UNIVERSIDAD DISTRITAL FRANCISCO JOSE DE CALDAS

FACULTAD DE CIENCIAS Y EDUCACION

PROYECTO CURRICULAR DE LICENCIATURA EN QUIMICA
BIOQUIMICA

Ayda Aristizabal 20051150007

Maritza Patiño 20051150046
Lorena Pedroza 20051150048

ACTIVIDAD ENZIMATICA
RESUMEN

INTRODUCCION
En bioquímica, se llaman enzimas a las sustancias de naturaleza proteica que catalizan
reacciones químicas. En estas reacciones, las enzimas actúan sobre unas moléculas
denominadas sustratos, las cuales se convierten en diferentes moléculas, los productos. A
las reacciones mediadas por enzimas se las denomina reacciones enzimáticas. Debido a
que las enzimas son extremadamente selectivas con sus sustratos y su velocidad crece
sólo con algunas reacciones entre otras posibilidades, el conjunto de enzimas sintetizadas
en una célula determina el metabolismo que ocurre en cada célula. A su vez, esta síntesis
depende de la regulación de la expresión génica.

Como todos los catalizadores, las enzimas funcionan disminuyendo la energía de

activación (ΔG‡) de una reacción, de forma que se acelera sustancialmente la tasa de
reacción. Las enzimas no alteran el balance energético de las reacciones en las que
intervienen, ni modifican, por lo tanto, el equilibrio de la reacción, pero consiguen acelerar
el proceso incluso millones de veces. Una reacción que se produce bajo el control de una
enzima, o de un catalizador en general, alcanza el equilibrio mucho más deprisa que la
correspondiente reacción no catalizada. Al igual que ocurre con otros catalizadores, las
enzimas no son consumidas por las reacciones que ellas catalizan, ni alteran su equilibrio
químico. Sin embargo, las enzimas difieren de otros catalizadores por ser más
específicas. Las enzimas catalizan alrededor de 4.000 reacciones bioquímicas distintas.
No todos los catalizadores bioquímicos son proteínas, pues algunas moléculas de ARN
son capaces de catalizar reacciones (como el fragmento 16S de los ribosomas en el que
reside la actividad peptidil transferasa).

La actividad de las enzimas puede ser afectada por otras moléculas. Los inhibidores
enzimáticos son moléculas que disminuyen o impiden la actividad de las enzimas,
mientras que los activadores son moléculas que incrementan la actividad. Asimismo, gran
cantidad de enzimas requieren de cofactores para su actividad. Muchas drogas o
fármacos son moléculas inhibidoras. Igualmente, la actividad es afectada por la
temperatura, el pH, la concentración de la propia enzima y del sustrato y otros factores
físico-químicos.

Algunas enzimas necesitan para su actividad iones inorgánicos específicos que reciben el
nombre de activadores. Los activadores que se necesitan con más frecuencia son los
iones de hierro, cobre, manganeso, magnesio, cobalto y zinc. De ordinario, sólo un ion
funciona con una determinada enzima, pero en ciertos casos se pueden sustituir ciertos
iones por otros, persistiendo una actividad enzimática satisfactoria. Las moléculas que
regulan la actividad enzimática inhibiendo su actividad pueden clasificarse en reversibles
e irreversibles. Las irreversibles se unen covalentemente a la enzima y son útiles en
farmacología (penicilina, aspirina). Las reversibles pueden clasificarse, a su vez, en
competitivas y no competitivas. Las competitivas modifican la Km de la enzima ya que se
unen al centro activo de éste e impiden la unión con el sustrato (se necesita más para
activar las enzimas). Las no competitivas, se unen a otro lugar de la enzima, modificando
la Vmáx. (Velocidad en que se forma el producto por unidad de tiempo) ya que al unirse,
la enzima queda inactiva.

MATERIALES  Pinzas
 Bisturí
 Baño de hielo
 14 Tubos de Ensayo REACTIVOS
 Mortero  Malonato de Sodio al 1% en
 Centrifuga buffer fosfatos
 Baño de maria 37°C  Buffer fosfatos 0.1M, pH 7.4
 Pipeta graduada de 10ml  Azul de metileno al 0.1%
 2 Tubos de Centrifuga  Aceite Mineral
 Vaso de Precipitado de 250ml  Musculo 10g
 Mechero  Succinato de Sodio al 1% en
 Gradilla buffer fosfatos

PROCEDIMIENTO
B B
TUBO 1 2 3 4
S E
Succinato de sodio
1 - 1 1 1 1
(ml)
Buffer fosfatos pH 7.4 3 3 2 2 1.5 1
Azul de Metileno 1 1 1 1 1 1
Oxalato de sodio - - - - - 1

Extracto enzimático + aceite 1

- 1 1 1.5 1
mineral 4-5 gotas c/u *

*
RESULTADOS

Masa = 12.5g

Tiempo de duración

TUBO BS BE 1 2 3 4
TIEMPO
40.40 36.94 29.1 35.95 34.9 33.33
(min.)

ANALISIS

CONCLUSIONES
LORE
FALTAN ANALISIS Y CONCLUSIONES
Y NO SE SI TOCA HACERLE A ESTA COSA CALCULOS DE ALGUNA INDOLE.

AAAAA
Y TAMBIEN FALTE EL CUESTIONARIO Y EL RESUMEN JAJAJAJAJAJAJ!!!!!!!!!!!!!
CUESTIONARIO
 Factores que afectan la actividad enzimática en esta práctica.

En esta práctica, los factores que afectan la actividad son el malonato de sodio el
cual actúa como un inhibidor de la succinato deshidrogenasa, y la temperatura la
cual hace que se desnaturalice la enzima y esta se vuelva inactiva.

 Que otros factores afectan la actividad enzimática

Temperatura: las enzimas son sensibles a la temperatura pudiendo verse

modificada su actividad por este factor. Los rangos de temperaturas óptimos
pueden llegar a variar sustancialmente de unas enzimas a otras. Normalmente, a
medida que aumente la temperatura, una enzima verá incrementada su actividad
hasta el momento en que comience la desnaturalización de la misma, que dará
lugar a una reducción progresiva de dicha actividad.
pH: el rango de pH óptimo también es muy variable entre diferentes enzimas. Si el
pH del medio se aleja del óptimo de la enzima, esta verá modificada su carga
eléctrica al aceptar o donar protones, lo que modificará la estructura de los
aminoácidos y por tanto la actividad enzimática.
Concentración salina: al igual que en los casos anteriormente mencionados, la
concentración de sales del medio es crucial para una óptima actividad enzimática.
Una elevada concentración o una ausencia de sales en el medio pueden impedir la
actividad enzimática, ya que las enzimas precisan de una adecuada concentración
de iones para mantener su carga y su estructura.

 Consultar la estructura del Azul de Metileno en sus formas oxidada y reducida

 Si no se usa azul de metileno, cuál sería el aceptor normal de electrones y

protones del FADH2.

El peróxido de Hidrogeno, ya que este se comporta de la misma forma en la

reacción.

 Explicar la grafica V vs Concentración de Sustrato y 1/V vs 1/Concentración de

sustrato obtenidos en estudios cinéticos en presencia y ausencia de malonato de
sodio, teniendo como sustrato el succinato de sodio y la enzima utilizada en la
práctica.
BIBLIOGRAFIA
 http://es.wikipedia.org/wiki/Digesti%C3%B3n_qu%C3%ADmica
 http://www.cori.unicamp.br/jornadas/completos/UNLP/Daza%20Millone.pdf
 http://es.wikipedia.org/wiki/Cin%C3%A9tica_enzim%C3%A1tica