Resultados: El cido peractico es una mezcla de cido

Cuadro 1. Prueba de eficacia en el desinfectante actico y perxido de hidrgeno en solucin

(concentracin mnima inhibitoria.) acuosa. Se obtiene por oxidacin a partir de
Volmenes de Inhibicin de acetaldehdo y oxgeno en presencia de
desinfectante mL crecimiento de acetato de cobalto. Tambin puede obtenerse
bacterias (+) tratando anhdrido actico con perxido de
0,3 -
hidrgeno (en presencia de cido sulfrico),
0,625 -
como ocurri en este caso. Es un lquido
1,25 -
transparente sin capacidad espumante y con
2,25 +
5 +
un fuerte olor caracterstico a cido actico.

Cuadro 2. Pruebas de calidad en el desinfectante

(identificacin de tensoactivo)
Tenso-activo Anicnico (colore la
fase orgnica)
Imagen No. 2 Reaccin del cido Peractico
pH 4,22 (acido)

Imagen No. 3 Caractersticas del cido

peractico

Imagen 1. Resultados de identificacin tensoactiva.

Discusin

La desinfeccin tiene que ver con la

destruccin de la mayora de los
microorganismos presentes en superficies y
equipos pero no de esporas bacterianas. Un
desinfectante no ha de matar todos los
microorganismos lo que hace es reducir los
mismos a niveles aceptables y sin daar la
salud ni la calidad (Ascenzi,1996).
Los desinfectantes modernos son complejas
formulaciones de sustancias qumicas,
jabones, detergentes y compuestos que
ayudan a la penetracin de los principios
activos a las clulas bacterianas.
En el presente laboratorio se prepar un litro
de desinfectante. En el cual utilizamos como
componentes activos principales el cido
actico (vinagre de manzana) y el perxido de
Hidrogeno (H2O2); dando como resultado el
cido peractico.
Imagen No. 4 Efectividad de Desinfectantes
Qumicos
Durante la preparacin de este desinfectante
se utilizaron otros reactivos y materiales, tales
como lauril, etanol, NaOH, H2SO4, H2O,
colorante y fragancia.
A continuacin describiremos que funcin
desempean en el desinfectante.
PERXIDO DE HIDRGENO (H2O2): Es un
compuesto ampliamente estudiado y utilizado.
Tiene muy bajo nivel de toxicidad para los
humanos y para el medio ambiente, se
descompone en oxgeno y agua. Su
efectividad cuando se usa durante 10 minutos
es comparable a la del glutaraldehdo al 2%
durante 20 minutos.
Esta molcula tiene unas caractersticas que
la hacen un buen desinfectante: es un
producto con un gran poder oxidante, lo que le
hace muy reactivo frente a la materia
orgnica, y por tanto le dan un amplio rango
de accin frente a microorganismos: tiene
buen poder bactericida, virucida, e incluso
esporicida. Los microorganismos anaerobios
son incluso ms sensibles a la accin de estos
productos, dado que no son capaces de
sintetizar la catalasa, una enzima que puede
descomponer el perxido.
Este gran poder oxidante garantiza una rpida
velocidad de accin, aunque precisa, debido a
esta misma caracterstica, que en su
formulacin se aadan productos que lo
estabilicen (Jefrey, 1995).
Vinagre, cido actico. El cido
actico (tambin llamado cido
metilcarboxlico o cido etanoico) puede
encontrarse en forma de ion acetato. Se
encuentra en el vinagre, y es el principal
responsable de su sabor y olor agrios. Su
frmula es CH3-COOH (C2H4O2). De acuerdo
con la IUPAC, se denomina
sistemticamente cido etanoico.
Segn CANCELLOTTI (1995) El cido Actico
se pudo utilizar como desinfectante barato y
no txico contra bacterias drogorresistentes
(TB) de la tuberculosis as como otras
micobacterias obstinadas, desinfectante-
resistentes.
Segn los experimentos elaborados en el
IVIC, la efectividad del vinagre como
micobactericida vara en funcin del tiempo de
exposicin y la concentracin, siendo esta
variable dependiente de cada pas. En Francia
y algunos pases de Europa, por ejemplo, el
vinagre comercial tiene 8% de cido actico;
mientras que en Venezuela, Estados Unidos y
otras naciones de Amrica contiene 5% de
cido actico.
NaOH: La sosa es un agente limpiador,
particularmente desengrasante.
El Lauril sulfato de sodio es un surfactante
o tensoactivo, este compuesto forma micelas
donde la cadena organica o apolar se une
dejando por fuera la parte polar que es el
sulfonato de sodio, con esta sustancia los
compuestos grasos quedaran atrapados en la
parte apolar y los compuestos ionicos o
polares en el exterior, pudiendo disolverse
grasas y otros tipos de suciedad en el agua y
muy efectivo agente formador de espuma.
Alcohol es un antisptico. Sustancia que
inhibe el crecimiento y desarrollo de los
microrganismos pero no necesariamente los
mata. (OMS, 2005)
Tambin es un desinfectante. Su mayor
potencial bactericida se obtiene a una
concentracin de aproximadamente el 70 %.
H2SO4: Es utilizado para catalizar la reaccin
qumica del cido actico y el perxido de
hidrogeno hasta lograr un equilibrio entre
ambas.
Prueba de eficacia
Para probar la eficacia microbicida utilizamos
bacterias Staphylococcus aureus conocido
como estafilococo ureo o estafilococo dorado
ya que es una bacteria muy resistente y por lo
tanto podremos obtener unos resultados ms
confiables; es una bacteria anaerobia
facultativa, grampositiva, mesfila, productora
de coagulasa, catalasa, inmvil y no
esporulada. (Ascenzi,1996).
Se utiliz el mtodo de concentracin mnima
inhibitoria mediante una serie de diluciones
decrecientes del desinfectante en caldo
nutriente de Muller Hilton, e inoculando los
tubos con una solucin bacteriana. El caldo es
preparado con glucosa, cloruro de sodio,
peptona, buffer pH 7,2 porque la bacteria es
neutrofila y agua destilada. Los tubos con el
caldo de cultivo fueron proporcionados por un
pofesor de microbiologa quien nos estuvo
asistiendo en todo el proceso. Tras la
incubacin a 370C por 24 horas se observa
cual es la concentracin mnima del producto
que inhibe el crecimiento. Tanto el caldo de
crecimiento como la temperatura sirven de
interferentes para la accin del desinfectante
ya que esta es la temperatura ptima para las
bacterias mesofilas y proporcionan a las
bacterias las condiciones adecuadas para
crecer asi que depende del desinfectante
parar estas barreras. (Leaveu y Bouix, 2002).
Como observamos en el cuadro 1 No hubo un
crecimiento de bacterias en los tubos que
contenan mayor volumen de desinfectante (5
y 2,5) mL, sin embargo si existi crecimiento
de bacterias en los dems tubos (1,25, 0,625,
y 0,3)mL, lo que significa que su mnimo
volumen de actividad antimicrobiana sera
2,5mL , menor a esto ya no cumplira su
funcin. Lo que podramos hacer para mejorar
esto es aumentar la concentracin de los
componentes activos para que tenga una
mejor actividad microbiana, es decir que sea
capaz de matar microorganismos a bajas
concentraciones.
Sabemos que las bacterias tienen un
crecimiento logartmico con una latencia, una
fase exponencial, una face estacionaria y
como todo ser vivo muere, entonces la funcin
de los componentes activos del desinfectante
es bloquear el proceso en la face exponencial
para que no se reproduzcan las bacterias. La
accin de los mismos se fundamente en
bloquear el metabolismo daando los lpidos y
protena de la membrana citoplasmtica
resultando en su ruptura y salida del material
celular; y desnaturalizacin de enzimas y
protenas generalmente por ruptura de
puentes de hidrogeno y disulfuro.
El primer paso es la interaccin del agente
qumico con el microorganismo con el fin de
penetrar el mismo para alcanzar un blanco de
accin, en el caso del perxido de hidrogeno
son los ribosomas, organelo formado de
protenas y ARN ribosomal.
El perxido de hidrogeno debe su actividad a
la formacin de radicales libres OH-, que oxida
a los grupos tioles en enzimas y protenas;
cido paractico, : inhibicin de los grupos
tioles en protenas y enzimas. En presencia de
enzima mieloperoxidasa, el cloruro contenido
en las bacterias puede ser oxidado por el
perxido de hidrogeno a hipoclorito
o puede actuar
mediante la generacin de radical OH, este
radical puede atacar a los lpidos de las
membranas, el ADN, protenas y otros
compuestod viables de las clulas.
Imagen 5. Reaccin del perxido en bacterias.
Sin embargo Staphylococcus aureus no es
inhibido totalmete por el perxido ya que este
microorganismo produce la enzima catalaza
que descompone el perxido de hidrogeno en
agua y oxigeno molecular cuando este
compuesto se encuentra en pequeas
cantidades; en cantidades mayores es
inhibido por la acumulacin de perxido en el
medio, adems el oxgeno liberado del
catabolismo es muy toxico para bacterias
anaerobias
Los cidos orgnicos como el cido actico
matan los microorganismos penetrando en su
interior y rompiendo la membrana celular;
disocian luego la molcula cida y como
consecuencia acidifican el interior.
Debemos considerar la resistencia intrnseca
de las bacterias gram positivas ya que su
pared celular est compuesta especialmente
de peptidoglicano y cido teicoico, pero
ninguno de estos parece ser una barrera
efectiva para la entrada de desinfectantes.
El desinfectante elaborado tambin tena
como ingrediente alcohol que contribuye a su
efectividad alterando las membranas
celulares y desnaturalizando las protenas;
ademas de que es activo frente a bacterias
gran positivas incluyendo patgenos
multirresistentes como Staphylococcus
aureus (Jefrey, 1995).
El lauril le da una capacidad detergente,
quiere decir que tambin cumple una funcin
limpiadora lo que mejora la efectividad del
desinfectante.
Los factores que puedieron influir en nuestros
resultados son Concentracin del agente,
tiempo de actuacin, pH, temperatura y
naturaleza del microorganismo(Jefrey, 1995).
Pruebas de calidad
Para la prueba de calidad realizamos la
identificacin del tensoactivo en nuestro
desinfectante y como observamos en el
cuadro 2 este es aninico, ya que se coloreo
la fase orgnica con el azul de metilo. Los
detergentes aninicos (grupo activo con carga
negativa) suelen tener mayor actividad
microbiana que los catinicos. Los
desinfectantes aninicos provocan una gran
destrupcin de membranas, con efectos de
lisis. Son activos sobre todo a pH cido,
prefentemente sobre bacterias Gram-
positivas, pero poco sobre Gram-negativas,
ya que stas quedan ms protegidas por la
barrera del lipopolisacrido de la membrana
externa. Estas caractersticas brindan a
nuestro desinfectante una mayor calidad ya
sus propiedades cidas y aninicas lo hacen
ms potentes para cualquier tipo de bacteria
que no sobrevivira en este medio.
Cuando los detergentes aninicos se
combinan con cidos, se logran
desinfectantes sanitarios muy potentes
(debido al efecto sinrgico de ambos
componentes) y de rpida actuacin (unos 30
segundos). (Jefrey, 1995).
Los tensioactivos aninicos son compuestos
que al disociarse en disoluciones acuosas, un
in cargado negativamente aporta las
propiedades de actividad superficial a un in
cargado positivamente.
pH de cido peractico
Durante la preparacin del desinfectante se
pudo obtener el pH de mismo obtiendo 4, 22,
lo que nos dice que nuestro desinfectante
tiene carcter cido como era de esperarse.
El pH afecta tanto a la carga superficial neta
de la bacteria como al grado de ionizacin del
agente. En general, las formas ionizadas de
los agentes disociables pasan mejor a travs
de las membranas biolgicas, y por lo tanto
son ms efectivos.La mayora de las bacterias
pueden crecer dentro de un margen de pH de
su medio, manteniendo al mismo tiempo su
pH interno ptimo prcticamente
constante.Por ejemplo, Escherichia
coli puede crecer bien entre pH 6 y pH 8, pero
su pH interno es siempre 7.6 o muy cercano a
ese valor (Leveau y Bouix, 2002).
Respecto del margen normal de pH a los que
crecen las bacterias, stas se pueden
clasificar en:
Neutrfilas, si crecen de modo ptimo en torno
a la neutralidad (entre pH 5.5 y 8).
Acidfilas, si crecen normalmente entre pH 0
y pH 5.
Alcalfilas, si crecen entre pH 8.5 y pH 11.5.
Los agentes aninicos suelen ser ms
efectivo a pH cidos y los catinicos muestran
ms eficacia a pH alcalinos.
La concentracin de iones hidrogeno influye
sobre la accin bactericida, afectando tanto al
microorganismo como al agente qumico.
Cuando de suspenden en un medio de cultivo
las bacterias estn negativamente cargadas;
un aumento del pH incrementa la carga y
puede alterar la concentracin efectiva del
agente qumico en la superficie de la clula. El
pH tambin determina el grado de ionizacin
del agente. En general, la forma no ionizada
de un agente disociable pasa a travs de la
membrana celular ms fcilmente que las
formas inicas relativamente inactivas.
Conclusiones
Logramos demostrar la eficacia de nuestro
desinfectante mediante una prueba de
concentracin mnima inhibitoria, donde en 2
tubos no se observ crecimiento de bacterias.
Esto debido a la accin inhibitoria de nuestros
componentes activos que actan bloqueando
el metabolismo en la face exponecia.
Logramos demostrar la calidad de nuestro
desinfectante haciendo una identificacin de
tensoactivo donde obtuvimos un desinfectante
de carcter inico que segn la literatura es el
ms eficiente y combinado con la acidez del
desinfectante le da un valor agregado de
mayor calidad.
Los desinfectantes constituyen un arma eficaz
en la lucha y prevencin de la contaminacin
causada por microorganismos en diversas
industrias.
La sustancia principal que tiene el vinagre, es
el cido actico, el cual puede matar las
bacterias y evitar que se multipliquen llegando
a niveles perjudiciales. El vinagre ha sido
utilizado durante mucho tiempo como
desinfectante y como conservante natural.
El pH determina el grado de disociacin y la
efectividad del agente qumico, pues a menor
mayor permeabilidad y mayor efectividad del
desinfectante.
Los desinfectantes deben tener el ms amplio
espectro posible en contra bacterias, hongos,
virus y esporas. Y deber tener una accin
biosida en contra de los microorganismos en
una variedad de condiciones y estadios de
crecimiento.
Se debe tener en cuenta la correcta utilizacin
de las sustancias utilizadas para este proceso
(agentes activos), ya que con el exceso o el
uso indebido de estas, no podremos asegurar
la calidad dentro de nuestro proceso de
desinfeccin y generaremos una ineficiencia a
largo plazo, debido a que los microorganismos
pueden ir adquiriendo resistencia.
Los desinfectantes deben seleccionarse
teniendo en cuenta el tipo de microorganismo
que se desea eliminar, el tipo de producto que
se elabora y el material de las superficies que
entren en contacto con el producto utilizado.

Bibliografas

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