1990 El microscopio electrnico, elementos de teora y prctica para bilogos.
Serie Cientfica Avanzada, Centro
de Extensin Biomdica, Facultad de Medicina, U. de Chile.
Menigault, P. 1972 El microscopio, Ed. T.E.I., Burgos.
Needham, G.H. 1977 Practical use of the microscope, Charles C. Thomas Publ., Ltd.
Pantin, C.F.A. 1968 Tcnicas microscpicas para zologos. Editorial Academia, Len.
Richardson, J.H. 1991 Handbook for the light microscope: a users guide, Noyes Publications.
Stroscio, J.A. y W.J. Kaiser (Edits.) 1993 Scanning tunneling microscopy, Academic Press Inc.
Stwertka, E. y A. Stwertka 1989 Microscope: how to use it and enjoy it, Library Binding.
Palabras claves:
Microscopa, propiedades de las lentes, cuidados y uso del microscopio
Resumen:
Tras una introduccin general sobre el microscopio, se explican los principales tipos que se
utilizan en las ciencias biolgicas, las propiedades de las lentes y del microscopio ptico,
principales normas de cuidado y utilizacin del microscopio ptico, sus
partes y los problemas ms frecuentes en el manejo del mismo y cmo resolverlos.
Trabajo enviado y realizado por:
Manuel Tamayo
Universidad Catlica del Maule,
Talca, Chile.
mtamayo[arroba]hualo.ucm.cl
Bibliografa
http://www.microscopyu.com
Microscopio compuesto
El sistema mecnico est constituido por una palanca que sirve para sostener, elevar y
detener los instrumentos a observar.
El sistema de iluminacin comprende un conjunto de instrumentos, dispuestos de tal
manera que producen las ranuras de luz.
El sistema ptico comprende las partes del microscopio que permiten un aumento de los
objetos que se pretenden observar mediante filtros llamados "de antigel subsecuente".
ndice
[ocultar]
Sistema ptico
Es el encargado de reproducir y aumentar las imgenes mediante el conjunto de lentes
que lo componen. Est formado por el ocular y los objetivos. El objetivo proyecta una
imagen de la muestra que el ocular luego ampla.
El ocular: se encuentra situado en la parte superior del tubo. Su nombre se debe a la
cercana de la pieza con el ojo del observador. Tiene como funcin aumentar la
imagen formada por el objetivo. Los oculares son intercambiables y sus poderes de
aumento van desde 5X hasta 20X. Existen oculares especiales de potencias mayores
a 20X y otros que poseen una escala micromtrica; estos ltimos tienen la finalidad de
medir el tamao del objeto observado.
Los objetivos: se disponen en una pieza giratoria denominada revlver y producen el
aumento de las imgenes de los objetos y organismos, y, por tanto, se hallan cerca de
la preparacin que se examina. Los objetivos utilizados corrientemente son de dos
tipos: objetivos secos y objetivos de inmersin.
Los objetivos secos se utilizan sin necesidad de colocar sustancia alguna entre
ellos y la preparacin. En la cara externa llevan una serie de ndices que indican
el aumento que producen, la abertura numrica y otros datos. As, por ejemplo, si
un objetivo tiene estos datos: plan 40/0,65 y 160/0,17, significa que el objetivo es
planacromtico, su aumento 40 y su apertura numrica 0,65, calculada para una
longitud de tubo de 160 mm. El nmero de objetivos vara con el tipo de
microscopio y el uso a que se destina. Los aumentos de los objetivos secos ms
frecuentemente utilizados son: 4X, 10X, 20X, 40X y 60X.
El objetivo de inmersin est compuesto por un complicado sistema de lentes.
Para observar a travs de este objetivo es necesario colocar una gota de aceite
de cedro entre el objetivo y la preparacin, de manera que la lente frontal entre en
contacto con el aceite de cedro. Generalmente, estos objetivos son de 100X y se
distingue por uno o dos crculos o anillos de color negro que rodea su extremo
inferior.
Sistema de iluminacin
Este sistema tiene como finalidad dirigir la luz natural o artificial de tal manera que ilumine
la preparacin u objeto que se va a observar en el microscopio de la manera adecuada.
Comprende los siguientes elementos:
Poder separador. Tambin llamado a veces poder de resolucin, es una cualidad del
microscopio, y se define como la distancia mnima entre dos puntos prximos que
pueden verse separados. El ojo normal no puede ver separados dos puntos cuando
su distancia es menor a una dcima de milmetro. En el microscopio viene limitado por
la longitud de onda de la radiacin empleada; en el microscopio ptico, el poder
separador mximo conseguido es de 0,2 dcimas de micrmetro (la mitad de la
longitud de onda de la luz azul), y en el microscopio electrnico, el poder separador
llega hasta 10 .
Poder de definicin. Se refiere a la nitidez de las imgenes obtenidas, sobre todo
respecto a sus contornos. Esta propiedad depende de la calidad y de la correccin de
las aberraciones de las lentes utilizadas.
Ampliacin del microscopio. En trminos generales se define como la relacin entre el
dimetro aparente de la imagen y el dimetro o longitud del objeto. Esto quiere decir
que si el microscopio aumenta 100 dimetros un objeto, la imagen que estamos
viendo es 100 veces mayor linealmente que el tamao real del objeto (la superficie de
la imagen ser 1002, es decir 10.000 veces mayor). Para calcular el aumento que est
proporcionando un microscopio, basta multiplicar los aumentos respectivos debidos al
objetivo y el ocular empleados. Por ejemplo, si estamos utilizando un objetivo de 45X
y un ocular de 10X, la ampliacin con que estamos viendo la muestra ser: 45X x 10X
= 450X, lo cual quiere decir que la imagen del objeto est ampliada 450 veces,
tambin expresado como 450 dimetros.
3. y 4. RSPTA
lente ocular, al otro extremo del tubo, est situadams cerca del ojo y hace la
funcin de lupa sobre la imagen que produce la lente objetivo.
El ocular logra que veamos la imagen del objetivo con un ngulo aparente mayor
que si el objeto estuviera en el punto prximo del ojo.
La lente objetivo produce una imagen mayor, real e invertida, y la lente ocular,
actuando sobre ella, la hace ms grande pero la deja invertida y virtual.
La distancia entre el punto focal imagen del objetivo y el punto focal objeto del
ocular se llama longitud del tubo, L. En los microscopios tiene un valor fijo: 16
cm.
El poder amplificador del microscopio (M) es el producto de la amplificacin
lateral del objetivo por la amplificacin angular del ocular:
El ngulo mximo con que el ojo ve el objeto sin usar lentes es el que logra
cuando el objeto est situado en el punto prximo del ojo. En esta posicin se
forma imagen ms grande en la retina.
Las casas comerciales facilitan con los microscopios unas tablas en las que se
indican los aumentos logrados con diferentes objetivos. Son del tipo siguiente:
Objetivo Aumento total Distancia
Aumento
(distancia de
Objetivo Ocular Ocular Ocular
focal trabajo
(para L=16 cm) x5 x10 x15
en mm) (mm)
50 3,2 16 32 48 30
25 6,4 32 64 96 14
16 10 50 100 150 8
8 20 100 200 300 2
4 40 200 400 600 0,5
2 80 400 800 1200 0,2
Cuanto mayor es el aumento del objetivo ms cerca est del objeto y menor es la
lente por lo que llega menos luz al ojo. A mayor aumento menos luminosidad.
Poder separador.
La luz visible tiene una longitud de onda comprendida entre los 400 y los 700
manometros (nm). Esta caracterstica supone una limitacin al poder separador
(distancia a la que dos puntos se ven separados). Piensa que la materia, tus
manos, por ejemplo, estn formadas por tomos, pero tu las ves como un todo
continuo.
El aumento total ms idneo debe estar comprendido entre 500 (A.N.) y 1000
(A.N.) veces la apertura numrica del objetivo. Oculares de gran potencia
favorecen el aumento pero disminuyen la luminosidad, nitidez y las dimensiones
del campo visual. Por eso es aconsejable situar el aumento total entre 500 y 1000
veces el valor de A.N.
Esta regla est basada en las relaciones entre los poderes separadores del ojo y
del microscopio.
Ejemplo
Segn la regla anterior, para un objetivo de aumento x40 y A.N. 0,65 debemos
usar un ocular que logre valores comprendidos entre los siguientes aumentos
10000,65=650 aumentos
Para lograr valores comprendidos entre 325 y 650 aumentos con un objetivo de
x40 debemos emplear oculares de x10 y x15
Existen dos poderes de resolucin del microscopio uno en el plano horizontal del
enfoque que se estudia como Poder separador y otro en el plano vertical que se
estudia como Profundidad de foco o Poder penetrante.
LONGITUD FOCAL
Para cada formato existe una longitud focal que proporciona un ngulo de visin "normal", o sea,
aquella que coincide con la longitud de ladiagonal del formato a cubrir. As, el objetivo
normal para el formato de:
35 mm. es de una longitud focal de 50 mm,
6 x 6 es de una longitud focal de 80 mm y de
9 x 12 de una longitud focal de 150 mm.
OBJETIVO NORMAL
Casi todas las cmaras de formato 35 mm. van provistos de objetivos "normales" de 50mm. de
longitud focal que proporcionan un ngulo de visin similar a la del ojo (45) con una imagen muy
parecida en tamao y perspectiva a la que percibimos.
Se habla entonces de su "perspectiva natural" o "visin humana" por la apariencia ms exacta o
verdadera de la imagen en la que no existe reduccin o ampliacin del entorno, procurando as
una idea clara y ms fiel de la realidad. Es el ms usado.
TELEOBJETIVO
El ngulo de visin de un "tele" es ms estrecho que el del objetivo normal. La visin a travs de
l es parecida a la dada por un telescopio. La imagen tele objetiva se caracteriza por su ngulo de
visin estrecho y una reducida profundidad de campo. La imagen aparece "ampliada"
producindose una sensacin de acercamiento y aplanamiento del tema provocada por la
captacin de una parte de nuestro campo visual.
A medida que es mayor la longitud focal, el campo de visin se hace ms estrecho.
Su peso, y menor luminosidad favorecen el riesgo de fotos movidas, obligando al uso del trpode y
pelculas de alta sensibilidad.
GRAN ANGULAR
Son aquellos que poseen una longitud focal inferior a la normal abarcando un ngulo mayor que el
de la visin ntida del ojo. Al mirar por un gran angular, parece que todo est ms lejos pero a la
vez abarcando ms campo visual. La imagen gran angular est como "reducida" ocupando un
espacio menor que a simple vista por lo que se produce la sensacin de alejamiento del tema. Sus
caractersticas son amplio ngulo de visin, gran profundidad de campo. El ngulo abarcado es
tanto mayor cuanto menor o ms corta sea la longitud focal. Atendiendo a esta pueden dividirse en
dos grupos:
- Angulares medios, desde 40 hasta 28 mm (en 35 mm.)
- Angulares extremos, por debajo de 28 mm.
Objetivos especiales
OBJETIVO ZOOM
El zoom es un objetivo de longitud focal variable capaces de cumplir las funciones de varios
objetivos simples a la vez. Dependiendo de las longitudes focales que abarque, puede ser angular,
normal o tele. En 35 mm. uno de los ms usados es el 80/200 mm
OBJETIVO MACRO
El macro es un objetivo con un mecanismo de enfoque que permitir la aproximacin necesaria para
fotografiar pequeos detalles del tema. La capacidad de aproximacin suele expresarse segn la
relacin 1:2 o 1:4, lo que significa que puede reproducir un motivo a la mitad o a la cuarta parte de
su tamao original respectivamente.
Oculares
INTRODUCCIN.
Los oculares son elementos importantsimos para la obtencin de imgenes de
calidad. Por lo general, se da mucha menos importancia a los oculares de la que
realmente tienen. Adems, existe una gama muy amplia de marcas, modelos y
tamaos, que permiten al aficionado aumentar su coleccin de oculares para
conseguir mejores rendimientos.
Cuando se adquiere un ocular es importante fijarse en el campo en grados que
tiene cada uno de ellos, denominado campo aparenteque no hay que confundirlo
con el campo que aparece con cuando se coloca en el telescopio (campo real o
ngulo de campo), sino el que tiene el propio ocular como elemento ptico
independiente. El campo aparente, se considera estrecho cuando llega a un
mximo de 35, medio hasta 50 y grande si alcanza los 60-80. Cuanto mayor
sea este campo aparente mucho ms agradable es la visin.
El campo real o ngulo de campo en el firmamento depende de cul sea el
campo del ocular y cul la relacin focal del telescopio o ngulo del cono de luz
proporcionado por el objetivo. Para conocer este campo real basta que cada
observador cronometre el tiempo que tarda una estrella en recorrer
diametralmente la zona del firmamento abarcada. De todos modos, en el
telescopio siempre ofrecern mayor campo aquellos que por s mismo ya lo
tienen mayor.
ESCALA DE POTENCIAS
Se necesitan al menos 4 oculares para tener una escala progresiva de potencias
que permitan trabajar comodamente. Estos deben incluir un ocular de muy baja
potencia que ofrecera un gran campo y mucha luminosidad, con otro que llegue
a la ms alta potencia con calidad que permita el dimetro del objetivo. (Lmite
terico de amplificacin). Estos 4 oculares pueden convertirse en 2 ms una lente
de Barlow, que amplifica por 2 la potencia de cada ocular.
No es conveniente sobrepasar el
lmite terico de amplificacin, pero
tampoco hacerlo por defecto es decir
utilizar un ocular de muy baja
potencia, cuyo lmite se encuentra
dividiendo por 7 el dimetro del
objetivo en milmetros.
c)Si la atmsfera fuera absolutamente estable, lo anterior podra ser una regla
que siempre se cumple. Pero la borrosidad causada en las imgenes por la
presencia de nubes de tipo alto (cirros) o por neblinas, las turbulencias trmicas
en el aire y la polucin luminosa, son todos ellos factores que influyen a la hora
de emplear un ocular de menor potencia a la deseada para obtener una imagen
ms luminosa y contrastada pero tambin ms pequea.
El tamao de las lentes no afecta, en principio, a los parmetros pticos. Un
ocular de 18 mm de distancia focal, por ejemplo, dar en un telescopio los
mismos aumentos, tanto si las lentes que lo componen tienen un diametro como
otro. La diferencia est en el campo resultante y tambin en la comodidad de la
observacin.
Tipos de objetivo
Los puntos fuertes de los lentes objetivos que se encuentran en la mayora de los
microscopios son. 4x, 10x, 40x y 100x Para calcular el aumento real proporcionado por
cada tipo de lente objetivo, basta con multiplicar el nmero antes de la x por diez. As,
un lente 4x en realidad muestra un objeto a 40 veces su tamao natural. Los lentes 10x
muestran un objeto en 100 veces, un 40x a 400 veces, y un 100x en 1.000 aumentos.
Cmo funciona
El potencial de aumento del lente objetivo est determinado por la relacin entre su
distancia de las muestra y el plano de la imagen. El plano de la imagen es donde
realmente se observa la imagen ampliada. Para los microscopios ms habituales el
plano de la imagen est en los oculares a travs del cual se mira. Los equipos
microscpicos ms sofisticados pueden tambin ofrecer un proyector que proyecta la
imagen sobre una superficie separada. Aqu se encuentra el punto focal desde donde se
proyecta la imagen el cual constituye el plano de la imagen, en lugar de las piezas
oculares.
5. RPTA :
6. RPTA: DIFERENCIAS
Frotis
Frotis de sangre humana normal: a - Glbulos rojos; b- Glbulo blanco neutrfilo; c- Glbulo blanco eosinfilo;
d - Linfocito.
Extensin en el portaobjetos
Dos frotis adecuados para la caracterizacin de los elementos celulares sanguneos. El frotis izquierdo se
halla sin teir y el derecho se halla teido con Wright-Giemsa.
Para llevar a cabo las extensiones en portaobjeto se coloca una gota de sangre de 3 a 4 mm
de dimetro, a unos 2 o 3 cm de uno de los extremos del portaobjetos, este se coloca en una
superficie plana y lisa. Con el borde de otro portaobjeto, con el que se toca la gota de sangre,
la cual se desliza por capilaridad a todo lo largo de el canto de dicho portaobjeto y con un
movimiento rpido y uniforme, en un ngulo de 45 grados se desliza el portaobjetos dejando
una capa de sangre en la superficie del otro. El espesor del extendido debe ser delgado
EXTENSIONES O FROTIS SANGUNEO
Una extensin o frotis sanguneo consiste en recubrir parcialmente un porta con una gota de
sangre, de tal manera que las clulas de sta se dispongan formando una sola capa de ellas.
Esto puede hacerse manual o automticamente. Lo ltimo se realiza mediante un aparato
(spinner) que centrifuga rpidamente el porta con la sangre depositada en su centro. Con este
aparato se obtienen unos frotis que presentan una distribucin celular muy homognea.
Mejor respuesta: En el frotis, haces una pelcula de la muestra (material biolgico) pero no
puedes observar microbios, y con la tincin, aprovechas las cargas de las protenas en las cpsula
bacteriana para que se tian con el qumico colorante que use
La imagen real se forma por rayos convergentes que pueden ser recogidos sobre
una pantalla o una placa fotogrfica.
Simplemente, una imagen real puede ser capturada en una pantalla (por ejemplo, en una hoja de
papel), una imagen virtual no.
Por ejemplo, si tenemos un bombillo (o una ventana), una lente convergente y una hoja de
papel. Al enfocar el bombillo (o una ventana) en la hoja aparece la imagen invertida del
bombillo (o de la ventana), esa imagen es real. Ahora, si la lente es divergente, jams se
formar una imagen en la hoja de papel, pero si miramos a travs de dicha lente podemos
ver la imagen del bombillo (o de la ventana) esa es una imagen virtual. Cuando tu te miras
en un espejo plano la imagen que ves es una imagen virtual, jamas podras proyectar tu
imagen con un espejo plano.
Los espejos cncavos y lentes covergentes pueden producir imagenes reales y virtuales,
dependiendo de la posicin del objeto con respecto al espejo o lente.
Los espejos convexos y lentes divergentes slo pueden producir imagenes virtuales.
aca esta la definicion en terminos cientificos
La imagen real es cuando los tres rayos reflejados pasan por el mismo punto por el cual pasan
dos de los mismos. Es el extremo de la imagen por lo que la imagen se forma en la superficie.
y la virtual se da cuando dos rayos se cruzan en sus prolongaciones por lo que el espejo no
contine la imagen y la misma se forma delante de este...0
Debido a la naturaleza de la luz, la formacin de imgenes, es una consecuencia de la reflexin de la luz. sin
embargo no todas la imgenes que observamos son reales en s, porque se pueden formar las
llamadas imgenes virtuales. la imagen que observamos dentro de un espejo es en realidad una imagen
virtual, porque los rayos de luz no penetran el espejo para formar la imagen sino que se forman por
la interseccin de la prolongacin de los rayos reflejados.
Imagen Real
Una imagen real, ocurre cuando se forma directamente por los rayos. Un ejemplo de ello son las
proyecciones de las diapositivas y las las imgenes formadas por un proyector de transferencias, ya que los
rayos de luz son emitidas, y forman la imagen en la superficie correspondiente.
Imagen virtual
En ptica geomtrica, una imagen virtual est formada por la proyeccin de los rayos
reflejados o refractados (segn sea el caso de un espejo o lente, respectivamente) en el
dispositivo las que convergern en un punto formando la Imagen virtual. (A diferencia de
una imagen real que se forma con los rayos reflejados o refractados y no con sus
proyecciones). Las imgenes virtuales tienen que ser vistas directamente, situando el ojo en el
trayecto de los rayos, alterado por el sistema ptico. Las imgenes dadas por el objeto
reflejado en un espejo liso, son siempre virtuales. En cambio, si el sistema ptico es un espejo
curvado o una lente, las representaciones sern existentes o virtuales, en virtud de la situacin
real de objeto y el foco del sistema.