Pared

celular
Bacteria:
Gram positivo
Gram negativo
Sin pared

Archaea:
Diversas estructuras
Sin pared
Envolturas de una bacteria
Pared de las bacterias

•Peptidoglicana (común)
•Matriz de bacterias Gram-positivas
•Pared de Gram-negativas
•Membrana externa
•Espacio periplásmico
•Paredes de arqueas
Funciones de la pared

n Rigidez (mantiene la forma, evita la lisis).

n Protege a la bacteria contra los cambios de presión

osmótica.

n Comunicación con el medio exterior.

n Puede estar involucrada en la patogenicidad (LPS)

n Barrera para algunas moléculas.

n Espacio periplásmico (enzimas de transporte, hidrolíticas,

etc.)
 *

*En esta estructura se anclan pilis, flagelos y fimbrias

*Constituye un sitio de reconocimiento para fagos
*Contiene los receptores de algunos anticuerpos.
*Es el blanco de algunos antibióticos.
*Es la responsable de la respuesta bacteriana a la
coloración de Gram.
Gram +
Bacteria Gram-
Pared Celular Gram Positiva
La pared celular de las bacterias Gram positivas está constituida de
peptidoglicana, ácido teicoicos, ácidos lipoteicoicos, metales (Mg2+) y agua.

La pared celular de las bacterias Gram negativas está constituida de

peptidoglicana, proteínas, metales (Mg2+) y agua. Fuera de la pared celular
se encuentra la membrana externa.

Gram positivas Gram negativas

La peptidoglicana consta de una parte polisacárida formada de
ácido N- Acetil-murámico y N-acetil-glucosamina y de una
porción peptídica formada por diferentes aminoácidos según
la bacteria.
Porción poliscárida:

La N-acetil-glucosamina es la 2-acetomido-2-desoxi-D-
glucopiranosa. El ácido N-acetil-murámico (un componente
que caracteriza a las bacterias) es el 2-acetomido-3-O-D-1-
carboxietil)-2-acetomido-2-desoxi-D-glucopiranosa.
La porción peptídica es variable. En las bacterias Gram

negativas está constituida por cuatro aminoácidos

numerados del 1 al 4 en el siguiente orden:

1.-L-alanina;

2.-ácido D-glutámico

3.-ácido meso-diaminopimélico y,

4.-D-alanina
 MUREÍNA O PÉPTIDO-GLICANA
Compuesto químico característico de bacterias.

Parte Peptidoglicana
Polisacárida

Porción
Peptídica

Gram negativa
Peptidoglicana

Composición química:
• Repeticiones (n=10-100) de una unidad disacarídica,
unida a su vez a un tetrapéptido
• Distintas cadenas de PG se unen entre sí por
determinados enlaces peptídicos entre tetrapéptidos de
cadenas diferentes
Estructura de la Peptidoglicana
Peptidoglicana: composición química
La unidad disacarídica que se repite es:
N-acetilglucosamina (NAG)...
...unida por enlace β(1 4) con...
... N-acetilmurámico (NAM)
Las distintas unidades disacarídicas se unen entre sí mediante
enlaces β(1 4)
Este enlace puede ser hidrolizado por la lisozima
La cadena tetrapeptídica sale desde el grupo
–COOH del lactilo de cada NAM y suele ser:
L-ala D-glu m-DAP D-ala
Peptidoglicana: estructura global

Las distintas cadenas lineales de PG (cada una con n

repeticiones del disacárido y sus tetrapéptidos) se unen
entre sí por enlaces peptídicos.
Frecuentemente el enlace se da entre el ε-NH2 del m-DAP
(3) y el –COOH de la D-ala (4).
La estructura global es una sola macromolécula gigante que
forma un sáculo rígido alrededor del protoplasto bacteriano
Peptidoglicana
Peptidoglicana
 Estructura global del PG de bacterias
Gram-positivas
Múltiples capas de PG (distintos niveles, hasta 50 en
especies de Bacillus).
Entrecruzamientos entre cadenas del mismo nivel y entre
un nivel y el inmediato superior o inferior.
La mayoría del NAM tiene tetrapéptidos .
La mayoría de los tetrapéptidos participan en los enlaces.
Consecuencia: una red tridimensional gruesa, con poros
pequeños, más compacta que en las bacterias Gram
negativas
Como se puede afectar la síntesis de la pared celular?
La penicilina, un antibiótico b-lactámico inhibe la
síntesis de la peptidoglicana, por su similitud, con la molécula
de D-alanina, un precursor de la peptidoglicana.

Observe la semejanza entre las dos moléculas

 La PG de bacterias
Gram-negativas

Normalmente:
1 o unas pocas capas de PG.
Las distintas cadenas se unen por enlaces peptídicos
directos entre el grupo ε-NH2 del m-DAP (3) de una cadena
con el –COOH de la D-ala (4) de otra cadena Malla floja con
grandes “poros”: Aproximadamente el 50% NAM carece de
tetrapéptidos.
En espiroquetas, el diaminoácido en posición n°3 es la L-
ornitina (en lugar de m-DAP)
 Otros componentes de la
pared celular
Los ácidos teicoicos
Son componentes exclusivos de las paredes
de las bacterias Gram positivas. Están
formados de poli-glicerol-fosfato o de poli-
ribitol-fosfato, en ambos casos, con algunas
otras sustituciones.
Los ácidos teicurónicos.
Forman parte de la pared de las bacterias
Gram positivas y son polisacáridos
esterificados con ácidos grasos. Atraviesan la
peptidoglicana y llegan hasta los fosfolípidos
de la membrana citoplásmica.
 Acidos Teicoicos

Polisacáridos ácidos de paredes de Gram positivos

Unidos covalentemente a la peptidoglicana (OH del C6 de NAM)
Atraviesan la pared y alcanzan la superficie de la bacteria

Unión hidrofóbica a la membrana celular

Pared celular en las Bacterias Gram positivas

ó teicurónicos.
 La matriz de la pared celular de las
Gram-positivas
La PG de Gram-positivas está inmersa en una matriz aniónica
(hasta 50%) de:
ØÁcidos teicoicos: polímeros (n<30) de ribitol-P o glicerol-P,
con –OH sustituidos por –H, azúcares, aminoazúcares o D-
alanina.
ØÁcidos teicurónicos (en ausencia de P): co-polímeros de
ácidos urónicos y aminoazúcares
ØÁcidos lipoteicoicos: glicerol-teicoicos unidos a la membrana
citoplásmica.
Sus extremos quedan expuestos hacia el exterior
Otros compuestos químicos característicos de la
pared de Gram+

n Ácidos teicurónicos

n Ácidos micólicos
 Pared de las bacterias ácido-alcohol
resistentes (AAR)
Pared especial de ciertas Gram positivas: Nocardia,
Mycobacterium
Resisten la decoloración con ácido clorhídrico-etanol (ácido-
alcohol resistentes)
Esta propiedad deriva de la presencia de:
•Ácidos micólicos
•Glucolípidos

•Ceras
Ácidos micólicos

Son ß-hidroxiácidos grasos ramificados en α, de

cadena muy larga (hasta 91 C)
Forman parte de un esqueleto muy peculiar de la
pared celular:

PG arabinogalactanoácidos micólicos
Otros lípidos de en la pared de bacterias AAR
Glucolípidos:
• Micolatos de trehalosa
• Funcionan como “factor de crecimiento en cuerdas” en
Mycobacterium
Sulfolípidos de trehalosa
• Factores de virulencia
• En Mycobacterium tuberculosis evasinas (inhiben la
fusión fagosoma-lisosoma en macrófagos)
• Micósidos (unión éster entre micólicos y azúcares)
• Ceras: unión de micólicos con alcoholes ramificados de

cadena larga (C30-C34)

 Papeles conferidos por la pared AAR
• Aspecto y consistencia cérea de las colonias en placas de
Petri
• En líquidos crecen formando grumos. Gran impermeabilidad
• Resistencia a la desecación
• Resistencia a agentes antibacterianos:
•Detergentes
•Oxidantes
•Ácidos y bases
 La pared celular de bacterias
Gram-negativas

Estructuralmente más compleja que la observada en bacterias

Gram-positivas:
La delgada peptidoglicana está inmersa en un compartimento
llamado…... espacio periplásmico (lleno con el gel periplásmico),
el cual a su vez limita con ...... la membrana externa
Membrana Externa de Gram Negativos

Porinas - proteínas que permiten el transporte de

moléculas pequeñas a través de la membrana --
específicas e inespecíficas
 La membrana externa de bacterias
Gram-negativas:
Bicapa lipopolisacarídica muy asimética
En la lámina externa:
60% de proteínas
40% de lipopolisacárido (exclusivo de Gram-)
En la lámina interna:
No hay lipopolisacárido
Existen Fosfolípidos. Lipoproteínas y Otras
proteínas
Lipopolisacárido (LPS)

Solo en bacterias Gram negativas

Parte de la membrana externa
 Composición del lipopolisacárido (LPS)

Región proximal: Lípido A (hidrófobo)

Región intermedia: oligosacárido medular
Región distal: cadena lateral específica, polisacarídica
(hidrófila):
Antígeno somático “O” de bacterias Gram-negativas
Lipopolisacárido (LPS)

n Lípido A (NAG-P + grupos acilos)

n Núcleo del polisacárido

n contiene KDO (cetodesoxioctonato) otros carbohidratos

(ramnosa, ácido galacturónico)

n usualmente específico de especies

 * Lipopolisacárido (LPS)

*O-antígeno
*número de repeticiones variables
*también contiene carbohidratos
*específico de cepa
*A menudo tóxico para animales - endotoxina
*Crea superficies densamente hidrofílicas
Papeles y funciones del LPS (1)

Papel estructural: Carácter masivo lípido A

Menor fluidez de esta membrana
Más resistente a detergentes y solventes
Las cadenas laterales menos permeables a moléculas
hidrofóbicas (Ej.: resisten mejor muchos antibióticos)
Antígeno somático “O” bacterias Gram-negativas
Condiciona virulencia en bacterias patógenas
Se une a cationes Mg, Zn
Si añadimos agente quelante, como EDTA se genera una
desorganización de la membrana externa.
Papeles y funciones del LPS (2)

Región del lípido A: endotoxina

Papel positivo: El macrófago reconoce el LPS, y libera
citoquinas que activan al sistema inmune
Papel negativo: A veces, el sistema inmune se activa “en
exceso” por el LPS, dando síntomas patológicos
Inducción de fiebre (pirogenicidad) Hipotensión, a veces
con fallo cardiaco
Actividad necrótica en tejidos
La lipoproteína de Braun (LPP)

Su parte proteica (7.2 kDa) está inmersa en el espacio

periplásmico, formando trímeros

Su aa. N-terminal es una cys

Su –SH se une por tioéter a un diglicérido de la lámina

interna de la membrana externa

Su –NH se une por un amido a A-G.

Su aa. C-terminal es una lys

Se une por su –NH con el –COOH libre del m-DAP de la PG

dando un anclaje firme entre LPP y PG
Proteínas de la membrana externa

Porinas: forman trímeros, con canales interiores que

atraviesan la membrana externa
Solo dejan pasar moléculas por debajo de cierto tamaño
(<500-700 Da)
En enterobacterias: protección frente a sales biliares
Canales específicos:
Para vitamina B12
Para quelatos de Fe
Para ciertos nutrientes
Papeles y funciones de la membrana externa
(1)

Tamiz molecular
Permite el paso de moléculas relativamente pequeñas
Protección frente a agentes antibacterianos:
Colorantes
Antibióticos
Enzimas (ej.: lisozima)
Ácidos biliares
 Papeles y funciones de la membrana
externa (2)

Condiciona propiedades de superficie: Grado de humedad

Adhesividad
Carga eléctrica
Lugar donde se fijan las proteínas del sistema defensivo;
Complemento del huésped
Lugares de adsorción de ciertos fagos
 El espacio periplásmico (periplasma)

Compartimento acuoso, relleno del gel periplásmico:

RNasas y fosfatasas
Proteínas de transporte de ciertos nutrientes
Proteínas de unión a señales químicas
En desnitrificantes y quimiolitoautótrofas:
•proteínas de transporte de electrones
Función de osmorregulación
Periplasma de E. coli

• Proteínas de periplasma de E.coli. • Ensamblado de mureína

• Proteínas de unión: • Formación de fimbrias
para amino ácidos (e.g. • Enzimas de degradación de
histidina, arginina) polímeros

para azúcares (ej. glucosa, * Fosfatasas

Proteasas
maltosa)
para vitaminas (ej. tiamina, • Enzimas detoxificantes:
Beta-lactamasas (e.g.
vitamina B12)
penicillinasa)
* para iones (ej. fosfato, sulfato)
• Fosforilación de aminoglicósidos
• Enzimas de biosíntesis
Pared celular de Archaea
n No contiene peptidoglicana

n Puede ser de
n pseudopeptidoglicana (pseudomureína) se tiñe como
Gram-positiva

n pseudomureina cubierta de proteina,se tiñe como Gram

positiva

n monocapa superficial de proteína o glicoproteína, sin

pseudomureína (halófilos, metanogénicos y
termoacidófilos) se tiñe como Gram negativa

n Existen Archaea sin pared

 La pared celular de las arquea
Aunque las arqueas pueden ser Gram positivas o Gram
negativas la estructura y composición química de sus paredes
celulares difiere de las eubacterias.
Muchas arqueas Gram
positivas poseen una
capa única gruesa y
homogénea como la de
las eubacterias Gram
positivas.
La arqueas Gram
negativas carecen de
membrana externa, y de
peptidoglicana. En
cambio suelen tener
una capa superficial de
subunidades proteicas o Envolturas de arqueas.
glucoproteinas. (a) Grampositiva. (b) Gramnegativa Cit = citoplasma. MC . =
membrana citoplásmica PC. = Pared celular. CS = capa superficial.
Paredes de las arqueas
En muchos casos, la función de P.C. la ejerce la capa S paracristalina, a
base de subunidades de (gluco)proteínas
En Methanosarcina y Halococcus: la capa S esta formada de
metanocondroitina
En Metanobacteriales: pseudomureína:
Unidades repetitivas de NAG ß(1-3) NAT (N-acetil-
talosaminourónico)
Del grupo –NH del NAT sale un tetrapéptido, con aminoácidos
de la serie L
Las cadenas se entrecruzan por puentes peptídicos entre aa(4) de una y
di-aa(3) de la otra cadena.
Pseudopeptidoglicana de Archaea
 Composición química de las paredes de las arqueas
Las paredes de las arqueas Gram
positivas suelen tener
pseudomureina, un polímero similar
a la peptidoglicana con aminoácidos
L en sus puentes entrecruzados y
ácido N-acetil talosaminurónico, en
lugar de ácido murámico, y con
enlaces β (1-3) en lugar de lugar de
β (1-4).

Las arqueas Gram

negativas tienen una gruesa
capa de proteínas con un grosor
de hasta 20 a 40 nm.
Estructura de la pseudomureina de una arquea Gram positiva
Pared celular de hongos
n La pared celular de los hongos esta formada por capas o estractos,
constituidos por diversos polímeros polisacáridos fibrilares, como
la quitina (polímero β-1,4 de N-acetilglucosamina), la celulosa
(polímero β-1,4 de glucosa) y por estructuras amorfas como otros
glucanas (polímeros β-1,6, ramificados de glucosa) y mananas
(polímeros α –1,6, ramificados de manosa).
n La pared de los hongos también contiene proteínas, asociadas a los
polisacáridos y lípidos.
n Las estructuras amorfas, glucanas y mananas, contienen los
principales antígenos de la pared.
n La pared es un exoesqueleto rígido que protege a la célula y
condiciona la nutrición absortiva ya que no permite la endocitosis.
n Algunos hongos unicelulares producen cápsulas constituidas por
polisacáridos mucilaginosos con capacidad inmunógena y acción
antifagocitaria.
 A)

B)

A)CELULOSA
Polímero de 3000 –10000 unidades de glucosa con enlaces ß (1 ➜ 4)
B) QUITINA
Polímero N-acetil glucosamina con enlaces ß (1 ➜ 4)
Algunas bacterias no poseen pared

• Mycoplasma

• Membrana celular mas gruesa pueden

tener esteroles y lipoglicanas.

• Bacterias pleomórficas
Formas L

Formas L naturales:
Carentes totalmente (o casi) de PC que algunas bacterias
generan espontáneamente en medios a base de suero (que
son hipertónicos) Ejemplo: Streptobacillus moniliformis
Colonias en forma de “huevo frito”
Formas L inducidas: tratamiento con penicilina en medio
hipertónico
Formas L inestables: tratamiento breve; revierten PC L
estables: tratamiento prolongado; no revierten PC
Protoplastos y esferoplastos

En el laboratorio se pueden lograr células desprovistas total

o parcialmente de PC

Protoplastos: células procarióticas carentes totalmente de

pared celular

Esferoplastos: células procarióticas carentes parcialmente de

pared celular
 Métodos de obtención de protoplastos y
esferoplastos

Por destrucción de la PG con lisozima o peptidasas

En Gram-negativas hay que desorganizar antes la membrana

externa con un agente quelante como el EDTA que secuestra
cationes.

Por inhibición de la formación de nuevo PG en células en

crecimiento
Ej.: tratando las células con penicilina
Suspensiones estables de protoplastos y esferoplastos

Hay que obtenerlos en un medio isotónico o ligeramente

hipertónico:
NaCl 0.25-0.5 M
Sorbitol o sacarosa 0.5-1.0 M
Polietilenglicol (PEG) al 7.5%
En estos medios protoplastos y esferoplastos tienen formas
esféricas, cualquiera que fuera la forma original de la bacteria
En medios adecuados, protoplastos y esferoplastos pueden
regenerar la PC
 ¿Para qué sirven los protoplastos y
esferoplastos?

Método suave que permite obtener extractos libres de

células y fracciones subcelulares
Para hacerlas permeables a ADN, en experimentos de
transformación artificial (ej.: en ingeniería genética)
Fusión de protoplastos (para obtener recombinantes
somáticos)
 Formación de Protoplastos

Baja
concentración de
solutos

Alta
concentración
de solutos

Lisozima -- enzima que rompe el enlace

glicosídico ß1-4 de la peptidoglicana
Funciones de la pared
n Rigidez y resistencia osmótica (mantener la forma, evitar la

lisis).

n Comunicación con el medio exterior.

n Posee factores de virulencia (LPS)

n Barrera para algunas moléculas (porinas en Gram negativos).

n Espacio periplásmico (enzimas de transporte, hidrolíticas,

etc.).

n Posee receptores específicos para fagos

n Sirve como punto de anclaje de flagelos, pilis y fimbrias.

n Participa en la división celular.

n Constituye un criterio de clasificación taxónomica

Síntesis de la Peptidoglicana

•Bactoprenol (C55 alcohol isoprenoide) -- acarreador lipídico que transporta

el disacáride pentapeptido del citoplasma al periplasma y lo inserta en la
pared celular en crecimiento
•La transpeptidación, es inhibida por la penicilina
Transpeptidación

Inhibido por la penicilina G.

 Síntesis de la peptidoglicana: transpeptidación

Inhibido por la penicilina G.

 Síntesis de la pared celular

La pared celular se abre por autolisinas y se insertan nuevas cadenas de

péptidoglicana