UNIVERSIDAD NACIONAL

AUTONOMA DE MEXICO

MICROSCOPIA

Por

C. D. Iris de los Ángeles Rodríguez Trinidad

ENDOPERIODONTOLOGIA

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES

IZTACALA
 Reglas y compromisos
Por favor:
Preguntas todo el tiempo
Atención
continua

Alimentos fuera del

laboratorio
 Objetivos:
Describir el manejo, cuidado y
funcionamiento del microscopio
Óptico Compuesto
Aplicar los conocimientos adquiridos
para la observación microscópica.
INTRODUCCIÓN
La microscopía es una disciplina que
comprende el estudio de los
principios físicos, funcionamiento,
constitución, manejo, cuidado y
aplicación de los diversos tipos de
microscopios, así como de los
variados métodos de procesamientos
del material que se estudien con el
microscopio.
 1590: Pierre Borel 1620 - 1671 o 1628 -
1689 y Willem Boreel 1591 - 1668
reivindican que los fabricantes
holandeses de anteojos, Hans Janssen y
su hijo Zacharias Janssen inventaron
un microscopio compuesto, hecho no se
ha verificado.
 1609: Galileo Galilei desarrolla un
occhiolino o microscopio compuesto de
una lente convexa y una cóncava.
 1612: Galileo presenta el occhiolino al
rey de Polonia Segismundo III.
 1619: Cornelius Drebbel presenta en
Londres, un microscopio compuesto
de dos lentes convexas.
 1622: Drebbel presenta su invento en
Roma.
 1625: Giovanni Faber de Bamberg,
miembro de la Academia de los
Linces, acuña la palabra microscopio
por analogía con telescopio
► 1665: Robert Hooke publica Micrographia, una
colección de micrografías biologicas. Acuña la
palabra célula para las estructuras que
descubre en una corteza de corcho.
El primer microscopio compuesto fue
desarrollado por Robert Hooke. A partir de
éste, los avances tecnológicos permitieron
llegar a los modernos microscopios de nuestro
tiempo, los que existen de varios tipos y son
usados con diferentes fines.
 1674: Anton Van Leeuwenhoek inventa el
microscopio simple.
 Anton Van Leeuwenhoek (Holanda, 1632-
1723), un pulidor de lentes aficionado, logró
fabricar lentes lo suficientemente poderosas
como para observar bacterias, hongos y
protozoos, a los que llamó "animálculos".
 1931: Ernst Ruska construye el primer
microscopio electrónico.
 1965: se desarrolla el primer microscopio
electrónico de barrido.
 1981: Gerd Binnig y Heinrich Rohrer
desarrollan el microscopio de efecto túnel.
 1985 Binnig y Rohrer desarrollan el
microscopio de fuerza atómica.
TIPOS DE MICROSCOPIOS
 Microscopio de campo claro: es el
microscopio óptico compuesto utilizado en
la mayoría de los laboratorios. Para formar
una imagen a partir de un corte histológico
usa luz visible, por esto la muestra debe
ser lo bastante fina como para que los
haces de luz puedan atravesarla. También
se usan métodos de tinción, según las
necesidades, con el fin de aumentar los
detalles en la imagen.
 Microscopio de contraste de fase: posibilita la
observación de muestras sin colorear, por lo que
resulta útil para estudiar especímenes vivos.
 Microscopio de interferencia: es una
modificación del anterior que permite la
cuantificación de masa en los tejidos.
 Microscopio de fluorescencia: permite la
observación de estructuras fluorescentes, ya sea
naturales o artificiales.
 Microscopio de barrido confocal: se usa para
estudiar la estructura de sustancias biológicas.
Combina partes de un microscopio de campo claro
con equipo fluorescente y un sistema de barrido
que emplea un rayo láser. A través de una
computadora se reconstruye la imagen tomada por
planos, a una imagen tridimensional.
MICROSCOPIO ELECTRÓNICO DE BARRIDO (MEB)
EL MICROSCOPIO DE CAMPO CLARO

 Es el principal medio
que utilizaremos a lo
largo de toda la
materia para
observar la
morfología de los
tejidos a estudiar,
por lo que debemos
conocer en detalle
sus partes y el
funcionamiento de
cada una de ellas.
DESCRIPCIÓN:
El microscopio compuesto :
 Objetivo, que es una lente próxima al objeto que
debe observarse.
 Ocular, lente situada a distancia considerable
del objeto y cercana al ojo del observador.
 Tornillos macrometrico y micrometrico: ajusta
delicadamente la distancia entre el objetivo y la
muestra, de modo que permita enfocar el objeto.
 La cantidad total de aumento del
microscopio es el producto del aumento del
objetivo por el del ocular por consiguiente,
si el objetivo de un microscopio aumenta
40x veces y el ocular 10x, el objeto
observado tendrá un aumento total de 400x.
 Debe señalarse aqui que el poder de
resolución es tan importante como el
aumento, se entiende por "PODER DE
RESOLUCIÓN " la capacidad de
distinguir con claridad entre los detalles
minúsculos y muy próximos de una
estructura.
EL OJO HUMANO NO LOGRA DISTINGUIR OBJETOS
DE MENOS DE 50 MICRAS DE DIÁMETRO NI
CONSIGUE RESOLVER DOS LÍNEAS SEPARADAS POR
MENOS DE 100 MICRAS (ES DECIR, LAS VE COMO
UNA SOLA LÍNEA).
SISTEMAS :
 Sistema mecánico, esta
formado por los
elementos de soporte y
el conjunto de piezas que
mueven el tubo del
microscopio, las partes
de este sistema son: pie,
columna, brazo,
revólver, platina,
tornillo macro y
micrométrico.
 Pie: brinda apoyo y estabilidad al aparato.
Vástago: soporta la platina, tubo y tornillos de ajuste
macro y micrométrico.

Tornillo de Ajuste: provocan el desplazamiento del

tubo o la platina en sentido vertical, lo que permite el
enfoque.

Tubo: en su extremo superior se halla el ocular, y

en el inferior el objetivo. Se trata de un cilindro
metálico cuyo interior se encuentra pintado de
negro, lo que evita la reflexión de la luz.
Normalmente tiene una longitud de 170 mm.

Platina: es una plataforma horizontal sobre la

cual se coloca y sujeta el preparado a observar,
tiene un orificio central que permite el paso de la
luz y un venier que posibilita la relocalización de
los detalles de interés.
 Sistema óptico
comprende las
lentes oculares y
los objetivos
estos últimos
pueden ser de
tipo seco y de
inmersión
 Sistema iluminación ,
se encuentra abajo de
la platina y
comprende fuente
luminosa (foco o
espejo) condensador y
diafragma.
 Este sistema tiene como finalidad dirigir la luz
natural o artificial de tal manera que ilumine la
preparación u objeto que se va a observar en el
microscopio. Comprende los siguientes elementos:
 El espejo. Tiene dos caras: una cóncava y otra
plana.
 Condensador. El condensador está formado por un
sistema de lentes, cuya finalidad es concentrar los
rayos luminosos sobre el plano de la preparación
 Diafragma. Generalmente, el condensador está
provisto de un diafragma-iris, que regula su
abertura y controla la calidad de luz que debe
pasar a través del condensador.
 Trayectoria del Rayo de Luz a
través del Microscopio
El haz luminoso procedente de la
lámpara pasa directamente a
través del diafragma al
condensador. Gracias al sistema
de lentes que posee el
condensador, la luz es
concentrada sobre la preparación
a observar. El haz de luz penetra
en el objetivo y sigue por el tubo
hasta llegar el ocular, donde es
captado por el ojo del observador.
 · ESCALA DE REPRODUCCIÓN: relación lineal
que existe entre el tamaño del objeto y su imagen,
por ejemplo, 4:1, 40:1, 65:1, etc.
 · PODER DEFINIDOR: es la capacidad del objetivo
de formar imágenes de contornos nítidos.
 · LÍMITE DE RESOLUCIÓN: es la menor distancia
que debe existir entre dos objetos para que puedan
visualizarse por separado.
 · PODER DE RESOLUCIÓN: es la capacidad de
mostrar la imagen en sus detalles más finos. Está
en relación inversa con el límite de resolución.
 · PODER DE PENETRACIÓN: es la propiedad de
permitir la observación simultánea de varios planos
del preparado. Es inversamente proporcional a la
escala de reproducción o aumento.
· DISTANCIA FRONTAL: es la distancia de
la lente frontal al preparado colocado en la
platina, cuando está enfocado. Disminuye
cuando aumenta la escala de reproducción
del objetivo.
 · AUMENTO TOTAL: Debemos notar que
el ocular también tiene un aumento, por lo
tanto el aumento total de la imagen que
observamos es el producto entre el aumento
del objetivo y el del ocular. Ejemplo: si
tenemos colocado el objetivo cuya escala de
reproducción es 40:1 y nuestro ocular tiene
un aumento de 10x, entonces el aumento
total será 40 x 10 = 400.
MANEJO DEL MICROSCOPIO.
 MANEJO DEL MICROSCOPIO: Dos
son las principales actitudes que
debe considerar cualquier individuo
al manipular un microscopio:
PRECAUCION Y LIMPIEZA.
 CUIDADOS PARA EL
MICROSCOPIO
 Protéjalo del polvo y los golpes.
 No lo manipule si no lo conoce.
 Evite tocar las lentes con los dedos.
 Tenga precaución al enfocar una preparación para no dañar la
lente frontal del objetivo al chocar con aquella.
 Limpie las lentes frontales del objetivo y de los oculares
 Limpie con un lienzo limpio y seco las partes mecánicas
accesibles.
 No desarme el sistema óptico, pues para colocar la lente
nuevamente en su posición original se requiere de controles
especiales.
 Ante cualquier signo anormal en su microscopio avise a su
maestro.
 Sienta el microscopio que utiliza como si fuera suyo, úselo y
cuídelo de esa manera.
 Uso del Microscopio Óptico Compuesto - Enfermería
UAP