UNIVERSIDAD NACIONAL

MAYOR DE SAN MARCOS

(Universidad del Per, DECANA DE AMRICA)

FACULTAD DE QUMICA E
INGENIERA QUMICA

E.A.P. INGENIERA QUMICA

DEPARTAMENTO ACADMICO DE QUMICA

ANALTICA E INSTRUMENTAL

PRCTICA N 2

TEMA: ANLISIS DE NITRATOS EN

AGUAS

CURSO : LABORATORIO DE ANALISIS INSTRUMENTAL

PROFESORA : ELVIRA BECERRA

ALUMNO: RAMIREZ CAMPOS, ANTONY RUFINO

CDIGO: 14070175
 NDICE

1. FUNDAMENTO DEL MTODO DE ANLISIS

1.1 ESPECTROSCOPIA ULTRAVIOLETA

1.2 INTERPRETACIN Y USOS DE LA ESPECTROSCOPIA

ULTRAVIOLETA

1.3 TEORA DE LOS ORBITALES MOLECULARES

2. DETALLES EXPERIMENTALES

3. DESCRIPCIN BREVE DE LA TCNICA EMPLEADA

4. DESCRIPCIN BREVE DEL INSTRUMENTO

5. CLCULOS DETALLADOS. TABLA DE RESULTADOS Y TRATAMIENTOS

ESTADSTICOS.

5.1 CLCULOS DETALLADOS.

5.2 TABLA DE RESULTADOS Y TRATAMIENTOS ESTADSTICOS.

6. DISCUSIN DEL MTODO EMPLEADO

7. DISCUSIN DE RESULTADOS

8. CONCLUSIONES

9. RECOMENDACIONES

10. BIBLIOGRAFA
1. FUNDAMENTO DEL MTODO DE ANLISIS

1.1. ESPECTROSCOPIA ULTRAVIOLETA

El espectro Ultravioleta y Visible de las molculas est asociado a transiciones
electrnicas entre los diferentes niveles energticos en ciertos grupos o tomos
de la molcula y no caracterizan a la molcula como entidad.

En contraste la absorcin de energa en la regin Infrarroja estimulan la molcula

completa y causa cambios vibracionales y rotacionales en esta lo cual
caracteriza la entidad estructural de dicha molcula.

Los grupos de tomos que dan origen a la absorcin en el UV cercano o UV de

cuarzo, se conocen como grupos cromforos. La mayora de los grupos
insaturados y heteroatmicos que tienen pares de electrones no compartidos,
son cromforos potenciales y estos grupos son la base de la elucidacin de
grupos estructurales en las molculas activas en el UV cercano.

1.2. INTERPRETACIN Y USOS DE LA ESPECTROSCOPIA ULTRAVIOLETA

En algunos casos la espectroscopia UV puede ser fundamental para el estudio
de ciertos problemas especficos. Por ejemplo en la industria de los cosmticos,
tintes, colorantes y pinturas. El estudio de los grupos auxcromos y de su
influencia en el desplazamiento de ciertos compuestos qumicos hacia la regin
visible hacen de esta tcnica una de las de mayor inters en sta rea.

Desde el punto de vista del estudio estereoqumico y de grupos funcionales en

una molcula orgnica, la espectroscopia UV no rivaliza con otras tcnicas que
tienen el mismo propsito, especialmente con la espectroscopia IR por las
razones mencionadas anteriormente, sin embargo su aplicacin en la
cuantificacin de sustancias que absorben radiacin UV la hacen una tcnica
insustituible.

Existe un gran nmero de tcnicas para determinar substancias que no tienen

un nmero suficiente de grupos cromforos para que la banda de absorcin est
dentro del espectro Visible; por ejemplo cidos orgnicos, alcoholes, fenoles,
aldehdos, cetonas, etc. Muchos de este tipo de compuestos muestran al menos
una banda de absorcin en el UV cercano y tomando como dato su longitud de
onda de mxima absorbancia se pueden cuantificar en la misma forma en que
se determina compuestos en espectroscopia Visible.

Es posible determinar un gran nmero de sustancias como son: cido ascrbico,

fructuosa, glicerol, cido 1-glutmico, lactosa, galactosa, maltosa, glucosa,
rafinosa, sorbitol, etanol, cido actico, etc. Estas tcnicas analticas son de
mltiples aplicaciones en bioqumica general y bioqumica de alimentos, y esta
es la razn de su importancia. En Qumica Clnica tambin son muy utilizados
los mtodos de espectroscopia UV.
1.3. TEORA DE LOS ORBITALES MOLECULARES

Cuando dos tomos forman un enlace

qumico, los orbitales atmicos de cada
uno de ellos se combinan para formar
dos orbitales moleculares, uno de baja
energa que es el orbital enlazante y otro
de energa mayor, que es el orbital
antienlazante (Figura 1). Los enlaces
covalentes que se originan entre los
orbitales de dos tomos que se enlazan
qumicamente pueden ser de dos tipos y
se conocen como enlaces y enlaces .

Al efectuarse dicho enlace covalente se

forman simultneamente orbitales
antienlazantes: * en el caso de un
orbital molecular enlazante y * en el
caso de un orbital molecular enlazante .

Los electrones que no participan en la formacin de enlaces covalentes en la

molcula, se denominan electrones n o no enlazantes. En las molculas
orgnicas los electrones estn localizados principalmente en los orbitales
atmicos de tomos como: Nitrgeno, Oxgeno, Azufre y del grupo de los
halgenos.

La absorcin de energa radiante en el Ultravioleta o Visible por los electrones ,

resulta en la excitacin de stos, los cuales pasan a ocupar alguno de los
orbitales antienlazantes. La absorcin de radiacin Ultravioleta o Visible es capaz
de efectuar dichas transiciones.

Mientras mayor sea la energa requerida para una determinada transicin, menor
es la longitud de onda de la radiacin que debe suministrarse para conseguir tal
fin; por ejemplo: la transicin * para el propano requiere de radiacin de
135nm, la cual se encuentra en la regin del Ultravioleta lejano por lo que es
necesario un equipo de alto vaco si se desea estudiar dicha regin del espectro.
La transicin * es la que requiere de menor energa y mayor longitud de
onda. Las cetonas y aldehdos saturados efectan esta transicin a una longitud
de onda de aproximadamente 285 nm.

Es necesario hacer notar que asociado a estas transiciones electrnicas existen

cambios rotacionales y vibracionales en la molcula lo cual origina que el
espectro obtenido se aun espectro de bandas y no un espectro de una o ms
lneas agudas, como s ocurre en un tomo.
 PREPARACIN DE
SOLUCIONES

SOLUCIN SOLUCIN PATRN SOLUCIONES PARA SOLUCIN DE Blanco

PATRN INTERMEDIO DE LA CURVA DE HCl 1N
PRIMARIO DE NITRATO. CALIBRACIN
2. DETALLES EXPERIMENTALES

Colocar en un Diluir 5mL de Preparar Diluir 83mL de Colocar en una

crisol de porcelana solucin patrn soluciones en el HCl conc. En agua fiola 45mL de
aprox. 0.3g de primario de nitrato a rango de 0.1, 0.2, destilada a un agua destilada
KNO3 y secar en la 100mL con agua. 0.3, 0.4 y 0.5 ppm litro en fiola. aadir 1ml de HCl
estufa a 105oC de NO3- 1 N luego

Retirar y Diluir cada una

enfriar en el de estas
desecador. alcuotas a 50mL,
no olvidar aadir
antes de enrasar
1mL de HCl 1N.
Pesar 0,7218g de
KNO3, disolver en
agua agregar 2mL
de CHCl3 y diluir a
1,0 L en fiola.
3. DESCRIPCIN BREVE DE LA TCNICA EMPLEADA

Este mtodo es aplicable a muestras limpias con bajo contenido de materia orgnica,
tales como las provenientes de plantas de suministro y/o pozos de agua subterrnea.
Las mediciones se realizan utilizando un fotmetro a 220 nm, para concentraciones
inferiores a 10 ppm, rango para el cual se cumple la Ley de Beer.

Teniendo en cuenta que tanto la materia orgnica como el ion nitrato absorben energa
radiante a una longitud de onda de 220nm y que la materia orgnica mas no el nitrato,
absorbe tambin a 275nm, el mtodo analtico realiza las mediciones a estas dos
longitudes de onda, con el objeto de corregir las primeras mediciones por la interferencia
que haya podido ocasionar la materia orgnica presente en la muestra.

El mtodo fotomtrico es muy bueno para muestras limpias y puede adaptarse bien para
muestras con materia orgnica, siempre que sta permanezca estable y constante. La
filtracin de las muestras a travs de membranas de 0,45 antes de realizar las
mediciones, ayuda bastante a minimizar las interferencias ocasionadas por presencia
de materia orgnica en las muestras.

4. DESCRIPCIN BREVE DEL INSTRUMENTO

Espectrofotmetro UV-Visible UV-1700, de marca Shimadzu .

Especificaciones: (exactitud espectral, resolucin, exactitud fotomtrica, etc...)
Validacin del hardware (9 tems) como estndar.
Soporte IQ/OQ*
Diseo compacto - modelo liviano de slo 17 kg que puede ser transportado por
una persona.
Operacin sencilla con teclas especficas para funciones.
Facilidad en la operacin a travs de la amplia pantalla de cristal lquido.
Funciones completas para anlisis cualitativo y cuantitativo instaladas como
estndar; se pueden agregar programas especiales usando tarjetas IC.
Compatible con PC usando software bajo Windows.
Modo de medicin fotomtrica de mltiples longitudes de onda (estndar).
5. CLCULOS DETALLADOS. TABLA DE RESULTADOS Y TRATAMIENTOS
ESTADSTICOS.

5.1. CLCULOS DETALLADOS.

Preparacin de la solucin Stock:

3 14.01
721.8 = 100
101.10 3

Preparando la solucin intermedia mediante dilucin de la solucin Stock:

100 5
= = 5
100

Preparacin de las soluciones de Lectura:

VSol. Int. VFinal Sol. Concentracin

VHCl (mL)
(mL) (mL) (ppm)
Patrn 1 1 mL 1 mL 50 mL 0.1 ppm
Patrn 2 2 mL 1 mL 50 mL 0.2 ppm
Patrn 3 3 mL 1 mL 50 mL 0.3 ppm
Patrn 4 4 mL 1 mL 50 mL 0.4 ppm
Patrn 5 5 mL 1 mL 50 mL 0.5 ppm

Haciendo los clculos para la solucin nmero 1:

5 1
= = 0.1
50

5.2. TABLA DE RESULTADOS Y TRATAMIENTOS ESTADSTICOS.

Las mediaciones de Absorbancia los patrones se realizaron para una longitud de

onda de 207 nm. Los resultados obtenidos se resumen en la siguiente tabla.

Concentracin
Tipo Absorbancia
(ppm)
P0 - 0.0000 0.000
P1 Standard 0.1000 0.044
P2 Standard 0.2000 0.123
P3 Standard 0.3000 0.179
P4 Standard 0.4000 0.258
P5 Standard 0.5000 0.305
Se realiza el ajuste por mnimos cuadrados:

X Y XY X Y
0.0000 0.000 0.0000 0.0000 0.0000
0.1000 0.044 0.0044 0.0100 0.0019
0.2000 0.123 0.0246 0.0400 0.0151
0.3000 0.179 0.0537 0.0900 0.0320
0.4000 0.258 0.1032 0.1600 0.0666
0.5000 0.305 0.1525 0.2500 0.0930
X Y XY X Y
1.5000 0.909 0.3384 0.5500 0.2087

m = 0.63514286 b = -0.00728571

R2 = 0.99457082

Entonces la ecuacin que describe la curva de calibracin es la siguiente:

= 0.63514286 0.00728571

En la lectura de las muestras:

Muestra Absorbancia
Vida 0.194
Cielo 0.118

Utilizando la Ecuacin para hallar las concentraciones de las muestras:

 ( + 0.00728571)
=
0.63514286

Para el clculo de la concentracin de la muestra de Agua Vida:

(0.194 + 0.00728571)
= = 0.3169
0.63514286

Para el clculo de la concentracin de la muestra de Agua Cielo:

(0.118 + 0.00728571)
= = 0.1973
0.63514286

Estas concentraciones las coinvertimos a concentracin de nitrato y las

llevamos al volumen de muestra sin diluir:

Concentracin
Concentracin Concentracin
Muestra Absorbancia Total en agua
(ppm N) (ppm NO3-)
(ppm NO3-)
Vida 0.184 0.3169 1.4035 7.0175
Cielo 0.118 0.1973 0.8736 21.84

CURVA DE CALIBRACION
0.350

0.300

0.250
ABSORBANCIA

0.200

0.150

0.100

0.050

0.000
0.0000 0.1000 0.2000 0.3000 0.4000 0.5000 0.6000
CONCENTRACIN (PPM - N)
6. DISCUSIN DEL MTODO EMPLEADO

La determinacin de nitratos en aguas es difcil dado los procedimientos complejos con

los que se cuentan, la gran posibilidad de encontrar sustancias interferentes y los rangos
de concentracin limitados que presentan las diferentes tcnicas.
Entre los mtodos que aparecen para la cuantificacin de nitratos en aguas, se pueden
citar: Cromatografa inica, mtodo espectrofotomtrico ultravioleta selectivo, mtodo
del electrodo de nitrato, mtodo de reduccin de cadmio, mtodo del cloruro titanioso,
mtodo automatizado de reduccin de hidracina, mtodo automtico de reduccin de
cadmio.
El mtodo espectrofotomtrico ultravioleta, no es un mtodo especfico para la
determinacin de ion nitrato en agua y debe ser utilizado con los recaudos necesarios.
Este mtodo presenta la dificultad de no ser adecuado para el estudio de aguas
contaminadas, es decir slo es vlida su aplicacin para muestras de agua con bajo
contenido en materia orgnica.
Para la determinacin de ion nitrato en aguas subterrneas, el mtodo
espectrofotomtrico ultravioleta selectivo presenta como caractersticas principales la
baja demanda de tiempo, reactivos necesarios y su fcil ejecucin.

7. DISCUSIN DE RESULTADOS

Los resultados obtenidos de la concentracin de NO3-, N- son por debajo de lo

permitido de 50 ppm segn la OMS. Por tanto, se concluy que el Agua Vida y
Agua Cielo son aptas para el consumo humano.

Si se trabaja directamente con la solucin stock se producira un gran error, por

eso se trabaja con solucin intermedia, que es una solucin diluida a partir de la
solucin madre, para realizar la lectura del blanco; el blanco se utiliza para
corregir (restar) las absorbancias de las interferencias.

Al trabajar con un espectrofotmetro de doble haz slo es necesario cambiar el

contenido de la celda que tiene la muestra, la otra celda contiene el blanco
permanentemente, esto hace que los resultados sean ms precisos.

Las posibles fuentes de error se deben a la preparacin de los patrones porque

de ah depende la curva de patrones de la cual se obtendr las concentraciones
de las muestras respectivas, en nuestra grfica se observa que los patrones 0.4
y 0.5 se desvan de la recta, producto de un incorrecto enrase de la fiola, no
agitacin o un ligero error en las cantidades de preparacin.

Esta tcnica es vlida solamente para seleccionar muestras con bajo contenido
de materia orgnica. Se aade HCl 1N para las interferencias que pueden haber
en el agua como carbonatos, hidrxidos, cloruros, etc.
8. CONCLUSIONES

El mtodo analtico que se emplea abarca rangos de concentracin pequeas lo

que nos permite la identificacin de sustancias presentes como trazas.

Se lleg a la conclusin que el agua VIDA es mucho ms apta para el consumo

humano, ya que posee menor concentracin de NO3 - N.

Segn la OMS, la concentracin mxima de NO3 - N en estas aguas debe ser

de 50 ppm. Entonces podemos decir que estas tres marcas de agua son aptas
para el consumo humano.

Para leer en UV no es necesaria que la muestra sea coloreada, las sustancias

absorben la luz que posee una longitud de onda caracterstica para dicha
sustancia y una fuente de luz de deuterio.

Los instrumentos de doble haz hacen medidas de forma prcticamente continua

de la luz que atraviesa las celdas de la muestra y de la referencia.

9. RECOMENDACIONES

No tocar con los dedos las paredes de las celdas por donde debe pasar el haz,
ya que las huellas dactilares absorben luz.

Lo recomendable es coger las celdas de cuarzo por la parte opaca.

No confundir el orden de las celdas, la de atrs es para el blanco y la de adelante

es para las muestras.
10. BIBLIOGRAFA

Skoog D. West D., Principios de Anlisis Instrumental, 6ta Edicin, Ed. Mac
Graw Hill, Mxico 2001. Pginas: 351-361

Strobel Howard A. Instrumentacin Qumica Editorial Limusa, 1979.

Willard Hobarth Mtodos Instrumentales De Anlisis Primera Edicin,

editorial Continental, 1971.