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EVALUACIN DE DIFERENTES CEPAS DE MICORRIZAS ARBUSCULARES EN EL DESARROLLO DE

PLANTAS DE ARROZ (Oryza sativa L.) EN CONDICIONES INUNDADAS DEL SUELO

RESUMEN. Los hongos micorrzico arbusculares estn representados en todos los suelos y
colonizan a ms del 80 % de las plantas terrestres. Su asociacin depende de muchos factores
edafoclimticos, de la planta y del hongo. En el cultivo de arroz se inform simbiosis micorrzica en
condiciones de anaerobiosis. Es por ello que la investigacin se realiz con el objetivo de evaluar la
respuesta en plantas de arroz inoculadas con diferentes cepas de hongos micorrzicas arbusculares
(Claroideoglomus claroideum,Glomus cubense, Rhizoglomus intraradices y Funneliformis
mosseae) en condiciones inundadas del suelo Hidromrfico Gley Nodular Ferruginoso Petrofrrico,
con una lmina de agua 5 cm, en la Unidad Cientfica Tecnolgica de Base Los Palacios. Los
resultados obtenidos demuestran que el arroz se coloniza, aunque con porcentajes bajos, debido a
la presencia de la lmina de agua, la cual afecta el establecimiento del hongo en la planta. En
cuanto a la altura, el ahijamiento, masa seca de la parte area y de las races en las plantas de
arroz se incrementaron cuando se inocularon con las diferentes cepas respecto al testigo no
inoculado, observndose una eficiencia simbitica superior en funcin del ahijamiento y la masa
seca de la parte area con las cepas R. intraradices, G. cubense y C. claroideum, aunque siempre
las cepas R. intraradices y G. cubense estuvieron entre las cepas de inculos de HMA que
manifestaron mayor efecto en el desarrollo de las plantas. Estos resultados sugieran el uso de
estas cepas en la produccin de biofertilizantes para el cultivo del arroz.

INTRODUCCIN Es de gran importancia la reduccin del consumo de agua, debido a la alta


necesidad que tiene el cultivo del arroz en comparacin otros cultivos. A nivel mundial, el monto
anual de recursos hdricos para la agricultura est disminuyendo a causa de la creciente
competencia del desarrollo industrial y urbano (1). El cultivo del arroz se enfrenta a los retos del
calentamiento global, la escasez de agua y otros factores limitan la capacidad de los agricultores
para cultivarlo en condiciones inundadas. En Cuba se ha tenido que reducir las reas de siembra
por no contar con suficiente agua en los embalseA. A pesar de la baja disponibilidad de agua que
existe y se avecina el futuro, se contina sembrando arroz bajo riego, o sea con una lmina de
agua, esta condicin de anaerobiosis afecta la asociacin micorrzica. Sin embargo, se inform
simbiosis micorrzica en condiciones de anaerobiosis para el cultivo del arroz inundado por
diferentes autores (2); no obstante, se desconoce la respuesta de esta asociacin con la
inoculacin de diferentes cepas de HMA. Recientemente, informaron que la colonizacin
micorrzica en plantas de arroz contribuye a su adaptacin a condiciones de anaerobiosis y
aerobiosis, as como a los cambios de una condicin a la otra. Tambin, detectaron la expresin de
transportadores de fosfato y amonio considerados marcadores de la funcionalidad de la simbiosis,
aun cuando los porcentajes de colonizacin micorrzica eran bajos (entre 8 y 25 %) dadas las
condiciones de anaerobiosis (3). Estos resultados evidenciaron la funcionalidad de la simbiosis
micorrzica, adems de que la anaerobiosis entre otras causas, provocan bajos porcentajes de
colonizacin y dificultan la sealizacin planta hongo. Es importancia destacar que, el ambiente
edfico es determinante en la seleccin de cepas eficientes, debido a que este influye en la
efectividad simbitica y en el suministro de nutrientes para la planta. En la actualidad es una
prioridad lograr una eficiencia mayor en la inoculacin de estos microorganismos en los sistemas
de produccin. Por otra parte, se inform que existe una alta especificidad suelo-cepa, no planta-
cepa (4); aunque, se ha encontrado diferencias cuando se inoculan distintas cepas en un mismo
cultivo y suelo (5, 6), comportamiento que nos hace pensar que an no existe un panorama claro
de las causas y condiciones que inducen las diferencias y ms an en el cultivo el arroz en
condiciones inundadas. Michel Ruiz Snchez, Yaumara Muoz Hernndez, Jos M. DellAmico
Rodrguez, Jaime Sim Gonzlez y Juan A. Cabrera Rodrguez A Gonzales, T. Entorno de la
produccin de granos a nivel mundial y nacional, retos y perspectivas. En: VI Encuentro
ECOARROZ, Ed. Instituto de Investigaciones de grano, 2013. A partir de lo anteriormente, esta
investigacin tuvo como objetivo, evaluar la respuesta en plantas de arroz inoculadas con
diferentes cepas de hongos micorrzicas arbusculares (HMA) en condiciones inundadas del suelo
Hidromrfico Gley Nodular Ferruginoso Petrofrrico de Los Palacios, Pinar del Ro, Cuba.

ASPECTOS BSICOS DE LA FIJACIN DE NITRGENO ATMOSFRICO POR PARTE DE BACTERIAS.


ESTUDIO EN EL LABORATORIO DE EDUCACIN SECUNDARIA

Se define el suelo como la capa de viva de transformacin de la corteza slido terrestre, formada
bajo el influjo de la vida y de las especiales caractersticas que determinan un hbitat biolgico,
sometido a un cambio estacional permanente y a un desarrollo caracterstico (Kubiena 1952). Es
decir, la zona de interfase entre la geosfera-hidrosfera y la atmsfera que permite la vida vegetal y
microbiana, as como sustentar la base de las complejas redes trficas (de productores a
consumidores); un hbitat particular donde suceden transformaciones biogeoqumicas, flujo de
materia y energa par el sostn de la vida. Los microorganismos, entre otro seres vivos,
contribuyen a sustentar la presencia y desarrollo de las plantas. stas toman del suelo el agua y las
sales minerales como fuente primaria para la fotosntesis. Entre las sales minerales encontramos
los cationes potasio, calcio y magnesio, los aniones sulfato, cloruro y nitrato, entre otros. El
nitrgeno que se incorpora a la materia orgnica va nitrato es indispensable para la constitucin
proteica, siendo la base de las subunidades que la constituyen, los aminocidos (Lpez y Boronat
2013). Desde tiempos ancestrales, cuando el hombre fue capaz de domesticar y trabajar la tierra,
introdujo el abonado del suelo con los restos vegetales y las sobras animales, provocando la
multiplicacin en la recoleccin de los productos derivados de las cosechas. La accin microbiana
sobre los restos orgnicos provocaba la mineralizacin del suelo, es decir, la liberacin de las sales
minerales contenidas en la materia viva. No obstante, esta costosa y lenta liberacin de los
compuestos inorgnicos qued desfasada como consecuencia de un aumento en las prcticas
agrcolas (figura 1), la llamada Revolucin Verde (mitad del siglo XX), necesitando los nuevos
cultivos de la produccin de los nutrientes minerales en gran cantidad va sntesis qumica
artificial. Entre la sntesis agrcola ms apreciada destaca la produccin de amonaco, base de la
formacin de nitrato, amonio y del resto de abonos qumicos, mediante la reaccin de Haber-
Bosch: N2 + 3H2 2NH3 (un mol de nitrgeno gaseoso reacciona con tres moles de hidrgeno
gaseoso para dar lugar a dos moles de amonaco gas). Esta reaccin qumica requiere de altsimas
temperaturas (400 - 500 C) y presiones de los gases reaccionantes (200 atmsferas) para lograr el
producto final, con el consiguiente gasto energtico derivado (Christen 1977). El anlisis de la
reaccin por parte del alumnado deriva a cuestiones de cmo el nitrgeno puede pasar a formar
parte de la base mineral del suelo en un ambiente que carece del mismo y no dispone de la
tecnologa qumica implantada por el ser humano. El nitrgeno se encuentra en grandes
cantidades en la atmsfera, constituyendo el 78 % del total de la composicin de gases del aire.
Tan solo la accin de algunos grupos de bacterias y arqueas es capaz de fijar este gas e
incorporarlo al suelo (Nelson y Cox 2009). Entre estos grupos de seres vivos destacan las
cianobacterias, las arqueas productoras de metano, el gnero microbiano Azotobacter y otros
grupos bacterianos simbiontes de las races de las leguminosas, objeto de estudio del presente
trabajo (Madigan et al. 2004). La gran singularidad de la fijacin biolgica de nitrgeno, al
contrario de lo que ocurre con el procedimiento descrito por Haber, es un transcurso de la
reaccin a temperatura ambiente y a las presiones de los gases presentes en la atmsfera. Esta
reaccin bioqumica, de notable inters para la vida se consigue, al menos en parte, gracias a la
hidrlisis de la molcula energtica biolgica, el ATP. La reaccin biolgica que tiene lugar se
puede sintetizar de la siguiente manera (Nelson y Cox 2009):

N2 + 10H+ + 8e- + 16ATP 2NH4 + + 16ADP + 16 Pi + H2 .

En resumen, la activacin microbiolgica del nitrgeno atmosfrico genera amonaco, que se


ioniza al catin amonio, NH4 + , va hidrlisis de ATP y la transferencia de poder reductor acoplado
a una cadena de transporte electrnico.

INFLUENCIA DE LA APLICACIN DE AZOSPIRILLUM LIPOFERUM EN MEGATHYRSUS MAXIMUS VC.


GUINEA TOBIAT EN UN SUELO PARDO GRISCEO

Resumen: Durante dos aos se realiz un estudio en la Estacin Experimental de Suelos y


Fertilizantes Escambray (ubicada en la provincia de Cienfuegos, Cuba), con el fin de evaluar el
efecto de la aplicacin de diferentes dosis de Azospirillum lipoferum en Megathyrsus maximus vc.
guinea tobiat. Para ello se emple un diseo de bloques al azar, con siete tratamientos y tres
rplicas. Los tratamientos fueron: dosis de aplicacin del biofertilizante (L ha-1): 25, 50, 75, 100 y
125; un testigo con NPK en la siembra (45 kg ha-1 de nitrgeno en cortes alternos); y un control
absoluto. Las parcelas medan 16 m2 , con un rea evaluable de 9 m2 . La cepa de A. lipoferum
utilizada fue INICA-8, con una concentracin promedio de 108 ufc g-1 de semilla. Se realizaron
cuatro cortes por ao, con una frecuencia de 90 das, a una altura sobre el suelo de 25 cm, y en
cada corte se evalu el rendimiento de materia seca. La aplicacin de A. lipoferum tuvo una
influencia favorable en el establecimiento del pasto; el rendimiento acumulado fue de 27,91;
28.34; 30,17; 30,23 y 31,92 t de MS ha-1 para 25, 50, 75, l00 y 125 L ha-1, respectivamente, con
diferencia significativa del control. El mayor rendimiento de MS se encontr en el testigo
fertilizado (54,45 t de MS ha-1), que difiri significativamente del resto de los tratamientos. Se
concluye que este biopreparado puede ser una alternativa a la fertilizacin mineral.

INTRODUCCIN La agricultura, a nivel mundial, constituye una actividad fundamental para la


subsistencia de la poblacin humana. Diversos factores han conducido a un proceso de deterioro
de sus escasos recursos y a una creciente dificultad para renovarlos. El suelo como base de los
recursos y de la produccin se encuentra enmarcado en un ambiente complejo, heterogneo y
frgil, que evidencia una alta susceptibilidad a la erosin y una baja fertilidad natural, con efectos
sobre la produccin de los cultivos, la productividad del trabajo y la factibilidad del
establecimiento de sistemas productivos sustentables. La recuperacin y mantenimiento de la
fertilidad de los suelos sobre una base sostenible constituye un factor de gran importancia en el
desarrollo de la produccin agropecuaria mundial (Rueda-Puente et al., 2015). El objetivo de las
estrategias de manejo de los nutrientes es lograr en los cultivos la produccin requerida, de una
manera eficiente, econmica y sustentable. A nivel mundial existe consenso acerca de que la
agricultura basada en la dependencia exclusiva de insumos qumicos no es sustentable a largo
plazo, y que solo involucrando la combinacin de fertilizantes orgnicos, abonos verdes y
biofertilizantes ser posible lograr una produccin sostenible de alimentos, mantener la
biodiversidad del suelo y evitar la contaminacin del ambiente (Aguirre-Medina et al., 2010). Los
biofertilizantes se consideran una alternativa para sustituir parcial o totalmente los fertilizantes
minerales, y el empleo de bacterias que interaccionan con las plantas resulta una opcin viable en
muchos pases. En la actualidad se busca el desarrollo de biofertilizantes con el uso de bacterias
promotoras del crecimiento vegetal, en particular del gnero Azospirillum, el cual fija nitrgeno y
produce fitohormonas (Ferlini, 2008). La primera especie del gnero Azospirillum fue aislada por
Beijerinck en 1925, en Holanda, a partir de suelos pobres en nitrgeno, y se llam originalmente
Spirillum lipoferum. Desde entonces, se han aislado cepas de este gnero a partir de numerosas
especies de pastos silvestres y cultivados, de cereales y de leguminosas en climas tropicales y
subtropicales, segn informaron Rueda-Puente et al. (2015). Esta bacteria ha progresado en los
campos, dando lugar a una aplicacin cada vez mayor y exitosa en varias regiones del mundo,
especialmente en Amrica del Sur y Centroamrica (Hartmann y Bashan, 2009). En este estudio se
evalu la aplicacin de diferentes dosis de Azospirillum lipoferum en Megathyrsus maximus vc.
guinea tobiat, en condiciones de campo, como una opcin para mejorar el rendimiento de
materia seca de esta especie de pasto.

EFECTO DE LA INOCULACIN CON BRADYRHIZOBIUM SP. Y TRICHODERMA HARZIANUM EN


TRITICALE (X. TRITICOSECALE WITTMACK), EN CONDICIONES DE ESTRS POR SEQUA

Resumen: En la Estacin Experimental de Pastos y Forrajes Sancti Spritus, se llev a cabo un


experimento de campo en condiciones de estrs por sequa, para evaluar el efecto de la
inoculacin con una cepa de Bradyrhizobium sp. y con el hongo Trichoderma harzianum, en
triticale (X. Triticosecale Wittmack). El diseo experimental fue completamente al azar, con cuatro
rplicas y siete tratamientos. Se utiliz un testigo fertilizado con NH4 NO3 (150 kg N/ha), as como
un control absoluto y cinco tratamientos inoculados. Se evaluaron las variables peso seco areo,
peso seco de la raz, longitud del tallo, rendimiento de grano, peso de mil semillas y nmero de
granos por espiga. La aplicacin simple de Bradyrhizobium o en combinacin con Trichoderma, de
forma general, ejerci un efecto positivo en las plantas, y result superior a la aplicacin de
fertilizante qumico. Se observ, adems, que el desarrollo de la parte area y el rendimiento de
grano no estuvieron vinculados con la aplicacin de nitrgeno mineral, sino con la inoculacin. Se
recomienda realizar experimentos similares en diferentes tipos de suelo en la provincia Sancti
Spritus, en condiciones de estrs por sequa.

Introduccin Los microorganismos del suelo contribuyen con un amplio rango de servicios
esenciales a la sostenibilidad de todos los ecosistemas. Ellos actan como los principales agentes
impulsores del ciclo de nutrientes; regulan la dinmica de la materia orgnica del suelo, el
secuestro de carbono y la emisin de gases de invernadero; modifican la 20 Pastos y Forrajes, Vol.
39, No. 1, enero-marzo, 19-26, 2016 / Carlos J. Bcquer-Granados estructura fsica del suelo y el
rgimen de agua; y mejoran la eficiencia en la toma de nutrientes por las plantas (Singh et al.,
2011). Es conocido que la inoculacin de cereales con microorganismos promotores del
crecimiento vegetal conlleva el crecimiento de la planta y de su rendimiento (Andrews et al.,
2003). Existen antecedentes del efecto positivo de los rizobios y otras rizobacterias en cereales
pertenecientes al gnero Triticum (Bcquer et al., 2012a; Bcquer et al., 2012b; Bcquer et al.,
2012c). Por otra parte, se conoce que el estrs hdrico limita el crecimiento y la productividad de
los cultivos, especialmente en reas ridas y semiridas (Farooq et al., 2009; Yang et al., 2009). La
sequa es considerada como uno de los mayores desastres naturales del mundo, el ms frecuente
y persistente, el de mayor efecto negativo para la produccin agrcola, y tambin como la causante
de impactos adversos reales sobre el medioambiente (World Meteorological Organization, 1994).
Existen diversas formas de combatir la sequa, y entre las ms novedosas se encuentra la
utilizacin de inoculantes microbianos (Tikhonovich y Provorov, 2011). Se conoce que el efecto
positivo de los microorganismos del suelo no radica solo en su influencia en el crecimiento, ya que
estos tambin constituyen un factor relevante en la tolerancia de las plantas al estrs abitico,
como el causado por la sequa. Entre esas rizobacterias, los rizobios ocupan un lugar importante
(Uchiumi et al., 2004; Stiens et al., 2006). Otro microorganismo que influye positivamente en el
desarrollo de las plantas es el hongo filamentoso Trichoderma spp. Los mecanismos directos
relacionados con su efecto protector incluyen la competencia, la antibiosis y el micoparasitismo
(Howell, 1998). Estudios ms recientes indican la induccin de mecanismos de defensa en las
plantas por Trichoderma, as como su actividad promotora del crecimiento vegetal (Saber et al.,
2009; Shaban y El-Bramawy, 2011). Existen antecedentes del efecto positivo de Trichoderma
harzianum en trigo, al combinarse con rizobios (Bcquer et al., 2015). Por ello, el objetivo de este
estudio fue evaluar el efecto de la inoculacin de Bradyrhizobium y Trichoderma en triticale (X.
Triticosecale Wittmack) variedad INCA TT-77, en diferentes momentos, y en condiciones de estrs
por sequa agrcola.

Aislados de Bacillus provenientes de la rizsfera de


cactus incrementan la germinacin y la floracin
en Mammillaria spp. (Cactaceae)

Las cactceas son la vegetacin caracterstica de las zonas ridas en Mxico,


donde las lluvias son escasas, la evapotranspiracin es elevada y la fertilidad de
los suelos es baja. Las plantas han desarrollado estrategias fisiolgicas como la
asociacin con microorganismos en la zona de la rizsfera para incrementar la
captacin de nutrientes. En el presente trabajo se obtuvieron 4 aislados
bacterianos de la rizsfera de Mammillaria magnimamma y Coryphantha radians,
los que fueron nombrados como QAP3, QAP19, QAP22 y QAP24 e identificados
genticamente como pertenecientes al gnero Bacillus. Estos aislados
exhibieron in vitro propiedades bioqumicas como solubilizacin de fosfatos,
produccin de cido indolactico y actividad ACC deaminasa, que se relacionan
con la promocin del crecimiento de las plantas. Dicha promocin fue ensayada
inoculando semillas de M. magnimamma y evaluando luego algunos parmetros.
Se encontr que todos los aislados incrementaron la germinacin desde un 17%
hasta un 34,3% (con respecto a las semillas testigo sin inocular); el aislado QAP24
fue el que present el mayor efecto en este sentido y permiti la germinacin de
todas las semillas viables (84,7%) 3 das antes que en el testigo. La inoculacin de
este aislado en plantas de Mammillaria zeilmanniana mostr un efecto positivo
sobre la floracin: en 2 meses dentro del perodo de un ao se detect un
incremento en el nmero de plantas en floracin con respecto a las plantas testigo,
de hasta el 31,0% en uno de ellos. Se concluye que los aislados de Bacillus spp.
caracterizados poseen potencial para ser empleados en programas de
conservacin de especies vegetales de zonas ridas.

Introduccin
La mayora del territorio mexicano est constituido por zonas ridas y semiridas,
donde las lluvias son escasas y la evapotranspiracin supera la precipitacin, con
poca cobertura vegetal y condiciones que favorecen la erosin del suelo17. La
vegetacin caracterstica de estas zonas incluye la familia de las cactceas, de las
cuales se han reportado 669 especies, 518 de estas son endmicas19.
Los suelos en estos ecosistemas son poco frtiles debido al bajo contenido de
nitrgeno (N), fsforo (P) y materia orgnica, a menudo esto es un factor limitante
para el desarrollo de las plantas12. En este aspecto, las comunidades microbianas
de la rizsfera desempean un papel fundamental, ya que algunas poblaciones
pueden contribuir a la nutricin y el crecimiento de las plantas a travs de
actividades bioqumicas como la fijacin biolgica de nitrgeno, la solubilizacin de
fosfatos y la produccin de cido indolactico, una hormona que induce el
crecimiento de los pelos radicales14 ; 40. Los microorganismos que presentan estos
efectos sobre las plantas son definidos como promotores del crecimiento vegetal15;
entre los gneros bacterianos ms estudiados con esta actividad se
encuentran Azospirillum, Pseudomonas, Citrobacter y Bacillus. Algunas cepas de
estos microorganismos aisladas de la rizsfera de cultivos de cereales y hortalizas
ya han sido comercializadas. Estos mismos gneros tambin han sido descritos
como parte del nicho ecolgico de la rizsfera de diversas cactceas, entre
ellas Mammillaria fraileana, Opuntia ficus indica, Stenocereus pruinosus,
Stenocereus stellatus, Ferocactus acanthodes, Opuntia cholla y Pachycereus
pringlei 22; 24 ; 34. A la rizsfera de estas cactceas se les reconoce su potencial
biotecnolgico como fuente de aislados microbianos, los cuales podran ser
empleados en programas de reforestacin de zonas ridas o para la conservacin
de plantas endmicas que se ven amenazadas por actividades antropognicas o
por condiciones ambientales adversas, que afectan su reproduccin5.
En la localidad La Caada (municipio El marqus, estado de Quertaro, Mxico),
un anlisis florstico realizado por Cabrera y Gmez10 indica que la familia de las
cactceas es la segunda en nmero de especies y que en ella sobresalen los
gneros Coryphantha y Mammillaria, cuyas rizsferas pueden ser fuente de
aislados bacterianos con potencial como promotores del crecimiento vegetal.
En el presente trabajo se aislaron y caracterizaron bacterias de la rizsfera de las
cactceas Mammillaria magnimamma Haw. y Coryphantha radians (DC.) Britton &
Rose, para evaluar luego su efecto sobre la germinacin de semillas de M.
magnimamma. El aislado ms promisorio fue seleccionado para estudiar su
impacto sobre el crecimiento y la floracin de plantas de Mammillaria
zeilmanniana Boed.

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