Universidad de Guadalajara

Centro Universitario de Ciencias Exactas e Ingeniera

Vernica Mara Quezada Rodrguez

217754181

Lic. Qumico Farmacutico Bilogo

1er Semestre

Prctica #1
Microscopa
Clula Bacteriana

Bases de Biologa Celular

M. en C. Olga Deli Vzquez Paulino
Objetivo: El alumno conocer los componentes y las partes del microscopio ptico, as como su funcionamiento, con fin
de utilizarlo en futuras prcticas o tcnicas microbiolgicas.

Introduccin:

El principio de funcionamiento de un microscopio

ptico se basa en la propiedad de algunos materiales que
permiten cambiar la direccin de los rayos de luz. Esto permite
fabricar lentes capaces de hacer converger o divergir los rayos
de luz. Mediante la combinacin de estas lentes se puede
generar una imagen aumentada de cualquier objeto. El
ejemplo ms sencillo sera utilizar una sola lente, como en el
caso de una lupa, para producir una imagen aumentada de
una muestra.
En el caso de un microscopio ptico se genera la imagen
aumentada a partir de distintas lentes. Algunas de ellas
montadas en el objetivo del microscopio y otras en el ocular.
En primer lugar las lentes del objetivo generan una imagen
real aumentada de la muestra. Esta imagen real es a continuacin ampliada mediante las lentes del ocular dando lugar a
una imagen virtual de tamao superior a la muestra original.

Tipos de microscopio:

Microscopio compuesto: Este es el tipo elemental de microscopio ptico. El trmino compuesto indica que se
utilizan dos o ms lentes para obtener la imagen aumentada. Esta denominacin se utiliza en contraposicin a la
de microscopio simple, que se refiere a los microscopios que funcionan con una sola lente y que se conocen
comnmente como lupas.

Microscopio monocular: Es aquel que slo tiene un ocular y, por lo tanto, permite observar la muestra solo con un
ojo. Debido a la sencillez de este tipo de microscopio es habitualmente utilizado por estudiantes o aficionados a
la microscopa. Este tipo de microscopio no resulta cmodo cuando se tienen que analizar muestras durante
horas y es por eso que en mbitos profesionales se utilizan normalmente microscopios binoculares.

Microscopio binocular: Este incluye dos oculares, de modo que es posible utilizar los dos ojos para examinar una
muestra. En los microscopios binoculares la imagen proveniente del objetivo se divide en dos mediante un
prisma ptico.
 Microscopio trinocular: Este tipo tiene los dos oculares necesarios para observar la muestra con los dos ojos e
incluye tambin un ocular adicional donde se puede conectar una cmara para capturar imgenes de las
observaciones.

Microscopio digital: Incluye una cmara en lugar del ocular, lo que permite capturar digitalmente la imagen de la
muestra. La imagen digital se puede visualizar en tiempo real en una pantalla o transmitirla a un ordenador
mediante conexin USB.

Microcopio USB: Es un tipo de microscopio digital muy sencillo que se ha popularizado en los ltimos aos
debido a su bajo coste. Los aumentos alcanzables con este tipo de microscopio son bajos en comparacin con el
resto de microscopios, pero an as son una herramienta muy til para observar objetos cotidianos.

Microscopio invertido: En l, la posicin de la fuente de luz y el objetivo es la opuesta al microscopio

convencional. De este modo, la muestra es iluminada desde arriba y el objetivo se encuentra debajo la platina.
La principal ventaja del microscopio invertido es que permite observar los elementos del fondo de un recipiente.
Se utiliza para observar clulas vivas y tejidos que se mantienen constantemente hidratados dentro del
recipiente.

Microscopio estereoscpico: Es un tipo de microscopio binocular porque est equipado con dos oculares. Sin
embargo, a diferencia del microscopio binocular convencional donde se ve exactamente la misma imagen en los
dos oculares, en el microscopio estereoscpico la imagen en cada ocular es distinta. La combinacin de las dos
imgenes provenientes de los dos oculares produce el efecto de estar viendo una imagen en tres dimensiones.
Para conseguir este efecto el microscopio estereoscpico utiliza en general dos objetivos, uno para cada ocular.

Bibliografa:
https://www.lifeder.com/partes-microscopio-optico/
https://www.mundomicroscopio.com/

Equipo: Materiales:
Microscopio binocular Aceite de inmersin
Papel absorbente
Frotis bacteriano
Frotis sanguneo

Metodologa:

1. Colocar el objetivo de menor poder de aumento en posicin de trabajo. Bajar la platina hasta el tope
inferior, todo lo que se pueda.

2. Colocar la preparacin sobre la platina de forma que la muestra quede centrada en el orificio por el que
pasar la luz. El portaobjetos debe quedar firmemente sujeto por las pinzas metlicas que en la platina.

3. Comenzar con la observacin. Se empieza con el objetivo de menor poder de aumento. ste
normalmente es el de 4x. Se puede pasar directamente al objetivo de 10x en caso de preparaciones de
bacterias o clulas de tamao similar.

4. Acercar la preparacin lo mximo posible a la lente del objetivo. Para ello, utilizar el tornillo macromtrico
mirando desde el exterior, no mirando a travs del ocular.

5. Poner los ojos sobre el ocular y, mirando a travs de l, proceder a realizar el enfoque grueso: Moviendo
el tornillo macromtrico, lentamente separar la preparacin del objetivo. Al llegar el momento en que la
 muestra se vea de forma ms o menos ntida, dejar de mover el tornillo macromtrico y pasar a mover el
tornillo micromtrico para ajustar de forma ms precisa el enfoque (enfoque fino).

6. Pasar al siguiente objetivo, de mayor aumento. La imagen puede desenfocarse un poco y requerir que
se ajuste el enfoque con el tornillo micromtrico.

Cmo usar el objetivo de inmersin:

1. Girar el revlver hasta que quede en una posicin media entre el objetivo de inmersin y el
anterior.
2. Poner una gota de aceite de inmersin en el crculo de luz que se visualiza.
3. Girar el revlver para colocar el objetivo de inmersin en posicin de trabajo.
4. Mirando desde fuera del microscopio, no a travs del ocular, acercar lentamente la platina al
objetivo hasta que la lente frontal del objetivo entre en contacto con el aceite de inmersin. Parar
en cuanto el aceite y la lente entren en contacto.
5. Mirar a travs del ocular y enfocar con el tornillo micromtrico.
6. Para retirar la preparacn, bajar la platina y luego girar el revlver para dejar el objetivo de menor
aumento en posicin de trabajo. Retirarla con cuidado.
7. Limpiar el objetivo de inmersin y los oculares con papel especial que no ralle las lentes y que
absorba el aceite.

7. Por ltimo, al terminar todas las observaciones, el microscopio se debe dejar con el objetivo de menor
aumento en la posicin de trabajo, con la platina centrada para que no sobresalga y con la funda
(normalmente de plstico) cubriendo el microscopio.

Resultados:

Muestra #1: Frotis sanguneo

De rojo, los eritrocitos; y de morado, los leucocitos. Se pueden observar monocitos, eosinfilos, basfilos,
linfocitos y neutrfilos.

4x 10x 40x 100x

Muestra #2: Frotis bacteriano

Parecen ser cocos gramnegativos, sin ningn tipo de asociacin aparente. Su tamao aparente es menor
a 1 micra, y probablemente mayor a 0.5 micras.
 4x 10x 40x 100x

Conclusin:

De ser usado de la manera correcta, el microscopio es una herramienta muy til para el proceso de
observacin e identificacin de microorganismos, clulas o cualquier objeto microscpico, sin importar su
naturaleza, siempre y cuando sean (naturalmente o posterior a una preparacin) traslcidos y de tamao mayor
a 0.1 micras. Cabe aclarar que, a pesar de que sea requisito que sean traslcidas (para que permitan el paso de
la luz) no tienen que ser incoloras. De hecho, en caso de serlo es necesario teirlos con uno o ms colorantes
que permitan la correcta distincin de su forma, componentes o situacin actual.
La prctica fue imprescindible para nuestro completo entendimiento del uso del microscopio ptico,
desde el objetivo panormico hasta el de inmersin.
Cuestionario:

1. Qu tipos de microscopios existen?, cul es la diferencia entre ellos?

Simples y compuestos. Los primeros cuentan con un solo lente, y los segundos tienen lentes
mltiples.

2. Cules son los componentes mecnicos?

Aquellos que sirven de sostn, movimiento y sujecin de los sistemas pticos y de iluminacin
as como de los objetos que se van a observar: Pi, brazo, platina, tubo ptico, revlver, tornillos
macromtico y micromtrico, engranajes y cabezal.

3. Cules son los componentes pticos?

Ocular, objetivos, condensador y prismas.

4. Cul es la importancia del ocular?

Es el encargado de formar una segunda imagen a partir de la imagen primaria que forma el
objetivo. La imagen del ocular es de mayor tamao, virtual y al derecho. Esta imagen nicamente
ampla un nmero determinado de veces (5x, 8x, 10x, 12x) a la imagen formada por el objetivo. No
aade, por ms aumentos propios que posea, ningn detalle a los generados por el objetivo.
En la generalidad de los casos, los oculares estn construidos por dos lentes convergentes
(planos convexos). La primera lente se denomina de campo o frontal, est situada en la parte anterior
del ocular y, es la encargada de recoger y ampliar la imagen generada por el sistema de lentes del
objetivo. La lente posterior, en contacto estrecho con el ojo del observador, se denomina lente ocular y
es la responsable de aumentar nuevamente la imagen y orientarla hacia el ojo del observador

5. Cul es la importancia de los objetivos?

Son los elementos ms importantes en la formacin de la imagen microscpica, ya que estos
sistemas de lentes establecen la calidad de la imagen en cuanto a su nitidez y la capacidad que tiene
para captar los detalles de la misma (poder de resolucin).
Estn constituidos tambin por un juego de lentes, convergente y divergente, para eliminar, en la
medida de lo posible, una serie de aberraciones que afectaran la calidad de las imgenes formadas.
Los objetivos se fabrican para ampliar las imgenes de los objetos observados en diversos
aumentos; as se tienen objetivos con aumentos propios de 3.5 x, 4x, 10x, 25x, 40x, 65x y 100x. Algunos
objetivos tienen alrededor de ellos una lnea coloreada que indica a simple vista el aumento propio.
La imagen que forman es de mayor tamao, invertida y real.

6. Cul es la importancia del condensador?

Est formado por una o dos lentes convergentes que renen los rayos luminosos y los orientan
hacia la abertura central de la platina. Su finalidad de concentrar la mayor cantidad de rayos luminosos
en el plano donde est situado el objeto a observar. La mayora de los condensadores de los
microscopios actuales tambin poseen una apertura numrica que indica la cantidad de luz que puede
captar y luego enviar hacia la preparacin.

7. Cul es la importancia de los prismas?

Sirven para desviar los rayos luminosos de la trayectoria rectilnea del eje ptico del objetivo y
dirigirlos hacia el tubo ptico ligeramente inclinado y luego hacia el ocular.
 En los microscopios binoculares, los prismas separan los rayos luminosos provenientes del
objetivo, en dos haces de luz y los dirigen a cada ocular. En ambos casos existe siempre una superficie
reflectante para evitar la descomposicin de la luz.

8. Cules son los componentes de iluminacin?

Son los instrumentos que proporcinan energa luminosa al microscopia, sea de tipo natural
(mediante un espejo) o artificial (mediante una lmpara de bajo voltaje).

9. Qu sustancias se pueden utilizar como sustancias de inmersin?

Agua, aceite de inmersin, fluorita, vidrio y flint.

10. Qu significa poder de resolucin?

Capacidad de un objetivo de poder distinguir la distancia mnima que debe existir entre dos
puntos del objeto para que se puedan visualizar como dos puntos separados. La calidad de una imagen,
en la que se observe la claridad, nitidez y la riqueza de detalles, depende del poder de resolucin del
objetivo.