XI Congreso de Biotecnologa CHIAPAS 2016

Microorganismos fijadores de nitrgeno de vida libre aislados de

TTULO
Direccin de correspondencia
suelos cafetaleros del municipio Unin Jurez, Chiapas
Universidad Autnoma de Chiapas Campus IV, Instituto de
Biociencias, Boulevard Prncipe Akishino, Colonia Antiguo
Aeropuerto, Tapachula Chiapas, Mxico. C.P. 30796.

Correo electrnico de
gc.arias@outlook.com
correspondencia

Telfono de correspondencia 9621141510

PROPUESTA DE PRESENTACIN: ORAL ______ CARTEL ___X___

Biotecnologas apropiadas Biotecnologas que resuelven problemas

 XI Congreso de Biotecnologa CHIAPAS 2016

MICROORGANISMOS FIJADORES DE NITRGENO DE VIDA LIBRE AISLADOS DE

SUELOS CAFETALEROS DEL MUNICIPIO UNIN JUREZ, CHIAPAS
Cruz-Arias Jes*, Bernal-Lpez Eduardo, Zavala-Mazariegos Francisco J., Snchez-Gutirrez
Adriana.

Universidad Autnoma de Chiapas Campus IV, Instituto de Biociencias, Boulevard Prncipe

Akishino, Colonia Antiguo Aeropuerto, Tapachula Chiapas, Mxico. C.P. 30796. Email:
gc.arias@outlook.com

INTRODUCCION en medio de cultivo solido rojo Congo con

El nitrgeno ocupa ms del 75% de los gases
presentes de la atmosfera y tambin est
presente en muchos de los nutrientes que
necesitan para subsistir tanto las plantas
como los humanos. Para que las plantas
logren incorporar este elemento es necesario
que sea transformado mediante un proceso
denominado fijacin biolgica del nitrgeno,
dicho proceso est reservado para unos
cuantos microorganismos los cuales estn
presentes en la mayora de los suelos y son
considerados unos de los principales
promotores de la nutricin vegetal (1).
La regin del soconusco se ha caracterizado
durante dcadas por sus extensas
plantaciones de caf as como por su
productividad y competencia. Como
consecuencia se requiere de la incorporacin
de grandes cantidades de nitrgeno al suelo
ya que dependiendo de las cantidades
disponibles de nitrgeno se puede estimular
el crecimiento y la productividad vegetal (2).
Por tanto el objetivo general fue aislar
microorganismos fijadores de nitrgeno de
suelos cafetaleros del municipio Unin
Jurez, Chiapas.
cido mlico como principal fuente de
carbono. Despus de la purificacin se
procedi a realizar la caracterizacin
morfolgica. A las cepas aisladas se les
realizaron pruebas bioqumicas las cuales
fueron hidrlisis de almidn, hidrlisis de
celulosa, solubilizacin de fosfato, oxidacin
de glucosa y lactosa, prueba de citratos de
Simmons y prueba de cido indolactico de
SIM. Para confirmar que realmente fuesen
fijadoras, se busc la presencia de la
nitrogenasa mediante la amplificacin del gen
nifH, previa extraccin de DNA de cada cepa
aislada.
RESULTADOS Y DISCUSION
Las caractersticas morfolgicas fueron
variadas entre las 9 cepas aisladas, la
mayora de cepas presentan tincin de Gram
negativa con excepcin de las cepas 9 y 10
que presentan una tincin positiva. En cuanto
a la forma de los microorganismos las cepas
9 y 6 presentan formas de estreptococos y el
resto presentan forma de cocos.
Los resultados de la caracterizacin
bioqumica se muestran en el Cuadro 1.

MATERIALES Y MTODOS Cuadro 1. Caracterizacin bioqumica

Prueba/C B B B B B B B B B1
epa 1 2 3 4 5 6 7 9 0
El muestreo se realiz en 2 parcelas con Ox. gluc. + + + + + + - - -
cultivos de caf distintos: rabe (Coffea Ox. lact. + + + + + + - - -
arabica) y robusta (Coffea canephora) Indol - + - + + - - + -
respectivamente, ubicadas en el municipio de H. alm. - + + + + + - - +
Unin Jurez, Chiapas. Se extrajeron 3 H. cel. - + - - - - - - -
muestras de suelo por cada lugar, as mismo Sol. fos. - - - - - - - - -
se realiz una muestra compuesta por cada Citrato + - + - - - - - -
sitio. Para el aislamiento y posterior
purificacin las muestras fueron inoculadas

Biotecnologas apropiadas Biotecnologas que resuelven problemas

 XI Congreso de Biotecnologa CHIAPAS 2016

RNA o cloroformo y por esto el primer no

pudo realizar la amplificacin o bien los
Las cepas que presentan resultados positivos microorganismos aislados no son fijadores de
en las pruebas de oxidacin de glucosa y nitrgeno.
lactosa, hidrolisis de almidn y celulosa y
citrato podran tener una mayor capacidad de
fijacin del nitrgeno en caso de que fueran CONCLUSIONES
de esta clase ya que al disponer de No podemos afirmar que los
diferentes fuentes de carbono producen microorganismos aislados son autnticos
mayor energa, esto representara, a nivel de fijadores de nitrgeno puesto que se carecen
produccin de nitrogenasa, una mayor de pruebas moleculares que apoyen esto.
fijacin por cada gramo de carbohidratos As mismo, por las pruebas bioqumicas
consumidos(3). realizadas podemos intuir que existen
El cuadro 1 indica que solo 4 cepas son microorganismos que promueven el
capaces de producir indol, esta es una crecimiento vegetal como son aquellas que
molcula precursora del cido indolactico la producen indol.
cual se caracteriza por ser una auxina
(fitohormona) promotora del crecimiento REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
vegetal(4) y por tanto las bacterias que
presentan resultados positivos podran ser 1. Leaungvutiviroj C., Ruangphisarn
candidatas para desempear dicho papel. P., Hansanimitkul P., Shinkawa
H., Sasaki K. (2010). El
La extraccin de DNA tuvo xito en 6 de las desarrollo de un nuevo
cepas aisladas las cuales fueron la cepa 1, 3, biofertilizante con una aptitud alta
4, 5, 6 y 9. para la fijacin N2, fosfato y
solubilizacin de potasio y la
produccin de auxina. Biosci
Biotechnol Biochem 74:1098-
1101.
2. Reinhold-Hurek Barbara, Hurek
Thomas (2005). Leben in
Grsern: Kooperation zwischen
Pflanzen und Bakterien fr einen
Figura 1. Resultado de las electroforesis en nachhaltigeren
gel de agarosa al 1%. Cada carril contiene landwirtschaftlichen Anbau.
DNA de cada cepa aislada (C: cepa) GenomXPress Sonderausgabe
pp: 7.
3. Dbereiner, J. & Pedrosa, F.
(1987). Nitrogen-fixing bacteria in
nonleguminous crop plants.
Science Tech Publishers. United
States pp:155.
4. Aoki, Y.; Yoshida, Y.; Yoshida,
M.; Kawaide, H.; Abe, H. and
Natsume, M. (2005). Anthranilic
Figura 2. Resultado de la electroforesis en acid, a spore germination
gel de agarosa 1.5% para amplificar el gen
inhibitor of phytopathogenic
nifH (C: cepa)
Streptomyces sp. B-9-1 causing
La electroforesis para amplificacin tuvo root tumor of melon.
resultados nulos al no presentar bandas en el Actinomycetolgica 19: 48-54.
gel de agarosa. Esto puede deberse a que
durante la PCR hubo contaminaciones de

Biotecnologas apropiadas Biotecnologas que resuelven problemas