Farmacopeia Brasileira, 5 edio 1229

DESCRIO MICROSCPICA
QUEBRA-PEDRA
Phyllanthus niruri herbae
Phyllanthus niruri L. PHYLLANTHACEAE
A droga vegetal constituda pelas partes areas secas de
Phyllanthus niruri e suas subespcies, Phyllanthus niruri
ssp. niruri L. e Phyllanthus niruri ssp. lathyroides (Kunth)
G.L. Webster, contendo, no mnimo, 6,5% de taninos totais
e 0,15% de cido glico.
CARACTERSTICAS
Caractersticas organolpticas. Droga inodora; sabor
amargo no incio da mastigao, tornando-se suave
posteriormente.
DESCRIO MACROSCPICA
Em seco transversal, o caule em desenvolvimento
secundrio exibe epiderme uniestratificada, com estmatos.
Subepidermicamente encontram-se uma ou mais
camadas de clulas colenquimticas com espessamento
angular, interrompidas somente nas regies das cmaras
subestomticas. Clornquima formado por duas a
quatro camadas de clulas isodiamtricas, com espaos
intercelulares evidentes ou no e com gros de amido.
Mais internamente, ocorrem uma ou mais camadas de
parnquima cortical, cujas clulas apresentam maior eixo
no sentido periclinal. O floema constitudo externamente
por agrupamentos de fibras de paredes muito espessas e
lume reduzido. Drusas de oxalato de clcio esto presentes
no clornquima, parnquima cortical, parnquima medular
e em maior abundncia no floema, sempre em clulas de
maior tamanho do que as demais, abrangendo quase todo o
volume da clula. Elementos de vaso, com disposio radial,
alternam-se com uma ou mais fileiras de fibras xilemticas
e clulas parenquimticas esclerificadas. O parnquima

q
medular constitudo por clulas isodiamtricas, de grande
Planta herbcea, glabra, com at 80 cm de altura, caules
volume, com grandes espaos intercelulares. Em caules de
simples ou ramificados, os principais delgados e sem
maior dimetro pode ocorrer periderme, seguida de duas a
folhas, com ramos ou rmulos laterais filiformes, estes
trs camadas clorenquimticas, com grande quantidade de
portando folhas. Folhas alternas, dsticas, simples,
gros de amido. O parnquima cortical mantm as mesmas
membranceas, glabras, oblongo-elpticas, de pice
caractersticas encontradas nos caules mais jovens. O floema
atenuado, s vezes mucronado e base assimtrica, margem
apresenta pequena quantidade de gros de amido, no se
lisa; lminas discolores, face adaxial de cor verde-oliva
observando diferenas quanto ao seu desenvolvimento,
e face abaxial verde-plida a cinza-plida. As folhas,
comparando-se caules jovens e mais desenvolvidos. O
quando observadas em conjunto, tm o aspecto de folhas
maior desenvolvimento do xilema, comparado ao dos
compostas de pequenas leguminosas. Lminas com 0,5 cm
ramos mais jovens, muito evidente, com consequente
a 1,4 cm de comprimento e 0,3 cm a 0,6 cm de largura.
reduo da rea ocupada pelo parnquima medular. Nos
Nervuras visveis, no proeminentes, com exceo da
raios parenquimticos, observa-se a presena de gros de
nervura principal na face abaxial. Venao broquiddroma.
amido e de compostos fenlicos. A folha geralmente
Pecolo de 0,05 cm a 0,1 cm de comprimento. Estpula
hipoestomtica. Raramente so encontrados estmatos
interpeciolar, triangular-lanceolada, de 0,1 cm a 0,2 cm
tambm na face adaxial, onde ocorrem sobre as nervuras
de comprimento, com pice longo e estreitamente agudo
de menor ordem. Os estmatos so do tipo paractico e,
a acicular, de base inteira e margem lisa. Flores femininas
menos frequentemente, anomoctico. Em vista frontal, as
com at 0,4 cm de dimetro, isoladas e axilares nos ns
clulas da epiderme da face adaxial mostram contornos
apicais, com cinco tpalas elpticas e disco inteiro, carnoso;
irregulares e paredes onduladas, podendo a ondulao
ovrio tricarpelar, trilocular, cada lculo bisprmico; trs
ser mais expressiva nessa face do que na face abaxial. As
estiletes, bfidos, com estigmas globosos; pedicelo com 0,1
ceras epicuticulares apresentam granulaes. A cutcula
cm a 0,4 cm de comprimento. Flores masculinas com at
fina, tornando-se mais espessa na nervura principal. A
0,3 cm de dimetro, em fascculos de uma a duas flores,
epiderme uniestratificada em ambas as faces e possui
dispostas nos ns basais, com cinco tpalas largo-ovaladas,
clulas fundamentais achatadas e algumas papilosas.
disco pentalobado, lobos carnosos e papilosos, e trs
As clulas fundamentais da face adaxial so de maiores
estames com filetes conatos na base; pedicelos com cerca
dimenses do que as da face abaxial. Ocorrem cristais nesta
de 0,2 cm de comprimento. Frutos esquizocrpicos, do
camada celular. A simetria do mesofilo dorsiventral. O
tipo tricoca, com 0,1 cm a 0,25 cm de dimetro, depresso-
parnquima palidico uniestratificado, ocupando cerca
globosos, expostos para a regio abaxial dos ramos,
de 2/3 da espessura do mesofilo, apresentando idioblastos
separando-se em carpdios (cocas); exocarpo verde-oliva,
cristalferos do tipo drusas, em sua maioria. Cristais
membranceo e endocarpo verrucoso; duas sementes por
pequenos e de diferentes formas so comuns e raramente
lculo, triangulares, com as duas faces ventrais retas e a
encontram-se cristais rombodricos. O parnquima
face dorsal arredondada, verrucosa, verrugas proeminentes,
esponjoso constitudo por duas a trs camadas,
com pice agudo a arredondado; pedicelos cilndricos, com
apresentando clulas de contornos irregulares, cujo maior
cerca de 0,4 cm a 0,5 cm de comprimento na maturao;
comprimento corresponde ao sentido periclinal. Cristais
clice persistente, membranceo, desenvolvido, atingindo
pequenos agregados e/ou isolados so comuns. Em seco
2/3 da altura do fruto. As caractersticas macroscpicas das
paradrmica, evidencia-se o carter braciforme dessas
duas espcies, Phyllanthus niruri e Phyllanthus tenellus,
clulas. Na nervura principal, o parnquima palidico
so determinantes para distingu-las, uma vez que so
pode distribuir-se continuamente ou ser interrompido
muito similares quanto s caractersticas anatmicas para
por pequeno nmero de clulas clorenquimticas ou
alguns rgos vegetativos.

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ainda, por clulas colenquimticas isodiamtricas. Nesta
regio, junto a epiderme abaxial, ocorre uma camada de
colnquima angular, de paredes pouco espessas, podendo
conter cloroplastos, seguido de tecido clorenquimtico de
clulas isodiamtricas, com poucos cloroplastos. O sistema
vascular do tipo colateral e formado por dois a seis raios.
O floema possui pequeno nmero de clulas. O padro de
venao broquiddromo.
DESCRIO MICROSCPICA DO P
O p atende a todas as exigncias estabelecidas para
a espcie, menos os caracteres macroscpicos. So
caractersticas: presena de frutos depressoglobosos,
carpdios (cocas) isolados e sementes como descritos;
flores como descritas; cristais de oxalato de clcio do tipo
drusas; fragmentos de tecido epidrmico como descritos;
fragmentos de tecidos foliares e caulinares como descritos;
fragmentos de tecido vascular com elementos de vaso
apresentando espessamento anelado, espiralado ou
pontoado, e fibras.
q
DESCRIO MICROSCPICA DAS IMPUREZAS
A raiz em crescimento secundrio apresenta periderme
formada por trs a quatro camadas de clulas suberificadas,
felognio e feloderme. Abaixo deste tecido encontra-
se o parnquima cortical, formado por trs a seis
estratos celulares. O floema apresenta fibras dispostas
perifericamente. O xilema apresenta duas a quatro fileiras
de fibras dispostas radialmente. Os raios parenquimticos
so ricos em gros de amido. A regio medular
frequentemente ocupada pelo tecido xilemtico, ou mais
raramente por parnquima. Cristais so comuns em todos
os tecidos, sendo mais abundantes na regio cortical e no
parnquima medular; comumente so pequenos, isolados
e/ou agregados, ocorrendo sob diferentes tipos, geralmente
drusas.
IDENTIFICAO
A. Proceder conforme descrito em Cromatografia em
camada delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel GF254, com
espessura de 250 m como suporte, e mistura de acetato de
etila, cido frmico, cido actico e gua (100:11:11:26),
como fase mvel. Aplicar, separadamente, em forma
de banda, 25 L da Soluo (1) e 5 L da Soluo (2), Cinzas totais (5.4.2.4). No mximo 6,0%.
recentemente preparadas, descritas a seguir.
Soluo (1): transferir cerca de 1 g da droga moda para
balo de fundo redondo, adicionar 10 mL de metanol e
aquecer sob refluxo durante 30 minutos em banho-maria.
Resfriar temperatura ambiente e filtrar sob presso
reduzida. Extrair novamente com mais 10 mL de metanol
durante 30 minutos. Filtrar o extrato lavando o resduo com
5 mL de metanol agrupando-o ao primeiro. Completar o
volume para 25 mL com metanol e filtrar em membrana
de 0,45 m.
Soluo (2): dissolver 10 mg e vitexina-2-ramnosdeo
SQR em 2 mL de metanol.
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Desenvolver o cromatograma. Deixar a placa secar
em estufa a temperatura entre 100 C e 105 C e, ainda
morna, nebulizar com uma soluo de difenilborato de
aminoetanol a 1% (p/v) em metanol, seguido de uma
soluo de macrogol 400 a 5% (p/v) em metanol. Deixar a
placa secar ao ar livre durante 30 minutos e examin-la sob
luz ultravioleta (365 nm). O cromatograma obtido com a
Soluo (1), deve apresentar no tero inferior da placa uma
mancha amarelo-esverdeado fluorescente correspondente a
vitexina-2-ramnosdeo e imediatamente abaixo dessa, uma
mancha amarelo fluorescente.
B. Proceder conforme descrito em Cromatografia em
camada delgada (5.2.17.1), utilizando slica-gel GF254,
com espessura de 250 m como suporte, e mistura de
hexano e acetato de etila (70:30), como fase mvel. Aplicar,
separadamente, em forma de banda, 25 L da Soluo (1)
e 5 L da Soluo (2), recentemente preparadas, descritas
a seguir.
Soluo (1): transferir cerca de 1 g da droga moda para
balo de fundo redondo, adicionar 10 mL de metanol e
aquecer sob refluxo durante 30 minutos em banho-maria.
Resfriar temperatura ambiente e filtrar sob presso
reduzida. Extrair novamente com mais 10 mL de metanol
durante 30 minutos. Filtrar o extrato lavando o resduo com
5 mL de metanol agrupando-o ao primeiro. Completar o
volume para 25 mL com metanol e filtrar em membrana
de 0,45 m.
Soluo (2): dissolver separadamente 10 mg filantina SQR e
nirantina SQR em 2 mL de metanol.
Desenvolver o cromatograma. Remover a placa, deixar
secar ao ar e examin-la sob luz ultravioleta (254 nm).
Nebulizar a placa com soluo de anisaldeido, cido
sulfrico e cido actico (1:2:97) seguida de aquecimento
em estufa. O cromatograma obtido com a Soluo (1)
no deve apresentar as manchas respectivas filantina e
nirantina obtidas com a Soluo (2).
ENSAIOS DE PUREZA
Material estranho (5.4.2.2). No mximo 2,0%,
correspondente s razes.
gua (5.4.2.3). No mximo 10,0%.
DOSEAMENTO
Taninos totais
Preparar as solues descritas a seguir.
Soluo estoque: pesar, exatamente, cerca de 0,75 g da
droga moda, transferir para balo de fundo redondo e
adicionar 150 mL de gua. Aquecer em banho-maria, sob
refluxo, durante 30 minutos, em temperatura entre 80 C e
90 C. Resfriar em gua corrente, transferir a mistura para
balo volumtrico de 250 mL e completar o volume com
gua. Deixar decantar o sedimento e filtrar, desprezando os
primeiros 50 mL do filtrado.
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Soluo amostra para polifenis totais: transferir 5 mL
da Soluo estoque para balo volumtrico de 25 mL
e completar o volume com gua. A 5 mL desta soluo,
adicionar 2 mL de reagente de Folin-Denis e diluir para 50
mL com carbonato de sdio SR. Medir a absorvncia da
soluo (A1) em 715 nm (5.2.14), exatamente 3 minutos
aps a adio do ltimo reagente, utilizando gua para Gradiente da Fase mvel: adotar o sistema de gradiente
ajuste do zero.
Soluo amostra para polifenis no adsorvidos pelo
p de pele: adicionar 0,2 g de p de pele SQR a 20 mL
da Soluo estoque e agitar, mecanicamente, durante 60
minutos. Filtrar. Diluir 5 mL desta soluo para 25 mL com
gua. A 5 mL desta soluo, adicionar 2 mL do reagente
de Folin-Denis e diluir para 50 mL com carbonato de
sdio SR. Medir a absorvncia da soluo (A2) em 715
nm (5.2.l4), exatamente 3 minutos aps a adio do ltimo
reagente, utilizando gua para ajuste do zero.
Soluo padro: dissolver 50 mg de pirogalol em gua e
diluir a 100 mL com o mesmo solvente. Diluir 5 mL desta
soluo para 100 mL com gua. A 5 mL desta soluo, Transferir o filtrado para balo volumtrico de 250 mL e
adicionar 2 mL de reagente de Folin-Denis e diluir para 50
mL com carbonato de sdio SR. Medir a absorvncia da
soluo (A3) em 715 nm (5.2.14), exatamente 3 minutos
aps a adio do ltimo reagente e dentro de 15 minutos
contados da dissoluo do pirogalol, utilizando gua
como branco. Calcular o teor de taninos totais segundo a
expresso:
em que
TT = taninos totais;
A1 = absorvncia medida da Soluo amostra para
polifenis totais;
A2 = absorvncia medida da Soluo amostra para
polifenis no adsorvidos pelo p de pele;
A3 = absorvncia medida da Soluo padro;
m = massa da droga vegetal considerando a determinao
de gua.
cido glico
Proceder conforme descrito em Cromatografia a lquido
de alta eficincia (5.2.17.4). Utilizar cromatgrafo provido
de detector de ultravioleta a 275 nm; pr-coluna contendo
fase reversa C-18 hidroflica e coluna de 100 mm de
comprimento e 2,1 mm de dimetro interno, empacotada
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com C-18 hidroflica (3 m); fluxo da Fase mvel de 0,25
mL/minuto.
Eluente A: gua contendo 0,05 % de cido trifluoractico;
Eluente B: metanol contendo 0,05 % de cido trifluoractico.
descrito na tabela a seguir:
Tempo Eluente A Eluente B
Eluio
(minutos) (%) (%)
0-7 95 5 isocrtica
7 - 25 95 0 5 100 gradiente linear
Soluo amostra: pesar analiticamente cerca de 0,75 g
da droga seca e moda (800 m) e transferir para balo
de fundo redondo. Adicionar 10 mL de gua, adaptar em
condensador de refluxo e aquecer em manta ebulio
durante 15 minutos. Esfriar sob gua corrente e filtrar o
extrato sob presso reduzida. Lavar o resduo com gua.
q
completar o volume com gua. Filtrar em membrana de
0,45 m e injetar no cromatgrafo.
Soluo padro: dissolver quantidade exatamente pesada
de cido glico SQR no Eluente A para obter soluo a 1
mg/mL.
Solues para curva analtica: diluir 1 mL da Soluo
padro em balo volumtrico de 50 mL completando o
volume com Eluente A. Diluir alquotas de 1 mL, 2 mL, 3
mL, 5 mL e 7 mL dessa soluo a 10 mL utilizando Eluente
A obtendo assim, solues com concentraes de 2,0 g/
mL; 4,0 g/mL; 6,0 g/mL; 10,0 g/mL e 14,0 g/mL.
Filtrar as solues em membrana de 0,45 m e injetar no
cromatgrafo.
Procedimento: injetar, separadamente 5 L da
Soluo padro e da Soluo amostra e obter as reas
correspondentes ao pico de cido glico. O tempo de
reteno relativo cerca de 4,6 minutos para o cido
glico. Calcular o teor de cido glico na amostra a
partir da equao da reta obtida com a curva analtica
do cido glico. O resultado expresso pela mdia das
determinaes em gramas de cido glico por 100 gramas
da droga considerando a determinao de gua (%).
EMBALAGEM E ARMAZENAMENTO
Em recipientes bem fechados, ao abrigo da luz e do calor.
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q Figura 1a Aspectos macroscpicos em Phyllanthus niruri L.

______________

Complemento da legenda da Figura 1a.

A hbito. B flor masculina com 5 nectrios e trs estames. C flor feminina com ovrio e disco nectarfero. D fruto, tpalas persistentes. E folhas
de base assimtrica. F aspecto geral da semente.

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