PRACTICA N1: MANEJO Y DESCRIPCION DEL

MICROSCOPIO COMPUESTO
I. OBJETIVOS
Reconocer y describir las distintas partes del microscopio
compuesto, agrupndolos en parte mecnica y parte ptica.
Realizar la demostracin de la inversin de la imagen usando
el microscopio compuesto.
II. INTRODUCCIN:
El estudio de los organismos vivos requiere de aparatos de precisin como lo es el
microscopio.
MICROSCOPIO COMPUESTO.
Microscopio compuesto: est constituido por la combinacin de dos sistemas de lentes
convergentes: uno, prximo al ojo del observador, el ocular, y otro prximo al objeto,
denominado objetivo.
Se llama as porque tiene los oculares y los objetivos los cuales sirven para ampliar la
imagen, la cual se observa invertida. Las muestras apropiadas para su observacin sern
aquellas que dejen pasar luz a travs de ellas. (Gomz Cern, 2007).
Un microscopio compuesto tiene ms de una lente objetiva. Los microscopios compuestos
se utilizan especialmente para examinar objetos transparentes, o cortados en lminas tan
finas que se transparentan. Se emplea para aumentar o ampliar las imgenes de objetos y
organismos no visibles a simple vista.

SISTEMA MECNICO DEL MICROSCOPIO

La parte mecnica del microscopio tambin se denomina montura y es de forma y

dimensiones muy variables, dependiendo del fabricante y el precio del instrumento.

De manera general se describen modelos grandes, medianos y pequeos o porttiles. Los

modelos grandes poseen todos los aditamentos que garantizan un trabajo profesional y
permiten el intercambio de piezas y accesorios para realizar los trabajos ms variados y su
costo es el ms elevado. Los modelos medianos no convienen a todo tipo de investigacin
pero son ms prcticos puesto que su precio es menor gracias a su construccin ms
simple. Los microscopios porttiles responden a necesidades ms restringidas y producen
aumentos menores, conviniendo para observaciones someras.

Toda montura, por complicada que sea posee los siguientes elementos: pie o base,
mecanismo de enfoque, la platina, el revlver y el tubo del ocular.

- Pie o base

Generalmente en herradura o en Y, aunque tambin puede ser rectangular, con un peso

considerable que garantiza la estabilidad del instrumento. La base aloja la fuente de
iluminacin y puede contener un mecanismo para regular la intensidad luminosa.
Sirve de soporte a una columna o brazo sobre el cual reposa el resto del aparato. La
columna puede ser inclinada; en su parte ms inferior se dispone el condensador y la parte
superior posee una cremallera que permite desplazar en sentido vertical el condensador, la
platina o el revlver y el tubo. Las ventajas que procura el microscopio inclinado son
mltiples y la posicin es ms confortable para el observador (actividad que es muy
incmoda cuando el tubo del microscopio es vertical).

-Mecanismo de enfoque

Se logra desplazando en sentido vertical ya sea la platina donde se coloca el espcimen o

ya sea el revlver donde estn colocados los objetivos, de modo que se pueda centrar el
punto focal del objetivo que se est utilizando es ese momento. Se logra mediante dos
mecanismos, primero uno rpido del tornillo macromtrico y segundo, otro lento del
tornillo micromtrico.

La cremallera que permite el movimiento rpido del tornillo macromtrico posee dientes que
se engranan y producen un movimiento tosco para lograr un enfoque aproximado. Se utiliza
para enfocar con los objetivos de poco aumento y para subirlos rpidamente con la finalidad
de colocar o retirar de la platina el preparado histolgico.

El tornillo micromtrico por el contrario posee una graduacin tal que cada divisin de la
rosca permite un movimiento vertical imperceptible en el orden de 0,001 mm. Esta
disposicin permite evaluar de manera aproximada el espesor de los objetos, considerando
el nmero de vueltas que realiza el tornillo al enfocar su parte ms superficial y luego la
ms profunda.

El movimiento del tornillo micromtrico tiene una extensin de 5mm aproximadamente y

est limitado. Permite un enfoque fino y se utiliza con los objetivos de mayor aumento
(Langueron, 1949).

-La platina

Es el soporte horizontal donde se colocan las preparaciones histolgicas. Presenta en el

centro un orificio circular por donde pasa el rayo de luz producido por la fuente luminosa y
proveniente del condensador. Generalmente es de forma cuadrada y posee un sistema de
fijacin e inmovilizacin de la lmina porta-objeto compuesto por pinzas o una pieza
articulada que esta fija a otro dispositivo, el carro.

Este dispositivo permite el examen metdico y completo de la preparacin al proporcionar

un desplazamiento hacia adelante o hacia atrs y de derecha a izquierda y viceversa.

Otra pieza, el vernier (denominado as gracias al nombre de su inventor en 1631), tambin

llamado nonius, consiste en dos pequeas reglas graduadas en milmetros cuya finalidad
es la de obtener coordenadas aproximadas que sirven de referencia para localizar una
estructura determinada en la preparacin. En la prctica, el uso del vernier no es frecuente,
se hace un poco complicado anotar las cifras y ms difcil an colocarlas en las reglas y
localizar la estructura en cuestin. Adems, estas cifras solo son vlidas para el microscopio
en el cual se obtuvieron. Hay otros procedimientos ms simples para tal fin (Abramowitz,
2003).
El revlver: Considerado como un accesorio del tubo. Es un implemento muy importante
que permite el intercambio rpido de objetivos mediante un movimiento de rotacin. El
revlver est constituido por una semiesfera que posee una serie de anillos en los cuales
van atornillados los objetivos. Esta pieza gira alrededor de un eje que est colocado en la
parte inferior del tubo. Puede ser de diversas formas y de igual manera, alojar un nmero
variable de objetivos (dos, tres, cuatro o ms).

El tubo ptico

Soporta la porcin ptica del microscopio. Es un cilindro hueco de longitud variable, cuyo
interior est pintado de negro mate y posee un diafragma para impedir la formacin de
reflejos y facilitar la observacin. El tubo puede ser doble y alojar dos lentes oculares
(microscopio binocular). En los modelos de microscopios grandes destinados a la
microfotografa, hay un tercer tubo accesorio, generalmente ms largo y vertical que sirve
para conectar una cmara fotogrfica sin necesidad de lente ocular (Langueron, 1949).

SISTEMA PTICO DEL MICROSCOPIO

Los microscopios modernos estn diseados para proporcionar imgenes aumentadas y

ntidas de los especmenes que se observan. Los componentes pticos estn colocados en
una base estable que permite un intercambio rpido y un alineamiento preciso. El sistema
ptico est constituido por dos juegos de lentes: El objetivo y el ocular.

-Los objetivos

Representan el componente ptico ms importante del microscopio. Su principal funcin

consiste en colectar la luz proveniente del espcimen y proyectar una imagen ntida, real,
invertida y aumentada hacia el cuerpo del microscopio.

Constituyen un sistema ptico formado por una o varias lentes, las cuales deben estar
centradas y los ejes pticos de cada una deben coincidir exactamente para formar el eje
ptico del sistema. Sus lentes estn hechas a partir de cristales (espatos, fluorita, entre
otros) con un alto grado de calidad y funcionamiento; su precio depende del poder de
aumento, resolucin y de la correccin de las aberraciones. Muchos fabricantes elaboran
objetivos que pueden ser intercambiados y empleados en microscopios de otras marcas
comerciales.

Clasificacin:
Tomando en cuenta el grado de correccin de las aberraciones hay dos categoras de
objetivos para el microscopio, los objetivos acromticos y los objetivos apocromticos. En
cada categora se distinguen an dos grupos, los objetivos secos y los objetivos de
inmersin (Abramowitz, 2003, Olympus Microscopy Resource Center, 2007)

Objetivos acromticos: Presentan correccin cromtica para la luz azul y roja. Correccin
de esfericidad para el verde. Dan mejores resultados con filtro de luz de color verde y son
ideales para microfotografa blanco y negro. Se asume que un objetivo es acromtico
cuando no posee ninguna denominacin.
 Objetivos semi-apocromticos: Elaborados a partir de cristales de fluorita. Corrigen para
el azul, el rojo y en cierto grado para el verde. La correccin de esfericidad es para dos
colores, el verde y el azul. Dan buenos resultados con luz blanca y estn mejor diseados
para la microfotografa en colores.

Objetivos apocromticos: Poseen el ms alto nivel de correccin de aberraciones y por

ello, son ms costosos. Presentan correccin cromtica para cuatro colores (azul oscuro,
azul, rojo y verde); correccin de esfericidad para dos o tres colores. Son los mejores
objetivos para microfotografa y video a color. Debido a su alto grado de correccin, estos
objetivos poseen mayores aperturas numricas que los acromticos y las fluoritas. Esto
puede ser un inconveniente puesto que el campo de observacin se presenta un poco
curvo.

Los tres tipos de objetivos proyectan imgenes con cierta distorsin que se manifiesta como
curvaturas y al ser corregidos para este defecto se denominan plan-acromticos, plan-
fluoritas o plan-apocromticos.

Objetivos secos y objetivos de inmersin:

Estos objetivos difieren entre s por la naturaleza del medio interpuesto entre el cubre-objeto
de la lmina histolgica y la lente frontal del objetivo. En los objetivos secos el medio
interpuesto es el aire cuyo ndice de refraccin (n=1) es muy diferente del ndice del vidrio
porta y cubre-objeto (n=1,5). Por el contrario, en los objetivos denominados de inmersin el
medio que separa al cubre-objeto de la lente frontal del objetivo es un lquido cuyo ndice
de refraccin es lo ms prximo al del vidrio. Este lquido puede ser agua destilada (n=1,33)
o mejor an aceite de cedro, que posee un ndice de refraccin (n=1,515) casi idntico al
del vidrio.

La ventaja de los objetivos de inmersin consiste en la disminucin o eliminacin de la

refraccin de los rayos luminosos entre el aire y el objetivo, en consecuencia la luminosidad
de la imagen est aumentada, mientras que en los objetivos secos, est disminuida. El
empleo de la inmersin aumenta el ngulo de apertura del objetivo y permite mayor
resolucin gracias a la captura de una mayor cantidad de rayos luminosos refractados
(Langueron, 1949, Abramowitz, 2003) y solo puede utilizarse con objetivos de mayor
aumento.

-El ocular

El ocular (del latn oculus = el ojo) est formado por lentes que generalmente son separadas
por un diafragma, montadas en las extremidades de un cilindro que va introducido en la
parte superior del tubo. El ocular sirve para observar la imagen real e invertida que produce
el objetivo, ejerciendo dos funciones:

Aumenta la imagen y la transforma en una imagen virtual, derecha con respecto a la

imagen del objetivo, pero aun invertida, con respecto al objeto. Posteriormente el ojo
endereza la imagen.

Aplana y aclara el campo ptico o plano circular en el que aparece el objeto.

La lente superior se denomina lente ocular y es la que produce el aumento de la imagen
real del objetivo; la lente inferior tambin se denomina colectora y es la que aplana y aclara
el campo.

FORMACIN DE LA IMAGEN EN EL MICROSCOPIO COMPUESTO

Con la finalidad de facilitar la comprensin de la propiedad de aumento que tienen las lentes
y en consecuencia el microscopio para observar objetos minsculos, es necesario conocer
algunos aspectos del fenmeno de la visin. El ojo humano est constituido de tal manera
que slo puede tener una visin clara cuando los rayos luminosos incidentes son paralelos
o ligeramente divergentes, debido a que la retina requiere la participacin del cristalino para
enfocar los rayos en su superficie.

El lmite para visin cercana es la mnima distancia a la cual se puede observar claramente
un objeto; varia de un individuo a otro y se estima entre 15 y 25 cm (6 y 10 pulgadas
respectivamente), depende de la edad y otros factores. El valor considerado normal es de
25 cm. El tamao aparente de un objeto depende del ngulo formado por dos lneas
proyectadas desde el centro del ojo a las extremidades de dicho objeto.

Este ngulo as formado se conoce como ngulo de visin o ngulo visual (Hogg, 1856). La
utilidad de una lente convexa interpuesta entre el ojo y un objeto cercano consiste en la
reduccin de la divergencia de los rayos luminosos emanados del objeto, de manera que
puedan entrar al ojo en un estado de moderada divergencia, como si emanaran de un objeto
situado ms all del lmite de visin cercana y en consecuencia se forma la imagen en la
retina.

Esos rayos luminosos emanados del objeto cercano y desviados por la lente son recibidos
por el ojo como si fuesen emanados directamente por una flecha (objeto) ms grande,
aparentemente situada en el lmite de visin cercana del observador (aprox. 25 cm del ojo).
La diferencia de tamao entre la flecha real y la flecha imaginaria estar determinada por
el poder de aumento de la lente (Spitta, 1920). La imagen formada no es real, no puede ser
proyectada en una pantalla o recogida en una placa fotogrfica; es una imagen mental. Por
esta razn la imagen se denomina virtual y la distancia desde la lente hasta la imagen
formada se denomina distancia focal virtual (Carpenter, 1901)

Al interponer una lente bi-convexa entre un objeto y el ojo se incrementa el ngulo de visin
y en consecuencia el objeto se ver ms grande.

Lo que se conoce sobre las propiedades de las lentes permitir comprender el principio del
microscopio compuesto, denominado as, en oposicin a la lupa (microscopio simple) en
base a que est conformado por dos sistemas de lentes, los cuales deben estar centrados,
es decir, tener el mismo eje ptico. El primer sistema, cercano al objeto en estudio, se
denomina objetivo, posee una distancia focal muy corta y es posible colocar el objeto un
poco ms all de su punto focal para obtener una imagen real, invertida y aumentada.

El sistema de lentes a travs del cual el observador examina se denomina ocular y funciona
como una lupa que aumenta la imagen real producida por el objetivo. La distancia entre el
ocular y el objetivo debe ser calculada de manera que la imagen real obtenida por el objetivo
se forme entre el ocular y su punto focal (Langueron, 1949). El aumento del microscopio
depender en principio de la longitud focal del objetivo. Mientras ms pequea sea esta
longitud y el objeto se acerque al objetivo, ms grande ser la imagen real. El aumento
tambin depende de la distancia focal del ocular y mientras ms corta sea esta, mayor ser
el aumento.

Formacin de la imagen en el microscopio compuesto (Flores, 2014)

MICROSCOPIO UTILIZADO EN LA PRCTICA

MICROSCOPIO CX21

El CX21 es un paso adelante en la microscopa educativa para aplicaciones biolgicas. Es

un microscopio slido, de fcil uso y gran fiabilidad, til para usos educativos usuales.

CARACTERSTICAS Y BENEFICIOS

- Los objetivos de plano acromtico corregidos al infinito ofrecen una uniformidad

excepcional y proporcionan imgenes claras y ntidas hasta los bordes del campo
visual (4x, 10x, 40x y 100x aceite)
- Hay dos juegos econmicos para instituciones educativas (Juego 1: objetivos 4x,
10x y 40x; Juego 2: objetivos 4x, 10x, 40x y 100x)
- Oculares de nmero de campo (F.N.) 18
- El tratamiento antimictico ayuda a proteger los componentes pticos incluso en
condiciones de trabajo de alta humedad
- Portaobjetivos cudruple giratorio de movimiento ultrasuave
- Condensador N.A. 1.25 Abbe fijo, con una posicin de detencin de apertura para
cada objetivo marcada con claridad en el condensador, lo que mejora el contraste
de las imgenes
- Un foco halgeno de 6V/20W que produce una iluminacin clara y estable. Una lente
colectora casi esfrica que proporciona imgenes claras e iluminadas de manera
uniforme en todo el campo visual.
- Un diseo compacto que permite transportarlo con facilidad y guardarlo en un
armario de aula
- Platina derecha integral sin cremallera y con controles X e Y en la parte inferior
- A prueba de estudiantes: los oculares, los objetivos y el condensador estn
conectados al cuerpo del microscopio para que ningn componente se caiga o se
desprenda al transportarlo o utilizarlo (Olympus Microscopy Resource Center, 2007)
 DIMENSIONES

Dimensiones del microscopio OLYMPUS CX21

III. MATERIALES Y METODOS :

Materiales/ equipos

1 Microscopio ptico compuesto.

2 lminas porta objeto.

Un pequeo pedazo de papel de cuaderno

Mtodo aplicado en la prctica

1. Observar externamente los valores numricos de cada objetivo: 4x/0.10, 10x/0.25,

40x/0.65 y 100x/1.25.

2. Ubicar la lmina porta-objeto en el microscopio para observar la imagen i.

3. Observarlo al aumento de 4x/0.10.

IV. RESULTADOS:

MUESTRA:--------------------

OBSERVACIN: Letra i

PREPARADO: En fresco

COLORACION:---------------------

AUMENTOS TOTALES: 10x X 4x= 40x

Figura N1: Observacin al microscopio compuesto (Olympus Cx 21) de la letra i

para determinar el fenmeno ptico producido

MUESTRA:--------------------

OBSERVACIN: flecha hacia la izquierda

PREPARADO: En fresco

COLORACION:---------------------

AUMENTOS TOTALES: 10x X 4x= 40x

Figura N2: Observacin al microscopio compuesto (Olympus Cx 21) de la flecha

para determinar el fenmeno ptico producido
 V. CONCLUSIONES

Se determin que al observar un objeto al microscopio se produce un fenmeno

fsico de inversin de imagen.

Cada lente hace converger los rayos luminosos que la atraviesan. Una de ellas,
llamada objetivo, se sita cerca del objeto que se quiere estudiar. El objetivo forma
una imagen real aumentada e invertida. Se dice que la imagen es real porque los
rayos luminosos pasan realmente por el lugar de la imagen. La imagen es
observada por la segunda lente, llamada ocular, que acta como una lupa. El ocular
est situado de modo que no forma una segunda imagen real, sino que hace divergir
los rayos luminosos, que al entrar en el ojo del observador, parecen venir de una
gran imagen invertida situada ms all del objetivo. Como los rayos luminosos no
pasan realmente por ese lugar, se dice que la imagen es virtual.

VI. BIBLIOGRAFA
Abramowitz, M. (2003). Microscope, Basis and Beyond Series. Vol 1. New York: Olympus
America Inc.

Carpenter, W. (1901). The Microscope an its Revelations. (8ed.). London: J & A.

Churchill.

Flores, D. (06 de 12 de 2014). Laboratorista Quimico. Obtenido de

http://danielafloreslaboratoristas.blogspot.pe/2014/12/microscopia-descripcion-del-
microscopio.html

Gomz Cern, H. (22 de 08 de 2007). Obtenido de bios:

http://benitobios.blogspot.pe/2007/08/manejo-del-microscopio.html

Hogg, J. (1856). The Microscope: Its History, Construction and Applications. Being a
familiar Introduction to the use of the instrument and the study of microscopical
science. (2ed.). London: Hebert Ingram and Co.

Langueron, M. (1949). Prcis de Microscopie. Paris: Masson et Cie. diteurs.

Olympus Microscopy Resource Center. (02 de 12 de 2007). Obtenido de

http://www.olympusmicro.com/primer/anatomy/ergonomics/ergointro.html

Spitta, E. (1920). Microscopy. The construction, theory and use of the microscope (3 ed.).
London: Jhon Murray.