UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN MARTIN-T

FACULTAD DE ECOLOGIA
CARRERA PROFESIONAL DE INGENIERIA AMBIENTAL

CICLO : VI

CTEDRA : TOXICOLOGA Y SALUD AMBIENTAL

DOCENTE : BLGO. ALFREDO IBAN DIAZ VISITACIN

TTULO : TOBSERVACIN DE CITOTOXICIDAD EN CLULAS DE

CEBOLLA (Allium cepa)

INTEGRANTES : BARDALEZ RIVERA GIAN MARCOS

LOZANO TORRES MABEL
OLIVERA AGUIRRE FRANK JHOSVI
JHINO PAOLO CACHIQUE GALAN

2017
 OBSERVACIN DE CITOTOXICIDAD EN CLULAS DE
CEBOLLA (Allium cepa)

I. INTRODUCCIN

Dentro del campo de la Mutagnesis ambiental se han desarrollado

diversos sistemas de monitoreo mediante la utilizacin de bioindicadores
que permiten evaluar los riesgos de contaminacin ambientales sobre la
informacin gentica de los organismos vivos. Las cebollas (Allum cepa9.
Entre otras especies de plantas, ha sido muy utilizada para tales fines
debido a que es un organismo que permite obtener meristemos
radiculares en cortos tiempos, pueden ser mantenidos en espacios
pequeos a bajo costo y son fciles de trabajar para la observacin de
clulas en divisin, posee poco y grades cromosomas por lo tanto permite
visualizar danos asociados a material gentico con relativa facilidad.
Entre las alteraciones citogenticas que se pueden evaluar en clulas de
raz de cebollas expuestas a contaminantes se encuentran alteraciones
en el ndice, la formacin de microncleos y la presencia de mitosis
atpicas.
Debido a lo anterior es posible realizar experimentos a corto plazo donde
se ponga a prueba el potencial mutagnico entre otras muchas.

II. OBJETIVO

Observar, reconocer y analizar daos asociados a txicos en

distintas etapas de la mitosis en clulas meristimticas de cebollas
(Allum cepa)

III. MATERIALES

Microscopio
Races de cebolla
Mechero de alcohol
Pinzas de relojero
Cerillos
Tijeras
Navaja
Orceina A y B
Lpiz con goma
IV. PROCEDIMIENTO

1. Colocar en un vaso con agua bulbos de cebollas. Colocar el

recipiente en un lugar templado y oscuro.

2. Una vez que aparezcan las raicillas (2 a 4 das) agregar dentro del
vaso una sustancia de su eleccin con sospecha de ser daino al
genoma (plaguicida, metal pesado, efluente, etc) y dejar que
crezcan uno o dos das ms.

3. Cortar con las tijeras unos 2-3 mm en los extremos de las raicillas
y depositarlo en un vidrio de reloj en el que se han vertido 2-3ml de
orceina A.

4. Calentar suavemente el vidrio de reloj a la llama del mechero

durante unos 8 minutos, evitando la ebullicin hasta la emisin de
vapores tenues.

5. Con las pinzas tomar uno de los pices o extremos de las raicillas
y colocarla sobre un portaobjetos, aadir una gota de orcena B y
dejar actuar durante 1 minuto.

6. Observe con el objetivo de menor aumento para localizar las

figuras mitticas, y posteriormente se pasa a un objetivo de mayor
aumento para discriminar detalles.
V. RESULTADOS
1. Esquema de las diferentes fases de la mitosis.

MITOSIS

ETAPAS
2. Fotografas de los estados de la mitosis

3. Esquemas de las alteraciones en la mitosis

Mitosis normal
 Mitosis anormal

Allium cepa, meristemo apical radicular, orcena aceto

clorhdrica, aumento 400X. A: Clulas en interfase.
B: Clulas diferenciadas. C: Clulas en telofase tarda.
Allium cepa, meristemo apical radicular, orcena aceto
clorhdrica, aumento 400X. A: Clula en metafase.

Allium cepa, meristemo apical radicular, orcena aceto

clorhdrica, aumento 400X. A: Clula en prometafase,
B: Clula en telofase temprana. C: Clula en metafase
Allium cepa, meristemo apical radicular, orcena aceto
clorhdrica, aumento 400X. A: Clula en interfase.
B: Clula en prometafase. C: Clula en profase
D: clula en metafase

Allium cepa, meristemo apical radicular, orcena aceto

clorhdrica, aumento 400X. A: Clula en anafase tarda
B: Clulas en metafase. C: Clula en profase.
D: Clula en anafase. El puntero seala una clula
anafase tarda.
Allium cepa, meristemo apical radicular, orcena aceto
clorhdrica, aumento 400X. A: Clula en interfase
B: Clula en profase. C: Clula en anafase.
D: Clula en metafase.

Allium cepa, meristemo apical radicular, orcena aceto

clorhdrica, aumento 400X. A: Clula en interfase.
B: Clula en profase. C: Clula en metafase.
 Allium cepa con colchicina

Clulas anormales con la colchicina

VI. DISCUSIN
La colchicina tambin es un alcaloide que acta como inhibidor de la mitosis a nivel de la
metafase, extrado de Colchicum autumnale, inhibe la polimerizacin de molculas de tubulina
e impide la formacin de los microtbulos, con lo que no se forma el huso mittico, y se duplica
el nmero de cromosomas de la clula, por lo tanto, ya que evita la separacin de las cromtidas
hermanas y su migracin a los polos de la clula. El hecho de estar separados por toda la clula
permite el que puedan contarse y determinarse cual es cada uno de ellos por su forma y su
tamao. Esta droga suele utilizarse para una correcta identificacin cromosmica.

La profase no se ve muy alterada, en la metafase al no haber tubulina aparecen los cromosomas

condensados pero dispersos por el interior celular, en la anafase se ven cromosomas con dos
brazos en lugar de cuatro y prcticamente no se observan telofases.

Los efectos secundarios incluyen trastornos gastrointestinales y neutropenia. Las dosis altas
tambin pueden daar la mdula sea, conducir a la anemia y causar prdida de cabello. Todos
estos efectos secundarios pueden resultar de la hiperinhibicin de la mitosis.
VII. CONCLUSIONES
Los resultados indican que la colchicina tiene marcado efecto genotxico sobre las
clulas de Allium cepa. Este efecto se hace ms severo a medida que aumenta la
concentracin del txico. El nmero de races del bulbo y el largo de las mismas no se
altera con notoriedad pero celularmente s y altera la mitosis. Tambin se observa que
la dureza de las races se incrementa con la concentracin del contaminante. El
incremento de mitosis anmalas es lineal con respecto a la concentracin de la
colchicina. Los resultados confirman la posibilidad de usar el test de Allium cepa como
bioensayo de contaminacin con la colchicina.
VIII. BIBLIOGRAFIA

1. M.A. Garca Martnez, F.J. Gonzlez de la Rosa y N. Bosacoma Ros. (2008). Intoxicacin
fulminante por colchicina.. Farm Hosp. Consultado el 4 de noviembre de 2016.
2. Colchicina: Casos de sobredosis graves por errores de medicacin.. Agencia Espaola
de Medicamentos y Productos Sanitarios. 2010. Consultado el 4 de noviembre de 2016.