BILIRRUBINA DELTA
De esta manera fue clasificada
ORIGEN
El metabolismo normal de la bilirrubina parte desde de la
degradacin de los grupos hem de los eritrocitos
senescentes, lo cual tiene lugar principalmente en los
cordones esplnicos del bazo cuando estos son retirados
de la circulacin. Estos producen la bilirrubina no
conjugada, la cual como ya se ha mencionado es insoluble
en agua, por lo cual debe circular acompaada de la
albmina hacia el hgado para ah ser conjugada a fin de
aumentar su solubilidad para poder ser excretada a travs
de la orina en forma de urobilingeno o a travs de las
heces en forma de estercobilingeno; teniendo en cuenta
que cuando esta bilirrubina conjugada se dirige hacia
estos rganos se disuelve en plasma o se disuelve con las
sales biliares para ser expulsado por la vescula biliar
respectivamente.
Un paciente en condiciones fisiopatologicas como dao
hepatocelular agudo (la ruptura de hepatocitos libera la
bilirrubina conjugada producida al espacio sinusoidal, junto
con el resto de su contenido enzimtico) o colestasis (a
cualquier nivel implica la obstruccin de la excrecin de la
bilis, por lo cual esta pasa al plasma) presenta altas
concentraciones de bilirrubina conjugada
(hiperbilirrubinemia conjugada), que si se mantiene en el
tiempo puede unirse de manera irreversible a la albmina
mediante un enlace covalente de tipo amida (Jacobo Daz
Portillo, Aspectos Bsicos de Bioqumica Clnica), que
segn Lauff y cols ocurre entre el carbono carbonilo de
uno de los cidos propinicos y los extremos
aminoterminales de los residuos de histidina de la
molcula de albmina, dando origen a la bilirrubina delta
(BD). Esto ocurre de manera espontnea y sin inversin
de ATP.
Esta bilirrubina delta tiene igual vida media que la
albmina, puesto a que si se une de manera irreversible
no puede ser eliminada va renal por cuanto a que
normalmente la albmina no se elimina de manera masiva
en la orina, por lo cual no es posible determinar esta
fraccin de bilirrubina en orina. Esto implica que el
aclaramiento de la bilirrubina conjugada sea menor al de
esta fraccin de bilirrubina.
IDENTIFICACIN Y CUANTIFICACIN
Esta bilirrubina delta reacciona y se comporta
qumicamente como la bilirrubina conjugada con el
reactivo acido sulfanlico diazotado, puesto a que
igualmente el carbono alfa se encuentra expuesto a este;
y es igualmente cuantificado junto a la bilirrubina directa
con este mtodo.
igualmente como bilirrubina directa por muchos aos.
Luego en 1982, Lauff y Cols emple la tcnica de
cromatografa lquida de alta eficacia (HPLC), donde
determin cuatro fracciones: Dos conjugadas,
correspondientes a la Bilirrubina Conjugada, una no
conjugada, y una fraccin unida a albmina a la que llamo
biliproteina o Bilirrubina Delta. De manera independiente
Kuenzle y cols determinaron las mismas cuatro fracciones
de bilirrubina en una cromatografa lquida de columna
abierta, sin desproteinizacin previa.
Por otra parte, Kubasik y cols, demostraron que en
pacientes tratados por ictericia obstructiva ocurra un
descenso de la bilirrubina conjugada si el tratamiento era
exitoso, pero la bilirrubina directa empleada en esta
determinacin se mantena elevada a causa de esta
fraccin delta que tambin reaccionaba, lo cual no era
congruente con la evolucin del paciente.
Todo esto cuestiona la ecuacin de bilirrubina que se ha
utilizado durante tantos aos (BT= BD+BI)
Entonces, en 1984, Wu y cols, realizaron por primera vez
la tcnica de qumica seca para la determinacin
independiente de bilirrubina total, bilirrubina conjugada y
bilirrubina no conjugada, la cual internacionalmente se
determina en la actualidad por algunos autoanalizadores
que veremos a continuacin.
Qumica Seca. Son metodologas donde todos los
reactivos para una determinada prueba se fijan a una fase
slida, de tal manera que ocurra la reaccin solo con la
adicin de la muestra.
Consiste en un Slide, o un elemento autnomo con
mltiples capas, donde cada capa realiza funciones fsicas
y qumicas particulares. Todas estas capas se encuentran
en un soporte de polister adaptado al tamao de una
estampilla. Las capas son las siguientes:
- Capa de difusin: permite la difusin uniforme de
la muestra. En esta capa se quedan retenidas las
protenas (hemoglobina, albmina, lipoprotenas),
de modo que se elimina la interferencia espectral
por hemlisis y lipemia
- Capa de filtro o barrera protectora: impide la
interferencia espectral de lo que se ha quedado
fijado en la capa de difusin, impidiendo que esto
absorba luz
- Capa de reactivo: se encuentra impregnada con el
reactivo, y es aqu donde ocurre la reaccin
- Capa indicadora: El producto de la reaccin se
recolecta para el anlisis espectral.
 Luego, por fotometra de reflectancia, se utilizan las
densidades pticas para medir la concentracin del
producto de la reaccin en la capa indicadora, que es
proporcional a la cantidad de analito.
Una de las tecnologas citadas en las referencias
consultadas para la determinacin de bilirrubina es la
utilizada por el multianalizador VITROS, cuyas placas son
provistas por la casa comercial Johnson&Johnson, la cual
utiliza este principio de qumica seca. Se utiliza de manera
separada una placa para bilirrubina total y una placa para
las bilirrubinas Conjugada y no conjugada, y la bilirrubina
delta es calculada por diferencia.
En la placa de bilirrubina conjugada y no conjugada, la
bilirrubina delta se queda atrapada en la capa de difusin
a causa de la albmina, junto a otras protenas, mientras
que difunden hacia la capa de reactivo la bilirrubina
conjugada y la bilirrubina no conjugada. Ambas se unen a
un mordiente cationico, que actua como fijador de
pigmento, lo cual incrementa notablemente su absortividad
especfica a 400 nm para la bilirrubina conjugada (mono y
diconjugada presentan un pico de absorcin idntico a
esta longitud de onda) y a 460 nm para la bilirrubina no
conjugada.
En la placa de bilirrubina total se utiliza el principio del
reactivo diazo modificado, que utiliza difilina para disociar
la Bilirrubina no conjugada y la bilirrubina delta de la
albumina. Toda esta bilirrubina reacciona con una sal
diaznica para producir cromforos de bilirrubina con una
absortividad cercana a los 520 nm.
se recomienda que la determinacin de bilirrubina directa
se acompae con la cuantificacin diferencial de la
bilirrubina delta.
Monitoreo post-transplante heptico: Wu y cols
determinaron que un aumento de 40-50% de bilirrubina
delta acompaada de una bilirrubina conjugada menor al
10% de la bilirrubina total es buen pronstico. La
explicacin que le da a este planteamiento es que otros
marcadores hepticos como por ejemplo la bilirrubina
total, directa o indirecta y las enzimas pueden estar
aumentados an por recidivas del dao heptico antes del
transplante, pero al determinar que la causa de elevacin
de la bilirrubina directa sea consecuencia de la bilirrubina
delta y no de la bilirrubina conjugada, indica que el
funcionalismo heptico (conjugacin) fue restituido con el
transplante.
Distincin entre pacientes con dao heptico irreversible
vs reversible en hepatitis alcohlica: Se recomienda
realizar un monitoreo en casos de tratamiento de
desintoxicacin alcohlica, a fin de diferenciar estos casos
de aquellos con mayor propensin a desarrollar cirrosis,
donde la bilirrubina delta estar aumentada, aunque la
bilirrubina conjugada permanezca normal, indicando falla
de funcionalismo heptico progresiva.

Obteniendo las concentraciones de ambas

determinaciones es posible calcular por diferencia la
bilirrubina delta.

UTILIDAD CLNICA

Permite evaluar la integridad fisiolgica del hepatocito:

luego de un dao hepatocelular agudo como en las
hepatitis virales, en la fase de convalescencia se produce
una elevacin de la bilirrubina directa: si se determina que
la causa de esta elevacin es la bilirrubina delta y no la
conjugada, indica que ya el funcionalismo heptico ha sido
reestructurado debido a que se ha restituido la integridad
heptica en el caso de que ste dao sea reversible, como
en el caso de la hepatitis A.

Integridad de las vas biliares: indica como el paciente

responde a un determinado tratamiento ante una ictericia
obstructiva, cuando se determina que la causa de la
elevacin de bilirrubina es a expensas de la bilirrubina
delta y no de la bilirrubina conjugada, lo cual habla de una
restructuracin de la integridad de las vas biliares y una
adecuada excrecin de la bilirrubina conjugada. Por esto