UNIVERSIDAD INDUSTRIAL DE SANTANDER

FACULTAD DE SALUD
ESCUELA DE MICROBIOLOGA Y BIOANLISIS
DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGA Y BIOANLISIS
LABORATORIO DE MICROBIOLOGA INDUSTRIAL

PRODUCCIN DE ETANOL

Presentado Por:
Isabel Cristina Alvarez Blanco, Cd. 2151557
Camilo Andrs Arvalo Navarro, Cd.2131388
Rodolfo Avellaneda Vega, Cd.2131313
Andrs David Ayala Vargas, Cd. 2142543

Presentado a: Jess Manuel Epalza Contreras

Mara Fernanda Moreno Vargas

INTRODUCCIN

El vino es una sustancia hidroalcohlica procedente de la fermentacin principalmente de la

uva aunque tambin se pueden utilizar otras frutas, por las levaduras. Est compuesto por
azcares, cidos, sales, compuestos fenlicos y otras sustancias. Cada sustancia presente
en el vino tiene una sabor y olor propio que se transmiten al conjunto. La calidad de ste
depende de la armona y el equilibrio del conjunto de componentes.

La fermentacin alcohlica es un conjunto de transformaciones bioqumicas por la cual los

azcares contenidos en el jugo de fruta se transforman en alcohol etlico. Para ello, es
necesaria la presencia de levaduras. La fermentacin alcohlica es una reaccin
exotrmica, se libera cierta cantidad de energa. Produce gran cantidad de CO2 que es lo
que provoca que algunos vinos tengan burbujas.
El etanol resultante es casi un 51% del peso y los rendimientos obtenidos en la industria
alcanzan un 7%.

Durante la fermentacin alcohlica es necesario controlar el aumento de la temperatura, ya

que por encima de los 29C, comienzan a producirse la volatilizacin de sustancias
aromticas y a una mayor temperatura, las levaduras empiezan a morir detenindose el
proceso fermentativo.

Las cepas de levadura ms empleadas en la fabricacin del vino, cerveza y pan, son las
correspondientes a la especie Saccharomyces cerevisiae. Esta levadura sigue un
metabolismo fermentativo cuando est en condiciones anaerobias, pero cuando hay
oxgeno hace una respiracin aerobia y no produce alcohol. Este fenmeno se conoce
como efecto Pasteur, y es determinante en la industria de bebidas alcohlicas, pues para
que la produccin de etanol sea correcta, las levaduras deben desarrollarse en ausencia de
oxgeno.

El empleo principal de los procesos de fermentacin ha sido dirigido, desde hace muchos
aos, a la produccin de etanol destinado a la elaboracin de bebidas alcohlicas como
como el vino, la cerveza, la sidra. Dentro de los estudios de biotecnologa se ha intentado
emplear el etanol resultante de la fermentacin alcohlica de los desechos agrcolas en la
obtencin de biocombustibles empleados en los motores de vehculos. Los usos del etanol
en la industria son amplios y van desde la elaboracin de productos cosmticos, productos
de limpieza, entre otros. No obstante el empleo de la fermentacin alcohlica tiene un xito
potencial en el tratamiento de los residuos de la industria alimenticia. Un proceso industrial
muy investigado a comienzos del siglo XXI es la fermentacin en estado slido empleada en
la biomedicacin y en la biodegradacin de productos de desecho, la transformacin
biolgica de residuos agroindustriales, en la produccin de compuestos bioactivos, de
enzimas, de cidos orgnicos, biopesticidas, biocombustibles y compuestos aromticos,
entre otros.

OBJETIVOS

Producir fermentacin alcohlica del zumo de Lulo, utilizando un biorreactor batch en

pequea escala.
Realizar un biorreactor a pequea escala con los componentes necesarios para que
sea posible que se de una fermentacin alcohlica
Analizar el comportamiento del cultivo hecho para la obtencin de bioetanol
atendiendo sus diferentes medidas.
Identificar cada una de las caractersticas obtenidas al final del proceso y la
viabilidad del mismo.
METODOLOGA

1. Pensamiento continuo

2. Pensamiento estructural
3. Pensamiento cientfico

Hiptesis alternativa
La adecuacin del reactor proporcionar las condiciones necesarias para la produccin de
Etanol mediante un cultivo en Batch.

Hiptesis nula
La adecuacin del reactor NO proporcionar las condiciones necesarias para la produccin
de Etanol mediante un cultivo en Batch.

Volumen a preparar : 12 L de vino

Cantidad de pulpa de fruta: 4L
Cantidad de azcar: 21% p/v por 12 L de vino en cada 100 ml corresponde a = 2,520 g
Cantidad de agua a utilizar: 1.6 mL que aumenta por cada gramo de azcar, 2520 g de
azcar x 1,6 ml = 1575 ml para 8L: 8000 ml - 1575 ml = 6425 ml de Agua.
Cantidad de Fosfato de amonio: Por cada litro de agua 1 gramo de la mezcla; 12 L de vino =
12 gramos de Fosfato de amonio

RESULTADOS

Da Hora Tiempo Temper Volume Acidez Brix pH Biomasa

(H) atura n de (cell/ml)
NaOH
gastad
o

20/10/1 14:00 0 25,8 C 19,58 0.0979 8 3,26 9.025.000

7

23/10/1 14:00 72 24,4 C 21 mL 0.105 4 4,10 11.037.500

7

24/10/1 16:00 98 22.4 C 22,5 mL 0.1125 1 4.08 19.750.000

7

25/10/1 08:00 114 24.1 C 23 mL 0.115 0 4.07 37.550.000

7

26/10/1 10:00 128 22,7 C 25 mL 0.125 - 4,06 55.500.000

7

27/10/1 14:00 156 21,8 C 21 mL 0.105 - 4,04 112.750.000

7

30/10/1 14:00 228 25,1 C 20,6 mL 0.103 - 4,09 138.560.000

7

31/10/1 16:00 254 23.9 C 25 mL 0.125 - 4.09 179.500.000

7
 01/11/1 09:00 271 21,9 C 27,3 mL 0.136 - 4,08 177.500.000
7

02/11/1 10:00 284 21.3 C 26.8 mL 0.134 - 4.06 172.000.000

7

03/11/1 14:00 312 21,8 C 26 mL 0.13 - 4,10 136.000.000

7

Acidez
N cido*V cido = N base* V base
N acido = N base * V base / V cido
N cido = 0.1 N * 19.58 mL / 20 mL = 0.097N

Nmero de generaciones.

Log Xf LogXo
n= Log 2

Log (179.500.000)Log(9.025.000)
n= Log 2

n = 4.314 generaciones

Tiempo de generacin
tc
tg = n

254 horas
tg = 4,314

tg = 58, 878.

Velocidad especfica de crecimiento

Ln 2
= tg

0,693
= 58,878

= 0, 012 h1

Concentracin Inicial de la Biomasa

X f = X o * e*t
Xf
Xo = e*t

0,0014 mg
Xo = e0,012*58,878

X o = 0, 00069 mg
Rendimiento de biomasa obtenida vs sustrato consumido

Xf Xo
Y x/s = SoSf

0,00140,00069
Y x/s = 25200 = 0, 281

Rendimiento producto obtenido vs sustrato consumido

% Etanol final: 13%

% v/v de etanol
% v/v = 105.3 g/l de Etanol

P f P o
Y p/s = SoSf
105,3 g/L 0 g/L
2520g/L0g/L = 0, 0417
Rendimiento del sustrato Respecto a la produccin de CO2

Y CO2/S = 1 Y x/s Y p/s

Y CO2/S = 1 0, 281 0, 0417 = 0, 6773

DISCUSIN

En la elaboracin del vino a base de pulpa de Lulo se utiliz para esta fermentacin
alcohlica una cepa de Saccharomyces cerevisiae y Saccharomyces bayanus como
levaduras y el zumo de la fruta actu como el sustrato. La primera cepa es muy conocida
por su actividad en la obtencin de etanol a nivel industrial, esto es debido que es un
microorganismo de muy fcil manipulacin y recuperacin, en contraparte la segund acepa
fue escogido por sus caractersticas anteriormente vistas en la fermentacin de un lote de
vino, dando como resultados buenos aprovechamientos de producto etanlico, estas cepas
no son muy exigentes en cuanto a su cultivo, no presentan alto costo, toleran altas
concentraciones de etanol, en la fermentacin se pueden producir bajos niveles de
subproductos o metabolitos los cuales no inhiben la cepas, son osmotolerantes, poseen la
capacidad de hidrolizar la sacarosa an estando en altas concentraciones.

El fruto escogido representado en su rentabilidad puede ser un producto que contiene

diversos factores que lo hacen un producto a considerar en la elaboracin de vino; el Lulo
es un producto un poco costoso a comparacin con otros frutos que tiene un mejor precio y
del cual se obtienen productos alcohlicos de buena calidad, no obstante, posee unas
caractersticas esenciales de acidez y dulzor, con una alta presencia de elementos
aromticos, tambin se ve favorecida que es una fruta que se mantiene en crecimiento a lo
largo de todo el ao y se dispone muy bien en la zona geogrfica donde fue adquirido el
producto.

En lo correspondiente a la grfica de la Biomasa se puede decir que se obtuvo un

crecimiento ptimo del nmero de clulas respecto a las horas, ya que proporcion una
curva ideal que nos grafica la buena utilidad de los nutrientes con respecto al tiempo para la
proliferacin adecuada de las levaduras.

Segn los resultados obtenidos de la sacarosa, ambas cepas levaduriformes tuvieron un

buen aprovechamiento,ya que al final de la fermentacin hubo una reduccin de la
concentracin inicial de azcar, permitindose el consumo del sustrato para poder
completar las necesidades bsicas de la clula , cmo el crecimiento ,mantenimiento y la
formacin de productos; adems cuando hay menos concentracin de sacarosa hay
incremento en la produccin de etanol al transcurrir el tiempo, esto hace referencia a que al
utilizar el Lulo que es la materia prima, el cual posee un alto contenido de azcares simples
y fermentables, como la glucosa, la fructosa y la sacarosa, entre otros, fue una gran ventaja
de utilizar este tipo de fuentes porque consiste en que no es necesario realizar tratamientos
previos para obtener los azcares fermentables, puesto que estos ya se encuentran
presentes y as las clulas pueden realizar un metabolismo anaerobio adecuado como el
presentado en los resultados. Las condiciones en las que se llev a cabo el proceso
facilitaron la produccin de etanol y su aumento en el tiempo pues la disminucin del
oxgeno favorece su produccin

El porcentaje final de alcohol que se obtuvo fue del 13% medidos al final del ensayo. En el
cual se dio una concentracin celular en el punto ms alto de 179500.000, con un consumo
del 100% de los azcares y con un pH promedio de 4.08. Reportes literatura de muestran
que muchas cepas de Saccharomyces spp, son ms eficientes a temperatura de 37C y pH
de 3.58, pero que en comparacin y a favor del proceso es necesario tener un control de
estas dos variables, esto es debido a la relacin que tiene con el consumo de carbono y
nitrgeno

CONCLUSIONES:

Para lograr la fermentacin alcohlica del zumo de lulo en un biorreactor por

denominarlo casero, requiri de un sellado por todos los orificios de manera tal que
no se presentase fugas del zumo, ni la entrada de oxgeno al interior del mismo, ya
que esto perjudica drsticamente al ser este un proceso anaerobio estricto; se opt
por elegir un reactor en forma de pimpina por las ventajas que este podra brindarle
al proceso.
Desde el inicio del proceso de fermentacin alcohlica con la adicin de todo lo
requerido para que este pudiese funcionar, hasta el momento de darle finalizacin
agregando el bisulfito y la gelatina sin sabor, para detener el procesos fermentativo y
la aclaracin del vino respectivamente, se observ que la calidad de la fruta es una
de los factores ms importante para obtener un resultado idneo, ya que el proceso
transcurri de la manera esperada da tras da, es tan as que al hacer la medicion
de que cantidad de alcohol produjo, este lleg al 13% dando a entender que el
proceso fue exitoso y se cumplio el objetivo planteado.
En el proceso de la cuantificacin de los datos se pudo presenciar la disminucin de
azcar hasta llevarla a 0 y el aumento de pH al igual que la biomasa como se
espere en un proceso de fermentacin ideal.

BIBLIOGRAFA

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Primera Edicin. 2008
Berg, J. Stryer, L. Bioqumica. Editorial Revert. Sexta Edicin. 2008
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http://es.scribd.com/doc/181053654/INFORME-DE-ELABORACION-DE-VINO#scribd
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http://repositorio.utp.edu.co/dspace/bitstream/11059/1689/1/66182G245.pdf>