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UNIVERSIDADE FEDERAL DE GOIS

CAROLINE BEATRIZ ARAUJO CONSTANTINO


GUILHERME AUGUSTO DA COSTA
JONAS ALMEIDA XAVIER NETO

TIPGEM SANGUINEA EM TUBO E EM LMINA

Goinia
2017
CAROLINE BEATRIZ ARAUJO CONSTANTINO
GUILHERME AUGUSTO DA COSTA
JONAS ALMEIDA XAVIER NETO

TIPGEM SANGUINEA EM TUBO E EM LMINA

Relatrio encaminhado como critrio


de avaliao para a disciplina
Mtodos Analticos em biomedicina
da Universidade Federal de Gois.

PROFESSOR RENAN NUNES LELES

Goinia
2017
Resumo
A descoberta dos grupos sanguneos e fator Rh abriu as portas para um avano
na rea mdica que salvou milhes de vidas. Dessa forma, a correta determinao do
grupo sanguneo de fundamental importncia para a diversos tratamentos e
preveno de doenas como a Eritroblastose fetal. Para a execuo dessa prtica
foram realizadas as tipagens em lmina e em tudo, tambm foi feita a prova reversa
e o teste do fator D fraco. O teste em lmina consistiu em adicionar os soros Anti-A,
Anti-B e Anti-D, cada um em uma gota de sangue e observada a presena ou no de
aglutinao. A tipagem em tubos, foi realizada de forma semelhante ao primeiro teste,
entretanto nesse caso a amostra sangunea foi diluda em salina na proporo 1:20 e
e centrifugada a 1.200 rpm por 60 segundos. Nos dois casos no foi observada
aglutinao nas amostras que receberam os Soros Anti-A e Anti-B indicando que o
sangue analisado do tipo O. A aglutinao em contato com o soro Anti-D demonstra
que a amostra tem fator Rh positivo. O teste reverso consistiu na adio de 100L
hemcias de tipos previamente determinados (A e B) em 100L do plasma obtido aps
centrifugao da amostra. Foi possvel observar aglutinao nos dois tubos, tendo em
vista que a amostra analisada pertencia ao tipo O, sendo assim o resultado ocorreu
conforme o esperado. A testagem do fator Du e realizado em amostras de fator Rh
negativo, a tentativa de realizao do teste no material em anlise encontrou
problemas, pois o sangue utilizado como grupo controle encontrava-se intensamente
lisado devido ser uma amostra antiga. Mesmo assim a amostra em anlise, e o
controle negativo apresentaram os resultados conforme o esperado.

Palavras-chave: Anlises Clinicas. Hemograma. Tipagem sangunea


Sumrio
1 Introduo ......................................................................................................................................... 4
1.1 Hereditariedade................................................................................................................... 4
1.1.1 Hereditariedade do sistema ABO ................................................................................. 4
1.1.2 Hereditariedade do sistema Rh .................................................................................... 4
1.2 Determinao dos grupos sanguneos do sistema ABO .............................................. 5
1.3 Determinaes do sistema Rh ............................................................................................. 5
1.4 Objetivos .................................................................................................................................... 6
2 Metodologia ...................................................................................................................................... 7
3 Resultados ........................................................................................................................................ 8
4 Consideraes Finais .................................................................................................................. 10
Referncias Bibliogrficas............................................................................................................. 11
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1 Introduo
1.1 Hereditariedade
A hereditariedade a transmisso dos caracteres biolgicos de pais para filhos,
em que a clula, rica em material gentico, responsvel por essa transmisso.
(CARVALHO, 1999)
A clula germinativa que se divide por meiose, formando gametas com metade
do material gentico do seu genitor, responsvel pela reproduo da espcie. Em
que, cada ser, recebe uma parte do material gentico de cada um dos seus
progenitores. (CARVALHO, 1999)
Os genes so responsveis pelos caracteres biolgicos, que integram os
cromossomos ocupando locais fixos, denominados de locus. Os alelos so os genes
que se emparelham no mesmo locus em cromossomos homlogos. (CARVALHO,
1999)
E no estudo dos grupos sanguneos, as hemcias possuem aglutinognios
determinados geneticamente, que apresentam capacidade antignica, reagindo com
anticorpos especficos, as aglutininas. (CARVALHO, 1999)

1.1.1 Hereditariedade do sistema ABO


O sistema ABO um fator hereditrio que determinado pela ausncia ou
presena dos aglutinognios, que se deve a alelos mltiplos situados no mesmo lcus,
em cromossomos homlogos. (CARVALHO, 1999)
Os genes A, B e O so responsveis pelos grupos sanguneos do sistema ABO.
Em que ocorre relao de co-dominncia entre os genes A e B sobre o gene O.
(CARVALHO, 1999)

1.1.2 Hereditariedade do sistema Rh


O fator Rh determinado por locs relacionados a trs pares de genes com os
alelos Cc, Dd e Ee, que possui trs aglutinognios. Cada gene determina um antgeno
que identificado pelo anti-soro correspondente. E o fator D considerado o mais
importante do sistema Rh. (CARVALHO, 1999)
Os indivduos Rh negativos so homozigotos recessivos, em que um
cruzamento de um Rh positivo com um Rh negativo s poder ter filhos com Rh
positivo. Nesses casos, pode ocorrer imunizao materno-fetal ao fator Rh, que
agravado por gestaes seguidas, pode levar ao aparecimento da eritroblastose fetal,
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que ocorre quando um feto Rh positivo imuniza a me Rh negativo que forma


anticorpos contra o prprio filho em gestao. (CARVALHO, 1999)

1.2 Determinao dos grupos sanguneos do sistema ABO


Quando uma substncia estranha entra no organismo, h uma produo de
uma substncia neutralizante que reage fsica e quimicamente com a primeira. A
substncia estranha denominada antgeno e a substncia produzida anticorpo. Essa
reao especfica, pois um antgeno s reage com seu anticorpo correspondente.
(CARVALHO, 1999)
A tabela a segui demonstra a distribuio das aglutininas e aglutinognios do
sistema ABO.
Grupo sanguneo Aglutinognio nas hemcias Aglutininas no soro
A A anti-B
B B anti-A
AB AB nenhum
O nenhum anti-A e anti-B
Tabela 1: Grupos sanguneos, aglutinognios e aglutininas do sistema ABO. Fonte: CARVALHO,
1999.

As hemcias contendo aglutinognio de um determinado grupo sanguneo,


sofrem aglutinao quando entram em contato com a aglutinina correspondente.
Sendo assim, os antgenos dos grupos sanguneos so denominados aglutinognios
e os anticorpos correspondentes, aglutininas. (CARVALHO, 1999)
A classificao dos grupos sanguneos pelos soros padres anti-A e antiB
determinada pela presena ou ausncia de aglutinognios A e B nas hemcias.
(CARVALHO, 1999)

1.3 Determinaes do sistema Rh


Na maioria dos indivduos existe, nas suas hemcias, um aglutinognio
importante denominado Rh. E a partir de uma cobaia obteve-se o soro contendo um
anticorpo que aglutina o sangue desses indivduos.
As hemcias aglutinadas possuem um antgeno ou aglutinognio, chamado Rh,
sendo consideradas Rh positivo. E nos casos restantes h ausncia de aglutinognio,
sendo denominada Rh negativo.
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Ao contrrio do sistema ABO em que as aglutininas ocorrem de forma natural,


no sistema Rh os anticorpos so imunes s a partir de um contato com o antgeno. O
indivduo no possui aglutinina correspondente ao Rh. Entretanto, um indivduo Rh
negativo ao receber sangue de um indivduo Rh positivo produz a aglutinina
especfica.
A determinao do sistema Rh conseguida a partir da aglutinao de
hemcias Rh positivo pelo anticorpo especfico anti-Rh. As hemcias Rh negativa
podem pertencer a variante D fraco, considerada Rh positiva para efeitos
transfusionais. E sua presena deve ser pesquisada, pois a transfuso de sangue
positivo produz imunizao em receptores negativos com formao de anticorpos anti-
Rh. Os indivduos D fraco positivo so considerados negativos.

1.4 Objetivos
O sistema ABO e Rh so muito importantes para a realizao do transplante
de sangue, em que dentro do sistema ABO o sangue O doador universal e o sangue
AB receptor universal e no sistema Rh, sangue positivo pode doar para negativo, no
entanto, o contrrio no pode acontecer. Caso a doao acontea sem respeitar o
quadro de quem pode doar para quem, h sensibilizao do paciente, podendo lev-
lo a uma anemia hemoltica.
Visto a importncia do conhecimento do tipo sanguneo e do fator Rh, o objetivo
da aula foi realizar a tipagem sangunea com a utilizao dos soros anti-A, anti-B e
anti-Rh e a tcnica de deteco de D fraco. Foram realizadas a tipagem sangunea
em lmina e em tubo, e comprovao da prova reversa e o teste do fator D fraco.
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2 Metodologia
Para a tipagem sangunea realizou-se 3 metodologias: em lmina, em tubo e
comprovao por prova reversa. Alm dessas duas realizou-se a testagem do fator
Du.
Para a tipagem com lmina utilizou-se 1 lmina na qual 3 gotas de sangue
foram colocadas simultaneamente (cada gota equivale 50 L). Essas gotas foram
testadas sob efeito de outra gota contendo soro anti-A, anti-B e anti-D. Havendo
aglutinao na gota com o sangue A significa que a amostra possui hemcias tipo A.
Se A e B aglutinarem, significa tipo AB. Se somente B aglutinar, significa que as
hemcias so do tipo B. Se a gota com o anti-D aglutinar significa que a amostra de
sangue Rh +.
A tipagem em tubo mais sensvel. Foi realizada fazendo uma diluio de 1/20
de hemcias em soluo salina. A homogeneizao foi realizada em centrifugao de
1200 rmps em 1 minuto. Foi transferida uma aliquota de uma gota das hemcias
lavadas para 3 tubos e adicionado uma gota de anti-A, anti-B e anti-D e verificado em
cada um dos 3 tubos a presena de aglutinao. A aglutinao indica resultado
positivo para aquele teste conforme explicado na tipagem em lmina.
Para a prova reversa utilizou-se100 L de plasma em cada um de 3 tubos. Cada
tubo identificado como A, B e O. Depois acrescentou-se 100 L de hemcias lavadas
e diludas tipo A, B e 0 nos respectivos tubos com o plasma. E foi feita a leitura.
No teste do fator Du foram preparados 3 tupos: T (teste), CP (controle postivo),
CN (controle negativo). Nos foram adicionados 100 L de hemcias lavadas e diluidas
em 1/20 em soluo salina. Adicionou-se mais 100 L de soro anti-D no tubo T e mais
100 L no tubo CP. Realizou-se incubao de 37 C por 20 minutos. E feita 3 lavagens
usando 800 L de soluo salina e centrifugao a 3000 rmps por 5 minutos. Depois
foi utilizado mais 100 L de soro de Coombs nos 3 tubos, homogeneizado utilizando-
se de centrifugao a 1200 rmps por 1 minuto, e feita a leitura para a presena de
aglutinao.
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3 Resultados
3.1 Tipagem sangunea em lmina
O resultado obtido na tipagem sangunea em lmina foi O+, considerando que houve
aglutinao apenas na gota de sangue em que foi aplicado o soro Anti-D, como mostra
a foto a seguir.

Figura 3.1: Tipagem sangunea em lmina com aglutinao apenas na gota de sangue em que foi
aplicado o soro Anti-D.

3.2 Tipagem em tubo


Na tipagem em tubo obteve-se o mesmo resultado, as hemcias dos tubos A e B que
tiveram contato com os soros Anti-A e Anti-B, respectivamente, no sofreram
aglutinao, determinando que as hemcias so do tipo O, pois no reagiram com
nenhum antgeno. E Rh positivo pois houve aglutinao quando pingou-se o soro
Anti-D, ou seja, os antgenos reagiram com as hemcias, se ligando a elas e ligando-
as umas nas outras. A imagem a seguir mostra o resultado obtido.

Figura 3.2: Resultado da tipagem sangunea em tubo, com aglutinao apenas nas hemcias em
que entraram em contato com o soro Anti-D.
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3.3 Prova reversa


Apesar do teste da prova reversa ser realizado apenas em pacientes com fato Rh
negativo e a amostra ter sido positiva, foi importante a realizao da prtica para o
conhecimento da tcnica.
O resultado obtido tambm foi o esperado, houve aglutinao no tubo teste, no entanto
no tubo de controle positivo, a maioria das hemcias estavam lisadas, ento a anlise
foi mais difcil, observando apenas uma fina camada de aglutinao e no tubo de
controle positivo no houve aglutinao.
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4 Consideraes Finais
O grupo utilizou uma amostra previamente coletada de um paciente que no
sabia sua tipagem sangunea, e portanto a aula se mostrou no apenas didtica, mas
tambm til por mostrar o resultado para o paciente. Por um lado a amostra j coletada
poupou baste tempo para todo o processo; por outro lado as lavagens foram um
procedimento trabalhoso e demorado.
No mais, o trabalho em grupo foi bastante proveitoso e a aula bastante til para
o entendimento da tipagem sangunea.
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Referncias Bibliogrficas

CARVALHO, W. F. Tcnicas mdicas de Hematologia e Imuno-Hematologia. 7.


ed. Belo Horizonte: Coopmed, 1999.

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