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BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR
GUÏA DE PRÁCTICA

Trujillo
2016-10

7 Actividades de Práctica E.L.L. & P.Ch.M.

L.L. BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR 7 Actividades de Práctica E. .Ch.M. & P.

que puede ocupar una buena parte del volumen total del citoplasma.M. participan en la vía endocítica donde diversas proteínas son internalizadas desde el medio extracelular. Este organelo está diferenciado en dos compartimientos cuyas superficies citoplasmáticas de sus membranas presentan ribosomas. consta de una serie de compartimientos membranosos dotados de enzimas. complejo de Golgi. a menudo tirada por proteína motoras que operan sobre rieles formados por microtubulos y microfilamentos del citoesqueleto. Identificar mitocondrias en cortes histológicos de tejidos animales. Este alto grado de compartimentación originó los organelos citoplasmáticos como el retículo endoplasmatico (rugoso y liso). INTRODUCCIÓN El citoplasma de las células eucariotas. OBJETIVOS 1. Como se podrá apreciar. constituyendo la via biosintética o secretora. etc. a los lisosomas. Este complejo de membranas. BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR OBSERVACION DE ORGANELOS CITOPLASMATICOS 1. endosomas y lisosomas los mismos que junto a la envoltura nuclear forman el Sistema de Endomembranas donde existe constantemente intercambio de materiales entre ellos. como también sucede con polisacáridos complejos producidos en el aparato de Golgi.) son transportados constantemente entre los componentes del sistema de endomembranas. Muchas proteínas destinadas al retículo endoplasmático (RE). síntesis de proteínas. que les permite llevar a cabo actividades celulares específicas como los procesos metabólicos propios de toda célula. proteínas. Algunos de estos organelos. como es el caso del retículo endoplasmático 7 Actividades de Práctica E. . aparato de Golgi y lisosomas en cortes de tejidos animales. etc.L. los lisosomas o exportadas fuera de la célula.L. existe un tráfico intracelular de membranas donde diversos materiales (lípidos. el almacenamiento y transcripción de información genética. 2. a diferencia del de las procariotas. 2. En el hígado se calcula que hay aproximadamente 11 m2 de retículo endoplasmático en 1 cm3 de tejido. son clasificadas. Esto es facilitado por una red dinámica integrada en la que los materiales se distribuyen en pequeñas vesículas de transporte limitadas por membranas que se mueven por el citoplasma en forma dirigida. al aparato de Golgi. En la cara trans del Golgi. a la membrana plasmática o aquellas que son secretadas se sintetizan en ribosoma fijos (adheridos a la membrana del retículo endoplasmático). al aparato de Golgi donde termina dicho procesamiento. Durante su síntesis por los ribosomas. se caracteriza porque se encuentra recorrido en toda su extensión por un sistema membranoso que separa el citosol de las cavidades internas que limita. Identificar a los componentes del sistema de endomembranas como el retículo endo- plasmático (rugoso y liso).Ch. a través de vesículas de transporte. los mismos que a continuación se describirá brevemente: Retículo Endoplasmático: Aproximadamente la mitad del área total de membrana de una célula eucariota engloba los espacios laberínticos del retículo endoplasmático. empaquetadas y dirigidas a diversos lugares como la membrana plasmática (proteínas integrales). además de los endosomas. estas proteínas son translocadas cotraduccionalmente al lumen del RE donde son plegadas y procesadas en su primera fase luego transportada. & P.

. bastones. Las potentes enzimas digestivas entran en contacto con las moléculas. que se aproxima a 4. Los lisosomas tienen una importancia particular en medicina. presentándose como vesículas membranosas cuando es muy abundante.5 . se clasifican y se empaquetan en diferentes tipos de vesículas que se transportaran a su destino final. Estos organelos contienen las enzimas del ciclo de Krebs y de la 7 Actividades de Práctica E. Cuando un leucocito o una célula de defensa ingieren bacterias o restos de una célula muerta. El RER tiene una morfología variable. de manera que sus componentes puedan utilizar la energía generada. Estas enzimas comparten una propiedad importante: todas alcanzan su actividad óptima en un pH ácido. A microscopía óptica. Esta apariencia ha fomentado la ampliamente aceptada visión de que las mitocondrias son entidades separadas y que son organelos grandes y numerosos. El REL está constituido por un sistema laberíntico de túbulos irregulares. Aparato de Golgi: Morfológicamente este organelo está compuesto por bolsas aplanadas rodeadas de membranas (cisternas) constituyendo los dictiosomas cuyo número varía en función del tipo celular. los lisosomas pueden degradar organelos (autofagia). BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR rugoso (RER) o carecer de ellos como el retículo endoplasmático liso (REL). ramificados y anastomosados e interviene en diversos procesos como la detoxificación. Tanto la CGN como la TGN funcionan como estaciones de clasificación: mientras que en la primera se distingue entre las proteínas que deben enviarse de regreso al RE y aquellas a las que se les permite avanzar a la siguiente estación de Golgi.L. almacenamiento de calcio.0 µm. es probable que los elementos básicos de su membrana limitante surjan del RE. Los dictiosomas. filamentos o raquetas cuyo tamaño varía entre 1 y 4 µm de largo y con un diámetro de 0.Ch.1. metabolismo de hidratos de carbono. se observan como gránulos. Los lisosomas se fusionan con el endosoma que contiene al cuerpo extraño y forman una gran vesícula.6. etc. presentan dos caras distintas: una cara cis (o cara de entrada) y una cara trans (o cara de salida). El RER está muy desarrollado en células que producen proteínas para exportación como en los acinos pancreáticos o en las células de las glándulas salivales. La disposición de los sáculos varía en función de la naturaleza de la célula y de la importancia de su actividad. aunque en la actualidad existen indicios de que los peroxisomas tienen un origen doble. que están conformados por cuatro a seis cisternas. Cada una de ellas están unidas a su respectiva red de estructuras túbulo- vesiculares: red tubular cis del Golgi (CGN) o red tubular trans del Golgi (TGN). Las enfermedades lisosomales puede deberse a una lesión de su membrana o por acumulación intracelular de sustancias. en la segunda. El condrioma ocupa aproximadamente el 15 a 20% del volumen de una célula hepática promedio de mamífero. el cuerpo extraño es incluido en una vesícula compuesta de una porción de la membrana celular. & P.L. Mitocondrias: A diferencia de la mayoría de los organelos citoplasmáticos que son de membrana simple. llamado lisosoma secundario.M. pero la mayor parte de sus proteínas de membrana y luminales son tomadas del citosol. En una célula que tiene poco combustible. Está bastante desarrollado en células que secretan hormonas esteroideas. ya que están involucradas en muchas enfermedades y síndromes. Las mitocondrias y los peroxisomas no forman parte de este sistema inter- conectado de compartimientos membranosos. En seguida haremos breve descripción de estos organelos. por lo que son hidrolasas ácidas. También degradan moléculas extrañas ingeridas por las células. El pH óptimo de estas enzimas se sitúa por debajo del pH del compartimiento lisosómico. en forma de cisternas aplanadas (sáculos) o adquiriendo el aspecto de láminas paralelas. Lisosomas: Son vesículas membranosas que contienen enzimas hidrolíticas que intervienen en la digestión intracelular. las mitocondrias son de membrana doble y lo bastantes grandes para verse con el microscopio óptico.

Según el tipo celular. Se asemejan a la mayoría de organelos que forman parte del sistema de endomembranas en el sentido que está limitada por membrana simple. Esquematice. mitocondrias gigantes (en células hepáticas en daño por alcohol).). homogeneización de crestas (en hepatitis viral). 2. Esquematice. La coloración del preparado es Hematoxilina-Eosina. intervienen en diferentes funciones. Identifique en las neuronas pequeñas granulaciones denominados corpúsculos de Nissl. que se tiñen intensamente con los colorantes básicos (hematoxilina). Observe al microscopio con objetivo de 40x un corte transversal de médula espinal. un tubo epididimario. Observe al microscopio con objetivo de 100X un corte de glándula suprarrenal. cristolisis. 3. tanto en la oxidación de los carbohidratos como en la de los lípidos con la consiguiente formación de ATP. desempeñan una función primordial en la utilización del oxígeno. la tumefacción turbia. se forma y degrada peróxido de hidrógeno (H2O2).L. uremia. RETÍCULO ENDOPLÁSMICO RUGOSO: 1. C. 7 Actividades de Práctica E. PROCEDIMIENTO A. Esquematice. como resultado de la actividad. RETÍCULO ENDOPLÁSMICO LISO: 1. Entre las primeras están.L. Identifique en el corte. que se encuentra arriba del núcleo cerca a la membrana apical. que le dan la apariencia de un aspecto esponjoso (espongiocitos). sustancia tóxica para las células pero degrado en agua y oxígeno por la catalasa. falta de riboflavina. APARATO DE GOLGI: 1. y otras. Alteraciones cuantitativas son: la hipertrofia (por alcohol. constituidos por el retículo endoplásmico rugoso y ribosomas. desnutrición. con un núcleo esférico central y citoplasma acidófilo o débilmente basófilo con gran número de gotitas de lípidos (extraídas por solventes orgánicos durante la técnica histológica). Se observa en el citoplasma el complejo de Golgi bastante desarrollado. 3. Identifique en la zona cortical unas células de forma poliédrica. La coloración del preparado puede ser Hematoxilina de Ehrlich ó Luxol fast blue. Pueden sufrir alteraciones de tipo cualitativa o cuantitativa. 2.M. BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR fosforilación oxidativa. La coloración del preparado es Impregnación Argéntica. así como los componentes de la cadena transportadora de electrones. B. Observe al microscopio con objetivo de 40x. 3. 2. MATERIALES Microscopio.Ch. etc.1 – 1. junto con las mitocondrias.0 µm que puede contener un centro denso y cristalino de enzimas oxidativas. un corte transversal de epidídimo. pero siempre. . Peroxisomas Estos organelos. De ahí su importancia metabólica. 3. Observe las células principales con núcleo oval localizado cerca a la membrana basal. Este organelo se observa como unas formaciones reticulares de color oscuro. preparados histológicos. 4. aceite de cedro. Son vesículas esféricas con un diámetro de 0. & P.

& P. 1. 2. un corte transversal de riñón.Ch. La coloración del preparado es fosfotúngstica de Mallory. Esquematice lo observado. Observe al microscopio con objetivo de 100x. Esquematice lo observado. MITOCONDRIAS. Identifique la porción de las células que presentan abundantes prolongaciones laterales que se interdigitan con las de las células vecinas. BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR D.L.M. RESULTADOS 7 Actividades de Práctica E. Tales prolongaciones aumentan considerablemente la superficie basal de la célula y es donde las mitocondrias están concentradas. Observe a 100x el corte transversal de riñón 2. 5. . Identifique unas zonas donde se aprecia un precipitado negro (debido a la presencia de fosfatasa ácida que es un marcador lisosomal). 3. 3. La coloración del preparado es Glicerofosfato de Plomo. LISOSOMAS 1. E.L.

. & P.L. BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR 7 Actividades de Práctica E.M.Ch.L.

Explique brevemente el mecanismo que produce las enfermedades lisosomales.L.L. Explique a que se debe que los ribosomas solo se unan a la membrana del RER y no a la del REL si son organelos que presentan continuidad física de sus membranas? 3. & P. Qué importancia tiene la compartimentación celular? 2. Establezca diferencias en el proceso de glucosilación de proteínas producidas en el RER y aparato de Golgi. Cite ejemplos.Ch. BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR 6.M. 5. Como explica Usted que las enzimas lisosomales no digieran los componentes químicos de la membrana lisosomal? 7 Actividades de Práctica E. 4. Explique brevemente porque la respiración aeróbica aportan más energía que la anaerobia? 7. Porque se dice que las mitocondrias son organelos autónomos? 6. A que se denomina secreción constitutiva y secreción facultativa. RESUELVA 1. . 8.

& P. BIBLIOGRAFIA 7 Actividades de Práctica E.M.L. .L.Ch. BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR 7.