III.

Alat dan bahan

Alat-alat Bahan-bahan
Tabung Reaksi Serum
Kuvet Akselelator
Pipet 10 ml Diazoblank
Pipet 1,0 ml Aqua destilata
Mikropipet 100-500 L Asam sulfanilat
Spektrofotometer =546 nm Natrium Nitrit

IV. Prosedur
A. Pengukuran Kadar Bilirubin Total
Disiapkan tabung reaksi untuk larutan blako yang berisi 50L serum,
1000L akselelator dan 100L diazoblank. Dan disiapkan tabung reaksi untuk
larutan uji yang berisi 50L serum, 1000L akselelator dan 100L reagen diazo.
Kemudian dicampurkan larutan sampai rata dan diinkubasi pada suhu 25C
selama 10 menit dan dibaca absorbansi larutan uji/sampel terhadap larutan blanko
dengan panjang gelombang 546 nm.
B. Pengukuran kadar Bilirubin Terkonjugasi
Disiapkan tabung reaksi untuk larutan blako yang berisi 50L serum,
1000L aquadest dan 100L diazoblank. Dan disiapkan tabung reaksi untuk
larutan uji yang berisi 50L serum, 1000L aquadest dan 100L reagen diazo.
Kemudian dicampurkan larutan sampai rata dan diinkubasi pada suhu 25C
selama 10 menit dan dibaca absorbansi larutan uji/sampel terhadap larutan blanko
dengan panjang gelombang 546 nm.

V. Hasil Pengamatan dan perhitungan

Absorbansi (A) Faktor
Bilirubin Total 0,011 45
Bilirubin Direct 0,008 5
Perhitungan :

Bilirubin Total (mg/dL) = Absorbansi Uji x Faktor Total

= 0,011 x 45
= 0,495 mg/dL

Bilirubin Direct (mg/dL) = Absorbansi Uji x Faktor Direct

= 0,008 x 5
= 0,04 mg/dL