Clases Biotecnología Industrial - 2017

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA
FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA DE BIOTECNOLOGA
Biotecnologa Industrial
El Alcance e Impacto de la
Biotecnologa Industrial
Dr. Roberto Vega Paulino

rvegap@unmsm.edu.pe
Biotecnologa Industrial o Biotecnologa Blanca
Industrial Biotechnology uses biological systems for the

production of chemicals, materials, and energy.
This technology is mainly based in biocatalysis (the use of

enzymes to catalyze chemical reactions) and in
fermentation technology (directed use of microorganisms),
in combination with breakthroughs in molecular genetics,
directed evolutions, and enzyme engineering and metabolic
engineering of microorganisms and cells.
Impacto de la Biotecnologa Industrial
This technology, already strongly developed in conventional domains
of the food and healthcare industry, now also strongly penetrates the
chemical industry with applications in fine and bulk chemistry,
polymer synthesis, pharmaceutical industry, and the energy sector. As
these processes and products are largely based on renewable raw
materials and possess substantial ecological benefits, this provides
them with a major advantage in the perspective of sustainable
development.
Impacto de la Biotecnologa Industrial
Successful innovation through a biotechnological product or process

is never solely defined by technology and science but equally by
other factors such as acceptance by the general public, the
innovation climate, and support by the authorities through a
consistent R&D policy.
Qu es un proceso?
Un proceso es un conjunto de operaciones a travs de las cuales la
materia prima es sometida en forma ordenada a un productos
En la transformacin hay cambios biolgicos

MATERIA PRIMA
Proceso biolgico (Bioproceso)

PRETRATAMIENTO
TRANSFORMACIN
RECUPERACIN
PRODUCTO
COLES GRANDES Obtencin de Chucrut
PICADOS EN TROZOS
PEQUEOS ensalada
Extraccin del agua por smosis, Aw

Promueve la salida de los azcares ferm.
DESHIDRATADO: SAL (2% 2.5%)
Favorece el crecimiento de BAL
1.Leuconostoc mesenteroides (heterofermentativa)

FERMENTACIN 2.Lactobacillus brevis (heterofermentativa)
T = 21 C, 1-2 meses 3.Lactobacillus plantarum (homofermentativa)
4.Pediococcus cerevisiae
EMBALAJE
PASTEURIZACIN
Acidez total: 1.7 2.3 %

EMPACADO EN lctico/Actico: 1-4
CONTENEDORES
AGENTES DE TRANSFORMACIN: ENZIMAS Y CLULAS
TIPOS DE CLULAS BACTERIAS

LEVADURAS
MOHOS
MICROALGAS
MICROBIANAS ARQUEAS
ANIMALES
VEGETALES
MAMFEROS
INSECTOS
POCAS AGENTES DE GRAN DIVERSIDAD
MATERIAS TRANSFORMACIN DE PRODUCTOS
PRIMAS
ENZIMAS CLULAS
VENTAJAS Y
DESVENTAJAS
EN CADA CASO
Preparaciones Enzimticas versus procesos de todas las clulas
Preparaciones Enzimticas versus procesos de todas las clulas
Procesos Biotecnolgicos versus Procesos de Sntesis
Qumica
Principales factores que limitan la aplicacin de los

biocatalizadores:
Las desventajas inherentes de los biocatalizadores
La existencia de tecnologas tradicionales bien desarrolladas
(consideraciones econmicas)
Desventaja de los biocatalizadores: Perspectiva econmica
Requerimientos de un proceso microbiolgico industrial:

Agua de proceso de alta calidad
Agua de enfriamiento a baja temperatura
Aire limpio
Vapor limpio
Ambientes higinicos
Facilidad para el tratamiento de aguas residuales
Facilidad para el almacenamiento de materias primas y
productos
Laboratorios de control de calidad sofsticados.
Posibles Ventajas de los Bioprocesos
Desarrollo de un Bioproceso
Depende de la realidad del mundo comercial (Consideracin comercial)
Desarrollo de un Bioproceso
Investigacin y desarrollo:
Rangos de los Procesos de Fermentacin
1.Fermentaciones que producen clulas microbianas (o biomasa)

como el producto
2.Fermentaciones que producen enzimas microbianas
3.Fermentaciones que producen metabolitos microbianos
4.Fermentaciones que producen productos recombinantes
5.Fermentaciones que modifican un compuesto que es adicionado a
la fermentacin el proceso de transformacin.
Los Elementos de un Proceso de
Fermentacin
1.Upstream Processing
Preparacin de los medios de cultivo, esterilizacin del medio,
fermentador y otros equipos auxiliares, preparacin del inculo
2. Bioreactor
El crecimiento del microorganismo en el fermentador de produccin,
bajo condiciones ptimas para la formacin de producto
3. Downstream Processing
La extraccin del producto y su purificacin, la disposicin de los
efluentes producidos por el proceso.
Representacin esquemtica de un proceso de
fermentacin
Diagrama de Flujo Tridimensional para un
Proceso de Fermentacin
Ejemplos de Fermentaciones
Ejemplos de Fermentaciones
Situacin actual de la Biotecnologa
Naturaleza de las vas metablicas: catablicas y
anablicas
Es importante conocer a fondo la fisiologa del microorganismo

para poder explotarlo en la biotecnologa
The series of chemical reactions involved in converting a chemical (or a

metabolite) in the organism into a final product is known as a metabolic pathway.
ATP
Intermediarios
anfiblicos
Funciones del Catabolismo y Anabolismo
Funciones del Anabolismo
La formacin de grandes molculas (algunas son constituyentes de la clula)

Proporcionar el esqueleto de carbono para la biosntesis.
Reciclo del reductante en
procesos anaerbicos
Metabolito
Reductante
Respiracin Aerbica y Anaerbica
Productos de Microorganismos Industriales
Del metabolismo primario: productos Del metabolismo secundario

finales e intermediarios
No tienen una funcin aparente en el organismo
Asociados con el crecimiento (obtencin de Son producidos en respuesta a una restriccin de
energa) y la mantencin de la vida la (sntesis nutrientes.
de macromolculas) Es restringido para algunas especies de plantas y
microorganismos.
Extraa e inusual estructura qumica
La capacidad de producir se puede perder fcilmente
(degeneracin de la cepa).
Los inductores gatillan el metabolismo secundario y los
cambios morfolgicos.
Productos del Metabolismo Primario
Principios para la produccin de metabolitos secundarios
Es gatillado por el agotamiento de un nutriente, biosntesis o adicin de un
inductor y el descenso en la velocidad de crecimiento.

Estos eventos generan seales los que afectan la cascada de los eventos
regulatorios, resultando en diferenciacin qumica (metabolismo secundario)
y morfolgica.
La seal es un inductor de bajo peso molecular que acta por control
negativo (inactiva a una protena regulatoria)
Los metabolitos secundarios son codificados por un conjunto de genes del
ADN cromosomal e infrecuentemente del ADN plasmdico.
Productos de Metabolismo Secundario
Aportan a la sociedad:
1) Salud
2) Nutricin
3) Economa
Modelo de Luedeking-Piret para la velocidad especfica de
formacin de productos
q P
Balance de masa del producto en un cultivo por

lote:
dP
qP X
dt
Trofofase e Idiofase en el metabolismo secundario
Geldanamycin
Doxycycline
Erythromycin
Aflatoxin B1
Conexiones entre las vas catablicas y anablicas, los 9 principales precursores
Vas para la Sntesis de Metabolitos Primarios y Secundarios
1. Catabolismo de carbohidratos
1.1 La va de Embden-Meyerhof-Parnas
1.2 La va de la pentosa fosfato
1.3 La va de Entner-Duodoroff
Pentosa Fosfato
Embden-Meyerhof-Parnas
Utilizada por el gnero de
Pseudomonas
Entner-Duodoroff
Ciclo de los cidos tricarboxlicos (procesos
aerbicos)
Funciones del ciclo de los cidos tricarboxlicos
Reaccin Anaplertica
Piruvato carboxilasa
Ciclo del glioxilato para el crecimiento sobre compuestos C2
Ciclo del glioxilato para el crecimiento sobre compuestos C2
Degradacin de cidos grasos
Glicerol
Gliceraldehido 3-
fosfato
Productos del metabolismo Anaerbico en varios microorganismos
Rutas biosintticas entre
metabolitos primarios y
secundarios
1. Productos secundarios derivados del esqueleto intacto de glucosa
Es ms comn entre los actinomicetos que entre Estreptomicina

los hongos.
2. Productos secundarios derivados de los nuclosidos

Bleomicina
Producen Actinomicetos y hongos
3. Productos secundarios derivados a travs de la va de Shiquimato-Corismato
Productos secundarios aromticos por bacterias y

actinomicetos
Cloranfenicol
Novobiocina
SOBREPRODUCIN DE METABOLITOS DE
MICROORGANISMOS INDUSTRIALES
Okafor, 2007. Modern Industrial Microiology and Biotechnology

Demain, 1971. Advances in Biochemical Engineering and Biotechnology

1.-
1.1. Induccin de sustrato
Las enzimas constitutivas se producen si sus sustratos estn o no presente. Ejemplo: las
enzimas que transforman la glucosa a piruvato.
Las enzimas inducibles se forman slo cuando sus sustratos o anlogos de sustrato estn
presentes en el medio.
Induccin enzimtica se define como un incremento relativo en la velocidad de sntesis
de una enzima especfica, resultando de la exposicin a una sustancia qumica- el
inductor.
Anlogos del sustrato son con frecuencia excelentes inductores.
Ejemplo de inductores cuando son sustratos: un polisacrido, un oligosacrido o un
aminocido como nica fuente de carbono y energa.
El inductor se puede formar internamente en la clula. Ejemplo: el inductor de piruvato
deshidrogenasa es el piruvato.
La induccin asegura que la energa y los aminocidos no se gasten en enzimas
innecesarias pero, cuando se necesita, estas enzimas sean formadas rpidamente.
Modelo de Jacob y Monod de un sistema enzimtico inducible: control negativo
Opern
: gen regulador
-R:
-O: gen operador
-S: gen estructural
-P: gen promotor
- Protena reguladora
- Inductor http://pendientedemigracion.ucm.es/info/genetica/grupod/Operon/Operon.htm
1.2. Regulacin de catabolito
Cuando ms de un sustrato utilizable est presente en el ambiente, la clula

microbiana produce enzimas para utilizar el mejor sustrato (usualmente glucosa) y slo
despus del agotamiento se forman las enzimas para la fuente de carbono ms pobre.
Represin de catabolito, el tipo ms comn de regulacin catablica, se define como
un descenso relativo en la velocidad de sntesis de una enzima especfica, resultando
de la exposicin a una fuente de carbono asimilable rpidamente.
Ejemplo de represin catablica: opern lac, represin catablica de la -galactosidasa
La induccin y la represin de catabolito aseguran que las enzimas inducibles se produzcan

slo en la presencia de sustrato, pero cuando varios sustratos estn presentes, nicamente
las enzimas actuando sobre el sustrato ms favorable sern producidas
Factores que favorecen la represin de catabolito:
1. Efecto de la glucosa
Otras fuentes de carbono pueden ser ms represivas que la glucosa. Ejemplos:
En Pseudomonas aeruginosa, el citrato es favorecido sobre la glucosa como la fuente de
carbono, reprimiendo las enzimas del catabolismo de la glucosa.
2. La Deficiencia de AMPc (3-5-adenosin monofosfato cclico) favorece la represin de

catabolito
AMPc
AMPc estimula la sntesis de un gran nmero de enzimas y es necesario para
la sntesis de ARNm que corresponden a todos los operones inducibles de E.
coli.
1.3. Regulacin de retroalimentacin
1.3.1 Inhibicin de retroalimentacin:

Fenmeno por el cual el metabolito final de una va bioqumica inhibe la accin de una
enzima temprana (usualmente la primera) de aquella secuencia. El inhibidor no es un
derivado del producto final
1.3.2 Represin de retroalimentacin:

Fenmeno por el cual se da la inhibicin en la velocidad de sntesis de las enzimas.
Se acompaa por un derivado del ltimo producto de la va
Ambos mecanismos actan para ajustar la velocidad de produccin de los productos
finales de las vas para la velocidad de sntesis de macromolculas
Sistema enzimtico represable por retroalimentacin
Co-represor: producto final de la va biosnttica

o un derivado del producto final
Represin de retroalimentacin es un fenmeno ampliamente utilizado que regula la sntesis

de aminocidos, vitaminas, nucletidos de purina y pirimidina y otras molculas que son los
bloques de las macromolculas
1.4 Regulacin de Vas Ramificadas
Isoenzimas:
La formacin de los aminocidos de la familia del cido asprtico en
E. coli. Tres apartoquinasas catalizan la reaccin inicial. Una
isoenzima es regulada por lisina, otra por treonina y la tercera por
metionina
Concertada o cooperativo:
Es ejercida en la secuencia ramificada que conduce a valina,
isoleucina, leucina y cido pantotnico en Salmonella
typhimurium
Acumulativa:
Cada inhibidor acta independientemente pero los efectos combinados
son acumulativos.
Science 1969, vol. 165, pag. 556-562
1.5 Regulacin de la carga de energa
Regula las actividades de las enzimas catablicas que
dirigen a la formacin de ATP y las enzimas biosintticas
que utilizan ATP
1.5 Control de la permeabilidad
No requieren
energa
Levaduras utilizan este mecanismo para tomar los azcares

La permeabilidad se puede incrementar o decrecer
por mutaciones y por cambios en el ambiente. Esta
ltima incluye limitacin de biotina o Mn++, los
cuales son de importancia en la produccin de
cido glutmico y ctrico. As tambin para la
permeabilidad de cido glutmico es importante la
penicilina y los cidos grasos derivados.
2.-
2.1. Control metablico: alteracin de la regulacin de retroalimentacin
2.1.1 Sobreproduccin de un intermediario en una va no ramificada

-Un auxtrofo de arginina de Bacillus
subtilis excreta 16 g de L-citrulina por
litro.
- Un auxtrofo de arginina de
Corynebacterium glutamicum
produce 26 g de L-ornitina por litro.
2.1.2 Sobreproduccin de un intermediario en una va ramificada
Ejemplo: Auxtrofos de C. glutamicum y

Brevibacerium ammoniagenes deficientes en
S-AMP sintetasa acumularon 13 g de IMP por
litro. IMP es un potente potenciador del
sabor.
AMP: adenosina 5- monofosfato

GMP: guanosina 5- monofosfato
IMP: inosina 5- monofosfato
XMP: xanthosina 5- monofosfato
2.1.3 Sobreproduccin de los productos finales de una va
ramificada
Ejemplo:
Mutantes de C. glutamicum
2.1.4 Sobreproduccin de producto final de una va no ramificada
a) Uso de un anlogo txico o anlogos resistentes de retroalimentacin

b) Uso de la mutacin inversa
Mecanismo a):
1. Aminocido A normalmente inhibe y/o reprime sus propias enzimas biosnteticas y es tambin
incorporado en la protena.
2. Anlogo de aminocido A tambin ejerce inhibicin o represin pero no puede ser utilizado para la
sntesis de protenas.
3. La vasta mayora de clulas expuestas a A mueren debido al agotamiento de A, aquellos mutantes
insensibles a A pueden an hacer A y son capaces de crecer en colonias.
4. Algunos de estos mutantes son resistentes a A porque una alteracin en la estructura de la enzima
(represin o inhibicin por retroalimentacin).
5. Debido a estos controles alterados, tales mutantes sobre producen A.
2.1.5 Restricciones de la actividad enzimtica
2.2. Alteracin de la permeabilidad

3.
-
3.1 Induccin de enzimas
3.1.1 Sntesis de alcaloides en Claviceps sp. (BuLock y Barr, 1968, Lloydia 31: 342-354)
Aunque el triptfano es un precursor del metabolito, su rol parece ser ms importante como inductor de
algunas de las enzimas para la biosntesis por tres razones:
1) Anlogos de triptfano que no son incorporados en el alcaloide tambin estimulan la produccin
2) El triptfano debe ser adicionado durante la trofofase ya que la adicin durante la idiofase tiene poco
efecto.
3) El triptfano adicionado es removido del medio durante el crecimiento y alcanza dos a tres veces ms la
concentracin intracelular normal solo antes de la produccin del alcaloide.
3.1.2 Sntesis de cefalosporina C por Cefalosporium ocremoniun

Inductor metionina
3.2 Regulacin de catabolitos
Puede ser por represin o inhibicin por catabolito; sin embargo no es posible an decir cul es el
mecanismo que opera en el metabolismo secundario.
La penicilina no se produce en un medio que contiene glucosa hasta despus del agotamiento de
la glucosa, cuando la idiofase se pone en marcha. El mismo efecto se ha observado con la
produccin de cefalosporina.
Durante la lenta utilizacin de la lactosa, el antibitico se produce en la ausencia de crecimiento.
Lactosa no es un precursor especfico , su valor conduce en una lenta utilizacin.
Hoy la alimentacin lenta de la glucosa ha reemplazado la lactosa en la industria de la penicilina.
La limitacin de la concentracin de glucosa aparentemente mantiene los catabolitos en un nivel
bajo
3.3 Regulacin de retroalimentacin
Chloramfenicol inhibe su propia produccin como lo hace la
penicilina, ristomicina y virginiamicina.
Va ramificada para producir lisina y penicilina en P.

chrysogenum. Se muestra la inhibicin de
retroalimentacin por lisina de homocitrato
sintetasa
3.4 Regulacin de ATP o carga energtica de metabolitos secundarios
4.-
4.1 Efecto estimulatorio de precursores

Ej. El triptfano se adiciona a las fermentaciones de alcaloides.
La produccin de penicilina es estimulada por la adicin de cido de
fenilactico presente en el licor de maz agotado.
4.2 Compuestos inorgnicos

Ej. El fosfato es restringido en la fermentacin de estreptomicina para evitar
la inhibicin de retroalimentacin de las fosfatasas involucradas en la
biosntesis.
4.3 Temperatura
Para los metabolitos secundarios es del orden de 5-10 C
4.4 Mutaciones
1) Mutantes revertidos:
Prototrofo
Prototrofo Auxtrofo Mutante resistente a la
retroalimentacin
2) Mutantes resistentes de un anlogo:

Produccin mxima del antibitico pirrolnitrina requiere suplementacin de
triptfano, un precursor. Despus de la seleccin de mutantes resistentes a anlogos
de triptfano, una cepa se obtuvo que sobreproduce triptfano y no requiere
suplementacin, resultando en un productor superior de pirrolnitrina.
3) Cultivos resistentes a antibiticos

Medios industriales y la nutricin de microorganismos utilizados en las
fermentaciones. Transferencia de oxgeno. Modalidades de cultivo para las
fermentaciones
Objetivo de los medios industriales

Abastecer al microorganismo o lnea celular con una fuente
necesaria de nutrientes en una forma fcilmente utilizable.
Por dnde empezamos a disear el medio de cultivo?
Composicin elemental de la lnea celular

Fuente de energa que requiere la lnea celular
Propsito del bioproceso: Biomasa/producto o ambos.
Impacto de la formulacin del medio sobre el producto, ejemplo: el pH.
Por dnde empezamos a disear el medio de cultivo?
Tipo de proceso: lotes, lote alimentado o continuo y diferentes medios ser

requerido en diferentes etapas?
El impacto del medio sobre otras etapas del proceso. Por ejemplo en el
downstream
Existe el correcto equipo para la esterilizacin?
Productos lbiles al calor
Clasificacin de los m.o. segn sus requerimientos de energa y nutricionales
Prototrofos no requieren factores esenciales

Auxotrofos requieren factores esenciales
El Medio de Cultivo Ideal
Rendimiento mximo de producto o biomasa por gramo de sustrato utilizado.
Velocidad mxima de formacin de producto.
Mnimo rendimiento de productos no deseados.
Calidad consistente y disponible todo el ao.
Causa mnimos problemas durante la formulacin y esterilizacin.
Causa mnimos problemas en la aireacin, agitacin, extraccin, purificacin y
tratamiento de residuos.
REQUISITOS DE LOS NUTRIENTES BSICOS EN LOS MEDIA
INDUSTRIAL
Deben satisfacer las necesidades del microorganismo en trminos de carbono,
nitrgeno, minerales, factores de crecimiento y agua.
No deben contener materiales que sean inhibitorios para el crecimiento.
Para una fermentacin aerbica
F. Carbono y Otros
energa + F. + O2 + requerimientos
Nitrgeno
Biomasa + Productos + CO2 + H2 O + Calor

Para los requerimientos de carbono y energa se utilizan carbohidratos:
glucosa, almidn celulosa, etc.
Fuentes de energa tambin incluyen hidrocarburos, alcoholes y cidos
orgnicos.
Nitrgeno se encuentra en protenas incluyendo enzimas, cidos nucleicos
y rea. Muchas clulas pueden usar el ion amonio, gas amoniaco o nitratos.
Algn componente nitrogenado que la clula no pueda sintetizar se debe
adicionar.
Criterios para la seleccin de materias primas usadas en medios industriales
Costo de la materia prima.

Disponibilidad inmediata de la materia prima.
Costo de transporte
Facilidad de eliminacin de los desechos resultantes de las materias primas
Uniformidad en la calidad de la materia prima y fcil de estandarizacin.
Each batch of molasses must be chemically analyzed before being used in a

fermentation industry in order to ascertain how much of the various nutrients
must be added. A raw material with extremes of variability in quality is clearly
undesirable as extra costs are needed, not only for the analysis of the raw material,
but for the nutrients which may need to be added to attain the usual and expected
quality in the medium.
Adecuada composicin qumica del medio

Presencia de precursores relevantes
Satisfaccin de los requerimientos del crecimiento y produccin de
microorganismos.
TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVOS
- Desechos agroindustriales y extractos naturales:

Melazas, licor de maceracin de maz, extracto de
Complejos
levadura, etc.
- Suplementacin de compuestos: N, Mg , P, entre otros.
-Usos: Microbiologa de aguas y alimentos,
fermentaciones industriales.
MEDIOS DE
CULTIVO
- Se formulan en base a compuestos puro s: glucosa,

sulfato de amonio, metionina, fosfatos etc.
Definidos
- Se usan en investigacin y desarrollo de procesos de
fermentacin
MEDIO DEFINIDO
Medio
mnimo
Medio formado por una solo fuente de cada elemento.

Tpicamente, est compuesto por glucosa, sulfato de amonio y
otras sales minerales.
COMPONENTES DE MEDIOS COMPLEJOS INDUSTRIALES
COMPONENTE ORIGEN
Melaza Industria azucarera
Licor de maceracin de maz Subproducto del procesamiento
del maz
Licor de sulfito Desecho de la industria de pulpa
y papel
Suero de permeado de suero Subproducto de la produccin de
queso
Vinazas Subproducto de la produccin de
etanol
Harinas de Soja y pescado Industrializacin de la soja y
pescado
Extracto de levadura Industria productora de levadura
Fuentes de Carbono Industriales
Melazas
Extracto de Malta
Almidn y dextrinas
Licor de sulfitos
Celulosa
Suero de leche
Alcanos y alcoholes
Grasas y aceites
Fuentes de Nitrgeno Industriales
Licor macerado de maz
Extracto de levadura
Peptonas
Harina de soya
Materias primas utilizadas en los componentes de medios
industriales
1) Licor de maz macerado
Producto secundario de la fabricacin del almidn de maz.

Es rico en carbohidratos, nitrgeno, vitaminas y minerales.
Composicin es altamente variable, depende de la variedad del maz, condiciones
de maceracin y tiempo de concentracin.
El altamente cido y se debe neutralizar (CaCO3) antes de utilizar.
2) Pharmamedia (Proflo)
Polvo fino amarillo hecho del embrin de la semilla del algodn.

Se utiliza en la fabricacin de tetraciclina y algunas penicilinas semi-
sintticas.
Es rico en protenas (56% p/v), contiene carbohidratos (24%), aceites (5%) y
cenizas (4%), (Ca, Fe, Cl-1, PO3-2 , SO4 -2)
La composicin de Pharmamedia
Componentes Cantidad
Slidos totales 99 %
Carbohidratos 24.1 %
Azcares reductores 1.2 %
Azcares no 1.2 %
reductores
Protenas 57 %
Nitrgeno amino 4.7 %
Grasas 4.5 %
Fuente: Stanbury et al. (1995). Principles of fermentation technology

3) Solubles de destilera
Producto secundario de la destilacin del alcohol de los granos

fermentados.
El filtrado se concentra para dar un jarabe que se seca en un secador de
tambor.
4) Harina de soya
5) Melazas
6) Licor de sulfito
Factores de crecimiento
Muchas actan como co-factores de enzimas
Aminocidos
cidos grasos
Esteroles
El Agua
Oxgeno
La disponibilidad del oxgeno puede ser influenciada por tres caminos:
Metabolismo rpido
Reologa del medio
Antiespumantes
Antiespumantes
Son agentes tensioactivos que reducen la tensin superficial, unindose toda la espuma.
El antiespumante ideal debe tener las siguientes propiedades:

Fcil y rpidamente dispersado con una accin rpida
Alta actividad a bajas concentraciones
Accin prolongada;
No txico para los microorganismos de fermentacin, los seres humanos o los animales;
Bajo costo;
termoestabilidad
Compatibilidad con los otros componentes del medio y el proceso (no tiene efecto
sobre las velocidades de transferencia de oxgeno o en el downstream.
Medio de cultivo para Clulas Animales
Clasificacin de acuerdo a su composicin:
Medios de bajo suero
Medios libres de suero
Medios libres de compuestos de animales.
Se adiciona antibiticos (penicilina y estreptomicina) para prevenir el crecimiento

bacteriano
Medios de Cultivo para el Crecimiento de Clulas Vegetales
Se utilizan medios qumicamente definidos.

Fuente de carbono orgnico (sacarosa, glucosa, fructosa, maltosa y lactosa)
Nitrato es la fuente de nitrgeno usual, suplementada con sales de amonio.
Algunas especies requieren nitrgeno orgnico (aminocidos).
Hormonas vegetales: auxinas que inducen la divisin celular y las citoquininas que
actan como factores de regulacin del crecimiento, las cuales promueven la divisin
celular del cultivo
ATCC
NRRL
DSM
CRECIMIENTO MICROBIANO INTERMITENTE
Estudio Cintco
Crecimiento bactariano
Medio definido mnimo
Ausencia de inhibidores
REACTOR POR LOTES DE LABORATORIO
Fases del crecimiento Microbiano en cultivo por lotes
Cultivo por lotes

a b c d e No hay intercambio de materia con
los alrededores, excepto los gases
(aireacin, produccin CO2).
Ln X
Se carga inicialmente los nutrientes y

luego se inocula con una cierta
cantidad de clulas viables.
Tiempo
(a) Fase de latencia.

(b) Fase de crecimiento exponencial o logartmico.
(c) Fase estacionaria.
(d) Fase de muerte o decaimiento
(e) Fase de crecimiento crptico.
Quimiostato: se refiere a un ambiente qumicamente constante.
Turbidostato: la concentracin de clulas en el fermentador se mantiene
constante mediante el monitoreo de la densidad ptica del cultivo y
controlando la velocidad de flujo de la alimentacin.
CULTIVO POR LOTE ALIMENTADO (CLA) (FED-Batch)
F
Cuando es necesario efectuar un cierto control sobre
SF
la velocidad especfica de crecimiento del
SR microrganismo.
X V
Resulta adecuado para procesos limitados por la
P
existencia de represin catablica, inhibicin por
sustrato y constante de saturacin Ks muy alta.
Control de la fuente de carbono en el fermentador
durante la produccin de biomasa de levadura, a fin
de minimizar la sntesis de etanol como consecuencia
del efecto Crabtree.
En el cultivo continuo y cultivo por lote alimentado siempre se quiere trabajar con
una menor que M. Si se quiere cultivar a M se cultiva por lotes.
Para la levadura de panificacin se trabaja por lote alimentado por la formacin
de alcohol.
Glucosa EFECTO CRABTREE
Etanol Etanol
Etanol Biomasa
O2
Microorganismos de inters biotecnolgicos:
diversidad, aislamiento, seleccin y
mantenimiento.
Aislamiento de Microorganismos
Es la obtencin de un cultivo puro o mixto seguido por

su evaluacin para determinar la reaccin deseada o
proceso para el producto deseado.
El aislamiento debe realizar el proceso econmico.
La seleccin del cultivo es un compromiso entre la

productividad del organismo y las restricciones
econmicas del proceso.
Criterios en la seleccin de organismos
Las caractersticas nutricionales del organismo: usando un medio

muy barato o uno predeterminado.
La temperatura ptima del organismo.
La reaccin del organismo con el equipo a ser empleado y la
adecuacin del organismo al tipo de proceso a ser usado.
La estabilidad del organismo y su posibilidad a la manipulacin
gentica.
La productividad del organismo.
La facilidad de recuperacin del producto del cultivo.
Mtodos de Aislamiento
Mtodo de Placa vertida
Sobre una placa estril sin medio de cultivo se agrega cierto volumen del inculo (0.1 1.0
ml) al que se aade el medio de cultivo con una temperatura de 45 o 50 C, luego se agita
suavemente la placa para mezclar, despus que el agar se solidifica y se incuba las colonias
crecern y en la superficie del agar. El principal inconveniente de este mtodo es que ciertos
microorganismos sensibles al calor pueden verse daados por la temperatura del agar
fundido.
2) Enriquecimiento y medio selectivo
Medio enriquecido: se ha adicionado factores de crecimiento,

puede ser un medio definido o medio complejo.
Medio selectivo: la adicin de penicilina a un cultivo de bacterias
y hongos filamentosos
CULTIVO CONTINUO
m.o. es seleccionado por la
afinidad al sustrato mas que por
m.
3) Condicin Aerbica y Anaerbica
4) pH del medio
4) pH del medio
4) Aislamiento por diferencias en la temperatura
4) Aislamiento por diferencias en la temperatura
Porque y para que conservar los cultivos ?
El cultivo (cepa microbiana o viral, linea celular, etc),

es el elemento vital de la investigacin o produccin
industrial
Conservar implica mantener la pureza, viabilidad y
propiedades genticas del cultivo durante un
determinado perodo de tiempo
Consecuencias de una adecuada conservacin:
estabilidad de las cepas de produccin,
reproducibilidad de la investigacin. Reposicin
Los tres objetivos de la conservacin:
1.-Mantenimiento del cultivo puro (PUREZA)
2.-Que este vivo (VIABILIDAD)
3.-gentica estable (ESTABILIDAD)
4.- Manejo fcil (TRANSPORTE)

Conservacin de cultivos
Espacio fsico e infraestrutura

Personal capacitado
Recursos econmicos
Inversin
Potencial limitacin de los Dao econmico

mtodos para conservar
Prdida del cultivo
Mtodos de conservacin de cultivos
1. con crecimiento
transferencia seriada (subcultivos)
2. con metabolismo limitado
agua destilada
bajo aceite mineral (control por O2)
3. con metabolismo detenido
3.1 Congelamiento (crioconservacin)
3.2 Deshidratacin
L-drying: secado desde la fase lquida,
silicagel, celulosa (papel), suelo, perlas de porcelana
Liofilizacin (freeze-drying)
Mantenimiento o Conservacin de los Cultivos
2) MTODOS:
Sub-cultivos
Mantenimiento bajo capa de aceite

Congelacin
Cultivos en tierra
Preservacin en celulosa
Liofilizacin
INJURIA POR CONGELAMIENTO
Congelamiento lento (efecto soluto)

exosmsis
Hielo extracelular
shrinkage (efecto soluto)
Congelamiento rpido ( efecto hielo )
Hielo intracelular Dao mecnico

CRIOPROTECCIN
Control de la velocidad de enfriamiento

Balance ptimo entre el efecto soluto y la formacin e hielo. En
la prctica es aceptable 10 C/min. El descongelamiento debe
ser lo mas rpido posible
Incorporacin de crioprotectores (CPs)

CPs que permean la pared y membrana celular
Me2SO ( Tp < 30 min), Glicerol, Metanol
Cps que permean la pared pero no la membrana
mono y disacridos, aminocidos, polmeros de bajo PM(PEG
600-1000)
Cps no permeantes
Polmeros de alto PM: protenas, polisacridos, PVP
CRIOPROTECCIN
El tipo de proteccin que ejerce el CPs depende de

su permeabilidad
Todos los CPs son altamente hidroflicos
CPs que permean totalmente ligan agua intracelular
y reducen el efecto soluto
CPs semipermeables forman entre la pared y la
membrana celular una capa que proteje la clula del
dao mecnico
CPs no permeables se adorben en la superficie
celular incrementando la viscosidad local lo cual
manteniendo el hielo en forma amorfa evitando dao
mecnico
Empleo de CPs en criopreservacin
Frecuencia de uso de CPs

Virus: Me2SO, Suero sanguneo, Sacarosa Glicerol
Bacterias: Me2SO, Suero sanguneo, Sacarosa, Glicerol, leche descremada
Hongos: Me2SO, Glicerol
Algas: Me2SO, metanol, Glicerol, PVP
Protozoarios: Me2SO, Suero sanguneo, Glicerol, Sangre desfibrinada
Rango de concentraciones de CPs

Me2SO: 1-32 % (media 10 %)
Glicerol: 5-50 %
Sacarosa: 1-68 % (media 10 %)
Metanol: 2-10 % (media 5 %)
Tiempos de contacto CPs-clula:

Glicerol, Metanol, Me2SO : 10-60 min a 0-10C
Comparacin de algunos mtodos de preservacin
Almacenamiento
Mtodo Ventajas Desventajas
(aos)
Secado del agar, baja
Simple, bajo costo,
Agar 0.5-2 estabilidad gentica, riesgo
equipamiento requerido bajo
contaminacin
bajo costo, equipamiento trabajo moderado, baja

Aceite mineral 2-20
requerido bajo estabilidad gentica
Requiere protectores, Alto

Equipamiento requerido bajo, costo de freezer (-80C).
Congelamiento 4-5
buena estabilidad gentica Clulas pueden ser sensibles al
O2
Preparacin rpida, buena Suministro regular de N

N lquido infinito
estabilidad gentica lquido
Bajo riesgo de contaminacin,

Liofilizacin 15-20 buena a regular estabilidad Alto costo de equipamiento
gentica
Simple , bajo costo, bajo

Agua 1-5 Estabilidad gentica regular
equipamiento requerido
Simple , bajo costo, bajo

L-drying 3-10 estabilidad gentica?
equipamiento requerido
Mejoramiento de cepas industriales
Por qu?
Incrementar los rendimientos para lograr una mayor

rentabilidad de los procesos
Posibilidades:
La optimizacin del medio de cultivo y de las condiciones de

operacin.
Mejoramiento gentico de la cepa.
Mejoradas Genticamente
Seleccin natural
Mutacin inducida
Recombinacin gentica
Seleccin natural
Mutacin Inducida
Implica dos etapas:

1. Tratamiento de la poblacin con el mutgeno elegido
2. Aislamiento de los mutantes para su posterior ensayo y
seleccin.
Tipos de mutgenos
a) cido nitroso (HNO2):
Induce transiciones A-T ----G-C y/o deleciones por uniones
cruzadas en el interior de la cadena.
b) N-metil-N-nitro-N-nitrosoguanidina (NTG)
It acts by adding alkyl groups to the O6 of guanine and O4 of
thymine, which can lead to transition mutations between GC
and AT. These changes do not cause a heavy distortion in the
double helix of DNA and thus are hard to detect by the DNA
mismatch repair system.
c) Anlogos de bases: producen transiciones. 5-bromuracilo y 2-
aminopurina
d) Mutgenos estructurales (proflavina o naranja acridina) no son
incorporados covalentemente en el ADN, sino que actan como
agente de intercalado en la estructura, promoviendo adiciones o
deleciones simples durante la sntesis del ADN.
Mutantes con niveles mejorados de metabolitos primarios
Mutantes auxtrofos para uno o ms productos finales.
Mutantes resistentes
Mutantes revertantes (doble mutacin)
Mutantes productores de enzimas degradativas de inters

industrial
Mutantes constitutivos: Productores de enzimas en ausencia
de inductor.
Productores de enzimas en presencia de represin
RECOMBINACIN GENTICA
Tecnologa de Procesos para la produccin de Biomasa
Celular: Levadura de Panificacin
Optimizacin
CONCENTRACIN MXIMA
FERMENTACIN DE CLULAS MICROBIANAS
Usos de la Biomasa Microbiana
Cultivos inciadores e inculo para las fermentaciones de alimentos y bebidas,

procesos de tratamientos de aguas residuales, inculos agrcolas, lixiviacin de
minerales y como biopesticidas.
Fuente de protenas para alimentacin humana (inodora e inspida)
Forraje para animales
Principales usos de las Levaduras
Atributos deseables de la levadura de panificacin
Crecer rpidamente
Producir grandes cantidades de CO2 en masa de harina, en lugar de
alcohol.
Buena calidad de conservacin a 20 C
Alta actividad glicoltica.
Adaptarse rpidamente a varios sustratos.
Atributos deseables de la levadura de panificacin
Alta actividad de invertasa y otras enzimas para hidrolizar los

glucofructanos rpidamente.
Crecer y sintetizar enzimas y coenzimas en condiciones anaerbicas de la
masa.
Resistir el efecto osmtico de sales y azcares en la masa.
Mantenimiento del cultivo
En nitrgeno lquido
Mtodo de cultivo de aceite en el que el aceite estril se

coloca sobre un tubo inclinado de la levadura y se mantiene en
refrigeracin a 4 C.
La liofilizacin no es muy utilizado, ya que induce la prdida
de viabilidad en muchas levaduras y una tendencia a la
mutacin.
Metabolismo energtico y absorcin de azcares por la levadura de
panificacin
BIOQUMICA DE LA PRODUCCIN DE LEVADURA
La produccin de levadura depende:
Habilidad para asimilar el nitrgeno inorgnico (amonio, sales de amonio).

Crecer va respiracin en vez de va fermentativa
Efecto Pasteur: Tendencia de la levadura a reproducirse va respiracin
cuando grandes cantidades de oxgeno est presente.

Efecto Crabtree: Tendencia de la levadura a producir alcohol en condiciones
aerbicas y altas concentraciones de glucosa.
http://www.lallemandmexico.com/#
Efecto Crabtree
Un fenmeno donde el sustrato suprime la
respiracin aerbica, provocando un
metabolismo anaerbico y produccin de etanol.
Resultado bajo rendimiento de biomasa.
Estequiometra de la produccin de Levadura de panificacin
200 g + 10 g NH3 + 100 g O2 + 7.5 g sales 100 g biomasa + 140 g CO2 + 70 g H2O
glucosa
Se utiliza NH4OH para regular el pH de la fermentacin
Dato Industrial: 1-Ib de peso seco de levadura requiere 4.3 Ib de melazas, 0.9 Ib de amonio, 0.3 lb de
NH4H2PO4, 1.1 lb de (NH4)2SO4 and 60 lb de aire.
MATERIAS PRIMAS EN LA PRODUCCIN
DE LEVADURA DE PANIFICACIN
Melazas (fuente rica en azcares fermentables: sacarosa, glucosa y fructosa)

Suero (previa hidrlisis de lactosa en glucosa y galactosa)
Almidn (previa hidrlisis a jarabes de glucosa y maltosa)
Materiales lignocelulsicos (previa hidrlisis qumica)
Sacarosa + rafinosa
Glucosa + (parcialmente
metabolizada)
Fructosa
BIOQUMICA DE LA PRODUCCIN DE LEVADURA
La combinacin de los efectos Pasteur y Crabtree en Saccharomyces

cervisiae es la razn por la que los productores comerciales de
levadura usen alta aireacin y cultivo por lote alimentado, para
mantener un alto nivel de oxigeno, un bajo nivel de azcar a travs
del proceso de produccin controlando la represin de catabolito y
la inhibicin de sustrato
By maintaining a specific growth rate () of 0.20.25 h-1 at 2830C, cell concentrations of up to 60 g/L can be
achieved.
PRODUCCIN INDUSTRIAL DE Levadura de panificacin
PROPAGACIN
COSECHA
CONCENTRACIN Y/O SECADO
EMPAQUETADO
ALMACENAMIENTO
pH 4-6
total sugar
T= 30 C does not
exceed
0.1%.
5% de slidos
18% de slidos
30% de slidos
Ayuda en la extrusin, corte
y mejorar la apariencia de
la levadura.
(0.2-0.6% p/v) (CONTRACCIN DE

CLULAS)(
PROCESOS DE FERMENTACIN EN LA PRODUCCIN
DE LEVADURA DE PANIFICACIN
ETAPA DE MADURACIN:
Permitir la aireacin durante 30-60 min al final de la alimentacin para
permitir que los nutrientes no utilizados se utilicen.
Las clulas en reproduccin se detienen as cuando se reanude el
crecimiento las clulas estn sincronizadas.
Se forma trehalosa que sirve como agente de proteccin de la
congelacin o secado de la levadura.
Continuous fermentation has not been widely used in bakers yeast production.
TIPOS DE LEVADURAS
EMPAQUE DE LA LEVADURA DE PANIFICACIN
(1) Compressed yeast: The yeast product obtained after harvesting,

is mixed with fine particles of ice, starch, fungal inhibitors and
processed vegetable oils (e.g. glyceryl monostearate) which all help
to stabilize it. It is then compressed into blocks of small (1-5 Ib)
blocks for household use or large (up to 50 Ib) for factory bakery
operations, stored at 7 to 0 C and transported in refrigerated
vans.
EMPAQUE DE LA LEVADURA DE PANIFICACIN
(2) Active dry yeast
Las levaduras son sometidas a diferentes tratamientos al final de
fermentacin:
Incremento T de 30 a 36 C
Adicin de alcohol del caldo agotado
Sincronizacin de la germinacin: alternando alimentacin y
agotamiento del sustrato limitante.
The final product has a moisture content of about 8% and may
be packaged in nitrogen-filled tins.
Varios mtodos para empacar
Levaduras
30-38% materia seca
30-38% materia seca
30-38% materia seca
30-38% materia seca

Biotecnologa Alimentaria
Produccin de Bebidas alcohlicas no
destiladas
Dr. Roberto Vega Paulino

BIOQUMICA DE LA FERMENTACIN ALCOHLICA
Mximo rendimiento
de glucosa: 51.1%
de sacarosa: 53.8%
Piruvato
descarboxilasa
Proceso de Fermentacin
2 bebidas alcohlicas
2 Estabilidad de la bebida
Alcohol Obtener sabor equilibrado
deshidrogenasa Alto rendimiento de etanol
C6H12O6 + 2 Pi + 2 ADP 2 CH3-CH2OH + 2 CO2 + 2 ATP + 25.5 kcal

TOMA DE AZUCARES EN Saccharomyces cerevisiae
Waites, Neil, Rockey, Higton.

Industrial Microbiology . 2001
TIPOS DE BEBIDAS ALCOHLICAS
Bebidas
Alcohlicas
Bebidas Bebidas
Fermentadas destiladas
Cerveza Vino Destilados Licores

> 20% (v/v)
De alta fermentacin Rojo Whiskey (cebada o centeno)

De baja fermentacin Blanco Brandy (destilado del vino)
Vodka (centeno, trigo, papa)
Ron (residuos de caa de
azcar o melazas)
Ginebra (saboreado con vayas
de enebro)
CERVEZA: bebida fermentada producida de la cebada o
trigo malteado. Adicin de lpulo. Contenido de alcohol:

4-6 % (v/v)
VINO: Jugo de fruta fermentada naturalmente. No se
adiciona azcar, cido, enzimas o una solucin de
nutrientes. Contenido de alcohol: 10-14 %(v/v).
DIFERENTES NOMBRES DE CERVEZA Y
CARACTERSTICAS
Garcia G., Quintero R., Lopez-Mungua C.,

Biotecnologia Alimentaria, Editorial Limusa, 2015.
LAGERS VS ALES
Lagers
Formadas por cultivos de S. carlsbergensis.
Normalmente la temperatura de la primera
fermentacin tiene lugar entre 5 y 9 C, durante una
dos semanas. La maduracin se realiza a una
temperatura cercana a 0C durante 2 o 3 semanas,
que algunas fabricas llevan hasta 3 meses.
Ales
Formadas por cultivos de Saccharomyces cerevisiae,
se fermenta a 25 C, esta fermentacin primaria
dura una semana como mximo. Se elimina la mayor
parte de las levaduras y a continuacin se realiza
una segunda fermentacin a temperatura ambiente
durante una o dos semanas, la maduracin
propiamente dicha.
https://www.google.com.pe/?gfe_rd=cr&ei=v85H
V_-_F9aWmAHImZuoAg&gws_rd=ssl
CERVEZAS DE BAJA FERMENTACIN
Bottom-fermented beers are also known as lager beers because they were
stored or lagered (from German lagern = to store) in cold cellars after
fermentation for clarification and maturation. Yeasts used in bottom-fermented
beers are strains of Saccharomyces uvarum (formerly Saccharomyces
carlsbergensis)
Tipos:
Pilsener (Repblica Checa)
Is usually carried out at 510 C for
Dortumund (Alemania)
810 days
Munich (Alemania)
Cerveza Pilsener:
Cerveza plida con un sabor a lpulo medio.
Maduracin 2-3 meses. Actualmente 2 semanas
Alcohol 3-3.8 % (p/v)
Agua suave: poco Mg y Ca
Cerveza Dortmund:
Cerveza plida con un sabor a lpulo menor que la Pilsen
Tiene ms cuerpo y aroma
Maduracin 3-4 meses
Alcohol 3-3.8 % (p/v)
Agua dura: grandes cantidades carbonatos, sulfatos y cloruros
Munich:
Cerveza oscura, aromtica y con cuerpo, con un sabor
ligeramente dulce.
Alcohol 2-5 % (p/v).
Agua: grandes cantidades carbonatos, baja en otros iones.
CERVEZAS DE ALTA FERMENTACIN
Top fermented beers are brewed with strains of Saccharomyces
cerevisiae.
Tipos:
Cerveza Ale (cerveza amarga, cerveza inglesa)
Cerveza negra Porter
Cerveza de malta
is usually carried out at 1522 C

for 35 days
Cerveza Ale:
Cerveza plida, amarga (alto contenido de lpulo).
Alcohol: 4-5 % hasta 8% (p/v)
Agua con sulfato de calcio Burtonized
Porter:
Marrn oscuro, fuerte de cuerpo y fuerte formacin de espuma
producida a partir de maltas oscuras.
Contiene menos lpulo y es ms dulce.
Tiene una graduacin alcohlica de 5,0%.
Stout:
Fuerte de cuerpo y alto nivel de lpulo con un fuerte aroma a

malta.
Se produce a partir de malta oscura o caramelizada
Contenido elevado de alcohol, 5,0-6,5% (w / v) y se almacena
hasta seis meses.
La fermentacin a veces procede en la botella.
Algunos stout son dulces, siendo menos lupulados de lo
habitual.
Cambios durante la fermentacin de la cerveza
Fermentacin ale
MATERIA PRIMA
Agua
Malta de cebada, cereal en etapa temprana de germinacin.
Adjuntos; almidn, sorgo, cebada, trigo, almidn de maz, trigo y
hojuelas de diferentes cereales, almidn de papa, jarabes sol. Conc.
de azcar y azcar invertida.(Europa mx.. 40%, Amrica llega a
60%)
Levadura: cepas de Saccharomyces cerevisiae o S. pasturianus
(sinnimos S. carlsbergensis, S. uvarum)
Lpulo; saborizante (sabor amargo) y conservador. Contiene resinas
y aceites esenciales. Objetivo adicional coagular protenas y
favorecer rx entre taninos; disminuir pH por precipitacin de fosfato
de calcio y otros iones, todo para clarificar la cerveza.
PROCESO PARA LA FABRICACIN DE CERVEZA
Cebada/ Germinacin
Remojo
otros granos
Mezclamiento Molienda Horneado

Agentes de
Wort
Lpulo clarificacin
Clarificacin y
Fermentacin Maduracin
estabilizacin
Cerveza
verde
Cerveza
Levaduras
Embotellado
(6-9 das) (activacin de enzimas
hidrolticas)
(preparacin del
medio de
fermentacin)
(5-8 h)
Proceso por lote

no asptico
cultivo iniciador
ale
Defectos en la fermentacin de la cerveza
Presencia de Diacetilo (aroma a
mantequilla)
Formacin espontanea.
Factores: La cepa de levadura,
temperatura de fermentacin,
contenido de aminocidos y el pH del
mosto. Tambin la agitacin.
El contacto prolongado de la levadura
con el mosto una vez terminada la
fermentacin es conveniente para
eliminar el diacetilo.
Los microorganismos indeseables
Revista Mash.DIACETILO: Su produccin y reduccin,
producen acidez excesiva, sabor Mayo 2016.
indeseable, pelculas en la superficie ,
turbiedad, protena letal en el
producto.
1
4
5
3 2 7
6
8
Almacenamiento de granos Extraccin y tratamiento de agua
Estructuras de concreto armado que en su Contamos con pozos de gran

interior almacenan cebada malteada y otros profundidad, desde donde el agua es
cereales adjuntos. Estas materias primas son extrada para luego ser sometida a un
transferidas por fajas transportadoras desde proceso de desionizacin parcial
los silos de almacenamiento hacia el rea de logrando as, condiciones ptimas y
molienda, donde luego de la trituracin del concentraciones de sales y minerales
grano son enviadas para su posterior necesarios para la elaboracin.
derivacin a las pailas de cocimiento.
Nitratos inhiben la fermentacin, mientras que el hierro
destruye la estabilidad coloidal de la cerveza.
Los iones de calcio conducen a un mejor sabor que los
iones magnesio y sodio.
Molienda Cocimiento
se trituran los granos de malta y de cereales a partir de la utilizacin de malta,

adjuntos, de aqu los granos pasan a adjuntos, agua previamente tratada
recipientes con la finalidad de facilitar los y lpulo, un lquido con un extracto
puntos de contacto del grano molido con el de alta calidad llamado mosto y
agua durante el proceso de maceracin que es la esencia de la cerveza en el
facilitando y acelerando las reacciones proceso cervecero.
enzimticas.
Enfriador de mosto
El mosto filtrado y hervido se enfra a la
temperatura de fermentacin mediante un
intercambiador de placas, donde en
contracorriente circula el mosto caliente y el
agua helada, permitiendo disponer un mosto
con una temperatura ideal para la siembra de
levadura y a la vez inyeccin de aire estril para
facilitar el posterior proceso de fermentacin.
Fermentacin
Dura entre 6 y 7 das, se caracteriza por la
formacin natural de gas carbnico y alcohol, el
proceso es exotrmico y se deben controlar
estrictamente las temperaturas de tal forma que
permitan siempre tener una fermentacin
controlada. Terminado el proceso de
Maduracin fermentacin se cosecha la levadura.
La cerveza se mantiene a temperaturas por debajo
de 0C permitiendo redondear el sabor y aroma
caractersticos de nuestros productos adems de la
estabilizacin y clarificacin de la cerveza. En este
proceso se mantiene los tanques con presin para
permitir la saturacin del gas carbnico en el
lquido, tambin se realiza la sedimentacin de la
levadura y protenas en suspensin permitiendo la
clarificacin de la cerveza.
Filtracin
Una vez terminado el proceso de la
maduracin se filtra la cerveza, a la
temperatura de -1.5C a travs de filtros con
ayudas filtrantes lo cual permite separar las
materias insolubles. Con la filtracin la
cerveza adquiere su tpico color dorado
brillante. Una vez filtrada, la cerveza es
almacenada en los tanques de presin para
ser enviada a las llenadoras donde se
envasan.
Distribucin
Envasado
Nuestras marcas son distribuidas a los

diversos puntos del pas y del
Las salas de envasado cuentan con modernas extranjero a travs de nuestro eficiente
llenadoras para botellas de vidrio, envases de sistema de distribucin.
aluminio y barriles chopp. Despus del llenado y
coronado, la cerveza envasada es pasteurizada
mediante duchas de agua caliente que elevan su
temperatura hasta los 60C, para garantizar su
estabilidad biolgica. La cerveza pasteurizada es
etiquetada, codificada, encajonada, paletizada y
almacenada para su posterior despacho al
mercado.
DEFECTOS DE LA CERVEZA
Origen biolgica Microorg. de deterioro

Turbidez Inducida por metales
Origen fisico-qumica protena-tanino
Sedimentos de polisacridos
oxalatos y sedimentos
PROCESO EN LA FABRICACIN DEL VINO
PROCESO EN LA FABRICACIN DEL VINO
PROCESOS EN LA FABRICACIN DEL VINO
Vinos blancos: Oscurecimiento oxidativo (oxidacin de
Trituracin y prensado los compuestos fenlicos).
Prevencin: anaerobiosis, CO2.
Vinos rojos, cscaras y pepas transfieren

Eliminacin de pieles (para vinos blancos) la astringencia.
Vinos blancos: SO2 o centrifugacin
22% de azcares eliminar la enzima polifenol oxidasa
Pasteurizacin SO2, bisulfato o metabisulfito

Saccaromyces cerevisiae var, ellipsoideus
Componentes Sacch. fermentati, Sacch. oyiformis and Sacch. bayanus.
oltiles: alcoholes, Fermentacin Vino tinto: 3-5 das, 25-30C
aldehdos, esteres Vino blanco: 7-14 das, 10-20 C
Etanol: 10-18%
Eliminacin de pieles (para vinos tintos)
PROCESOS EN LA FABRICACIN DEL VINO
Vinos rojos de climas fros
cido mlico cido lctico

Leuconostoc oenos fermentacin
Incrementa el pH y estabiliza el sabor
malolctica Reduce la acidez y se producen otros aromas
El vino es ms estable microbiolgicamente
Tratamiento post-
Indeseable para muchos vinos y prevenido con SO2
fermentacin
T= 11-16 C. De 2 a 5 aos. El bouquet del vino
Envejecimiento se desarrolla...... SO 60-200 mg/L
2
Clarificacin gelatina, la casena, tanino, cola de pescado,

albmina de huevo, y bentonita.
Filtracin ferrocianuro de potasio conocido
como "clarificacin azul '; se elimina
el exceso de iones de cobre, hierro,
manganeso y zinc
Pasteurizacin
Embotellado
FERMENTACIN MALOLCTICA
Llamada tambin desacidificacin biolgica, ocurre espontneamente despus

de la fermentacin alcohlica de los vinos tintos y algunos vinos blancos, es una
fermentacin secundaria.
Condiciones: A los vinos que no se les somete

pH mayor a 3,3. a fermentacin malolctica ,se
Temperatura superior a 15C. les adiciona SO2, para evitar el
Bajos niveles de CO2 deterioro del producto.
FERMENTACIN MALOLCTICA
Ocurre en vinos con un alto contenido de acido mlico (climas frios), el cual
es transformado a acido lctico , logrndose as una reduccin de la acidez
del producto hasta en un 33%.
La importancia de esta fermentacin es la estabilidad microbiolgica y el
efecto en el sabor del producto.
Los microorganismos responsables son bacterias lcticas de los gneros
Leuconostoc, Lactobacillus y Pediococcus.
Tratamientos Post-Fermentacin del Vino
Microbiolgico
Proteger del Vino del deterioro
No Microbiolgico: oxidacin
Estabilizacin:
Enfriamiento
Anaerobiosis
Decantacin
Trasiego de las levaduras
Dejar el vino con la levadura (2 semanas a 9 meses) para liberar ms compuestos
del sabor. SO2 se le adiciona
Caractersticas deseables de la levadura
Crecimiento en bajo pH del jugo de la uva

Resistencia al alto contenido del alcohol (ms alto del 10%)
Resistencia al sulfito.
DEFECTOS DEL VINO
La causa ms importante es microbiana
defectos de menor importancia son la acidez y la turbidez.
Factores que influyen en el deterioro por bacterias y levaduras:

(a)La composicin del vino, especficamente el azcar, alcohol, y el
contenido de dixido de azufre.
(b)Las condiciones de almacenamiento, por ejemplo, alta
temperatura y la cantidad de espacio de aire en el recipiente.
(c)El alcance de la contaminacin inicial por microorganismos
durante el proceso de embotellado.
PRODUCCIN DE PROTENA CELULAR
En ingls: Single Celular Protein (SCP)
SCP is not pure protein, but refers to the whole cells of bacteria, yeasts, filamentous fungi or
algae, and also contains carbohydrates, lipids, nucleic acids, mineral salts and vitamins.
PRINCIPALES APLICACIONES NUTRICIONALES SCP
Suplementos de protenas en la alimentacin humana.

Suplemento de protenas en la alimentacin de animales.
Ingrediente funcional en alimentos (componentes
nutricionales que benefician las funciones del organismo, en
forma adicional a sus propiedades tradicionales).
ECONOMIA DE 5 PROCESOS VS HARINA DE SOYA Y
PESCADO
B. Lee, Fundamentals of Food Biotechonology, 2015.

.
Ventajas sobre Fuentes Convencionales de Protena
Caractersticas de la cepa microbiana para SCP
Procesos de produccin de SCP
1) El proceso BELL (Francia)
PASTEURIZACIN DEL 75% de las protenas

SUERO precipitan
Lactosa 34 g/L
FERMENTACIN CONTINUA Kluyveromyces lactis o K. marxianus
Volumen reactor 22 m3
T= 38 C, pH =3.5
Vel. Aireacin= 1700 m3/h
Xf= 25 g/L, Yx/s=0.45-0.55 g/g
Lactosa < 1
g/L
CENTRIFUGACI
N
Agua
RECENTRIFUGACIN
SECADO 95% slidos: Protibel para consumo humano y animal

2) El Proceso Symba (Suecia)
SCP para alimentacin animal de residuos de almidn de papa.
degradacin del almidn
90% C. utilis
300 m3
3) El Proceso Pekilo (Finlandia)
Produccin de Paecilomyces variotii (hongo filamentoso)

Utilizacin del licor agotado de sulfito del procesamiento de la madera
Suplemento: melazas, suero, residuos de plantas hidrolizadas
Proceso continuo con dos fermentadores de 360 m3
10000 toneladas de protena unicelular en un ao (59% de protena cruda)
Usado para alimento animal
3) El Proceso
Pekilo
El PROCESO DE BIOPROTEINA
Desarrollado en 1990 por Norferm en Noruega, usa gas natural rico en
metano como fuente de carbn y fuente de energa para Methylococcus
capsulatus.
La planta industrial con capacidad de 10 0000 toneladas.
Esta fermentacin continua altamente aerbica es desarrollada en un sistema
de fermentacin con un contenido medio de amonio minerales y metano.
La biomasa es continuamente cosechada por centrifugacin y ultrafiltracin,
antes de la inactivacin por calor y secado por atomizacin.
El producto final contiene 70% de protena y es comercializada como Protin.
La cual ha sido aprobada por los EU para ser usada como alimento de
animales y de peces y podra ser usada como alimentos para humanos en un
futuro.
EL PROCESO
PRUTEEN
Uso como sustrato metanol , ventajoso frente al metano y a otras
fuentes de carbn porque es miscible en agua y permite el desarrollo en
una forma muy pura, en consecuencia la protena resultante no tiene
que ser purificada.
El problema es que solo bajas concentraciones de metanol (0,1 a 1%)
son toleradas por los microorganismos y el oxigeno requerido es alto,
asi como tambin el calor de la fermentacin.
La mayor experiencia tcnica fue desarrollada por ICI in UK, la cual
empez la produccin en 1980, usando la methylotropic bacteriun, M
methylotrophus, para producir un alimento proteico para pollos,
chanchos y terneros de engorde llamado Pruteen.
La produccin ceso en 1987 por razones econmicas, debido al
incremento del precio del metanol, el cual constitua el 59% del costo de
la produccin, cayendo en precio frente a la soya.
Este proceso es digno de admiracin debido a los avances hechos en el
diseo y tecnologa durante su desarrollo.
EL PROCESO PRUTEEN
Fermentador de 3 000 m3
Capaz de producir 50 000 toneladas de Pruteen anuales.
M. Waites, N. Morgan, J. Rockey, G. Higton, Industrial Microbiology, 2001.

PRODUCCIN DE BIOETANOL: MICROORGANISMOS Y VAS
METABLICAS INVOLUCRADAS, MATERIAS PRIMAS UTILIZADAS,
ANLISIS DEL PROCESO FERMENTATIVO
INTRODUCCIN
The annual world production of ethanol is over 30 billion

litres, approximately 70% of which is produced by
fermentation, the remainder being mostly manufactured by
the catalytic hydration of ethylene.
Almost 12% of the fermentation ethanol is beverage alcohol,

20% is for various industrial uses and the remaining 68% is
fuel ethanol.
Ethanol is an attractive fuel because it may be be used

alone or mixed with other liquid fuels, e.g. gasohol, a blend
of 1022% (v/v) ethanol with gasoline.
1. Microbiologa y Bioqumica de la Formacin del Etanol
1.1 Caractersticas del microorganismo utilizado industrialmente
1.2 Levaduras para la obtencin de etanol
Saccharomyces cerevisiae
Saccharomyces uvarum (carlsbergensis)
Schizosaccharomyces pombe
Especies de Kluyveromyces
1.2.1 Levaduras para la obtencin de etanol
Son capaces de crecer y fermentar el etanol a valores de pH de 3.5-6.0 y de 28-
35C.
Metabolizan la glucosa a etanol por la va de Embden-Meyerhof-Parnas
El rendimiento terico YP/S es 0.51 g etanol/g glucosa, pero el rendimiento en la
prctica no excede usualmente el 90-95% del valor terico.
Los factores de crecimiento ms importantes para la levadura son las vitaminas,
biotina, cido pantotnico, tiamina, cido nicotnico y cido flico.
Son muy susceptibles a la inhibicin de etanol. Las [ ] de 1-2% (p/v) son
suficientes para retardar el crecimiento microbiano y a 10% de alcohol, la
velocidad de crecimiento es detenida.
[ ] pequeas de O2 es necesario en la biosntesis de grasas y lpidos
poliinsaturados (0.05 0.10 mm Hg).
1.2.1 Levaduras para la obtencin de etanol
1.2.1 Bacterias para la obtencin de etanol
Muchas bacterias general mltiples productos finales: alcoholes (butanol,

alcohol isopropilo, 2,3 butanodiol), cidos orgnicos (actico, butrico, frmico y
lctico), polioles (arabitol, glicerol y xilitol), cetonas (acetona) o varios gases
(metano, CO2 y H2)
Z. mobilis utiliza la va de Entner-Doudoroff
Z. mobilis da muy altas concentraciones de etanol sin inhibicin.
La desventaja de Z. mobilis es que muy pocas cepas metabolizan la
sacarosa.
Desventajas de Z. mobilis: La sacarosa causa cantidades excesivas de
productos secundarios y la produccin de cidos orgnicos (actico y
lctico) que causa problemas durante la rectificacin del etanol
T= 30-40 C y pH 4.0 -5.0 (se tiene que esterilizar el medio).
Produccin de etanol: Bacteria versus Levadura
Produccin de etanol: Bacteria versus Levadura
Materias Primas para la Produccin Industrial de Etanol
Costo (actualmente representar hasta la mitad de los costos de produccin)

Disponibilidad/abundancia
Contenido de carbohidratos (rendimiento de etanol)
Facilidad para transformarse a etanol
Materiales de Biomasa Renovables usados para la
produccin de Etanol
Materiales azucarados
Materiales almidonados
Materiales lignocelulsicos
2. MATERIAS PRIMAS UTILIZADAS
Productos
fermentados
ms lentamente
Produccin Industrial de Etanol de varios Sustratos
3. PROCESO FERMENTATIVO DE PRODUCCIN
3.1 Proceso de fermentacin del grano completo del trigo

Cereales
PRETRATAMIENTO
Molienda
-amilasa: Bacillus licheniformes
vapor
Gelatinizacin
Licuefaccin Hidrlisis parcial del almidn

(dextrinas)
Glucoamilasa:Transformacin de las dextrinas a

Sacarificacin glucosa
S. Cerevisiae
Fermentacin T= 28-35C y pH= 3.5-6.0
Mosto 12 % (v/v)
Fuente: Kunz (2008). Bioethanol: Experiences from running plants, optimization and
prospects. Biocatalysis and Biotransformation 26 (1-2): 128.132
Produccin de etanol de las races de yuca
Continua
Produccin de etanol de las races de yuca
Fuente: Biotechnology vol. 6. Second edition

Fuente: Kunz (2008). Bioethanol: Experiences from running plants, optimization and
prospects. Biocatalysis and Biotransformation 26 (1-2): 128.132
Produccin de etanol por S. cerevisiae en varios sistemas de
fermentacin
Fuente: Buchholz and Collins (2010). Concepts in Biotechnology.
Conversin Bioqumica de Biomasa Lignocelulsica
Acceso y separacin de los

Matriz Pre-tratamiento principales componentes:
Lignocelulsica Lignina, pectina, celulosa y
Etapa hemicelulosa
Limitante
Azcares de 5 C
(xilosa, arabinosa)
celulosa y Hidrlisis Fermentacin
hemicelulosa
Glucosa Etanol
Saccharomyces
(8-12%)
cerevisiae
Etapa
compleja
Mtodos de Pre-tratamientos
Deseabilidad en el pre-tratamiento:
Buena recuperacin de celulosa y pentosas de hemicelulosas
Excelente digestibilidad de la celulosa por celulasas comerciales en
la etapa de hidrlisis.
Mnima o no efecto inhibitorio por productos secundarios.
Buena separacin de lignina
Ser fcilmente manipulable en grandes volmenes.
Ser relativamente barato
No requerir grandes cantidades de energa
Poseer caractersticas aceptables ambientalmente.
AFEX: ammonia fiber explosion
ARP: ammonia recycle percolation
Hidrlisis de Celulosa
Mtodos:
1) Hidrlisis cida diluida
Cantidad de cido= <1% de H2SO4
T=215 C
Tiempo= 3 min
Rendimiento de glucosa = 50-70%
2) Hidrlisis con cido concentrado

Cantidad de cido= 30-70% de H2SO4
T=40 C
Tiempo= pocas horas
Rendimiento de glucosa > 90%
Hidrlisis de Celulosa
3) Hidrlisis enzimtica
Mezcla de celulasas
T= ~ 50C
Tiempo= varios das
Rendimiento de glucosa > 75-95%
Tres grupos de celulasas
- Endoglucanasa (E.C. 3.2.1.4)
- Exoglucanasas: celodextrinasa (E.C. 3.2.1.74) y
celobiohidrolasa (E.C. 3.2.1.91)
- glucosidasa (E.C.3.2.1.21)
Etapa de Fermentacin de azcares de 6C y 5C
Hidrlisis celulosa Hidrlisis hemicelulosa pre
pre-tratada tratada
Fermentacin de
azcares de 6C y 5C
Saccharomyces
?
Bacillus macerans
cerevisiae Pichia stipitis
Fusarium
E. coli
Una Co-Fermentacin de Zymomonas mobilis
ambos azcares, m.o. Pichia stipitis
Thermoanaerobacterium saccharolyticum
genticamente modificados S. cerevisiae
Estrategias para la fermentacin de pentosas a etanol pos S. cerevisiae
PRODUCCIN DE VINAGRE
Introduccin
Vinagre es un producto resultante de la oxidacin del alcohol a cido

actico aerbicamente por bacterias cido acticas (Acetobacter y
Gluconobacter).
Vinagre es clasificado como un condimento que contiene un mnimo
de 4% (p/v) de cido actico y no ms del 0.5% de alcohol.
ORGANISMOS INVOLUCRADOS
Requisitos de las cepas industriales de bacterias cido acticas:
Tolerar altas concentraciones de cido actico.

Requerir pequeas cantidades de nutrientes.
No sobre-oxidar el cido actico formado.
Tener altos rendimientos de cido actico
Gluconobacter Oxida etanol solamente a ac. actico
BACTERIAS CIDO
ACTICAS
Acetobacter Capaces de oxidar el etanol a ac.
Actico y luego a CO2 y H2O
A. aceti
A. pasteurianus Gluconobacter oxydans
A. peroxidans
A. europaeus (tolera ac. actico de 4 a 8%, no sobre oxida el CH3COOH)
A. hansenii
A. rancens
A. xylinum (tiende a producir un lodo)
En la prctica se utiliza un cultivo mixto

de estas cepas
Oxidacin de Etanol a cido Actico
CH3CHO CH3CH(OH)2
+
O2
Theoretically, 1 gm of alcohol should yield 1.304 gm of acetic acid but

this is hardly achieved and only in unusual cases is a yield of 1.1
attained. From the reactions one mole of ethanol will yield one more
of acetic acid and more of water.
Over-oxidation can occur and it is undesirable. In over-oxidation acetic acid is

converted to CO2 and H2O. It occurs when there is a lack or low level of alcohol.
Oxidacin de Etanol a cido Actico
Si no existe suficiente oxgeno, en presencia de altas concentraciones de
Ac. Actico y etanol, las clulas mueren. Con 5% de ac. actico y etanol
muere el 34% de las bacterias despus de una interrupcin de la
aireacin de 2 minutos, mientras que con 12% de cido atico y etanol la
misma tasa de muerte se produce despus de 10-20 seg.
El suministro de etanol es crtico y con menos del 0.2% (v/v) aumenta la
velocidad de muerte. Sin embargo, la concentracin mxima de etanol
no debe exceder el 5% en los procesos convencionales.
Las cepas de alto rendimiento producen 13-14% de cido actico.
ALTOS NIVELES DE AIREACIN POR LA HIPERSENSIBILIDAD DE ACETOBACTER

LA NATURALEZA EXOTRMICA DE LA OXIDACIN DE ETANOL A ACTICO
FABRICACIN DEL VINAGRE
1) El mtodo Orleans, mtodo de superficie tradicional (o lento)
The oldest method of vinegar production is the let alone method in which
wine left in open vats became converted to vinegar by acetic acid bacteria
entering it from the atmosphere.
Later the wine was put in casks and left in the open field in the fielding
process. A small amount of vinegar was introduced into a cask of wine to help
initiate fermentation. The introduced vinegar not only lowered the pH to the
disadvantage of many other organisms but also introduced an inoculum of
acetic acid bacteria.
The casks were wooden and of approximately 200 liter capacity. It was never
filled beyond about two-thirds of its capacity so that there was always a large
amount of air available above the wine. A thick film of acetic acid bacteria
formed on the wine and converted it in to vinegar in about five weeks.
1) El mtodo Orleans, mtodo de superficie tradicional (o lento)
Often due to its thickness and consequent weight and sometimes due to
disturbance, the film sank. When this happened the whole process had to be
restarted, since acetic acid bacteria are aerobic.
The disadvantages of this method are following:
(a) It was slow in comparison with later methods, taking up to five weeks
sometimes as against days, hence it is also known as the slow method.
(b) It was inefficient, yielding 75-85% of the theoretical amount.
(c) The mother of vinegar usually gradually filled the cask and effectively killed
the process.
2. Generador de Filtro de Goteo (mtodo rpido)
These methods involve the movement of alcoholic liquid over surfaces on which
films of acetic acid bacteria have become attached (a supported film system),
and a good air supply is provided to facilitate ethanol oxidation.
Traditional generators consist of a cylindrical
wooden vessel of up to 60m3, divided
horizontally into three sections. The upper
section receives the alcoholic solution, which
then trickles down through the main middle 29 C
section that is loosely packed with inert
materials, such as beech woodor rattan
shavings, corn cobs and charcoal. These
materials provide a very large surface area on
which acetic acid bacteria can become
established and over which forced air is 35 C
passed from below. The bottom section
serves to collect the vinegar, from where it
may be returned to the top of the same
generator for recirculation or to a second
generator in series.
2. Generador de Filtro de Goteo (mtodo rpido)
Oxidation of ethanol produces heat: the top of the generator is often at 29C,
increasing to 35C at the bottom. Therefore, cooling coils or jackets are
normally provided to prevent overheating. The process time is about 3 days, a
considerable improvement over surface methods, resulting in final acetic acid
concentrations of 1012% (v/v). Productivity of these generators is in the order
of 10 15kg/m3 of reactor volume per day, with a yield of 85%, based on
ethanol added.
3. Proceso sumergido (mtodo rpido)
Submerged methods were first devised in the late 1940s.

They are five times faster than the trickling methods and
El tiempo para obtener un vinagre de
require less capital investment. Since their introduction 12% es 35 h.
there have been several modifications that have

improved aeration efficiency.
The process frequently used, often based on Frings
acetators, consists of a highly aerated stainless steel
stirred tank reactor. This vessel is continuously stirred at
14501750 r.p.m. and is normally maintained at 2430C,
although temperatures of up to 40C have been
reported. Specially selected strains of acetic acid bacteria
are used that function well in suspension cultures. They
grow in a suspension of very fine air bubbles within the
fermenting liquid.
3. Proceso sumergido (mtodo rpido)
Submerged processes are usually operated automatically on a semicontinuous

basis. Starting medium for each cycle contains 710% (v/v) acetic acid and 5%
(v/v) ethanol, higher ethanol concentrations being inhibitory. When the ethanol
concentration falls to 0.050.3% (v/v), a portion of medium, 4050%, is
removed and replaced with fresh starting medium.
The production bacteria are very sensitive to both low oxygen and ethanol
concentrations. They die rapidly if the oxygen supply is halted or if the ethanol
becomes depleted. Final acetic acid concentrations of up to 14% (v/v) can be
achieved using these methods. Their productivity is 5060kg/m3 per day with
a yield of over 90%.
PROCESAMIENTO DEL VINAGRE
1) Clarificacin y embotellamiento:
Vinegars produced by slow surface methods are less harsh and require shorter maturation.
Those produced by the quicker methods benefit from a period of maturation to improve flavour
and body.
The vinegars are then diluted and clarified, which is accomplished by fining with bentonite and
filtration.
Some vinegars may be decolorized using potassium ferrocyanide. Finally, the liquor is
pasteurized at 7580C for 3040 s prior to bottling, during which SO2 may be added at levels of
50100mg/L.
Defects and diseases of vinegar include production of precipitates or cloudiness caused by
certain metal ions.
Microbial infections by lactic acid bacteria may result in slime production and some acetic acid
bacteria can cause overoxidation. Certain wild yeasts and fungi also oxidize acetic acid.
PROCESAMIENTO DEL VINAGRE
2) Concentracin del vinagre:

Se concentra por congelacin; la suspensin resultante se centrifuga para separar
el hielo y producir el concentrado. Con este mtodo 20% (w / v) de cido actico
se puede producir.
Necesidad de concentrar:
Reduccin de los costos de transporte.
Evitar la prdida de actividad del vinagre cuando los pepinos se recogen despus
de haber sido empapada en salmuera.
cido Ctrico
Microorganismos y vas metablicas involucradas. Rendimiento terico de azcares.
Anlisis del proceso fermentativo. Materias primas utilizadas en la formulacin de
los medios de cultivo.
Manufactura de cidos Orgnicos: cido Ctrico
cido ctrico: La mayor produccin se da en Europa

Occidental (41%) y Amrica del Norte (28%).
Historia
Originalmente se produjo de limones en Italia.

A inicios de 1920 se descubri que Aspergillus niger acumula
cido ctrico y actualmente ms del 95% de la produccin se
realiza por fermentacin.
Aplicaciones del cido Ctrico
Tiene un sabor placentero, baja toxicidad y excelente

palatabilidad.
En la industria de alimentos: confites (21% de la produccin
total) y bebidas (45%).
En la industria farmacutica (8%) y de detergentes/limpieza
(19%).
Compleja iones metlicos pesados (Fe y Cu) y estabiliza los
aceites, grasas y cido ascrbico de la oxidacin cataltica.
Se utiliza como un tampn sobre un amplio rango de pH.
Estrategias para aislar mutantes de A. niger
Tolerancia a altas concentraciones de:

Azcares
2-desoxiglucosa
Inhibidores de la cadena respiratoria
Bajos pHs
Decremento o eliminacin de productos secundarios: cido oxlico
y glucnico
La Bioqumica de la Produccin de cido ctrico
1. Si el cido ctrico es removido, no hay aparentemente un camino de
PROBLEMAS regeneracin de oxalacetato.
BIOQUMICOS
2. Para acumular el cido ctrico, aconitasa tiene que ser bloqueada para
evitar que el cido ctrico se convierta a aconitato
Fe2+
-
-
X
-cetoglutarato
deshidrogenasa
Represin por Glucosa
Represin por NH4
-
Esquema metablico de la biosntesis de cido Ctrico
Piruvato carboxilasa citoslica
Malato deshidrogenasa citoslica

Sobreflujo
Piruvato
desh.
Altos niveles de amonio
se debe a la deficiencia
de Mn2+ en el medio de
cultivo.
Regulacin de la acumulacin de cido ctrico por
nutrientes
La acumulacin se observa en estricto control de nutrientes:

Altas concentraciones de la fuente de carbono
Altas concentraciones de iones hidronio
Alta velocidad de transferencia de oxgeno
Sub-ptimas concentraciones de ciertos metales trazas y fosfato.
La deficiencia de Mn 2+ en A. niger:
Tipo de azcar para la fermentacin
Azcares rpidamente catabolizados (sacarosa, maltosa o
glucosa), altos rendimientos y velocidades de produccin.

Industrialmente se usa melazas de remolacha o de caa
(aunque se ha detectado varios componentes inhibidores la
produccin).
La concentracin de la fuente de carbono es muy alta (superior
a 100 g/L).
Conc. de azcares de 140 240 g/L. Conc. menores acumulan cido

oxlico y baja relacin ctrico/biomasa
Tipo de azcar para la fermentacin
Una alta concentracin del azcar:

Induce un sistema de transporte de glucosa adicional.
Contrarresta la inhibicin de hexoquinasa por trehalosa 6-fosfato.
Incremento de la concentracin de fructosa 2,6-bifosfato, el cual es un
activador de la fosfofructoquinasa.
Requerimientos del medio y factores ambientales involucrados en la
produccin de cido ctrico
Requerimientos del medio y factores ambientales involucrados en la
produccin de cido ctrico
Oxygen
Efecto de la concentracin limitante de Mn+2
Aumenta el flujo de carbono a travs de la gluclisis.

Altera la composicin de la membrana plasmtica de A. niger.
Afecta la sntesis de ADN y el recambio de protenas, incluyendo la de un componente
de la cadena respiratoria estndar, alterando la respiracin.
El aumento de la degradacin de protenas tambin eleva la concentracin intracelular
NH4, estimulando la actividad de la fosfofructoquinasa (contrarresta el efecto inhibidor
de citrato en la fosfofructoquinasa).
Deficiente en
manganeso
0.1 -0.2%.
0.1 -0.4 g/L sales de amonio o nitrato

TEMPERATURA: 25-30 C
Proceso de Produccin de cido Ctrico
1) El Proceso Koji Japones

2) El Proceso de cultivo de superficie
3) El Proceso de cultivo sumergido
El Proceso de cultivo de superficie
Rendimiento 210 a 250 Kg/m3

El Proceso
de cultivo
sumergido. [ ] Fe2+ y [ ] Mn2+
200 y 5 /L
A. niger se observa a
ser ms sensible y ms
fcilmente inhibido 50 150 m3 (Reactor de tanque agitado)
por hexacianoferrato Superior a 200 m3 (Bioreactores de columna)
en cultivo sumergido
que en cultivo en
superficie Rendimiento:125 Kg/m3
El cido ctrico est en el micelio y en el
medio agotado.
15% aprox. Se encuentra en el micelio.
Diagrama de flujo para la manufactura de
cido ctrico por procesos de superficie o
sumergida.
Produccin de aminocidos por
fermentacin: cido glutmico y lisina
Historia
Produccin de aminocidos Japn (1908), cuando el Dr. Ikeda, estaba trabajando en

los componentes de sabor de algas.
Despus de la hidrlisis cida y fraccionamiento de algas, el Dr. Ikeda descubri que una
fraccin especfica que haba aislado consista en cido glutmico que, despus de la
neutralizacin con soda custica, desarroll una nuevo sabor delicioso.
Historia
La produccin de glutamato monosdico (GMS) pronto se comercializ por la

Compaa Ajinomoto Ltd. basado en su aislamiento de protenas vegetales, como
la soja o protena de trigo. Sin embargo, con este proceso la fraccin de
residuos es alta, y tambin la sntesis qumica de D, L-glutamato fue de poca
utilidad puesto que la sal de sodio del ismero D es inspido.
Historia
El avance en la produccin de glutamato monosdico fue el aislamiento de una bacteria
especfica (Corynebacterium glutamicum) por el Dr. S. Udaka y Dr. S. Kinoshita en Kyowa
Hakko Kogyo en 1957.
Ellos descubrieron que su aislamiento, N 534, en un medio de sal mineral excret L-

glutamato. Pronto se hizo evidente que el organismo aislado necesitaba biotina y que la
excrecin de L-glutamato se provoc por un suministro insuficiente de biotina.
Es una bacteria Gram-positiva que se puede aislar del
suelo.
La comercializacin exitosa de produccin de glutamato es
un gran impulso para la produccin de aminocidos con C.
glutamicum y ms tarde con otras bacterias como E. coli
Usos Comerciales de Aminocidos
Mercado de los Aminocidos
Fuente: Leuchtenberger et al. 2005.

Appl. Microbiol Biotechnol 69:1-8
Los principales factores que determinan la localizacin de las plantas de produccin

son el precio de la fuente de carbono y el mercado local.
Las grandes plantas de produccin de L-glutamato estn

repartidos por todo el mundo, con una presencia significativa
en el Lejano Oriente, por ejemplo, Tailandia e Indonesia.
Para la L-lisina la situacin es diferente. Un tercio del mercado mundial est
en Amrica del Norte y hay un cmodo acceso al maz como una materia prima
para el proceso de fermentacin, alrededor de un tercio de la capacidad de
produccin de L-lisina se encuentra all.
En casi todos los casos, las empresas productoras de L-lisina se asocian con
la industria de la molienda del maz, ya sea como productores, en negocios
conjuntos o como proveedores de azcar barata.
MTODOS DE PRODUCCIN
L-Glutamato
La produccin utiliza C. glutamicum.

Esta bacteria utiliza la gliclisis, la va de fosfato pentosa y el ciclo del
cido ctrico para generar los precursores de metablicos.
La estequiometra es de 1 mol de aminocido por 1 mol de glucosa.
3-C
2-C
4-C
6-C
5-C C. Glutamicum tiene una gran flexibilidad para la

reposicin de los intermediarios del ciclo del
cido ctrico tras el retiro.
Aminacin
reductiva 5-C
> 150 mM, dentro de la Oxidative decarboxylation of isocitrate by
clula, otros AA <10 mM isocitrate dehydrogenase.
Glutamate
dehydrogenase
NH +
+ 4
NH
-cetoglutarato
2
Glutamato
La aminacin reductora, o aminacin reductiva, es una reaccin

qumica que implica la conversin de un grupo carbonilo de una
cetona o aldehdo en una amina.
Cepas productoras
Tratamientos que conducen a la liberacin de L-glutamato:
1) Crecimiento bajo limitacin de biotina.
2) Tratamiento con derivados de cidos grasos.
3) Garantizar la deficiencia de cido oleico en los mutantes que requieren
de cido oleico (C16-C18).
4) Adicin de penicilina
5) Adicin de lisosima
6) Adicin de tensoactivos
7) Uso de auxtrofos de glicerofosfato.
Tienen como blanco la pared celular o la membrana lipdica.

La composicin de fosfolpidos es alterada en el caso de la limitacin por biotina.
Cepas productoras
Las clulas tratadas con uno de las tres primeras alternativas tienen las membranas
celulares en la cual la razn de cidos grasos insaturados a saturados es anormal; por lo
tanto la barrera de permeabilidad de cido glutmico es destruida.
El tratamiento con penicilina previene la formacin de pared celular.
Por lo tanto, una relacin existe entre:

Un desorden de la pared celular
La composicin de lpidos de la membrana.
Un transportador putativo localizado en la membrana.
Bajo limitacin de biotina:
El contenido de fosfolpidos de la membrana
desciende de 32 a 17 nmol/mg peso seco
El cido oleico (insaturado) incrementa respecto al
cido palmtico (saturado) en 45%.
Composicin de la membrana:
Es afectada por mutantes de cido oleico y glicerol
Adicin de tensioactivos:
Acta sobre la actividad de la acetil-CoA carboxilasa
Proceso de Produccin
Factores ms relevantes que influyen en la formacin de

glutamato son:
Concentracin de amonio
Concentracin de oxgeno disuelto
pH
Para la conversin del azcar a L-glutamato se necesita una gran cantidad

de amonio; sin embargo cantidades muy elevadas son inhibitorias para el
crecimiento microbiano y la produccin de L-glutamato.
Al inicio de la fermentacin se adiciona en una concentracin baja de
amonio y luego se adiciona continuamente durante la fermentacin.
Bajo condiciones de oxigeno insuficiente, la produccin de L-glutamato es

pobre y se acumula cido lctico y succnico.
Con un exceso de oxgeno la cantidad de -cetoglutarato se acumula como

un producto secundario.
Proceso Industrial de Produccin de AG y GMS
Liofilizado
Unidad A (provisin) Melaza Minerales Amoniaco

Unidad B (provisin)
Unidad C (semilla en matraz)
Cultivo de la primera semilla
Cultivo de la segunda semilla
Produccin en fermentador
Caldo fermentado
cido clorhdrico Evaporacin
Cristalizacin de AG
Separacin de AG
Secado
Producto AG
Neutralizacin
(NaOH)
Decoloracin Tercera
(carbn activado) cristalizacin
Segunda
Filtracin cristalizacin
Recuperacin
Cristalizacin de GMS
Separacin
Secado
Tamizado
Producto GMS
Despus del pre-cultivo, la excrecin de L-glutamato se controla por la adicin

de agentes tensoactivos, tales como polioxietileno sorbitn monopalmitato
(Tween 40).
El rendimiento de L-glutamato est entre 60 y 70% sobre la base de la
glucosa utilizada.
Al final de la fermentacin, el caldo contiene L-glutamato en la forma de su sal
de amonio.
En un proceso de downstream tpico, las clulas se separan y el caldo se hace
pasar a travs de una resina de intercambio aninico bsica.
Los aniones de L-glutamato se enlazan a la resina y el amonio se

libera. Este amonio se puede recuperar por destilacin y reusar en la
fermentacin.
La elucin se realiza con NaOH para formar glutamato monosdico
(GMS) directamente en la solucin y para regenerar el
intercambiador de aniones bsico.
A partir de los eluidos, GMS se pueden cristalizar directamente
seguido por etapas posteriores de acondicionamiento como
decoloracin y tamizado para obtener una calidad de grado
alimenticio.
Recuperacin de los aminocidos de los caldos de
fermentacin
1. Criterios generales para la factibilidad econmica
La recuperacin debe ser tan simple en lo posible

El rendimiento de la recuperacin del proceso debe ser alto
Las etapas del proceso que dan lugar a la prdida del producto se
deben evitar
Los procesos deben ser fciles de escalar industrialmente.
Produccin L-Lisina
Lisina es un aminocido esencial para la nutricin humana y animal.

La adicin de L-lisina aumenta la calidad de los alimentos producidos
a partir de plantas.
L-Lisina se produce por fermentacin con el m.o. Corynebacterium
glutamicum.
Aplicacin en el pienso
La adicin de tan slo 10 kg de metionina por tonelada de alimento aumenta
la calidad de las protenas del pienso de la misma manera que la adicin de
160 kg de harina de soya o 56 kg de harina de pescado.
El primer aminocido limitante en el pienso sobre la base de los cultivos de

plantas y semillas oleaginosas es por lo general L-metionina, seguido de L-
lisina, y luego por L-treonina.
Otro aspecto importante en la administracin de suplementos de

alimentacin es que con un contenido equilibrado de aminocidos
el estircol de los animales contiene menos nitrgeno (debido a que mayor
cantidad del nitrgeno en la mejora del pienso ha sido utilizado por el
animal) reduciendo as la contaminacin ambiental.
Mutantes auxtrofos a fin de liberar la enzima
clave Aspartato quinasa.
Screening para mutantes regulatorios en la
cual aspartato quinasa es resistente a
X anlogos de L-lisina. S-(2-aminoetil)-L-Cisteina

o O- (2-aminoetil)-L-serina.
Screening for mutants having amino acid
auxotrophy combined with deregulation.
Screening for regulatory mutants having
1
2 additional enzyme defects (pyruvate kinase)
and low level enzymes (citrate synthase).
Inhibicin retroalimentacin
Baja afinidad por
el sustrato
Exportacin de L-Lisina
Cepas productoras
Proceso de produccin de L-Lisina
Fuente de carbono: Melazas de caa o de remolacha azucarera, sacarosa o

hidrolizados de almidn
Fuente de amonio: sulfato de amonio y amoniaco
Cultivo por lote

alimentado
Produccin microbiana de lpidos unicelulares
Lpidos Solventes orgnicos no

(solubilidad) polares (hexano, dietil eter,
etc)
Propiedades
Fisicoqumicas
Esteroles
Carotenoides
Lpidos
Acil glicridos
Polihidroxialcanoatos, etc
Acil glicridos: triglicridos
Son producidos por

m.o va fermentacin
para consumo humano
Producto derivado de la reaccin de

esterificacin entre glicerol y tres molculas de
cidos grasos
Advantages of Oleaginous
microorganism
Growth on various substrates

utilizing by-product = reduce cost
Ability to synthesize a divert

array of fatty products
many useful applications.
Able to be genetic manipulation

selection for highest productivity.
Condition for lipid
accumulation
Lipid accumulation is trigger when:
Nutrients in the growth medium (usually Nitrogen
source) is exhausted
Surplus of Carbon source (usually glucose)
Cells stop multiplying.

Cells convert Carbon source to Storage oils or fats.
Proceso de acumulacin de lpidos en microorganismo
Enzimas claves:
Isocitrato deshidrogenasa
ATP citrato liasa
AMP: adenosn monofosfato Precursor de los cidos

IMP: inosina monofosfato grasos
Proceso de acumulacin de lpidos en microorganismos
oleoginosos
Microorganismo eucariotas, plantas y animales
superiores sintetizan cidos grasos de cadena
lineal que contienen slo enlaces dobles cis.
Produccin de aceites microbianos
Condicionamiento para la produccin de lpidos microbianos:

S un beneficio peculiar posee el aceite microbiano en
comparacin a los aceites tradicionales
S ese beneficie soporta un precio premium.
cido araquidnico ARA

20:4 n-6 Importancia en la
cidos nutricin infantil
grasos
cido docosohexanoico DHA
22:6 n-3
La mezcla de ARA Y DHA se vende en E.E.U.U. desde el

2002
Aceite de DHA
pescado cido eicosapentanoico (EPA, 20:5, n-3)
No se debe incluir en formulas infantiles

porque afecta el crecimiento del recin nacido.
Necesidad para un aceite rico de DHA que no
contenga EPA.
Los lpidos
se extraen
con
Hexano
Refinacin,
blanqueado y
deodorizaci
nProducto final
Sistema de fermentacin utilizado para la produccin de aceites
unicelulares
Precauciones para estabilizar el aceite
Rpido procesamiento del aceite
Almacenamiento de la biomasa y el aceite a bajas temperaturas
bajo una atmsfera de N2 (para excluir el O2)
Limitar el calor durante el procesamiento
Pasteurizacin durante la cosecha de las clulas

Evita la contaminacin bacterian durante las etapas de cosecha
Mata la produccin de las clulas. Muy importante !
Adems se puede ver afectada la calidad del aceite

Aceites ricos en ARA
Microorganismo: Mortierella alpina se obtuvo usando mtodos
de seleccin clsicos para el crecimiento deseable y
caractersticas de acumulacin de lpidos (not obtained using
any form of genetic engineering --all current SCOs are non-
GMO)
Empresas:
Suntory Co. Ltd (Japn)

Wuhan Alking Bioengineering Co. Ltd.
DSM Food Specialities (Italia) and then sold into the USA
under an exclusive contract with Martek Biosciences (95%
de la venta anual a nivel mundial)
El aceite es un aceite brillante amarillo (debido a algunos carotenoides

residuales) que tiene un caracterstico, pero no desagradable, sabor y
olor.
Aunque el aceite de hongo es notablemente resistente a la oxidacin,
debido a la presencia en el aceite de compuestos antioxidantes
endgenos, se aaden antioxidantes adicionales (vitamina E) durante el
procesamiento para asegurar una proteccin completa contra la
oxidacin.
Aceites ricos en DHA
Crypthecodinium cohnii, developed by Martek Biosciences, Columbia, MD

being a dinoflagellate and the other Schizochytrium, developed by Omega
Tech Inc., Boulder, CO. Both of these produce oils rich in DHA; however, the
Schiozochytrium oil also contains another very long chain PUFA
docosapentaenoic acid (DPAn-6, 20:5, n-6). In 2001, Martek acquired
OmegaTech in order to consolidate the expertise and intellectual property
of these two companies.
Para la cultivacin de C. Cohnii es el requerimiento de un medio de cultivo

salino (m.o. marino). La salindad del mar es tan alta para los fermentadores de
acero. Por lo tanto, medios de bajos cloruros y cepas adaptadas se han
desarrollado para permitir al proceso comercial a operar en concentraciones
de cloruro ms bajas que los lmites de corrosin.
Polihidroxialcanoatos (PHAs) Microbianos
1. Estructura
Son polisteres de cidos hidroxialcanoicos con la estructura general como se muestra.
PHALCM : N tomos de C: 6-14
PHALCC: N tomos de C: 3-5

2. Caractersticas
Son compuestos de reserva de carbono y energa intracelulares

producidos por muchas bacterias. Se acumulan como grnulos dentro de
la clula.
La oxidacin a CO2 y H2O da una gran cantidad de energa.
Son plsticos biodegradables
Grnulos de PHB en
Ralstonia eutropha
Se llega a acumular hasta 80% de su biomasa en peso seco

Fuente: Akaraonye et al. 2010. J Chem Technol Biotechnol. Un disco piezoelctrico genera un
85: 732-743 voltaje cuando se deforma.
Sun et al. 2007. Fermentation process development for the production of mdium-chain-length poly-3-
hydroxyalkanoates. Appl. Microiol. Biotechnol. 75: 475-485
Biotecnologa de la produccin de PHAs
Fase de Fase de
crecimiento acumulacin
Fuente: Bioprocess Biosystem Eng. 2013, 36:1235
Bioreactor de Lote alimentado
Bioresource Technology
2013, 137:98-105
Fuente: Biotechnology Letters 2002, 24:125-130
Biosntesis de PHB Condensacin de 2
molculas de acetil-CoA
1 er etapa condensacin
2 da etapa reduccin
3 er etapa isomerizacin Enzima asociada con la membrana

circundante de los grnulos de PHB
Biosntesis de PHB/V
Ciertas cepas de Ralstonia eutropha producen a partir de glucosa ms cido propinico. El

cido propinico es primero activado para dar propionil-CoA.
cido Propinico + CoA + ATP Propionil-COA + AMP + PPi

Biosntesis de PHA
Regulacin del metabolismo de PHB
Acetoacetil-CoA
sintetasa Citrato
ATP, sintasa
3-hidroxibutirato
deshidrogenasa
PHA despolimerasa
(asociada con el
grnulo)
Distribucin de la fuente de carbono bajo condiciones limitadas de carbono
(S1 )T (S1 )C (S1 ) mR
Distribucin de la fuente de carbono bajo condiciones limitadas de nitrgeno
(S1 )T ( S1 ) C ( S1 ) mR ( S1 ) P
Biopol- Un plstico biodegradable comercial fabricado de
Polihidroxialcanoatos
En los 1980s, ICI plc en el Reino Unido desarroll un proceso de fermentacin de alta
densidad celular y mtodos de procesamiento de downstream para la recuperacin de
PHB y PHB/V sin la necesidad para la extraccin de solventes costosos.
Biopol fue el nombre comercial utilizado para el rango de polmeros manufacturados por
ICI
El primer producto comercial hecho de Biopol fue un frasco de champ vendido por Wella
en Alemania.
La produccin de Biopol fue continuada por Zeneca plc (una offshoot de la compaa
original ICI) y el proceso fue subsecuentemente adquirido por Monsanto en los Estados
Unidos. Biopol fue tan caro para competir con los plsticos no biodegradables y la
produccin ces en 1998.
Fuente: Chem. Soc. Rev. , 2009, 38, 2434-2446

Clases Biotecnología Industrial - 2017

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UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA

Dr. Roberto Vega Paulino

Industrial Biotechnology uses biological systems for the

This technology is mainly based in biocatalysis (the use of

Successful innovation through a biotechnological product or process

En la transformacin hay cambios biolgicos

Proceso biolgico (Bioproceso)

Extraccin del agua por smosis, Aw

1.Leuconostoc mesenteroides (heterofermentativa)

Acidez total: 1.7 2.3 %

TIPOS DE CLULAS BACTERIAS

Principales factores que limitan la aplicacin de los

Requerimientos de un proceso microbiolgico industrial:

1.Fermentaciones que producen clulas microbianas (o biomasa)

Es importante conocer a fondo la fisiologa del microorganismo

The series of chemical reactions involved in converting a chemical (or a

La formacin de grandes molculas (algunas son constituyentes de la clula)

Del metabolismo primario: productos Del metabolismo secundario

inductor y el descenso en la velocidad de crecimiento.

Balance de masa del producto en un cultivo por

Es ms comn entre los actinomicetos que entre Estreptomicina

2. Productos secundarios derivados de los nuclosidos

Productos secundarios aromticos por bacterias y

Okafor, 2007. Modern Industrial Microiology and Biotechnology

Demain, 1971. Advances in Biochemical Engineering and Biotechnology

Cuando ms de un sustrato utilizable est presente en el ambiente, la clula

La induccin y la represin de catabolito aseguran que las enzimas inducibles se produzcan

2. La Deficiencia de AMPc (3-5-adenosin monofosfato cclico) favorece la represin de

1.3.1 Inhibicin de retroalimentacin:

1.3.2 Represin de retroalimentacin:

Co-represor: producto final de la va biosnttica

Represin de retroalimentacin es un fenmeno ampliamente utilizado que regula la sntesis

Levaduras utilizan este mecanismo para tomar los azcares

2.1. Control metablico: alteracin de la regulacin de retroalimentacin

2.1.1 Sobreproduccin de un intermediario en una va no ramificada

Ejemplo: Auxtrofos de C. glutamicum y

AMP: adenosina 5- monofosfato

a) Uso de un anlogo txico o anlogos resistentes de retroalimentacin

2.2. Alteracin de la permeabilidad

3.1.2 Sntesis de cefalosporina C por Cefalosporium ocremoniun

Va ramificada para producir lisina y penicilina en P.

4.1 Efecto estimulatorio de precursores

4.2 Compuestos inorgnicos

2) Mutantes resistentes de un anlogo:

3) Cultivos resistentes a antibiticos

Objetivo de los medios industriales

Composicin elemental de la lnea celular

Tipo de proceso: lotes, lote alimentado o continuo y diferentes medios ser

Prototrofos no requieren factores esenciales

Para una fermentacin aerbica

Biomasa + Productos + CO2 + H2 O + Calor

Costo de la materia prima.

Each batch of molasses must be chemically analyzed before being used in a

Adecuada composicin qumica del medio

- Desechos agroindustriales y extractos naturales:

- Se formulan en base a compuestos puro s: glucosa,

Medio formado por una solo fuente de cada elemento.

Licor macerado de maz

1) Licor de maz macerado

Producto secundario de la fabricacin del almidn de maz.

Polvo fino amarillo hecho del embrin de la semilla del algodn.

Fuente: Stanbury et al. (1995). Principles of fermentation technology

Producto secundario de la destilacin del alcohol de los granos