Practica No.

1 Corpúsculo de Barr
Equipo No. 1. 7° “B”
Medina-Pérez BR, Mendoza-Guzmán J, Meza-Hernández AG, Mota-Rodríguez DL.
Viernes 10:00-13:00. 08 de Septiembre de 2017. Agosto-Diciembre 2017.
Laboratorio de genética, Unidad Académica de Ciencias Químicas, Universidad Autónoma de Zacatecas

Resumen: Las células de las hembras contienen dos cromosomas X, sólo uno de ellos ejerce actividad
transcripcional. El otro cromosoma X permanece condensado como un cúmulo de heterocromatina de tipo
facultativa que se denominó corpúsculo de Barr. La formación del corpúsculo de Barr asegura que las
células tanto de hembras como de machos tengan el mismo número de cromosomas X activos y por tanto
sinteticen cantidades equivalentes de productos codificados por los genes que están incluidos en el
cromosoma X. En esta práctica se demostró la evidencia citológica del corpúsculo de Barr en células
somáticas femeninas en interfase a través de la observación del corpúsculo de Barr en preparaciones de
células de la mucosa oral y en neutrófilos de un frotis sanguíneo. Se observaron las células de descamación
de la mucosa oral y neutrófilos de un frotis sanguíneo masculinas para establecer un control negativo en
la prueba, sin corpúsculo de Barr.

Palabras clave: Corpúsculo de Barr, Cromosoma X, neutrófilos, mucosa, cromatina.

Introducción fracción de la cromatina, llamada

La cromatina no se presenta en las células
como un filamento de nucleosoma muy
extendido, sino que se compacta en niveles
superiores de organización. Cada partícula
nuclear del nucleosoma contiene una
molécula de histona H1 unida al DNA.
Tanto el núcleo como las histonas H1
median la interacción entre los
nucleosomas vecinos que generan fibras
de 30 nm, que representan un nivel
superior de organización de la cromatina.
Las fibras de 30 nm se organizan a su vez
en dominios en forma de asas, que se
visualizan cuando los cromosomas
mitóticos se someten a procedimientos que
remueven las histonas. Los cromosomas
mitóticos representan el estado más
compactado de la cromatina. Cierta
heterocromatina, permanece en un estado
muy compactado a través de la interfase.
La heterocromatina se clasifica como
heterocromatina constitutiva, que se
mantiene condensada en todas las células
todo el tiempo, y heterocromatina
facultativa, que se inactiva de manera
específica durante ciertas fases de la vida
de un organismo (Karp, 2010).
Las células de los machos tienen un
pequeño cromosoma Y y un cromosoma X
mucho más grande. Como los cromosomas
X y Y tienen pocos genes en común, los
machos poseen una sola copia de la mayor
parte de los genes que se portan en los
cromosomas sexuales. Aunque las células
de las hembras contienen dos cromosomas
X, sólo uno de ellos ejerce actividad
transcripcional X (Vera-Daher y Ronald- todas las descendientes de esa célula en
Youlton, 2001). particular.
El otro cromosoma X permanece 3. La reactivación del cromosoma X
condensado como un cúmulo de heterocromatizado tiene lugar en células
heterocromatina de tipo facultativa que se germinales antes del inicio de la meiosis.
denominó corpúsculo de Barr en honor del En consecuencia, los cromosomas X son
investigador que lo descubrió en 1949. La activos durante la oogénesis y todos los
formación del corpúsculo de Barr asegura gametos reciben un cromosoma X
que las células tanto de hembras como de eucromático (Karp, 2008; Pierce 2010).
machos tengan el mismo número de
Material y métodos
cromosomas X activos y por tanto
sinteticen cantidades equivalentes de Reactivos
productos codificados por los genes que
están incluidos en el cromosoma X (Karp, -Alcohol 95%
2008). -Acetorceína
Inactivación del cromosoma X Con base -Colorante Wright
en sus estudios de la herencia del color del
pelaje en el ratón, la genetista británica -Buffer de Wright
Mary Lyon, en 1961 propuso lo siguiente -Aceite de inmersion
(Karp, 2008):
Materiales
1. La heterocromatización del cromosoma
X en hembras de mamíferos ocurre -6 portaobjetos
durante la fase temprana del desarrollo -2 cubreobjetos
embrionario y conduce a la inactivación de
los genes en ese cromosoma. -2 Abatelenguas

2. La heterocromatización en el embrión es -2 Lancetas

un proceso aleatorio en el sentido de que -Algodón
los cromosomas X que derivan del padre y
los cromosomas X que derivan de la madre -Plancha eléctrica
permanecen con igual probabilidad de
-Microscopio óptico
convertirse en inactivos en cualquier
célula determinada. En consecuencia, en el Resultados
tiempo de la inactivación, el X paterno
El frotis de las células epiteliales de la
puede inactivarse en una célula del
mucosa interna de la mejilla de la mujer se
embrión y el X materno puede hacerlo en
observó a 10X (Fig.1) para encontrar un
una célula vecina. Una vez que se ha
campo donde estuvieran células
desactivado un cromosoma X, su estado
epiteliales, después se observó a 40X
heterocromático se transmite a través de
(Fig.2) para enfocar una célula, por último,
muchas divisiones celulares, de modo que
al observar el frotis con el objetivo de
el mismo cromosoma X es inactivo en
inmersión se encontró el corpúsculo de
Barr, teñido rosa fuerte unido a la
membrana nuclear (Fig. 3)
Figure 1 Células epiteliales de la mucosa oral femeninas,
10X. Las células están señaladas con flechas negras.
Figure 2 Células epiteliales de la mucosa oral
femeninas, 40X.
Figure 3 Corpúsculo de Barr en célula de la mucosa oral
femenina, indicado con flecha negra en la periferia de
la membrana nuclear, 100X
El control negativo para esta prueba fue el
frotis de, un individuo de sexo masculino,
células de la mucosa oral, en el cual no se
observaron los corpúsculos de Barr en las
células.
Por último, se analizó el frotis sanguíneo
de origen femenino, para observar el
corpúsculo de Barr en neutrófilos, en 40X
(Fig. 4) se eligió un campo adecuado para
encontrar neutrófilos, en 100X se
observaron los neutrófilos con mayor
detalle, observando en los mismos una
pequeña protuberancia en forma de palillo
de tambor en su núcleo segmentado.
Figure 4 Frotis sanguíneo femenino, flechas negras
neutrófilos, flecha azul linfocitos, flecha verde
eritrocitos, flecha roja basófilos, 40X.
Discusión
Dado que las hembras poseen dos copias
de cada gen ligado a X y los machos solo
una, el proceso de transcripción y el de
traducción sería el doble en hembras que
en los machos. Los mamíferos
placentarios inactivan completamente uno
de los cromosomas X de las hembras. El
proceso de inactivación cromosómica es
aleatorio. El cromosoma que se inactiva se
superhelicoidiza formando
heterocromatina facultativa a la que se le
llama corpúsculo de Barr.
De acuerdo con lo dicho anteriormente, en
hembras debe estar el corpúsculo de Barr
y en los machos no. En la práctica, la
técnica para la observación del corpúsculo
de Barr en células de la mucosa oral y en
neutrófilos se realizó de manera rápida y
sencilla, se realizó en núcleos interfásicos,
no requirió cultivo celular y proporcionó
información preliminar del estado de los
cromosomas sexuales de forma inmediata.
Los resultados obtenidos en la práctica
coincidieron con lo reportado en la
bibliografía, en las células de la mucosa
oral y en los neutrófilos del individuo de
sexo femenino se observaron los
corpúsculos de Barr. En el caso de las
células de la mucosa oral, el corpúsculo de
Barr aparece en forma de un gránulo
pequeño, ligeramente unido a la
membrana nuclear (en la periferia). Con la
tinción de orceína, se observó el núcleo de
la célula teñido de rosa y a nivel de la
membrana nuclear una masa oscura
adherida a la membrana nuclear teñida de
rosa oscuro (Fig. 3). En el frotis sanguíneo
el corpúsculo de Barr aparece como un
palillo de tambor (borde de la envoltura
nuclear con un apéndice pequeño), en los
núcleos de los neutrófilos.
Para el caso de los controles negativos para
esta prueba, los resultados fueron de
acuerdo con la literatura, no se encontraron
corpúsculos de Barr en las células de la
mucosa oral y tampoco en los neutrófilos
del frotis sanguíneo del individuo de sexo
masculino.
Todos los demás equipos obtuvieron
resultados similares a los nuestros lo que
indica que la práctica se realizó de manera
adecuada y los voluntarios no presentan
trastornos genéticos ligados al cromosoma
X.
La cromatina X es un examen solicitado
como método diagnostico por diversos
especialistas, en particular Pediatras,
Gineco-Obstetras y Urólogos, a pacientes
en los que se sospecha alguna anomalía de
los cromosomas X (Vera-Daher y Ronald-
Youlton, 2001).
Conclusión
Con base en el objetivo establecido para
esta práctica se observó la evidencia
citológica del cromosoma X inactivo en
células somáticas femeninas en interfase a
través de la observación del corpúsculo de
Barr en preparaciones de células de
descamación de la mucosa oral y en
neutrófilos de un frotis sanguíneo.
Además, se observaron las células de
descamación de la mucosa oral y
neutrófilos de un frotis sanguíneo de un
individuo de sexo masculino para
establecer un control negativo en la
prueba, debido a que las células de
individuos de sexo masculino no deben
presentar corpúsculo de Barr.
Estos resultados nos indican un adecuado
mecanismo de inactivación del
cromosoma X.
Bibliografía
Karp G. (2008). Biología celular y
molecular Conceptos y experimentos. 5ª
ed. Mc Graw Hill. México, pp 495-498 y
573.
Pierce BA. (2010). Genética un enfoque
conceptual. 3ª ed. Editorial Medica
Panamericana. México, pp 87 y 88.
Vera-Daher N y Ronald-Youlton R.
(2001). Cromatina de Barr: análisis de su
valor actual. Rev. Chil. Pediatr. 57(6):
506-509.