ANALIS DE LABORATORIO DE MICRORGANISMO

Los microorganismos juegan un papel muy importante en el proceso de limpieza del agua
contaminada con desechos industriales. Estos desechos incluyen los desperdicios que
salen de las minas, las curtiembres, las fbricas productoras de azcar, panela etc. que
son colocados en el agua por las industrias para poder deshacerse de ellos, sin tener en
cuenta su capacidad de destruir el medio ambiente.
Este proceso de limpiar para remediar los daos causados por procesos industriales se
denomina BIOREMEDIACIN y no solo se atribuye a la limpieza del agua, tambin se
puede aplicar a otros espacios tales como paredes, cuadros, artesanas etc.
El motivo por el cual las bacterias y los hongos pueden desarrollar procesos de
bioremediacin es porque hay algunos de ellos capaces de resistir pHs extremos o
lugares con alto contenido de sustancias txicas, las cuales son aprovechadas por estos
microorganismos, y a veces por plantas, para realizar sus propios procesos metablicos.
Esto implica crecer y reproducirse en estos ambientes, que tambin pueden concebirse
como extremos.
En procesos de bioremediacin se encuentran bacterias reductoras de sulfatos, que
convierten los metales contaminantes en insoluble. Al lograr ese estado, el material
contaminante se convierte en filtrable por ende, separable del medio ambiente al que est
contaminando. Este proceso de insolubilizar el material contaminante es una de las
formas ms eficaces de separacin.
Actualmente y gracias a estos procesos de bioremediacin, las bacterias tambin se
estn utilizando para extraer el oro y cobre que se encuentra pegado a las piedras en las
minas. Para este proceso, se aprovecha el azufre, el cual se oxida convirtindose de
sulfuro a sulfato y el hierro de su forma frrica a ferrosa y con esto se le da ms valor al
metal. Bacterias como el Acidithiobacillus ferrooxidans son ejemplos de estos agentes que
con el paso del tiempo se van a volver mas populares en nuestra industria. 2 Los
microorganismos en la recuperacin del ambiente

La biodegradacin de compuestos orgnicos, tales como hidrocarburos, insecticidas y

plaguicidas, compuestos clorados y compuestos aromticos, ha sido ampliamente
estudiada a nivel de laboratorio y en estudios de campo. Dichos estudios han demostrado
que la degradacin microbiana de contaminantes en el ambiente es un proceso complejo,
cuyos resultados cuantitativos y cualitativos dependen de factores abiticos y biticos.
Entre los primeros se deben enumerar a las condiciones ambientales locales como pH,
temperatura y humedad, principalmente, adems de la concentracin y la disponibilidad
del contaminante. Entre los factores biticos son fundamentales la composicin, la
adaptabilidad y capacidad fisiolgica de las poblaciones microbianas. En suma, esos
resultados han permitido el desarrollo de las llamadas tecnologas de biorremediacin
(Boopathy, 2000).

En los ltimos aos, se ha desarrollado una amplia variedad de tecnologas de

biorremediacin, tanto in situ como ex situ. Esas tecnologas han sido diseadas para
lograr condiciones adecuadas de cultivo e incrementar la disponibilidad de los
contaminantes y las poblaciones microbianas con reconocida capacidad de
biodegradacin. A ese respecto destaca la tcnica de bioaumentacin, que se refiere a la
adicin de microorganismos exgenos a un sistema para incrementar la tasa y alcance de
la biodegradacin. El xito de la estrategia de bioaumentacin est determinado por la
interrelacin del microorganismo inoculado con su nuevo ambiente bitico y los factores
ambientales, en trminos de su supervivencia y actividad de migracin (Mrozik y
Piotrowska-Seget, 2010). En un ambiente natural, la depredacin por protozoarios o
bacterifagos, competencia con microorganismos autctonos por nutrientes o aceptores
de electrones y la presencia de races que liberan compuestos orgnicos, son elementos
que afectan adversamente a la bioaumentacin (Fantroussi y Agathos, 2005). Varias
tcnicas han sido empleadas para incrementar la probabilidad del establecimiento,
eficacia y actividad de un inoculo introducido en un ambiente natural. Esas tcnicas
incluyen la inmovilizacin de microorganismos, el desarrollo de nichos que favorezcan el
crecimiento del inculo (inoculacin en la rizosfera de una planta que es introducida en el
sitio) y el uso de suelos activados (Mrozik y Piotrouska-Seget, 2010; Gentry y col. 2004a).
Esta ltima se refiere a partculas de suelo que han sido expuestas al contaminante de
inters y que actan como soporte para el desarrollo de una poblacin microbiana que
puede eliminar un contaminante en particular (Barbeau y col., 1997). Cuando se opta por
la inmovilizacin de microorganismos, los resultados obtenidos han demostrado que el
soporte de inmovilizacin proporciona una efectiva proteccin al inculo ante los
microorganismos nativos. Adicionalmente, con la introduccin de microorganismos
inmovilizados se logra establecer micrositios con una poblacin microbiana nica que
trabaja de forma interactiva en la remocin del compuesto de inters.

EL USO DE MICROORGANISMOS EN MINERA

Extraccin de metales y ambiente

Mediante la minera se obtienen productos que, en su mayora, son esenciales para la
subsistencia de la humanidad. Uno de los metales cuyo uso intensivo por la
humanidad lleva ms de 4000 aos es el cobre, que tiene mltiples aplicaciones,
principalmente como conductor elctrico. Sin embargo, si la extraccin de metales se
desarrolla sin las medidas de control adecuadas, puede tener un impacto negativo en
el ambiente y en la calidad de vida de los organismos que habitan en zonas aledaas.
Se denomina metalurgia al proceso o conjunto de procesos por el cual se extrae el
metal correspondiente de un mineral metlico. La extraccin clsica de este tipo de
minerales se realiza a travs de la pirometalurgia, proceso por el cual el mineral es
tostado a altas temperaturas y posteriormente reducido al metal. Esta metodologa,
que resulta inviable econmicamente para minerales con bajo contenido en metal, es
altamente contaminante ya que libera enormes cantidades de dixido de azufre, uno
de los gases involucrados en la llamada "lluvia cida".
Debido a esto, la continuidad de operaciones mineras de larga data y la instalacin de
nuevas explotaciones, est encontrando una resistencia creciente dentro de la
sociedad, aun en pases cuya economa depende fuertemente de estos recursos
naturales. Adems, los estudios de riesgo ambiental y la aplicacin de mtodos
preventivos y remediadores de las emisiones y residuos, suelen encarecer las
operaciones hasta, en muchos casos, hacerlas inviables. Una alternativa a la
obtencin de metales por pirometalurgia, es el uso de metodologas que funcionen a
bajas temperaturas y con soluciones acuosas capaces de extraer el metal de los
minerales (lixiviar). Esta tecnologa, llamada hidrometalurgia, es preferible desde el
punto de vista de su impacto ambiental y de su rentabilidad.
Por lo visto, aunque algunas actividades mineras no son fcilmente reemplazables, se
busca lograr que tengan el menor impacto ambiental posible. En este sentido, se
espera que los avances cientficos en una de las reas de la biotecnologa llamada
biominera, permitan reducir el impacto ambiental negativo en estas operaciones
mineras.

La biominera

Parte importante del cobre extrado desde tiempos remotos, provena justamente de
procesos de lixiviacin que ocurran en lugares con depsitos de ese metal. Por mucho
tiempo, se pens que la disolucin o lixiviacin de metales era un proceso netamente
qumico, mediado por agua y oxigeno atmosfrico. Recin en la dcada del 40 se
descubri la existencia de bacterias que revolucionaron la definicin de lixiviacin
como un proceso catalizado biolgicamente. La biolixiviacin es una tecnologa que
usa bacterias especficas para extraer (lixiviar) metales de los minerales. Por lo tanto,
se determin que la tecnologa debera llamarse biohidrometalurgia ya que, para
que el

proceso de recuperacin de cobre fuera eficaz era necesaria adems de agua, la

presencia de ciertos microorganismos.
De all surge el trmino de biominera, que es el uso de microorganismos en
diferentes aspectos de la explotacin de los minerales, abarcando desde la
concentracin de las especies de inters (a travs de la bioflotacin), la recuperacin
de los elementos presentes en ellas (biolixiviacin y biooxidacin), hasta su accin en
tareas de remediacin ambiental (ver Cuaderno N 36 y 46).
La biolixiviacin suele hacerse regando pilas (acumulaciones de mineral
previamente triturado) con soluciones de cido sulfrico. Las bacterias existentes en
los minerales liberan al metal del mineral que finalmente es recuperado a partir de las
soluciones que emergen de la parte inferior de la pila. El cobre es el metal que se
recupera en mayor medida por esta metodologa, pero adems se utiliza para extraer
cobalto, nquel, cinc, entre muchos otros.
La biooxidacin es aplicable a minerales refractarios de oro en los cuales ste se
encuentra incluido dentro de una matriz mineral de sulfuros lo cual dificulta su posterior
recuperacin. La accin de las bacterias elimina esta matriz liberando al oro y
haciendo as ms eficaz su recuperacin.

Cmo actan las bacterias mineras

Las bacterias mineras logran hacer solubles los minerales. Los microorganismos
realizan esta tarea como parte de sus procesos metablicos, simplemente
alimentndose de los minerales (son quimiolitoautotrficas o quimioauttrofos).
Durante el proceso, las bacterias comen electrones, los cuales son extrados de los
minerales. Estos electrones forman una especie de batera dentro de la bacteria,
creando una diferencia de potencial que genera energa, al igual que en una pila. Esta
energa es almacenada para luego utilizarla en los distintos procesos metablicos.
Adems, estos microorganismos necesitan carbono, pero lo obtienen del aire en forma
de CO2, no de los hidratos de carbono.
A este tipo de microorganismos se los llama "bacterias oxidantes" porque al obtener
los electrones oxidan ciertos minerales. La utilizacin de bacterias permite explotar
recursos minerales que son muy difciles y costosos de lixiviar qumicamente. En
cambio estos microorganismos son muy eficientes y econmicos ya que crecen
naturalmente en estos medios.
La primera bacteria identificada capaz de lixiviar fue Acidithiobacillus ferrooxidans. Fue
en 1947 cuando se descubri que era la responsable del gran deterioro que sufran los
equipos metlicos en las instalaciones de una mina espaola, debido a su gran
capacidad de oxidacin de las aguas. Diez aos ms tarde se encontr la misma
bacteria en drenajes cidos de minas de carbn a cielo abierto.
Nuevo ISO para validar los mtodos de prueba de microorganismos para la
industria alimentaria
5th Jul GlobalSTD GlobalSTD Blog
Es esencial tener acceso a alimentos sanos y nutritivos. Sin embargo, los productos
como carne, pescado, lcteos, huevos y mariscos tienen una cantidad significativa de
flora microbiana que puede afectar nuestra salud. Por lo tanto, es importante identificar
los microorganismos para mantener nuestros alimentos seguros, adems si la flora
microbiana no es controlada tambin puede afectar la calidad de los alimentos y su vida
til. Si eres un fabricante o usuario de mtodos de ensayo microbiolgicos, debes
asegurarte de que estn totalmente probados, validados y aptos para su uso.

ISO 16140: 2003 para la validacin de mtodos microbiolgicos alternativos

(patentados) acaba de ser revisado. El nuevo estndar multiparte proporciona el
protocolo especfico y las directrices para validar los mtodos patentados (comerciales)
o no. Estos mtodos son generalmente ms baratos de usar, produciendo resultados
con mayor rapidez que los tradicionales y son ms fciles de aplicar porque requieren
menos habilidades tcnicas. Lo mejor es que en su mayora son parcial o totalmente
automatizados, y son ms fciles de usar en laboratorios con menos experiencia, como
fbricas y laboratorios comerciales, con menos personal tcnico.

Las dos partes de la serie ISO 16140 que ya han sido publicadas:

ISO 16140-1:2016 Microbiologa de la cadena alimentaria, Validacin del mtodo;

Parte 1: Vocabulario, que describe la terminologa utilizada en las pruebas
microbiolgicas.

ISO 16140-2: 2016 Microbiologa de la cadena alimentaria - La validacin del mtodo;

Parte 2: Protocolo para la validacin de mtodos alternativos (patentados) segn un
mtodo de referencia que se dedica a la validacin de mtodos microbiolgicos
patentados.

Ambos estn diseados para ayudar a los laboratorios de ensayo en los que se
examinan los alimentos a realizar pruebas, a los fabricantes, a las autoridades
competentes, y a los operadores de alimentos y piensos para la implementacin de
mtodos microbiolgicos. ISO 16140-2 incluye dos fases: el estudio de comparacin de
mtodos y el estudio entre laboratorios, con protocolos separados para la validacin de
mtodos microbiolgicos cualitativos y cuantitativos.

Se incluyen nuevos conocimientos de validacin:

Ms de cien mtodos alternativos se han validado con base a la versin anterior de ISO
16140, que fue actualizada para proveer nuevos conocimientos sobre la validacin de
mtodos microbiolgicos y la experiencia adquirida en la realizacin de estudios de
validacin en todo el mundo. Hoy en da, existen muchas alternativas (en su mayora
patentadas) sobre los mtodos que se utilizan para evaluar la calidad microbiolgica de
las materias primas y productos alimenticios terminados, as como para supervisar el
estado microbiolgico de los procesos de fabricacin. Los desarrolladores, usuarios
finales y autoridades necesitan un protocolo confiable para la validacin de estos
mtodos alternativos, y con este nuevo protocolo, los datos generados tambin
proporcionarn posibles usuarios finales con los datos de rendimiento para un
determinado mtodo, lo que les permitir tomar una decisin informada sobre la
adopcin de un mtodo en particular (alternativo). Estos datos tambin pueden servir
como base para la certificacin de un mtodo por una organizacin independiente.

Desarrollo de la serie ISO 16140:

"La validacin de acuerdo a la norma ISO 16140-2 le brindar mayor fiabilidad a los
resultados de los mtodos de ensayo alternativos, y los usuarios se beneficiarn de tener
los resultados de sus pruebas microbiolgicas lo antes posible. Lo ms probable es que
esto contribuya a mejorar la seguridad de los alimentos ", explica Paul in 't Veld,
Coordinador del Grupo 3 de Trabajo, sobre la validacin del mtodo (ISO/TC 34/SC
9/WG 3 cuya secretara est en manos de NEN, miembro de ISO en los Pases Bajos),
que es responsable del desarrollo de la serie ISO 16140. Las otras cuatro nuevas partes
de la norma ISO 16140 todava estn en fase de desarrollo, con los siguientes temas:

Protocolo para verificar referencias y mtodos alternativos validados implementados en

un solo laboratorio (Parte 3 de ISO 16140).
Protocolo para la validacin del mtodo de un solo laboratorio (en casa). (Parte 4 de ISO
16140).
Protocolo para validar diversos factores de mtodos no patentados entre laboratorios.
(Parte 5 de ISO 16140).
Protocolo de validacin de mtodos alternativos (patentados) para la confirmacin
microbiolgica y su escritura (Parte 6 de ISO 16140).
WG 3, Mtodo de validacin, es parte del subcomit ISO/TC 34/SC 9, Productos
alimenticios - Microbiologa, cuya secretara est en manos de AFNOR, miembro de ISO
en Francia. El estndar estar disponible con tu miembro nacional de ISO o directamente
en la tienda ISO.