UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE

BASADRE GROHMANN

FACULTAD DE CIENCIAS

Escuela acadmica profesional de

biologa y microbiologa

Tema: informe de laboratorio n4

RECUENTO DE COLIFORMES TOTALES

Estudiante: Cesar Huallpa Estala cdigo:

2012-36083

Curso: microbiologa de aguas

Docente: MSC.Angela Choque Miranda

 INFORME DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA DE
AGUA N 4

RECUENTO DE COLIFORMES TOTALES

Introduccin

El agua es una de las principales fuentes de vida en nuestro planeta, son infinitos
los usos del agua, para consumo humano, para labores domsticas y en la
industria farmacutica, es utilizada en las diferentes actividades como el lavado de
materiales, utensilios, reas accesorias, de anlisis, y como base para la
preparacin de medicamentos y/o cosmticos, en este caso el agua debe cumplir
unos estndares ms estrictos y su sistema de purificacin debe ser muy eficiente,
para obtener un alto grado de pureza y estar libre de contaminantes que puedan
afectar la calidad del producto terminado y ms an, la salud del paciente a quien
se le suministren los medicamentos elaborados. (Walter, J. 2003).As mismo, el
agua puede ser uno de los principales transmisores de enfermedades entricas si
se llegara a consumir en estado contaminado; entre los microorganismos
indicadores del agua potable, se pueden encontrar las bacterias del grupo
coliforme, perteneciendo a este grupo, gneros como: Escherichia coli,
Enterobacter spp, Klebsiella spp y Citrobacter spp; los cuales, generalmente se
pueden encontrar en la capa superficial del agua o en los sedimentos del fondo
(OMS, 1998). Es por esto, que los laboratorios de anlisis microbiolgico, buscan
validar las tcnicas desarrolladas para el anlisis de este tipo de aguas, que en la
mayora de los casos buscan detectar bacterias coliformes totales y fecales,
mediante las diferentes tcnicas, tcnicas que es aceptada y utilizada a nivel
nacional e internacional por entes reguladores, debido a su fcil manejo y empleo
y de esta manera contribuir a que el agua suministrada al consumo humano sea
de excelente calidad y que su sistema de potabilizacin logre eliminar la mayor
cantidad de organismos contaminantes que puedan llegar a afectar la salud de los
consumidores. (Walter, J. 2003).
OBJETIVOS

-Analizar y determinar si hay presencia de coliformes en la muestra de agua.

-Determinar mediante el mtodo de los tubos multiples,el nmero de coliformes

presentes en una muestra de agua.

-Comprender y realizar adecuadamente la determinacin de coliformes totales en

una muestra de agua.

-Interpretar adecuadamente los resultados para la determinacin de la calidad de

la muestra de agua.

MATERIALES

-Tubos de ensayo

-Mechero

-Medio de caldo brilla.

-Gradillas

-Pipetas

-Incubadora

FUNDAMENTO TEORICO

La denominacin genrica coliformes designa a un grupo de especies bacterianas

que tienen ciertas caractersticas bioqumicas en comn (aerobias o anaerobias
facultativas, Gram negativas, no esporgenas, fermentan lactosa a35c en 48
horas) y tienen importancia relevante como indicadores de contaminacin del agua
y los alimentos.

El grupo coliforme est formado por los siguientes gneros:

1. Escherichia.
2. Klebsiella.
3. Enterobacter.
4. Citrobacter.
Chromocult Agar para Coliformes: Es un agar selectivo para la identificacin
simultnea de coliformes totales y E. coli en muestras de agua y alimentos.
Gracias a la accin conjunta de peptonas selectas, piruvato y tampn de fosfatos
se garantiza un rpido crecimiento tambin de coliformes con daos subletales. El
contenido en lauril sulfato inhibe ampliamente el crecimiento de bacterias Gram-
positivas, sin tener influencias negativas sobre el crecimiento de Coliformes.La
identificacin simultnea de coliformes totales y E. coli se hace posible por la
nueva combinacin de dos sustratos cromgenos. El sustrato Salmon-GAL es
escindido por la enzima beta-D-galactosidasa caracterstico de coliformes y
provoca una coloracin roja de las colonias de coliformes. La identificacin de la
beta-D-glucoronidasa caracterstica para E. coli tiene lugar mediante el sustrato X-
glucornico, cuyo producto de escisin produce una coloracin azul de las
colonias positivas.

RESULTADOS: PRUEBA PRESUNTIVA

LECTURA REALIZADA A LOS 24 HORAS

Figura n1 3 tubos de una

concentracin doble eso se debe a
su coloracin ms oscura, el cual
se le , agrego 10 ml de muestra de
agua para ver presencia de
coliformes por medio de la
presencia de un gas el cual ser positivo .

Figura n 2 El primer tubo de concentracin

doble fue positivo, presencia de gas en la
campana de Durham.

10ml de muestra +caldo lauril sulfato

Figura n 3 El segundo tubo de

concentracin doble fue positivo, presencia
de gas en la campana de Durham.

10ml de muestra+caldo lauril sulfato

Figura n4 El tercer tubo de concentracin

doble es positivo, presencia de gas en la
campana de Durham.

10ml de muestra+caldo lauril sulfato

 Figura n 5 Aqu se ven los tubos de
concentracin simple, que se le agrega
1ml de muestra de agua con el caldo
de lauril sulfato.

-En el tubo n1 fue positivo, presencia de gas en la campana de Durham.

-En el tubo n2 fue positivo presencia de gas en la campana de Durham.
-En el tubo n3 fue negativo no hubo presencia de gas en la campana de
Durham.

Figura n6 Aqu se ven los tubos de

concentracin simple, se les agrega
0,1 ml de muestra de agua con el caldo
de lauril sulfato.

-En el tubo n1 fue positivo, presencia de gas en la campana de Durham.

-En el tubo n2 fue positivo, presencia de gas en la campana de Durham.
-En el tubo n3 fue negativo no hubo presencia de gas en la campana de
Durham.
LECTURA REALIZADA A LAS 48 HORAS:PRUEBA COMFIRMATORIA

Figura n7 Tubos que contienen caldo

brilla, para confirmar la presencia de
GAS en los tubos de coliformes totales.

Se incuban a 35C-37C POR 24horas

TUBOS 10ML

-Los tubos de 10ml los cuales los 3 fueron positivo en la prueba de presuntiva,
se les confirmo en dos tubos de caldo brilla y el resultado fue: 2 confirmatorias.

TUBOS 1ML

-Los tubos de 1ml los cuales 2 fueron positivos en la prueba presuntiva se les
confirmo en 1 tubo de caldo brilla .Resultado: 1 tubo confirmatorio.

TUBOS 0,1ML

-Los tubos de 0,1 ml los cuales 2 fueron positivos en la prueba presuntiva se les
confirmo en dos tubos de caldo brilla. Resultado: 1 tubo confirmatoria.

RESULTADOS FINALES: 2 - 1 -1
 Anlisis Microorganismo Mtodo Caractersticas Dilucin N de resultados
macroscpicas tubos
Recuento coliformes Siembra de Presencia de 10ml 3 2
de tubos gas en tubos
mltiples campanas de
coliformes Durham
totales Presencia de 1ml 3 1
gas en tubos
campanas de
Durham
Presencia de 0,1ml 3 1
gas en tubos
campana de
Durham
Cuadron1 resultados obtenidos en laboratorio.

En la tabla encontramos las 2-1-1 y tiene 20 nmp/100ml.

Interpretacin: Como observamos en el cuadro 2-1-1- de los tubos positivos, con
un 95% de lmite de confianza nos da en bajo de 0,07 y el alto de 0,89 son los
valores obtenidos.

DISCUSION

Segn los resultados obtenidos de 2-1-1 y con un 95% de confianza podremos

afirmar segn la tabla de NMP se puede afirmar que estn dentro los parmetros
permisibles, ya que una contaminacin en agua para consumo humano deben
estar con tolerancias permitidas segn las normas tcnicas se separa el agua
potable del agua para otros fines. Las entidades encargadas de la pureza del agua
como por ejemplo el instituto nacional de tecnologa del agua de Mxico menciona
que la calidad del agua debe cumplir con los parmetros permisibles, as en su
manual n7determinacin de coliformes totales primera edicin del 1991 da las
pautas para que se determine si el agua est libre de microorganismos que no
afecten a las personas a su consumo.
 REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

-ANALISIS MICROBIOLOGICO DEL AGUA (2005) Obtenido el 07 de febrero de

2008.

-ANALISIS MICROBIOLOGICOS (2004) Obtenido el 07 de febrero de 2008 .

-FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS (1989). Medios de Cultivo en

Microbiologa: Manual de Laboratorio. Editora Tricelm S.A. 3 Edic. Lima.-

-FUENTES, A. F. y otros (2005). Calidad Sanitaria de Alimentos Disponibles al

Pblico de la Ciudad de Sonora, Mxico. Revista Salud Pblica y Nutricin. Vol.6
N 3. Obtenido el 01 de febrero de 2008

-L. ORTIZ, M. (2003) Material didctico de Microbiologa de Alimentos: Recuento

de entero bacterias. Obtenido el 01 de febrero de 2008 .

-- WALTER J. WEBER, JR, W. J. WEBER, JACK A. 2003.Control de la calidad del

Agua/ Water Quality control: Procesos fisicoqumicos. Editorial Revert. 684
pginas.

Pgina web:

- https://www.ircwash.org/sites/default/files/245.11-91AD-9090.pdf.