La actividad de las enzimas reguladores se modula de diferentes maneras.
Los enzimas alostricos funcionan a travs de la unin reversible, no covalente, de unos compuestos reguladores: los moduladores alostricos o efectores alostricos, que generalmente son metabolitos pequeos o cofactores. Otros enzimas en cambio estn regulados por modificacin covalente reversible. Ambas clases de enzimas reguladores tienden a tener varias subunidades y, en algunos casos, el sitio o sitios reguladores y el sitio activo se encuentran en subunidades separadas. En los sistemas metablicos existen al menos otros dos mecanismos que regulan la actividad de los enzimas. Algunos enzimas son estimulados o inhibidos cuando se unen a protenas reguladoras separadas. Otros se activan cuando se eliminan segmentos peptdicos mediante escisin proteoltica la cual, a diferencia de la regulacin mediada por efectores, es irreversible. En procesos fisiolgicos tales como la digestin, la coagulacin de la sangre, la accin hormonal y la visin se encuentran ejemplos importantes de estos tipos de mecanismos. El crecimiento y la supervivencia celulares dependen del uso eficaz de los recursos; esta eficiencia es posible gracias a la accin de los enzimas reguladores. No hay una regla nica que gobierne la existencia de diferent3es tipos de regulacin alostricos (no covalente) puede permitir el control afinado de las rutas metablicas que funcionan de modo continuado pero a diferentes niveles de actividad cuando cambian las co0ndiciones celulares. La regulacin por modificacin covalente puede ser del tipo o nada (el caso ms comn en las roturas proteolticas) o dar lugar a ligeros cambios en la actividad. En un mismo enzima regulador pueden darse varios tipos de regulacin. LAS ENZIMAS ALOSTRICOS EXRIMENTAN CAMBIOS DE CONFROMACIN EN RESPUESTA A LA UNIN DE MODUALADORES Las protenas alostricas son las que presentan otras formas o conformaciones inducidas por la unin de moduladores. El mismo concepto de aplica a ciertos enzimas reguladores, en los que cambios de conformacin inducidos por uno o ms moduladores interconvierten formas ms activas o menos activas del enzima. Los moduladores de enzimas alostricos pueden ser inhibidores o estimuladores. El mismo sustrato es a menudo el modulador; la regulacin en la que el sustrato y el modulador son idnticos de denomina homotrpica .El efecto es similar al de la unin del O2 a la hemoglobina: la unin del ligando, o el sustrato en el caso de los enzimas, origina cambios de conformacin que afectan la actividad de otros sitios en la protena. En la mayora de casos el cambio de con formacin convierte una conformacin relativamente inactiva (estado T) en una conformacin ms activa (estado R). Cuando el modulador es una molcula diferente del sustrato, se dice que el enzima es heterotrpico. Obsrvese que los moduladores alostricos no se deben confundir con los inhibidores acompetitivos y mixtos. Aunque estos ltimos se unen en un segundo sitio del enzima, no inducen necesariamente cambios de conformacin entre las formas acticas e inactivas, y los efectos cinticos son distintos. Las propiedades de los enzimas alostricos son significativamente diferentes de las de los enzimas no reguladores sencillos .Algunas de las diferencias son estructurales .Adems de sitios activos, los enzimas alostricos tienen generalmente uno o ms sitios reguladores, alostricos, para la unin del modulador. Del mismo modo que el sitio activo de un enzima es especfico para su sustrato, cada sitio regulador es especfico para su modulador. Los enzimas con varios moduladores tienen, generalmente, diferentes sitios de fijacin especficos para casa uno de ellos. En los enzimas homotrpicos de sitio activo y el sitio regulador son el mismo. En general los enzimas alostricos tambin son mayores y ms complejos que los enzimas no alostricos. La mayora tienen dos o ms subunidades. Un ejemplo clsico es la aspartato transcarbamilasa (a menudo abreviada ATCasa), que cataliza una de las primeras reacciones de la biosntesis de nucletidos pirimidnicos, la reaccin entre el carbamil fosfato y el aspartato que forma carbamil aspartato:
La ATCasa tiene 12 cadenas polipeptdicas organizadas en 6 subunidades
catalticas (organizadas en forma de 2 complejos trimricos) y 6 reguladores (organizadas en forma de 3 complejos dimricos). La figura 6- 33 muestra la estructura cuaternaria de este enzima deducida a partir de anlisis de rayos X .Tal como se detalla ms adelante, el enzima muestra un comportamiento alostrico, ya que las subunidades catalticas funcionan como cooperativo. Las subunidades reguladoras tienen sitios de unin para el ATP y el CTP , que actan como reguladores positivo y negativo , respectivamente .CTP es uno de los productos finales de la ruta por lo que la regulacin negativa por el CTP sirve para limitar la accin de la ATAasa en condiciones en las que el de ATP indican que el metabolismo celular es robusto , la clula crece , por lo que pueden necesitarse ms nucletidos de pirimidina para que se produzca la transcripcin del RNA y la replicacin del DNA . LAS PROPIEDADES CINTICAS DE LOS ENZIMAS ALOSTRICOS DIVERGEN DEL COMPORTAMIENTO DE MICHAELIS MENTEN Los enzimas alostricos muestran una relacin entre Vo y (S) alcanza valores suficientemente elevados, la mayora de enzimas alostricos dan lugar a un curva de saturacin sigmoidea cuando representa Vo frente a (S), en lugar de la curva hiperblica tpica de los enzimas no reguladores .En la curva de saturacin sigmoidea podemos encontrar un valor de (S) a la que Vo es mitad de la mxima, pero no nos podemos referir al mismo con la designacin Km ya que el enzima no sigue la relacin hiperblica de Michaelis -Menten. En su lugar se utilizan a menudo los smbolos (S) 0,5 o K0, 5 para representar la concentracin mxima de la reaccin catalizada por una enzima alostrico. El comportamiento cintico sigmoideo es por lo general el reflejo de interacciones cooperativas entre subunidades proteicas .Dicho de otro modo , los cambios en la estructura de una subunidad se traducen en cambios estructurales de las subunidades adyacentes , efecto que es facilitado por interacciones no covalentes en la interfase entre subunidades .Los principios estn especialmente bien ilustrados por un no enzima : la fijacin de o2 a la hemoglobina .El comportamiento cintico sigmoideo se explican mediante los modelos concent5rado y secuencial de interaccin de subunidades La ATCasa ilustran de manera efectiva tanto el comportamiento cintico alostrico homotrpico como el heterotrpico .La unin de los sustratos, aspartato carbamil fosfato, al enzima producen de manera gradual una transicin desde el estado t relativamente inactivo al estado r ms activo .este hecho explica el incremento sigmoideo en lugar de hiperblico de Vo al aumentar (S). Una caracterstica de la cintica sigmoidea es que pequeos cambios en la concentracin de un modulador se puede asociar con grandes cambios en la actividad .un incremento relativamente pequeo en (S) en la parte de mayor pendiente de la curva provoca un incremento comparativamente grandes en Vo. La regulacin alostrica heterotrpica de la ATCasa es producto de sus interacciones con ATP y CTP. En el caso de los enzimas alostricos heterotrpicos, un activador puede hacer que la curva de saturacin con el sustrato sea ms prxima a la hiperblica, con un descenso de K0, 5 pero sin cambios en Max lo que se traduce en un incremento de velocidad de reaccin a una concentracin de sustrato fija. En el caso de la ATCasa , esto se produce por la interaccin con ATP lo que hace que el enzima muestre una curva de Vo frente a (S) caracterstica del lado R activo a concentraciones de ATP suficientemente elevadas (Vo es superior a cualquier valor de (S) ) . Un modulador negativo (un inhibidor) puede producir una curva de saturacin de sustrato ms sigmoidea, con un incremento en K0, 5. Otros enzimas alostricos heterotrpicos responden a la presencia de una activador con un incremento de Vmax pero con poco cambio en K0, 5. Los enzimas alostricos heterotrpicos muestran, por tanto, diferentes clases de respuesta en sus curvas de actividad frente a sustrato debido a que algunos tienen moduladores inhibidores, otro tienen moduladores activadores y otros (como la ATCasa) los tienen de ambas clases.