Cromatografa de Aminoacidos

1 AUTORES
Morales Huaraja Eduardo
Olave Lazo Gabriel Martn
Salcedo Portugal Eduardo

2 INTRODUCCION
La cromatografa en capa fina (CCF) es una tcnica cromatogrfica que utiliza una placa inmersa verticalmente. Esta placa
cromatogrfica consiste en una fase estacionaria polar (comnmente se utiliza slica gel) adherida a una superficie slida.1 La
fase estacionaria es una capa uniforme de un absorbente mantenido sobre una placa, la cual puede ser de vidrio, aluminio u
otro soporte.

Est tcnica deriva de los trabajos del farmacutico alemn Egon Stahl (1924-1986), que la present en 1956.

3 OBJETIVOS
Comprender los principios bsicos de la cromatografa como herramienta til en la identificacin y separacin de
compuestos.
Separar e identificar los aminocidos presentes en una muestra.
Conocer la importancia de la nihidrina en la dactiloscopia.
Enfatizar en el proceso enseanza-aprendizaje valores de puntualidad, responsabilidad, cooperacin y perseverancia.

4 MARCO TERICO

La cromatografa en capa fina (CFC) es un tipo de Cromatografa de Reparto, en donde los componentes de una mezcla
se separan en base a una distribucin diferente entre la fase mvil y la fase estacionaria. El movimiento relativo de las
molculas a lo largo del sistema cromatogrfico es el resultado de un equilibrio entre las fuerzas de transmisin o
arrastre ejercido por la fase mvil en su desplazamiento sobre la fase estacionaria y las fuerzas que tienden a frenar
dicho desplazamiento. Las fuerzas de frenado pueden ser tanto de reparto (basado en criterios de solubilidad) como de
adsorcin. La teora de la cromatografa de reparto se basa en que, en general, si dos fases inmiscibles se encuentran
en contacto una con otra y si una de las dos fases contiene un soluto, ste se distribuir entre ambas de acuerdo con sus
solubilidades relativas. Dicho fenmeno se denomina reparto. En la cromatografa de reparto se suelen utilizar diversos
materiales como soportes: almidn, celulosa, gel de slice, xido de aluminio, etctera. Aunque en teora se consideran
inertes, pueden generar diferentes procesos de adsorcin, por lo que la separacin ocurrir tambin, en parte, debido a la
interaccin entre las molculas a separar con dicho soporte, la cual actuara como fuerza de frenado. Tanto la cromatografa
en papel como su anloga en capa fina estn comprendidas en la descripcin de Cromatografa en Dos Dimensiones,
debido a las dos dimensiones espaciales que son el ancho y el largo que son caractersticas de una Cromatografa en Plano.

5 METODOLOGA
5.1 Materiales:
Reactivos:

Solucin de aminocidos 0.1M

Solucin de nihidrina (al 2% en acetona)
Etanol
cido actico

Material de vidrio:

Beakers 250 mL
Capilares
Pipetas de 1 y 10 mL
Placas Petri

Otros:

Placas de TLC

Equipos:

Cocinilla elctrica

5.2 Procedimiento detallado:

Obtener una placa de TLC, evitando tocar la superficie.

Trazar dos lneas a 0.5 cm del borde inferior y superior, marcando en el primero tres cruces.
Sembrar la muestra de cada aminocido en cada marca, usando el capilar.
Dejar secar la placa y aadir el solvente, usando un beaker del tamao adecuado
Cuando el solvente est por llegar a la parte superior, sacar el criptograma
Dejar evaporar
Aplicar el revelador de nihidrina, dejarlo secar y calentar en una cocina elctrica
Marcar el centro de cada aminocido
Calcular el factor de retencin para cada aminocido

6 RESULTADOS Y DISCUSIN
Se observa los siguientes resultados:

Distancia recorrida por el solvente: 4 cm

Distancia recorrida por los aminocidos:

Glicina 1.9 cm
Metionina 3.7 cm
Arginina 0.5 cm
Sol. Problema 3.3 cm

Factor de Retencin:

Glicina : 0.5 (polar)

Metionina: 0.9 (apolar)
Arginina: 0.1 (polar)
Sol. Problema: 0.8 (apolar)
7 CONCLUSIN
Se lleg a la conclusin de que los aminocidos Glicina y Arginina nos polares, mientras que la metionina y la Solucin
Problema, son apolares.

Se debe recordar de tener cuidado al manejar los materiales, ya que la placa de TLC es muy sensible y es muy fcil daarla, ya
sea con las huellas de los dedos o con algn compuesto; y los resultados no sern los mismos.

8 CUESTIONARIO

Cul es el rol del adsorbente en la TLC?

- Es el de poder mostrarnos la longitud a la que puede llegar a expandirse una muestra.

Qu papel juega el solvente en la elusion del cromatograma?

- El solvente ayuda al aminocido a expandirse, mientras este va ascendiendo.

Cal es el proposito del revelador en la cromatografia en capa fina?

- Como dice su nombre, revela hasta hasta donde alcanzo la expansin de la muestra y el camino que realizo, formando
una barra.

Qu otros materiales o sustancias pueden ser detectados por TLC?

-Para compuestos orgnicos.

En qu consiste la dactiloscopa?

-Es un sistema de identificacin, utilizando una comparacion de huellas digitales, que pueden ser obtenidas en el TLC, ya
que este es sensible a la presion.

Qu metodos suelen ser usados para hacer visibles las huellas dactilares?

- Para revelar una huella latente, se utilizan reactivos de gran adherencia a la humedad (hidroscpicos), como el carbonato
de plomo (polvo color blanco)y el negro de humo (polvo color negro), los que se utilizan en contraste con el color del
soporte.

Cul es el fundamento de la reaccin con nihidrina?

- El tomo de carbono de un carbonilo tiene una carga positiva parcial, por lo que el C central de de un 1,2,3-tricarbonilo es
menos estable y ms electroflico que una cetona simple. En la mayora de los compuestos, un carbonilo es ms estable
que la forma dihidroxi (hidrato). Sin embargo, la ninhidrina es un hidrato de carbono estable del C central porque esta
forma no tiene el efecto desestabilizador de los centros adyacentes de carbonilo parciales positivos. El indano-1 ,2,3 -
triona reacciona rpidamente con nuclefilos.
9 ANEXOS