UNIVERSIDAD LATINA DE PANAMA

SEDE JOSE BARRIOS

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

DR. WILLIAM C. GORGAS

ESCUELA DE TECNOLOGIA MDICA

CUERSO DE INMUNOLOGIA CLINICA

Profesora: Javier Ruiz

COMPLEJO MAYO DE HISTOCOMPATIBILIDAD (MHC)

MHC Clase 1
MHC Clase 2

GRUPO #1

ESTUDIANTES: JAISON LOMBARDO

ORLANDO SANCHES

V SEMESTRE
 INTRODUCCION

El sistema inmunitario es el encargado de defender al organismo frente a los agentes

patgenos. De entre las clulas que intervienen en este sistema, los linfocitos son las
responsables de la respuesta inmune adaptativa. Los linfocitos T, protagonistas de la inmunidad
celular, poseen receptores que reconocen fragmentos peptdicos, generados a partir de
protenas, que son presentados en la superficie de clulas presentadoras de antgeno (APC)
asociados a las molculas del complejo principal de histocompatibilidad (molculas de MHC). La
importancia de las molculas de MHC en la respuesta inmune se descubri en 1974 cuando
Zinkernagel y Doherty observaron que linfocitos T aislados de un ratn infectado podan
reconocer clulas de otro ratn infectadas por el mismo virus solo en el caso de que ambos
expresaran la misma isoforma de MHC (Zinkernagel 1974), demostrando que en la activacin de
las clulas T intervienen tanto determinantes del antgeno como de las molculas del MHC. Es
lo que se conoce como restriccin por el MHC.

El estudio de los mecanismos que dan lugar a la formacin de los complejos MHC-
pptido, su presentacin en la superficie de la APC y el reconocimiento de los mismos por parte
de las clulas T es fundamental para poder entender, no slo la respuesta inmune a infecciones,
sino tambin patologas tan relevantes como el cncer, la autoinmunidad o el rechazo de
trasplantes. Asimismo, la identificacin de los pptidos asociados a las molculas de MHC puede
ser una va en el desarrollo de vacunas y frmacos para el tratamiento de enfermedades
asociadas con fallos en el reconocimiento de antgeno. En esta tesis se presentan los resultados
obtenidos en el estudio de la va de presentacin de pptidos por las molculas de MHC de clase
II, utilizando diversas estrategias protemicas.
 Historia
El CMH fue descubierto en la dcada de 1950. Previamente, en el ao 1900 el campo de
la inmunogentica se abri con el descubrimiento de los grupos sanguneos, seguido por
el descubrimiento del factor Rh en 1940.

En 1936, Peter Gorer fue el primero que describi un complejo de histocompatibilidad en

ratones. Su investigacin fue seguida por George Snell quin plante que el rechazo de
tejidos por el ratn era debido a incompatibilidad en algunos antgenos. Este CMH fue
denominado H-2 (en honor al antgeno 2 descrito por Gorer) y es similar al CMH de
varias especies.

En 1952, Jean Dusset plante la hiptesis de que un sistema de histocompatibilidad

similar al de los glbulos rojos deba estar presente en los glbulos blancos. Logr
demostrarlo con la aglutinacin de leucocitos en el suero de un paciente poli transfundido.

La primera identificacin concreta de un producto del CMH, fue hecha en el ao 1958,

mediante el estudio de suero reactivo. Se identific el antgeno MAC, correspondiente al
actual HLA-A2. En los aos 1960, el polimorfismo fue confirmado con el trabajo de Jon
van Rod, Rose Payne y Walter Bodmer, quienes describieron los antgenos 4a y 4b (Bw4
y Bw6), y los HLA-A2 y HLA-A3 en un estudio de mujeres multparas.

En el ao 1964, se inici un esfuerzo internacional para la caracterizacin del complejo,

denominado Taller Internacional de Histocompatibilidad (IHW, acrnimo del
ingls International Histocompatibility Workshop). Se defini entonces el rea del
cromosoma 6 donde se codifican los HLA A, B y C, que por entonces se crea que slo
era expresado por leucocitos (por eso el nombre HLA: human leucocytic antigen));
tambin se mape el sistema del complemento como proveniente de la misma zona. En
los aos 1970, se identificaron los HLA de clase II y luego, con los avances de la biologa
molecular, la investigacin se centr a nivel de genes ms que en sus productos.

En el ao 1967 se ocup por primera vez el trmino haplotipo en relacin con el CMH.
En el ao 1969, Baruj Benacerraf demostr que el CMH no slo era el causante de la
aloreactividad, sino que permita activar la respuesta inmune en contra de un antgeno
en particular. Este descubrimiento le signific obtener el premio Nobel de medicina en
1980.

En 1987, Bjorkman logr elucidar la estructura del HLA-A2 y tambin de las molculas
de clase II. El ao 1999 se logr definir la secuencia de nucltidos del CMH, mediante
los esfuerzos combinados del Consorcio de Secuenciacin del CMH bajo la direccin de
Stephen Beck, Daniel Geraghty, Hidetoshi Inoko y Lee Rowen.

Entre los aos 1980 y 2000 el conocimiento de los alelos presentes en el CMH pas de
unas pocas decenas, con varios millones de posibles combinaciones alotpicas a
alrededor de 15 000 alelos. La regin HLA-B se convirti en la regin gentica ms
polimrfica del genoma humano, seguida de la regin del HLA-A. La regin de genes
MHC contiene una densidad y diversidad de genes extremadamente alta; la variacin
gentica dentro de esta regin juega un papel vital en la susceptibilidad a las
enfermedades autoinmunes, infecciosas, y otras enfermedades.
 Molculas de Histocompatibilidad
Las molculas de histocompatibilidad fueron inicialmente descubiertas por ser las
principales responsables de las reacciones de rechazo de tejidos trasplantados entre individuos
de la misma especie. Los loci genticos reguladores de la sntesis de estos antgenos se agrupan
en una regin denominada Complejo Mayor de Histocompatibilidad (MHC) y se heredan de
acuerdo con las leyes de Mendel. Una de las principales caractersticas de estas molculas es
su extraordinario polimorfismo. Hoy da se considera que las molculas de histocompatibilidad
tienen como funcin principal recoger pptidos del interior de la clula, transportarlos a la
superficie celular y all presentarlos a las clulas T.

Las molculas de histocompatibilidad se localizan en la superficie de las clulas de las

distintas especies animales. En el ratn se denominan antgenos H-2 y los genes que las
codifican se localizan en el cromosoma 17. En el humano se denominan antgenos HLA (Human
Leucocyte Antigens) y estn codificadas por genes ubicados en el brazo corto del cromosoma 6.
Los primeros trabajos sobre los antgenos H-2 fueron realizados por Gorer (1936) en cepas
murinas endogmicas (inbred), obtenidas por el cruce entre animales hermanos de forma
continuada durante al menos 20 generaciones. El rechazo de trasplantes entre animales de
distintas cepas endogmicas y la obtencin de aloantisueros mediante inmunizacin de animales
de una cepa con clulas de otra, permitieron una primera definicin de este sistema gentico.

Fig.:5.1 En el caso humano, el

primer antgeno de
histo-
compatibilidad descrita fue Mac (en
la actualidad definido como HLA-A2),
descubierto por Jean Dausset en
1958 (Figura 5.1). Pronto se vio que
exista una relacin entre estos
antgenos y la supervivencia de
riones trasplantados.

En la actualidad, son ya
centenares los antgenos de este tipo
que se han definido gracias a las
intensas colaboraciones
establecidas entre los laboratorios
que trabajan en histo-
compatibilidad, a travs de los
Workshops Internacionales de Histocompatibilidad que desde 1964 se celebran peridicamente.

En este captulo estudiaremos la estructura de estas molculas y la organizacin de los

genes que las codifican. Su funcin en el procesamiento y presentacin de pptidos se estudiar
en el captulo siguiente.

ESTRUCTURA DE LAS MOLCULAS DE HISTOCOMPATIBILIDAD

Segn su estructura las molculas de histocompatibilidad se dividen en dos grandes

grupos: molculas de clase I y molculas de clase II que se encuentran codificadas por regiones
genticas distintas dentro del MHC y desempean distintas funciones inmunolgicas (Figura 5.2).
 Fig.:5.2

Las principales molculas de histocompatibilidad humanas quedan reflejadas en la tabla

5.1.

TABLA 5.1 Diferentes

tipos de HLA
HLA Formas
Clase I clsicas A, B y C
Clase II clsicas Otras DR, DQ y DP
G, E, F y CD1

Estructura de las molculas HLA de clase I.

Las molculas de los antgenos de histocompatibilidad de clase I (Figura 5.3), tanto en el

sistema HLA como en el H-2, se hallan constituidas por 2 cadenas poli peptdicas: una cadena
pesada, glicosilada, de mayor tamao, con un peso molecular de 45 kD, que se encuentra
asociada, mediante interacciones no covalentes a una cadena ligera, la beta-2-microglobulina
que tiene un peso molecular aproximado de 12.5 kD.

Fig.:5.3
Fig.:5.4 La beta-2-microglobulina,
polipptido idntico al componente
srico normal, es idntica en todos los
individuos de la misma especie y los
genes que la codifican
no se encuentran en el MHC,
situndose en el cromosoma 16, en el
hombre y en el cromosoma 2 en el
ratn. El anlisis estructural de la beta-
2-microglubulina revela que pertenece a
la superfamilia de las
inmunoglobulinas, con una notoria
homologa con el tercer dominio
constante de la cadena pesada de las
inmunoglobulinas. La cadena pesada,
por el contrario, es altamente variable
entre individuos de la misma especie,
siendo la responsable del polimorfismo
antignico de las
molculas de histocompatibilidad
clase I (Figura 5.4).
Se distinguen tres zonas bien definidas,
una zona extracelular de mayor tamao en la que se encuentran los determinantes antignicos
de la molcula, una pequea regin transmembrana, hidrfoba, y finalmente una regin
intracitoplasmtica de unos 35 aminocidos.

La zona extracelular se halla organizada en tres dominios de aproximadamente unos 90

residuos cada uno, denominados alfa-1, alfa-2 y alfa-3 mantenidos por la existencia de puentes
intracatenarios. Los residuos glucdicos se encuentran unidos a la asparragina en la posicin 86
del dominio alfa-1. Los dominios alfa-1 y alfa-2 constituyen regiones de contenido variable en
aminocidos, es decir son las zonas donde radica la variabilidad de la molcula. Por el contrario
el dominio alfa-3 es bastante constante, pertenece a la superfamilia de las Igs y por tanto muestra
una notable homologa con la regin constante de las inmunoglobulinas y con la beta-2-
microglobulina

Estructura de las molculas HLA clase II.

Las molculas de clase II son glicoprotenas que se encuentran en la superficie celular.

Estn formadas por dos cadenas, ambas con un dominio transmembrana, denominadas cadena
a o pesada y cadena b o ligera, asociadas entre s mediante interacciones de naturaleza no
covalente. Tanto la cadena a como la cadena b se encuentran codificadas por genes situados en
el MHC.

La cadena a tiene un peso molecular aproximado de 33kD y la cadena b de 29 kD. Ambas

cadenas tienen una organizacin semejante. Estn constituidas por dos dominios extracelulares
y se conocen con las denominaciones de a-1 y a-2 en la cadena pesada y b-1 y b-2 en la cadena
ligera. Cada uno de estos dominios consta de 90-96 aminocidos. El dominio a-1 es abierto
mientras que los dominios alfa-2, beta-1 y beta-2 se pliegan mediante un puente disulfuro cada
uno de ellos. Cuando se analizan los aminocidos de las cadenas ligeras, se observa que los
dominios a-2 y b-2 pertenecen a la superfamilia de las Igs, mientras que los a-1 y b-1, que son
los que presentan mayor diversidad presentan homologa con los dominios alfa-1 y alfa-2 de los
antgenos clase I. Se aprecian tres zonas donde es ms frecuente la variabilidad. Un tercer
dominio corresponde a la regin de cada cadena que atraviesa la membrana celular, contiene
unos 30 aminocidos y es de naturaleza hidrofbica. Finalmente, el cuarto dominio, corresponde
a la parte citoplasmtica de la molcula, es de naturaleza hidroflica y contiene de 10 a 16
aminocidos.
Estructura tridimensional.

El anlisis de la estructura tridimensional de los antgenos de histocompatibilidad de clase

I y clase II, determinada mediante cristalografa, demuestra que los dominios estn estructurados
de forma diferente. As, dentro de los antgenos clase I, el dominio alfa-3 y la beta-2-microglobulina
estn organizados en estructura de hoja plegada b. Por el contrario los dominios a1 y a2 constan
cada uno de ellos de una sola zona formada por cuatro fragmentos en estructura de hoja plegada
b seguido de otro segmento organizado en forma de a-hlice. Esta organizacin delimita una
hendidura denominada sitio de unin al pptido (peptide binding groove) en el que los residuos
ms polimrficos se encuentran en el suelo y las paredes de la hendidura. En esa hendidura se
localiza un pptido que no pertenece a la molcula y de aproximadamente 8-10 aminocidos.
Ese pptido procede de protenas endgenas, como veremos en el captulo siguiente e
interacciona con las molculas de histocompatibilidad mediante fuerzas no covalentes entre sitios
concretos de ambas estructuras. Un determinado antgeno de histocompatibilidad puede unirse
a pptidos diferentes siempre que stos posean uno o varios motivos que interaccionen con
zonas de la molcula cuya estructura suele estar condicionada por residuos polimrficos.

La estructura tridimensional de los antgenos de clase II tambin ha sido determinada por

cristalografa y es semejante a la de los antgenos de clase I. Los dos dominios proximales (a2 y
b2) son los equivalentes al dominio alfa-3 y a la beta-2-microglobulina de los antgenos clase I,
mientras que los dos dominios distales (alfa-1 y beta-1) de los antgenos clase II se corresponden
con los dominios alfa-1 y alfa-2 de la molcula clase I. La hendidura donde se ubica el pptido
se forma entre los dominios alfa-1 y beta-1 de las molculas clase II.

Distribucin tisular de las molculas clase I y II.

Las molculas de clase I se encuentran presentes en la mayora de las clulas nucleares

del organismo pero no en todas, dado que, en algunas localizaciones, su expresin es mnima o
incluso nula, como sucede en el endotelio, glndulas de Brunner duodenales, trofoblasto velloso
o neuronas del sistema nervioso central.

La expresin de las molculas de clase II se encuentra fundamentalmente restringida a

macrfagos, monocitos, linfocitos B y cuando estn activados tambin en linfocitos T y NK.
Igualmente se encuentra expresado en alta densidad en otras clulas que actan como
presentadoras de antgenos, tales como clulas dendrticas del bazo, epidrmicas de Langerhans
o clulas endoteliales. Tambin se encuentran en progenitores hematopoyticos, clulas
leucmicas y clulas de diferentes tipos de tumores.

Esta distribucin diferencial de las molculas de histocompatibilidad de clase I y II se

encuentra directamente relacionada con la diferente funcin de cada tipo de molculas. Los
niveles relativos de las molculas HLA en diferentes rganos y tejidos es muy variado (Figura
5.5).

Fig.:5.5
Otras molculas de histocompatibilidad

Existen otras molculas de histocompatibilidad entre las que destacan de manera ms

significativa: HLA-G, HLA-E y HLA-F, que presentan una gran homologa con las molculas
clsicas de MHC de clase I (HLA-A, -B y -C).

HLA-E: La estructura tridimensional de la molcula de HLA-E, es muy similar a la de

las molculas clsicas HLA-A, B y C presentando sitios de unin conservados para
la b-2-microglobulina y al CD8. Esta molcula, cuando presenta el pptido
adecuado, se une a los receptores CD94/NKG2A que inhiben la actividad citotxica
de las NK y ciertos linfocitos T. En la actualidad se ha descubierto que la protena
UL40 presente en los citomegalovirus, es capaz de unirse ella, y provocar una
cascada de inhibicin en las clulas NK.
HLA- F: Se sabe que esta molcula se expresa principalmente en amgdalas, bazo
y timo. La localizacin de la protena es intracelular. Adems, est descrito que los
tetrmeros de HLA-F se unen a los receptores ILTR2 (LIR1) y ILTR4 (LIR2) que son
receptores inhibidores de leucocitos.
HLA-G: La molcula HLA-G pertenece a la familia de molculas de
histocompatibilidad no clsicas y se caracterizan por un limitado polimorfismo y una
distribucin celular y tisular restringida al trofoblasto fetal y clulas del epitelio tmico.
Esta molcula puede presentarse en siete isoformas distintas, codificadas por
splicing alternativo, cuatro de ellas son protenas unidas a membrana (HLAG1, G2,
G3 Y G4), y otras tres isoformas que son protenas solubles (HLA-G5, G6 Y G7).
Otras caractersticas de esta molcula son:
o Es reconocida por ciertos receptores inhibidores, tales como KIR2DL4, ILT-2 y
ILT-4 y, en consecuencia posee, capacidad de inhibir la lisis mediada por clulas
NK y ciertas clulas T. o Est relacionada con la induccin de tolerancia
materno-fetal. Se ha demostrado que la molcula HLA-G es capaz de inhibir la
actividad de las clulas NK de los leucocitos de la decdua sobre los trofoblastos
durante el primer trimestre de gestacin
o Parece participar en la vigilancia del sistema inmune frente a tumores y se ha
descubierto un aumento en el nivel de la expresin de esta molcula en la
superficie de las clulas infectadas por el HIV, que podra ser una forma del virus
de escapar de la destruccin por el sistema inmune.
Familia de molculas CD1. Los antgenos CD1 son glicoprotenas no polimrficas
constitudos por una cadena pesada de 43-49 kDa que, en muchos casos, se asocia
con la beta-2-microglobulina (beta-2-m). Se ha definido como una molcula
presentadora de antgeno presente en la mayora de los mamferos encontrndose
tanto en las clulas dendrticas como en timocitos. Mientras que en ratones las
molculas CD1 pueden presentar pptidos y molculas no peptdicas como
glicolpidos a clulas T, en humanos slo hay evidencia de presentacin de
antgenos no peptdicos de origen microbiano, generalmente a clulas T de TCR
restringido Las clulas T implicadas en el reconocimiento de antgeno presentado
por CD1 son denominadas NKT.

En humanos la familia de los genes de CD1 contiene 5 miembros: CD1A, CD1B, CD1C,
CD1D y CD1E, que se agrupan en dos grupos en base a la similitud de la secuencia de
aminocidos entre ellas y entre especies. En general, las molculas de CD1 se expresan
predominantemente en timocitos y en algunas APCs derivadas de mdula sea como las clulas
dendrticas. Se ha descrito que las clulas del epitelio intestinal expresan las molculas de CD1d.
GENTICA DEL COMPLEJO MAYOR DE HISTOCOMPATIBILIDAD

Como ya se ha dicho, los genes que codifican las molculas cuya estructura y funcin
hemos estudiado, se encuentran agrupados en el genoma formando el Complejo Mayor de
Histocompatibilidad que se extiende aproximadamente 2-3 centimorgans (aproximadamente
4x106 pares de bases) y en el humano contiene al menos 50 genes distintos. Este grupo de genes
se encuentra organizado de forma diferente en las distintas especies, conocindose con precisin
la organizacin gentica del MHC en el hombre, sistema HLA, y el ratn, sistema H-2.
Recientemente se ha propuesto una nueva taxonoma para clasificar los distintos genes que
codifican las molculas de histocompatibidad, (Tabla 5.2)

TABLA 5.2
Genes que codifican las molculas de histocompatibidad
Nomenclatura antigua Nomenclatura actual
HLA A, B y C HLA clase Ia
HLA E, F y G HLA clase Ib
Localizadas en complejo HLA (MIC, HFE) HLA clase Ic
Molculas localizadas fuera del complejo HLA HLA clase Id

Complejo Mayor de Histocompatibilidad en el hombre.

El Complejo Mayor de Histocompatibilidad en el hombre est constituido por un grupo de

genes situado en el brazo corto del cromosoma 6. El complejo mayor de histocompatibilidad
humano es donde se codifican los loci que de los distintos antgenos HLA clase I y II (Figura 5.6).
Entre los de clase I se encuentran los genes que codifican las cadenas a de los antgenos HLA-
A, HLA-B y HLA-C y entre los de clase II se encuentran los pares de genes que codifican las
cadenas alfa y beta de los antgenos HLA-DR, HLA-DQ y HLA-DP.

Fig.:5.6

Este grupo de genes se heredan de acuerdo con las leyes de Mendel, como caracteres
codominantes simples. La regin gentica de un cromosoma que contiene todos los genes HLA
(a excepcin de los que codifican la beta-2-microglobulina) se denomina haplotipo HLA (Figura
5.7).
 As pues un haplotipo HLA incluye los genes clase I: HLA-A, HLA-B y HLA-C y los genes clase
II: HLA-DR, HLA-DQ y HLA- DP. y otros loci que codifican molculas implicadas en el
procesamiento de pptidos como son los genes TAP cuyos productos estn implicados en la
transferencia de pptidos del citosol al retculo endoplsmico y los genes LMP que codifican
componentes del proteosoma responsable de transformar protenas en pptidos que
posteriormente sern presentados en la superficie celular. Asimismo, en esta regin se
encuentran los genes que codifican algunos factores del complemento, la enzima 21-hidroxilasa,
la citocina TNF-alfa y otros genes y pseudogenes con homologa estructural con los genes clase
I y clase II con limitado polimorfismo y cuya funcin an se encuentra insuficientemente aclarada
(Figura 5.8).

Fig.:5.8

La existencia de estos diferentes loci fue demostrada inicialmente por la aparicin

espontnea de recombinaciones entre los mismos o la existencia de lneas celulares mutantes,
con prdidas de uno o varios loci y ha sido confirmada a lo largo de los ltimos aos por el empleo
de tcnicas de biologa molecular que han permitido aislar y secuenciar estos genes. Gracias a
estas tcnicas de biologa molecular se ha descubierto la existencia en esta regin de numerosos
genes y pseudogenes pero solamente una minora tiene estructura clase I o clase II mientras que
la mayora no estn relacionados estructuralmente.

Cada clula del organismo, (excepto las clulas germinales), poseen un haplotipo
procedente del padre y otro de la madre. La mayora de los genes del MHC son altamente
polimrficos, es decir pueden ser estructuralmente diferentes entre individuos de la misma
especie. No obstante, como se vio al hablar de la estructura, existen zonas muy conservadas,
prcticamente idnticas en todos los individuos y zonas altamente variables.

Cada especificidad definida en la superficie celular representara un alelo diferente a nivel

genmico. Como se muestra en la tabla 5.3, se han descrito numerosos alelos para los diferentes
loci HLA. Dado que cada individuo posee dos de cada uno de estos alelos, el nmero de
combinaciones tericas posibles en la poblacin considerada en su conjunto es muy alto.

A menudo se describen nuevas especificidades asociadas a otras previamente

establecidas. Estas nuevas especificidades se suelen denominar especificidades subtpicas que
aparecen por divisin de otras anteriores y a las antiguas especificidades supertpicas. As por
ejemplo, las especificidades HLA-B51 y HLA-B52 se consideran como productos de la divisin
del antgeno HLA-B5. De hecho la secuenciacin de los genes HLA ha demostrado que el
polimorfismo que es detectado a nivel serolgico es slo una parte del que se encuentra a nivel
genmico. As por ejemplo existen numerosos subtipos de HLA-A2 y numerosos subtipos de
HLA-B27. Ello ha hecho que se establezca un nuevo sistema de nomenclatura para los diferentes
alelos HLA que utiliza la letra del loci seguida de 4 dgitos tal como se muestra en el Apndice.
Los dos primeros dgitos seran los de la especificidad serolgica y los otros dos indicaran la
especificidad detectada por secuenciacin.

TABLA 5.3
Lista de antgenos HLA clase I y II
A B C D DR DQ
A1 B5 B51(5) Cw1 Dw11(w7) DR1 DQ1
A2 B7 B5102 Cw2 Dw12 DR103 DQ2
A203 B703 B5103 Cw3 Dw13 DR2 DQ3
A210 B8 B52(5) Cw4 Dw14 DR3 DQ4
A3 B12 B54 Cw5 Dw15 DR4 DQ5(1)
A9 B13 B53 Cw6 Dw16 DR5 DQ6(1)
A10 B14 B54(22) Cw7 Dw17(w7) DR6 DQ7(3)
A11 B15 B55(22) Cw8 Dw18(w6) DR7 DQ8(3)
A19 B16 B56(22) Cw9(w3) Dw19(w6) DR8 DQ9(3)
A23(9) B17 B57(17) Cw10(w3) Dw20 DR9
A24(9) B18 B58(17) Dw21 DR10
A2403 B21 B59 Dw22 DR11(5)
A25(10) B22 B60(40) Dw23 DR12(5)
DP
A26(10) B27 B61(40) Dw24 DR13(6)
A28 B2708 B62(15) Dw25 DR14(6) DPw1
A29(19) B35 B63(15) Dw26 DR1403 DPw2
A30(19) B37 B64(14) DR1404 DPw3
A31(19) B38(16) B65(14) DR15(2) DPw4
A32(19) B39(16) B67 DR16(2) DPw5
A33(19) B3901 B70 DR17(3) DPw6
A34(10) B3902 B71(70) DR18(3)
A36 B40 B72(70) DRW51
A43 B4005 B73 DRW52
A66(10) B41 B75(15) DRW53
A68(28) B42 B76(15)
A69(28) B44(12) B77(15)
A74(19) B45(12) B78
A80 B46 B81
B47 Bw4
B48 Bw6
B49(21)
B50(21)
Fig.:5.9

Los haplotipos heredados de

cada padre van a determinar el genotipo
del hijo, es decir, el genotipo de ste ser
la suma de un haplotipo procedente de
padre y otro procedente de la madre. En
la Figura 5.9 se ilustra grficamente todo
lo anteriormente expuesto. En una
familia determinada en la que el padre
tiene los haplotipos (a) = A2, B8, Cw1,
DR1 y (b) = A3, B7, Cw3, DR4 y la madre
los haplotipos (c) = A2, B7, Cw2, DR2 y
(d) = A11, B13, Cw3, DR5 los hijos
podrn heredar cuatro combinaciones
distintas de estos haplotipos, siendo (a,
b), (b, c) y (b, d) los posibles genotipos
resultantes.

Tras la secuenciacin completa del Complejo Mayor de Histocompatibilidad en el 1999

se conoce que esta regin la forman ms de 200 loci, muchos de los cuales an son
funcionalmente desconocidos, aunque posiblemente la mitad juegue un papel en la funcin del
sistema inmune. Probablemente el estudio del polimorfismo de esta regin ayudar a comprender
por qu unas personas desarrollan unas enfermedades y otras no, en todo caso este avance
ser una importante herramienta para el estudio filogentico, la biologa y la evolucin de las
familias de multigenes, las poblaciones y la enfermedad.

Loci HLA-A, B, C.

La regin que codifica las molculas de clase I est dividida en tres loci, conocidos como
A, B y C, que codifican tres tipos de cadenas pesadas para las distintas molculas de clase I.
Algunos de estos genes han sido estudiados mediante tcnicas de hibridacin de DNA y se ha
demostrado que se encuentran divididos en exones e intrones, encontrndose una estructuracin
homloga a los genes que codifican la b-2 microglobulina, las inmunoglobulinas y otros tipos de
protenas.

El prototipo de gen que codifica molculas de clase I, se encuentra dividido en 8 exones,

cada uno de los cuales, se corresponde a cada dominio estructural de la molcula. Si bien se
conoce con precisin la funcin de estas tres familias de antgenos de histocompatibilidad de
clase I expresados en la superficie celular, se ha demostrado la existencia de otros genes que
tambin codifican otros antgenos HLA de clase I con menor polimorfismo y cuya expresin es
variable, tanto en su distribucin tisular como en la densidad en la membrana celular. Entre estos
genes se incluyen: HLA-E, HLA-F y HLA-G.

Gen HLA-E: Este gen presenta una secuencia parecida a la molcula Qa1 murina,
que une pptidos hidroflicos de la secuencia leader de las molculas MHC clsicas.
Se expresa en pequeas cantidades en la superficie de la clula, y su expresin est
regulada por la presencia de las otras molculas de histocompatibilidad presentadas
en la superficie celular y es TAP dependiente.
Gen HLA- F: Este gen es muy similar en estructura y secuencia a los genes de las
molculas clsicas. Se transcribe en una gran variedad de clulas y tejidos
presentando un polimorfismo limitado.
Gen HLA-G: Este gen presenta la estructura tpica de la HLA clase I y su expresin
parece estar restringida a la placenta y se asocia con funciones de carcter
tolerognico.
Regin HLA-D

En la regin D se localizan los genes que codifican las molculas HLA-DR, HLA-DQ y
HLA-DP. Su anlisis bioqumico demuestra que se trata de molculas de clase II compuestas,
como ya hemos indicado, por una cadena a y otra b.

Las molculas HLA-DR y HLA-DQ se estudiaron por serologa y los antgenos HLA-DP fueron
inicialmente definidos por estudios funcionales, mediante estimulacin secundaria de linfocitos
previamente sensibilizados (PLT).

El empleo de tcnicas de biologa molecular ha permitido el aislamiento y secuenciacin

de los genes de esta regin, de manera que hoy se conoce con precisin que la regin D posee
un elevado nmero de genes.

Fig.:5.10 Los genes de la familia DR

comprenden un gen DRA que
codifica la cadena DRalfa y posee
escaso polimorfismo y al menos
cuatro genes DRB (DRB1, 3, 4, 5)
que codifican cadenas DRbeta que
contienen gran polimorfismo. Se
han descrito otra
serie de pseudogenes DRB
(DRB2, 6, 8) sin conocerse an
su funcin y expresin.
La cadena proteica
DRalfa puede combinarse (Figura
5.10) con las diferentes cadenas
beta codificadas por los genes DRB
dando origen a las molculas de
clase II portadoras de las especificidades HLA-DR (la unin de los productos de los genes HLA-
DRA y HLA-DRB1 y las especificidades HLA-DRw51, 52 y 53 (la unin de los productos de los
genes HLA-DRA y HLA-DRB5, DRB3 o DRB4, respectivamente).

Tanto las familias DQ como DP contienen dos pares de genes, es decir dos genes a y
dos genes b, prximos entre s y todos polimrficos. Slo uno de estos pares, DQA1 y DQB1 y
DPA1 y DPB1, codifican las cadenas a y b de las molculas de clase II HLA-DQ y HLA-DP
respectivamente. Los otros 2 pares de genes DQA2, DQB2 y DQB3 (pseudogen) y DPA2 y DPB2
poseen un limitado polimorfismo y no se encuentran expresados en la superficie celular. Adems
existe otra subregin que contiene un gen a, denominado DNA, y un gen beta, DOB, que podran
codificar un nuevo tipo de molculas clase II.

Por otra parte tambin se han localizado una nueva pareja de genes, HLA-DM, no
polimrficos, que se encuentran implicados en el proceso de procesamiento y presentacin de
antgeno como se expone en el prximo captulo. Cada uno de estos genes est estructurado en
secuencias de intrones y exones relacionados con los dominios estructurales de la protena
codificada por ellos.
Regulacin de la expresin de los genes del MHC

En la parte 5' no traducida de los genes se encuentran las reas reguladoras (llamadas
elementos cis) constituidas por el promotor (rea estrictamente necesaria) y los aumentadores e
inhibidores que modulan la expresin basal de los genes. El promotor suele estar situado a una
distancia de unas 300 bases desde el inicio de la transcripcin, mientras que los aumentadores
o inhibidores se encuentran a distancias variables. Sobre estas reas cis se fijan unas protenas
llamadas factores de transcripcin (elementos trans) que son necesarios para que se active la
polimerasa II, enzima que inicia la transcripcin. En muchos casos, la induccin de la expresin
de los genes se debe a modificaciones post-transtraducionales de estas protenas como son la
fosforilacin o la glicosilacin. Hasta ahora no se conoce el mecanismo exacto de la expresin
de los genes de clase I y II aunque se han descrito algunos de sus elementos cis y trans.

Los genes de clase I y beta-2-microglobulina tienen regiones cis muy parecidas y su

expresin est coordinada. Se han detectado tres regiones cis en el promotor a las que se unen
factores de transcripcin y que se llaman aumentadores A y B y entre ellos el IRE (elemento de
respuesta al interfern) (Figura 5.14). Adems, existen dos inhibidores en dos regiones a unas -
700 y -400 bases. Sobre las reas cis se unen factores de transcripcin que no son especficos
del promotor de clase I, sino que regulan muchos genes. En la regin I del aumentador A se une
RXRb que es un elemento de la familia de los receptores de la hormona tiroidea y del cido
retinoico y que se une a AP-1 (Protena Activadora 1) que es un complejo de los oncogenes jun
y fos originando un heterodmero que aumenta su afinidad por el DNA. En la regin II del
aumentador A se une el NF-kB (Nuclear Factor-kB). En la regin IRF se unen protenas que se
inducen por efecto del interfern y que se fosforilan por una tirosina quinasa. Por ltimo, en el
aumentador B parece que se unen protenas del grupo AP-1 que responde a la induccin con
AMP cclico.

Fig.:5.14

En el promotor de todos los genes de clase II y de todas la especies descritas, existen

tres reas con secuencias que tienen una gran homologa entre los genes y que se denomina X,
Y y W separadas entre si por unas 20 bases. Estas reas son esenciales para la transcripcin
(elementos cis) y sobre ellas se unen una serie de factores de transcripcin. La caja Y contiene
una secuencia CCAAT sobre la que se une el NFY (Nuclear Factor Y) compuesto por dos
protenas A y B, ambas se requieren para una unin eficiente al DNA. Sobre la caja W se une un
factor no caracterizado hasta ahora y sobre la caja X, dependiendo del extremo 5'(X 1) se han
descrito protenas RF-X y NF-X y sobre el extremo 3'(X2) se unen hXBP y el complejo AP-1 (fos-
jun) aunque estas interacciones con el DNA no estn muy claras. La distancia crtica que separa
estas cajas sugiere que los factores de transcripcin que se unen a ellas interaccionan dando
lugar a que se inicie la transcripcin. Sin embargo, no sabemos que es lo que hace que se
induzca clase II por efecto del gamma-interfern o porque en algunos casos la induccin de
clase II sea constitutiva.

Otros genes del sistema HLA.

Situados en el complejo HLA se encuentran un grupo de genes que codifican tanto el

componente Bf de la cascada alternativa del complemento, como los componentes de la va
clsica C2 y C4 que se estudian en el captulo dedicado al complemento.

Otros genes de esta regin y de inters en la respuesta inmune son los genes que
codifican

1. Las formas alfa y beta del factor de necrosis tumoral (TNF-alfa).

2. HSP (Heat Shock Protein).
3. lmp que codifican los componentes del proteosoma y
4. TAP1 y 2 que son protenas transportadoras.

Estas estructuras como veremos en el captulo 6, poseen una gran importancia en la

funcin de procesamiento antignico asociada a las molculas del MHC. Tambin dentro del
sistema HLA e ntimamente relacionado con los genes anteriores, se encuentran los genes que
codifican la enzima 21-hidroxilasa, que participa en el metabolismo de ciertas hormonas
sexuales.

MECANISMOS DE GENERACION DEL POLIMORFISMO

El polimorfismo del MHC es el resultado de un largo proceso de evolucin a lo largo de

miles de millones de aos como consecuencia de la presin evolutiva ejercida por los agentes
infecciosos. Para la generacin de este elevado polimorfismo el MHC ha utilizado diferentes
mecanismos que han contribuido de diferente forma a la creacin de nuevos alelos. As, algunos
son el resultado de mutaciones puntuales mientras que otros proceden de la combinacin de
secuencias completas entre diferentes alelos, bien mediante un proceso de recombinacin
gnica o bien mediante el proceso denominado conversin gnica, segn el cual una secuencia
es reemplazada por otra semejante de un gen homlogo. La recombinacin entre alelos del
mismo locus parece ser el mecanismo ms frecuentemente utilizado para la creacin del
polimorfismo y as muchos alelos diferentes pueden proceder de procesos de recombinacin
repetidos a partir de un pequeo nmero de genes ancestrales. La existencia de este proceso
evolutivo apoya que el polimorfismo es esencial para la funcin de los antgenos de
histocompatibilidad.

FUNCION MOLECULAS DE HISTOCOMPATIBILIDAD

Las molculas de histocompatibilidad presentes en las clulas del organismo son

marcadores para las clulas del sistema inmunitario de "lo propio" (el yo inmunolgico) e
intervienen de manera fundamental en la educacin tmica de los linfocitos T (Tabla 5.5).
 TABLA 5. 5
Principales funciones de las molculas de histocompatibilidad
HLA-I Presentacin de antgenos a CD8 y marcador de diferenciacin.
HLA-II Presentacin de antgenos a CD4 y marcador de activacin celular.
HLA-G Posible funcin inductora de tolerancia.
CD1 Educacin tmica de los linfocitos T (timocitos y clulas dendrticas).

La funcin biolgica de las molculas de histocompatibilidad es la de presentar pptidos

antignicos para la activacin de los linfocitos T. Los linfocitos T que reconocen molculas HLA
clase I y su pptido pertenecen a la subpoblacin citotxica. Las clulas T que reconocen
molculas HLA clase II en su la mayora tienen funcin reguladora produciendo citocinas. Las
molculas de histocompatibilidad de un individuo son antignicas para otro y por lo tanto activan
el sistema inmune (rechazo de trasplantes).
 CONCLUSION

El complejo mayor de histocompatibilidad humano, o sistema HLA, est

localizado en el brazo corto del cromosoma 6. Sus genes codifican tres tipos de
molculas. Los antgenos clase I (HLA-A, B, C y E) estn formados por una
cadena pesada unida no covalentemente a la 2-microglobulina y se expresan
en la superficie de la mayora de las clulas nucleadas del organismo. Estos
antgenos actan como elementos de restriccin en la activacin de los linfocitos
T CD8+. Los antgenos clase II son dmeros compuestos por cadenas y y su
distribucin tisular est limitada slo a algunos tipos de clulas. Estas molculas
actan restringiendo la presentacin de antgenos a los linfocitos CD4+. Los
antgenos de clase III son protenas plasmticas del sistema del complemento.
Los diferentes loci del sistema HLA son muy polimrficos y sus productos se
heredan en bloques conocidos como haplotipos. Debido a que los diferentes
grupos tnicos presentan variaciones en la frecuencia de alelos y haplotipos, el
HLA ha sido muy til en los estudios antropognicos. Algunos antgenos HLA
estn presentes en pacientes con determinadas enfermedades con una
frecuencia significativamente diferente a la encontrada en la poblacin general.
Estos hallazgos han sido de gran importancia para comprender la patognesis y
los mecanismos genticos de resistencia o susceptibilidad a dichas
enfermedades. En el campo de los transplantes de rganos, la compatibilidad
HLA donante-receptor correlaciona con la sobrevida del injerto. El sistema HLA
tambin parece tener mucha importancia en los fenmenos inmunolgicos que
ocurren durante el embarazo.