Laboratorio de Analisis Instrumental, Semestre A-2017, Prof.

Lisandra Chacon
Fecha de realizacin: 26/10/2017 Fecha de entrega: 02/11/2017

Determinacin del Punto Isobestico y la Constante de Disociacion de

un Indicador Acido-Base
Ramirez, Luis1; Sifontes, Hector2; Carrillo, Marcos3
Facultad de Ingeniera, Escuela de Ingeniera Qumica, Universidad de Los Andes,
Mrida, Venezuela.

Este indicador presenta una coloracin amarilla en su forma

1 Resultados y Discusin acida (no disociada), un color verde un su forma neutra y un
azul en su forma bsica (disociada). Este tipo de compuestos
El azul de bromotimol es un cido dbil utilizado comn- presentan grupos cromforos unidos a los anillos bencni-
mente como un indicador acido-base cuya estructura y reac- cos, originalmente incoloros, que le otorgan el color. Esto se
cin de disociacin es: debe a que estos compuestos presentan gran cantidad de
electrones capaces de absorber radiacin visible a ciertas
longitudes de onda, reflejando otras longitudes correspon-
dientes a los colores que presentan.
En la figura 2 se puede observar que para un pH 3 la absor-
bancia alcanza un mximo de absorbancia a una longitud de
onda 420nm (tabla 5) y luego empieza a disminuir, esto es
debido aque el indicador en su forma acida se encuentra en
su forma no disociada este absorbe luz a bajas longitudes
onda reflejando las altas, la cual presenta una coloracin
amarilla. Por otra parte, tambin se puede observar que para
Figura 1. Estructura y reaccin de disociacin del azul de una solucion alcalina este alcanza su mximo de absorban-
bromotimol. cia en una longitud de onda de 600nm ya que en un medio
Para la determinacin del punto isobestico del azul de bro- bsico el indicador se encuentra en su forma disociada y este
motimol se realizo el espectro de luz visible a diferentes absorbe luz a altas longitudes de onda y reflejas las peque-
longitudes de onda de tres soluciones una acida de pH 1, una as, observndose un color azul.
bsica de pH 13 y una neutra obteniendo los resultados de
la tabla 1.
Tabla 1. Barrido espectral a diferentes pH.
Longitud pH 1 pH 7 pH 13
(nm) A A A

380 0,65 0,54 0,43

400 0,745 0,64 0,42
420 0,85 0,66 0,24
440 0,83 0,62 0,14
Figura 2. Espectro del azul de bromotimol a diferentes pH.
460 0,7 0,54 0,13
480 0,48 0,42 0,215 Podemos observar tambin en la figura 2, que el indicador
en un pH neutro alcanza dos mximos los cuales coincide a
500 0,29 0,33 0,35 la longitud de onda de los mximos tanto para el medio aci-
520 0,16 0,3 0,52 do y bsico, esto es debido a que en ese medio tanto la for-
540 0,06 0,305 0,8 ma no disociada como la disociada se encuentra de igual
proporcin lo que permite absorber luz en ambas longitudes
560 0,03 0,41 1,2 de onda, reflejando a su vez los dos colores a la vez el cual
580 0,01 0,49 1,5 en su forma combinada es el verde. Por otro lado, se puede
600 0 0,62 1,6 observar en la misma figura que existe un punto donde los
tres medios alcanza un mismo valor de absorbancia a una

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 Ramirez, Sifontes y Carrillo.

misma longitud de onda el cual representa el punto isobesti- puede notar que los porcentaje de discrepancia son muy ba-
co, dicho punto tiene una absorbancia de 0,32 a una longitud jos.
de onda de 496nm. Sin embargo, cabe destacar que el indi-
Para el estudio de la absorbancia versus el pH se obtuvieron
cador presento dificultades en el medio acido por lo que no
dos graficas una antes del punto isobestico (Figura 3) y otra
cruza justamente en ese punto pero si se aproxima al mismo.
despus del punto isobestico (Figura 4), con la que se puede
Este mtodo permitio determinar la constante de disociacin observar la variacin de la absorbancia con respecto al pH.
del indicador pKa obteniendo un valor promedio del pKa de
En la figura 3, se puede observar que la absorbancia para el
7,21 con un porcentaje de discrepancia de 1,55% (tabla 2)
medio acido y neutro fue incrementado y para el medio alca-
con respecto al valor teorico que es 7,1. Cabe destacar que
lino fue disminuyendo hasta una longitud de onda de 460nm
para determinar el pKa promedio se tomaron 6 valores los
por lo que hasta este punto predomina la forma no disociada
cuales su discrepancia sean las ms bajas para asi obtener un
del indicador, luego la absorbancia tanto en el medio acido y
valor ms exacto al teorico.
neutro fueron disminuyendo y el medio alcalino fue aumen-
Tabla 2. Constante del Azul de bromotimol promedio. tando hasta que alcanzaron el mismo valor de absorbancia a
una longitud de onda de 496nm. Por otra parte, se puede no-
pH pKa Ka % Discrepancia tar que la recta antes del punto isobestico tiene una pendien-
longitud 7 1,00E-07 1,408 te negativa la cual es mas pronunciada a longitudes mas le-
jas del punto isobestico y a medida que va disminuyendo se
380 7,344 4,52E-08 3,444 va a acercando a la longitud del punto isobestico se hace
420 7,196 6,36E-08 1,356 menos pronuncia la cual casi se comporta como una hori-
zontal esto es debido a que las absorbancias se van de los
520 7,305 4,95E-08 2,894 tres medios son casi parecidas.
540 7,318 4,81E-08 3,068
560 7,199 6,33E-08 1,392
Promedio 7,210 6,16E-08 1,553

Para saber si el valor promedio de la constante de disocia-

cion tiene una diferencia significativa se realizo un anlisis
estadstico la cual se aplica una hiptesis nula de que el va-
lor obtenido no tiene diferencia significativa con respecto al
valor real, por como se puede mostrar en la tabla 3 el factor
t obtenido fue de 2.09 el cual es mas pequeo que critico a
un intervalo de confianza de 95%, por lo que se acepta la
hiptesis nula en que no existe diferencia significativa entre
Figura 3. Absorbancia vs pH antes del punto isobestico.
el valor obtenido con el valor real.
Por otra parte, en la figura 4 se puede observar que a una
Tabla 4. Dato estadstico de la constante de disociacon pKa.
longitud de 500nm se obtiene una recta prcticamente hori-
Media 7,210 zontal ya que esta longitud esta muy cercana a la longitud
del punto isobestico por lo que se puede decir que la absor-
Desviacion estandar 0,12898638 bancia no depende del pH y las otras rectas van aumentando
Varianza 0,01663749 a medida que se van haciendo diferentes los valores de ab-
sorbancia.
Ho 7,1
t 2,0938614
t (P=0,05) 2,57

En la tabla 3 se puede observar que los mayores porcentaje

de discrepancia se obtuvieron a longitudes cercana al punto
isobestico, lo cual puede ser debido que a esas longitudes las
absorbancias son muy similares por lo que su diferencia son
cercano a 0, por lo que a mayor diferencia de absorbancia se

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un Indicador Acido-Base
Conclusiones

Se logro determinar el punto isobestico para el indicador

Figura 4. Absorbancia vs pH despues del punto isobestico.
azul de bromotimol el cual se encuentra a una longitud de
onda de 496nm y tiene una absorbancia de 0,32.
Se obtuvo la constante de disociacin promedio pKa de
7,21 con un procentaje de discrepancia 1,55% con res-
pecto al valor teorico.
Se determino por medio de tratamiento estadistco que no
existe diferencia significativa entre el valor obtenido de
la constante de disociacin promedio pKa igual a 7.21
con la real.
Se pudo demostrar por medio de las figura 3 y que la
absorbancia no depende del pH.

Anexos

Tabla 4. Constante de disoacion a diferentes longitudes de onda.

Acido Neutro Basico

pH 1 7 11
longitud A A A pKa Ka % Discrepancia
380 0,65 0,54 0,43 7,0000 1,000E-07 1,408450704
400 0,745 0,64 0,42 7,3212 4,773E-08 3,115963123
420 0,85 0,66 0,24 7,3445 4,524E-08 3,44360126
440 0,83 0,62 0,14 7,3590 4,375E-08 3,648196375
460 0,7 0,54 0,13 7,4087 3,902E-08 4,347378508
480 0,48 0,42 0,215 7,5336 2,927E-08 6,107079024
500 0,29 0,33 0,35 6,6990 2,000E-07 5,648309798
520 0,16 0,3 0,52 7,1963 6,364E-08 1,356262608
540 0,06 0,305 0,8 7,3054 4,949E-08 2,893508656
560 0,03 0,41 1,2 7,3178 4,810E-08 3,068218235
580 0,01 0,49 1,5 7,3231 4,752E-08 3,141973752
600 0 0,62 1,6 7,1988 6,327E-08 1,392033608

Laboratorio de (Asignatura)
 Ramirez, Sifontes y Carrillo.

Tabla 5. Absorbancia Maximas obtenidas en el medio Acido y Basico.

Acido Basico

Longitud Absorbancia Longitud Absorbancia

420 0,85 600 1,6

Muestra de Calculo
Para un indicador Acido-Base monoprotico se tiene que:

+ +
Por lo que:
[+ ][ ]
= Ec. 1

Aplicando logaritmo negativo en ambos lados tenemos:

[ ]
= + Ec. 2

Dejando la Ec 2 en funcin de pKa y absorbancias tenemos:

= Ec. 3

Para la determinacin de los pKa a las diferentes longitudes de ondas aplicamos la ecuacin 3 utilizando los valores de ab-
sorbancia de la tabla 1 y pH igual a 7.
, ,
@ = =
, ,
Por lo que se procedio a determinar los dems pKa de la misma manera resultados representados en la tabla 3.

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