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OBJETIVO GENERAL
Familiarizar al estudiante con los materiales de uso en el laboratorio de microbiologa y
con los cuales, trabajaremos en los siguientes laboratorios.
Objetivos Especficos
Identificar el modo de uso de cada equipo y material.
Reconocer sus funciones.
Conocer sus aplicaciones en la investigacin o industria.
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Mechero Bunsen
Fue inventado por Robert Bunsen en 1857 y provee una transmisin muy rpida de
calor intenso en el laboratorio. Es un quemador de gas natural o de gases licuados
procedentes del petrleo (normalmente propano, butano o una mezcla de ambos),
siendo la llama el producto de la combustin de una mezcla regulable de aire con uno
de estos gases.
Un mechero o quemador Bunsen es un instrumento utilizado en los laboratorios
cientficos para calentar, esterilizar o proceder a la combustin de muestras
o reactivos qumicos. Es uno de los principales instrumentos del laboratorio de
Microbiologa ya que nos permite crear una zona asptica de trabajo. Es muy
importante conocer su correcto uso y las precauciones que debemos tomar en su
manejo. Todas las manipulaciones con el mechero bunsen deben realizarse en un radio
de 10-15cm de la llama del mechero (zona asptica), en caso de utilizar mechero
nunca se debe coger material por encima de la llama
Asa bacteriolgica
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Asa en argolla o anillos, no calibrada: Generalmente son de alambre de nicromo. Sirve
para la siembra por estras e inoculaciones en general.
Placa de Petri
Micropipeta
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Los volmenes captables por estos instrumentos varan segn el modelo: los ms
habituales, denominados p20, p200 y p1000, admiten un mximo de 20; 200 y 1000 l,
respectivamente.
Es de destacar que el uso de micropipetas permite emplear distintos lquidos sin tener
que lavar el aparato: para ello, se emplean puntas desechables, de plstico, que
habitualmente son estriles.
Existen micropipetas manuales, en las que el volumen a aspirar se fija girando un
botn en su parte superior que est conectado a un sistema analgico de confirmacin
de volumen, y automticas, en las cuales dicho sistema es digital.
Hay micropipetas simples, que slo acogen una punta cada vez, y multicanales, que
permiten incorporar mltiples puntas (por ejemplo, ocho), absorbiendo el mismo
volumen en todas ellas.
Medios de Cultivo
Un medio de cultivo es una tcnica de laboratorio (vase microbiologa) que consta de
un gel o una solucin que contiene los nutrientes necesarios para permitir, en condiciones
favorables de pH y temperatura, el crecimiento de virus, microorganismos, clulas, tejidos
vegetales o incluso pequeas plantas. Segn lo que se quiera hacer crecer, el medio requerir
unas u otras condiciones. Generalmente se presentan desecados en forma de polvo fino o
granular antes de ser preparados; ya preparados pueden encontrarse en estado slido,
semislido o lquido. El objetivo ltimo del cultivo es variado: antibiograma, identificacin,
multiplicacin. Ejemplos de medios de cultivo:
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COMPOSICIN
Extracto de levadura 1,500 g
Triptona 10,000 g
Glucosa 10,000 g
Cloruro sdico 5,000 g
Prpura de bromocresol 0,015 g
Agar-Agar 12,000 g
(Frmula por litro)
pH final: 7,0 0,2
COMPOSICIN
Fosfato monopotsico 10,0 g
Fosfato dipotsico 1,0 g
Asparagina 2,0 g
Sulfato magnsico 0,5 g
(Frmula por litro)
pH final: 7,0 0,2
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ACIDOTERMFILOS OSMOTOLERANTES G.P.Y. BROTH para recuento total de
microorganismos acidotermfilos y osmotolerantes en alimentos. Detecta los
heterotrofos osmoacidotolerantes que fermentan la glucosa con produccin de gas.
COMPOSICIN
Peptona de Carne 5,0 g
Extracto de Levadura 5,0 g
Glucosa 40,0 g (Frmula por litro)
pH final: Ajustar hasta 3,8 0,2
COMPOSICIN
Triptona 5,0 g
Extracto de Levadura 2,5 g
Glucosa 1,0 g
Factores doping MICROKIT 8,0 g
Agar-agar 10,5 g
Cromgeno termoestable c.s.
(Frmula por litro)
pH final: 6,8 0,2
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Cabina de flujo laminar
Una cabina de flujo laminar, cmara de flujo laminar o campana de flujo laminar es un
recinto que emplea un ventilador para forzar el paso de aire a travs de un
filtro HEPA o ULPA y proporcionar aire limpio a la zona de trabajo libre de partculas de
hasta 0.1 micras. Este tipo de equipos se fabrican en forma generalmente prismtica
con una nica cara libre (la frontal) que da acceso al interior, donde se localiza la
superficie de trabajo, que normalmente permanece limpia y estril.
Dentro de estas cabinas o campanas se trabaja con obleas de semiconductor, cultivos
celulares o cualquier otro sistema que deba mantenerse limpio y deba evitarse la
contaminacin con partculas minsculas. Estas cabinas estn diseadas para
proporcionar un aire limpio y constante a una velocidad de paso de aire de 0.30 a 0.50
metros por segundo para as barrer la superficie de la zona de trabajo y evitar la
suspensin de partculas, as como una posible contaminacin de las muestras.
El aire es inyectado a la zona de trabajo a travs de un filtro HEPA o ULPA e insuflado
en forma de un flujo laminar o flujo unidireccional, muy suave, hacia el usuario. La
superficie de trabajo de la cabina se construye generalmente de acero
inoxidable grado 304 o superior para facilitar su limpieza y aumentar su durabilidad
por el uso, con acabados sanitarios, sin espacios o juntas donde las esporas pueden
llegar a acumularse.
Las cabinas de este tipo existen tanto en configuracin vertical como en horizontal,
segn que la posicin del filtro est en la parte superior o en la parte trasera de la zona
de trabajo. La norma reguladora que establece el estndar comnmente aceptado
para estas cabinas es la norma IEST-RP-CC002.3 aunque tambin se emplea la norma
NSF/ANSI-49.
Las cabinas de flujo laminar pueden tener una lmpara de rayos ultravioleta-C con
accin germicida para esterilizar el recinto y su contenido, cuando no se utiliza.
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Cinta indicadora para autoclave de vapor
Cintas autoadhesivas de papel semicrepado de celulosa pura, en la que hay por un lado el
adhesivo de goma natural y por el otro lado los indicadores qumicos, para distinguir paquetes
procesados, de los no procesados (reconocen el proceso de la esterilizacin a vapor en
autoclaves). Las cintas indicadoras han sido a sometidas a estudio para asegurar su doble
funcin, por una parte, de cierre de los paquetes a esterilizar y por otro lado para evidenciar
que pas con el proceso de esterilizacin.
Las lneas del indicador qumico pasan de un color amarillo (no virado) a tonalidad negro
(aceptado) cuando se expone a un proceso de esterilizacin de 121C, y a un proceso de
esterilizacin a vapor de mayor temperatura (136C). Es considerado no estril cuando la
tonalidad no alcance los parmetros descritos. El confiable indicador qumico reacciona
cuando se expone al proceso de esterilizacin a vapor.
Se adhiere a envolturas de tela, tela tratada, material no tejido, papel y plstico. El adhesivo
sella los paquetes de manera segura, y es fcil de remover.
Tubo de microcentrfuga
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de la superficie de plstico, los tubos de microcentrfuga son usualmente desechados
despus de su uso.
Autoclave
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Microscopio ptico
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MATERIALES OBSERVADOS EN EL LABORATORIO
AUTOCLAVE
MICROSCOPIO OPTICO
MEDIO DE CULTIVO
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CUESTIONARIO
1. Qu es Biocida, Bactericida y Bacteriosttico? De ejemplos para cada caso.
DEFINICION EJEMPLOS
BIOCIDA Los biocidas son sustancias - Agua oxigenada
qumicas, sintticas, de origen - Alcohol 96
natural o microorganismos que - Acari zum. Acaricida
estn destinados a destruir, en aerosol.
contrarrestar, neutralizar, -Filvit. Locin para
impedir la accin o ejercer un eliminar piojos y
control de cualquier organismo liendres
considerado nocivo para el
hombre.
BACTERICIDA Es una sustancia que tiene la -Lisozima: rompe los
capacidad de matar bacterias, enlaces entre las
microorganismos unicelulares molculas
u otros organismos. de peptidoglicano que
forman la pared
celular de las bacterias
gram-positivas,
formando huecos en
la pared de las
bacterias haciendo
que entre una gran
cantidad de agua
provocando la lisis
osmtica de la
bacteria.
-Cefalexina
BACTERIOSTTICO Es aquella sustancia que, - Lactoperoxidasa
aunque no produce la muerte -cido lctico
a una bacteria, impide su -Cloranfenicol
reproduccin; la bacteria
envejece y muere sin dejar
descendencia.
Temperatura Tiempo
170 C 60 minutos
180 C 30 minutos
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3. Cules son los errores al trabajar con materiales no esterilizados cuando se
cultiva una cepa pura?
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5. Explique y diga cuales son las aplicaciones de la microbiologa en la Industria.
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combinacin de soja, habichuelas, arroz y cebada que dan lugar a los alimentos
orientales miso, shoyu y tempeh. Los hongos son tambin la fuente de muchos
enzimas comerciales (amilasas, proteasas, pectinasas), cidos orgnicos (ctrico,
lctico), antibiticos (penicilina), quesos especiales (Camembert, Roquefort) y,
evidentemente, de las setas.
Bacterias
Entre las especies bacterianas de inters industrial estn las bacterias del cido
actico, Gluconobacter y Acetobacter que pueden convertir el etanol en cido
actico. El gnero Bacillus es productor de antibiticos (gramicidina,
bacitracina, polimixina), proteasas e insecticidas. Del gnero Clostridium cabe
destacar Clostridium acetobutylicum que puede fermentar los azcares
originando acetona y butanol. Las bacterias del cido lctico incluyen, entre
otras, las especies de los gneros Streptococcus y Lactobacillus que producen
yogur.Corynebacterium glutamicum es una importante fuente industrial de
lisina. El olor caracterstico a tierra mojada se debe a compuestos voltiles
(geosmina) producidos por Streptomyces aunque su principal importancia
radica en la produccin de antibiticos como anfotericina B, kanamicina,
neomicina, estreptomicina, tetraciclina, etc.
REFERENCIAS
http://www.metrixlab.mx/no-cat/uso-de-una-incubadora-de-laboratorio/
https://es.wikipedia.org/wiki/Incubadora_(aparato_de_laboratorio)
https://sites.google.com/a/goumh.umh.es/practicas-de-microbiologia/normas-
y-recomendaciones-de-seguridad/mechero-bunsen
https://es.wikipedia.org/wiki/Mechero_Bunsen
http://microbiologia3bequipo5.blogspot.pe/2014/10/asas-microbiologicas-y-
su-uso.html
https://es.wikipedia.org/wiki/Placa_de_Petri
https://www.tplaboratorioquimico.com/laboratorio-quimico/materiales-e-
instrumentos-de-un-laboratorio-quimico/placa-de-petri.html
http://www.iclinics.cl/producto/cinta-indicadora-para-autoclave-de-vapor/
http://www.3msalud.cl/enfermeria/files/2012/02/5.4.3.1-Cinta-para-
Autoclave-Vapor-Clase-11.pdf
https://es.wikipedia.org/wiki/Micropipeta
http://equiposylaboratorio.com/sitio/contenidos_mo.php?it=1031
http://www.medioscultivo.com/category/microbiologia-de-alimentos/
http://www.qo.fcen.uba.ar/quimor/wp-
content/uploads/2012/08/Guia_Medios_2012.pdf
https://es.wikipedia.org/wiki/Cabina_de_flujo_laminar
http://www.escoglobal.com/products/download/AHC_AVC_S_catalog.pdf
https://es.wikipedia.org/wiki/Tubo_de_microcentr%C3%ADfuga
https://es.wikipedia.org/wiki/Autoclave
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http://www.equiposylaboratorio.com/sitio/contenidos_mo.php?it=1498
https://www.tplaboratorioquimico.com/laboratorio-quimico/materiales-e-
instrumentos-de-un-laboratorio-quimico/autoclave-de-laboratorio.html
http://periodicosalud.com/microscopio-optico-que-es-funcion-partes-tipos/
https://es.wikipedia.org/wiki/Microscopio_%C3%B3ptico
http://cienciaytecnologiacorsaje.blogspot.pe/2012/09/aplicaciones-de-la-
microbiologia-en-la.html
http://www.izt.uam.mx/ceu/publicaciones/MMBG/files/manual_microbiologia
_general.pdf
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