UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS - “ESPE”

Microbiología I
Nombre: Andrés Acosta NRC: 3310
Título: Frotis bacteriano, tinción simple y diferenciada (Gram)
Palabras clave: Staphylococcus aureus, asa bacteriana, azul de metileno.
Resumen: Se realizó dos frotis de Staphylococcus aureus en distintos portaobjetos.
Luego se llevó cada placa a diferente tinción (simple y diferenciada) para distinguir las
diferencias entre estas técnicas. Una vez teñidas las placas se las observo al microscopio
con en el lente 100X con aceite de inmersión.
Introducción
Antecedentes: Los colorantes son sales compuesta por un ion positivo y uno
negativo, uno de ellos esta colorado conocido como cromóforo. Cuando el ion positivo
es el cromóforo se llaman colorante básicos, cuando lo esté en el ion negativo serán
colorantes básicos (Tortora, Funke, & Case, 2007).
Justificación: En general las bacterias son microorganismos transparentes, lo que
dificulta su estudio. Es por esta razón que cuando se requieren conocer los detalles
morfológicos se recurre a tinciones (Pumarola, Rodriguez, Garcia, & Piedrola, 1987).
Marco Teórico: Una tinción simple es una solución acuosa o alcohólica de un
solo colorante básico, con el propósito principalmente de destacar al microorganismo
completo para ver sus formas y estructuras celulares (Tortora, Funke, & Case, 2007).
La tinción Gram permite diferenciar las incluso cuando son de igual forma y tamaño, por
esto es una tinción diferenciada. La propiedad de la grampositividad dependerá de la
naturaleza y composición química de la pared bacteriana. Las bacterias gramnegativas
son más permeables al alcohol, dado que tienen un alto contenido de lípidos, por esto se
destiñen al aplicar el decolorante, diferenciándolas de las grampositivas (Pumarola,
Rodriguez, Garcia, & Piedrola, 1987).
Objetivos
General: Diferenciar grupos bacterianos de acuerdo a su forma, agrupación
bacteriana y su tipo de acuerdo a la tinción Gram
Específicos
- Aplicar la tinción simple y diferencial es muestra de Staphylococcus
aureus.
Hipótesis: Gracias a la tinción se podrá la forma, agrupación de bacterias y su tipo de
acuerdo a la tinción Gram
Materiales y métodos: En el laboratorio de microbiología se realizó la Frotis bacteriano,
tinción simple y diferenciada (Gram) el 13 de noviembre de 2017, a cargo de la Lic. Alma
Koch y Andrés Acosta.
Se realizó el frotis de Frotis bacteriano de Staphylococcus aureus en dos placas
portaobjetos según la técnica de frotis añadiendo una gota de agua para realizarlo bien.
La primera placa se tiño con verde de malaquita por un minuto, se enjuagó y seco con
presión con papel toalla (Tortora, Funke, & Case, 2007). La segunda placa se tiño con
tinción Gram: se colocó violeta de cristal por un minuto, se enjuagó; se añadió Lugol por
un minuto, se aplicó 20 gotas de decolorante y por último se añadió safranina por un
minuto; después se enjuagó y seco a presión con papel toalla (Pumarola, Rodriguez,
Garcia, & Piedrola, 1987).
Resultados: En la placa teñida con verde malaquita al ser observado con el lente objetivo
100X se logró ver las células en forma circular y en formación de estafilococos de un
color verde intenso como se ve en figura 1. En la placa con tinción Gram se observó a
100X al igual que la anterior, estructuras circulas en agrupaciones de estafilococos de un
color rojo-rosa a pesar de ser Gram positivos, como se ve en la figura 2.

Figura 1 Staphylococcus aureus con

tinción simple (verde de malaquita)
observada a 100X de color verde
intenso.

Figura 2 Staphylococcus aureus con

tinción diferencial (Gram)
observada a 100X de color rosa.

Discusión: El Staphylococcus aureus es una bacteria grampositiva que se tiñe de color

azul-morado al aplicar la tinción Gram; si se tiñen de color rosa haciendo parecer que es
gramnegativa puede deberse a que perdió la integridad de la pared celular debido a
tratamiento antibiótico, al envejecimiento o a la acción de enzimas autolíticas, haciendo
que se elimine el cristal violeta durante la decoloración (Forbes, Sahm, Weissfeld , &
Trevino, 2009).
Conclusiones
 - Al teñir células bacterianas se puede apreciar con claridad sus formas, estructuras
y agrupaciones del resto del campo óptico.
- El Staphylococcus aureus es una bacteria que presenta agrupaciones en
estafilococo de pequeñas células en forma circular (o coco, la fruta), de allí su
nombre.

Bibliografía
Forbes, B., Sahm, D., Weissfeld , A., & Trevino, E. (2009). Diagnóstico micribiológico. México:
Ed. Médica Panamericana.

Pumarola, A., Rodriguez, A., Garcia, J., & Piedrola, G. (1987). Micribiología y parasitología
médica. Barcelona: Elsevier España.

Tortora, G., Funke, B., & Case, C. (2007). Introducción a la microbiología. Ed. Médica
Panamericana: México.