1-indicar otros mtodos de recuperacin de ovocitos?

LA TCNICA DE ASPIRACIN FOLICULAR TRANSVAGINAL (OPU)

Mejor conocida por sus siglas en ingles, OPU (Ovum Pick-up), la aspiracin folicular transvaginal
es una tcnica mediante la cual los ovocitos inmaduros son recolectados de los folculos en los
ovarios de una vaca viva por aspiracin guiada mediante ultrasonografa a travs de la pared
vaginal.

Para llevar a cabo esta tcnica de aspiracin folicular in vivo se requiere contar con un equipo de
ultrasonografa, un transductor sectorial, una bomba de aspiracin y un sistema de gua de la aguja.
La sonda ultrasonogrfica para OPU ha sido construida con la finalidad de que permita la
manipulacin de la aguja desde el exterior del animal y que el transductor est en contacto con los
ovarios; de ese modo, el extremo
de la aguja pueda ser visualizado cuando penetra dentro de los folculos que sern aspirados. La
aguja est conectada a la bomba de vaco por medio de una tubera plstica o de silicona, lo que
permite que el contenido folicular sea vaciado directamente al filtro, que es similar al utilizado para
la recoleccin de embriones. En primer lugar, al iniciar el trabajo, las hembras a utilizar deben ser
sedadas con xilazina y adems deben recibir anestesia epidural con lidocaina al 2% (3-5 ml/vaca),
luego de esto se debe proceder a limpiar y desinfectar la vulva y el perineo.
Una vez realizada la higiene, se procede a introducir el transductor que tiene acoplado el sistema de
gua de la aguja. No es necesario introducir la mano por la vagina para tal fin. La cabeza del
transductor debe ubicarse en cualquiera de los lados del cervix, segn sea el ovario a puncionar.
Luego se introduce la mano izquierda por el recto y se fija el ovario contra la cabeza del
transductor, lo que permite visualizarlo en la pantalla del equipo del ultrasonografa, al igual que a
los folculos y la aguja. A su vez en la pantalla del ultrasonografo podemos apreciar la trayectoria
de la aguja lo que nos permite ubicar los folculos para lograr una aspiracin exitosa. Una vez
ubicado el folculo a aspirar, se impulsa la aguja suavemente para que penetre la pared vaginal y
luego la folicular; una vez logrado esto la bomba de vaco aspira el contenido y lo deposita en el
filtro de embriones o en el recipiente destinado para tal fin. En cualquiera de los casos estos debe
contener medio de aspiracin heparinizado (PBS+ 10% de suero fetal bovino). Posterior a esto los
ovocitos son procesados igual que para fertilizacin in vitro.

Metodo laparotoma-laparoscopa

Dentro de las tcnicas existentes para la recoleccin de ovocitos de hembras vivas, se encuentran la
laparotoma-laparoscopa y la aspiracin transvaginal guiada por ultrasonido. El desarrollo de la
laparoscopia ha permitido avances en el diagnstico y manejo de la fertilidad para incrementar la
produccin animal. Se ha utilizado para desarrollar la industria de transferencia en aquellas especies
o grupos de edades en donde no es fcil realizar la manipulacin del tracto reproductivo por va
rectal durante la recuperacin de ovocitos y/o transferencia de embriones. Dentro de las ventajas
que ofrece la laparoscopa se encuentra el bajo costo del equipo, la obtencin de una imagen clara y
un mejor control de problemas de recuperacin pos
quirrgico del ovario .
Sin embargo, esta tcnica tiene como desventajas la no visualizacin del cohorte de folculos que
estn en crecimiento debajo de la superficie ovrica, el desconocimiento de los efectos a largo plazo
de recolecciones repetidas que pueden llegar a formar cicatrices y adherencias en el sitio de
operacin y, bsicamente, el hecho de ser una tcnica altamente invasiva, por lo cual no es aceptada
desde el punto de vista de bienestar del individuo.
2.- qu aspectos debera de tomarse en cuenta para hacer la clasificacin de ovocitos

Aspectos que debemos tomar en cuenta

Corpsculo polar: la presencia de un corpsculo polar dismrfico, aunque no afecte a la tasa de

fecundacin, s afecta al posterior desarrollo del embrin, as como a la tasa de
embarazo(10,15,16).

Espacio perivitelino: un espacio perivitelino agrandado, irregular, con contenido en su interior,

disminuye la tasa de embarazo, aunque no afecte a la tasa de fecundacin(10,15,16).

Zona pelcida: la existencia de una zona pelcida engrosada, adelgazada, irregular o tabicada o
con diferente densidad, afecta a la tasa de ovocitos que no continan su desarrollo tras la
ICSI(15,16).

Citoplasma: la presencia de anomalas del citoplasma como granulaciones, inclusiones, cuerpos

refrctiles, vacuolas, etc., se ha demostrado que disminuye la tasa de embarazo(12,10,17). Otros
autores consideran que las anomalas en el citoplasma son un factor pronstico pobre, aunque s
un signo de inmadurez citoplasmtica. Se ha demostrado una relacin directa entre las anomalas
citiplasmticas y el nmero de aneuploidas

Clasificacin de ovocitos

A corresponde a un ovocito con clulas del cumulus con nmero de capas

mltiples (mayor a 4) y compactas, con citoplasma homogneo y
transparente
B tiene capas mltiples del cmulus (de 1 a 3) y un citoplasma homogneo
con zonas perifricas oscuras.
C se caracteriza por tener un cumulus denudado y un citoplasma irregular
con zonas oscuras.
D tiene el cumulus con clulas expandidas y un citoplasma irregular y con
zonas oscuras Clasificacin propuesta por Lonergan y colaboradores, en
1991. Ilustraciones realizadas en el estudio sobre las categoras ovocitarias:
3. indique la clasificacin, diferencias y las caractersticas de los folculos y las caractersticas
delos vulos en cada una de sus etapas

La foliculognesis se desarrolla de manera paralela a la ovognesis y durante este proceso el

folculo pasa por diversos estadios:

folculo primordial,
folculo primario, (que contiene el ovocito y el epitelio folicular)
folculo secundario o preantral (en este estadio varias hileras de clulas de la
granulosa forman el stratum granulosum y segregan una capa glicoproteica que ser
la zona pelcida, inmersas en la teca folicular),
folculo terciario o antral (el cual contiene una cavidad, el antro folicular y el ovocito se
encuentra en un lateral llamado cumulus oophorus) y
folculo de Graaf (el folculo grande ya listo para la ovulacin).

El desarrollo de los folculos ovricos puede dividirse en dos fases:

Una fase prepuberal que comienza con la formacin de los folculos primordiales.
Los folculos primordiales son aquellos que presentan el ovocito rodeado de una
monocapa celular, constituida en lo general por 4 a 8 clulas de la granulosa de forma
fusiforme (alargadas). Estos folculos se forman a partir de la octava semana de
gestacin y miden 25 m de dimetro aproximadamente. An no presentan receptores
para la hormona FSH (hormona foliculoestimulante), lo que significa que an no han
sido reclutados para iniciar el desarrollo folicular.
 A la semana 20-24 de gestacin, las clulas fusiformes de algunos folculos primordiales
se transforman en clulas granulosas cuboides, formndose el folculo
primario unilaminar.

Estos folculos sern aquellos que constan de una monocapa celular que rodea al
ovocito, pero cuyas clulas de la granulosa tienen forma cuboidal. Estas clulas
granulosas se dividen, formando varias capas alrededor del oocito y el complejo se
convierte en un folculo secundario o folculo primario multilaminar.

stos folculos secundarios tienen ms de una capa de clulas de granulosa, y sobre

estas se observan clulas de la teca(de forma alargada).

Las clulas granulosas segregan mucopolisacridos que forman un halo protector,

la zona o membrana pelcida alrededor del oocito. Este folculo, el folculo antral,
crece hasta alcanzar un dimetro de unas 150m y presenta una cavidad entre las
clulas granulsicas, que est llena de lquido folicular (rico en lpidos y algunas
protenas). Esta estructura, llamada antro, terminar rodeando completamente al
ovocito hasta la ovulacin.

Microfotografa de un corte de Folculo de Graaf. El ovocito se ve circular y claro

rodeado por clulas especializadas del cmulo, teidas ms oscuras. El gran espacio
claro es el antro. Tincin con Hematoxilina-eosina

Una fase de folculos maduros: o folculos de Graaf que son de tipo antral,
de gran tamao en comparacin a los otros tipos de folculos, y tienen varias
capas de clulas de la granulosa.
Se forman de la siguiente manera: las prolongaciones citoplasmticas de las clulas
granulosas continan penetrando en la zona pelcida y proporcionan nutrientes y
seales hormonales a los ovocitos primarios en maduracin. Este paso es
dependiente de FSH que, adems de inducir la proliferacin de las clulas de la
granulosa, incrementa el nmero de receptores de stas, potenciando su propio
efecto. Adems, parece ser que la LH dirige la diferenciacin de las clulas tecales
que rodean al folculo. El oocito ahora se desplaza hacia una posicin excntrica y se
rodea de una capa llamada cumulus oophorus o disco prolgero (de 2 o 3 clulas de
grosor). Al final de esta fase el complejo folculo preovulatorio o de Graaf alcanza un
dimetro medio de 2 a 5 mm. Son estos folculos los que llegan a la etapa de la
ovulacin.

Caractersticas de los ovulos

La ovulacin est marcada por tres etapas:

Fase folicular, ya que la accin de la hormona folculo estimulante (FSH) hace que
comience la maduracin de clulas oocitos en ambos ovarios para que puedan llegar
a ser vulos. stos son encerrados en un folculo adherido al ovario para completar su
proceso, pero slo uno de ellos madurar lo suficiente para desprenderse y ser
liberado en la mitad del ciclo menstrual.

En la etapa folicular, los niveles de estrgeno aumentan con el fin de preparar al tero
para que ste sea capaz de albergar el vulo fecundado, se comienza formar desde
ya el endometrio, que es una capa que recubre las paredes uterinas y que posee una
serie de nutrientes. Cuando un vulo es liberado, es decir, entre los das 12 y 16, se
produce la segunda etapa de la ovulacin, donde el vulo sale del folculo y es dirigido
hacia el tero a travs de las trompas de falopio para ser fecundado.El vulo tiene una
vida aproximada de hasta 48 horas, por lo que si ste no es fecundado en este
periodo de tiempo, comienza a desintegrarse. Por el contrario, los espermios tienen
una vida ms larga, de hasta 5 das, lo que les permite alojarse en las trompas de
falopio algunos das antes de la ovulacin. En los das previos y durante la ovulacin,
la mujer secreta una mucosidad vaginal que se caracteriza por tener una consistencia
similar a una clara de huevo cruda, y sta es la que permite transportar a los
espermatozoides con mayor facilidad al interior del sistema reproductor femenino.

Pasada esta etapa, comienza la tercera fase ltea, en donde se espera la

implantacin del vulo fecundado en el endometrio. Es este proceso, el cuerpo de la
mujer puede sufrir una serie de cambios, ya que ste se prepara para iniciar un
embarazo. Es as como los niveles de progesterona aumentan, y hacia el final de esta
fase, es decir, los ltimos cinco das antes de la nueva menstruacin, es comn que
se manifiesten sntomas del Sndrome Pre Mestrual (SPM). Los sntomas abarcan una
extensa gama de molestias, algunas leves y otras que incluso imposibilitan la vida
normal de la mujer. En estos das de la fase ltea, es probable que se presentes
algunos sntomas fsicos, como dolores de cabeza, hinchazn, leve aumento en el
volumen de los pechos, agotamiento y algunos problemas gastrointestinales, por
nombrar los ms comunes.

5.-indique si hay diferencia entre vulos de vacunos, porcinos, equinos y conejos

Tipos de Ovulos de acuerdo a la concentracin del vitelo

*Isoleucito.- El vitelo y citoplasma en iguales cantidades. Ej: Mamiferos(Especie Humana).

*Mesotelio.- El vitelo se encuentra Polo Vegetativo. Ej: Anfibios(Batracio)
*Centrolecito.- El vitelo esta alrededor del Nucleo. Ej: Antropodos(Araa)
*Telolecitos.- El vitelo se encuentra gran cantidad que empuja al nucleo hacia la periferia. Ej: Aves,
Reptiles
Vacunos No hay diferencia
Equinos No hay diferencia
Porcinos No hay diferencia
conejos No hay diferencia