CROMATOGRAFIA

CROMATOGRAFÍA Historia

M. TSVET (1903): Separación de mezclas de

pigmentos vegetales en columnas rellenas con
adsorbentes sólidos y disolventes variados.

éter de
GC SFC LC petróleo
mezcla de
pigmentos

Gas/Sólido Gas/Líquido CaCO3 pigmentos

separados

De Adsorción Intercambio iónico De Afinidad

(líquido/sólido)
De Reparto Exclusión por tamaños
Cromatografia =
(líquido/líquido)
kroma [color] + graph [escribir]
(griego)

CROMATOGRAFIA
Principio Básico CROMATOGRAFIA
Modalidades y Clasificación
Separación de mezclas por interacción diferencial de sus
componentes entre una FASE ESTACIONARIA (líquido o
sólido) y una FASE MÓVIL (líquido o gas).
Cromatografia
FM = Líquido
Líquida

Cromatografia
FM = Gas
Gaseosa (CG)

Cromatografia
Sólida
Gas-Sólido (CGS)
En CG la FE
puede ser:
Cromatografia
Líquida
Gas-Líquido (CGL)
 CROMATOGRAFIA GASEOSA
Efemérides
1940
“CGS” rudimentaria
CGL propuesta (Martin e Synge)
Separación de ácidos orgáni-
cos por CGL: primer cro-
matógrafo (Martin e James)
Primer equipamiento comer-
1950 cial (Griffin & George)
Detector por Densidad de
Gás (Martin e James)
Detector de Ionización de
llama (McWillian e Dewar)
Detector de Captura Electrónica
(Lovelock e Lipsky)
1960 Columnas Capilares (Golay)
Presente:
Ventas de equipamientos y acessorios para CG em U.S.A.
estimadas en más de US$ 750.000.000 (1995).
Diferencias entre GC y HPLC
Tan sólo el 20% de los compuestos
orgánicos conocidos son analizados por
cromatografía de gases
CROMATOGRAFIA GASEOSA
Aplicaciones
Qué mezclas pueden ser separadas por CG ?
(para que una substancia cualquiera pueda ser
“arrastada” por un flujo de un gas ella debe
poder disolverse - al menos parcialmente -
en ese gas)
Mezclas cuyos constituyentes sean
VOLÁTILES (=“evaporables”)
EN GENERAL:
CG se emplea en la separación y análisis
de mezclas cuyos constituyentes tengan
PUNTOS DE EBULLICIÓN de hasta 300oC
y que sean térmicamente estables.
El Cromatógrafo de
Gases
1 6
3
1 – Suministro de Gas y Controles de Vacío / Presión
2 - Inyector (Vaporizador) de muestra
3 - Columna Cromatográfica y Horno
4 - Detector
5 – Amplificador de Señal (tratamiento electrónico)
6 - Registro de Señal (Registrador u Ordenador).
Observación: en rojo: temperatura controlada
 Gas Chromatography

Filters/Traps
Data system
H

RESET

Regulators Syringe/Sampler

Inlets

Detectors
Gas Carrier
Hydrogen
Air

Column

INSTRUMENTACIÓN INSTRUMENTACIÓN
Gas de Arraste Inyector “vaporizador Instantáneo”
Convencional
Fase Móvil en CG: NO interacciona con la 1
muestra. 2 5 (3 mL/min)
Split/Splitless
(20-50 mL/min)
Requisitos:
3
INERTE No debe reaccionar con la muestra, 4
fase estacionaria o superfícies del instrumento.

6
PURO Debe estar exenta de impurezas que
puedan degradar la fase estacionaria.
1 - Septum (silicona) FHe=1mL/min
2 - Alimentación gas de arraste)
Impurezas típicas en gases y sus efectos:
3 – Bloque metálico calefactado
oxida / hidroliza algunas FE 4 - Punta de la columna cromatográfica
H2O, O2 incompatibles con DCE 5- Purga del Septum
6- Glass-liner
hidrocarburos ruido en la señal del Col. Rellenas: no split.
DIC Col. Capilares: Inyect. con split/splitless
 - División de la muestra inyectada Con división-sin división
SPLIT en dos partes en las que sólo una
se introduce en la columna.

Requerimientos:

- Completa vaporización de la muestra

Inyectada
“Splitless”
“Split”
- Perfecta homogeneización con el gas
portador

Linealidad (No Discriminación):

-La relación de split afecta por igual a todos
los solutos. ¿Muestras diluidas, muestras concentradas?
-Las áreas relativas son proporcionales a las
concentraciones de los solutos en la muestra.
-Cualquier cambio en las condiciones de
trabajo afecta por igual a los solutos.

Linealidad Discriminación INSTRUMENTACIÓN

Inyección “on-column” de líquidos
Causas de Falta de Linealidad

a) Velocidad de difusión: diferente comportamiento

de moléculas de distintos tamaños: los solutos más 1 2 3
volátiles tienen más tendencia a pasar a la columna que
los menos volátiles.

b) Evaporación incompleta: produce falta de

linealidad si los compuestos se distribuyen de modo
diferente en la fase vapor y en las gotas resultantes de
una evaporación incompleta.

c) Fluctuaciones en la relación de división de

Flujo: cambios en la relación de división de flujo.
Fraccionamiento de la muestra antes de alcanzar el punto
en que se realiza la división de flujo.

Método para mejorar la Linealidad 1 – La punta de la aguja de la microjeringa es

introducida en el inicio de la columna
2 – La muestra es inyectada instantáneamente en el
inicio de la columna.
“Flash evaporation” = Evaporación Instantánea
3 – El “Plug” del vapor de la muestra es forzado por
(mejorar la evaporación de la muestra) el gas de arraste a fluir por la columna.
 Aplicaciones Inyector
On-Column: INSTRUMENTACIÓN
Inyector PTV (Tª programada)
Análisis cuantitativo de compuestos termolábiles y
de muestras con amplio rango de volatilidades

- No vaporización previa

- No se requiere septum

Ventajas - No se realiza split

- Se introduce la
- No se produce discriminación muestra refrigerada
y elevamos la Tª del
inyector mediante
- No existe descomposición térmica
calentamiento rápido

Requerimientos:
- Posible sobrecarga de las columnas
- Evitar altas Tª en la zona en la que se introduce la
-Jeringas especiales. Difícil Jeringa.
Inconvenientes automatización - Evitar uso de la columna como elemento intrínseco del
sistema de inyección.
-Límitación al tamaño de muestra
- Permitir inyección automática.
inyectada (vols. pequeños sino
- Elevada velocidad de calentamiento.
inundación)

Ventajas de PTV
INSTRUMENTACIÓN
(inyector de Tª programada) Parámetros de Inyección
TEMPERATURA DEL INYECTOR debe ser lo
suficientemente elevada para que la muestra se
-Introducción muestra sin discriminación (igual a
On-column) vaporice imediatamente sin que exista
descomposición.
- Uso de jeringas standard y cualquier diámetro de Regla General: Tinj = 50oC por encima de la
columna capilar (On-column no). temperatura de ebullición del componente
- Buena reproducibilidad de tiempos de retención menos volátil
(mejores que On-column)
VOLUMEN INYECTADO Depende del tipo de
- Evita la descomposición de sustancias columna y del estado físico de la muestra
térmicamente estables (igual que On-column) Muestras Muestras
COLUMNA Líquidas Gasosas
-Residuos de muestra no volátiles no entran en
la columna (en On-column todo entra en col.) empaquetada 0,2 µL ... 20 µL 0,1 ml ... 50 mL
∅ = 3,2 mm (1/4”)
Permite el modo split (no en On-column) capilar 0,01 µL ... 3 µL 0,001 ml ... 0,1 mL
∅ = 0,25 mm

- Se puede usar como trampa intermedia Sólidos: convencionalmente se disuelve en un

Para el acoplamiento con otras técnicas - disolvente adecuado y se inyecta la solución
 INSTRUMENTACIÓN Autoinyector: carruseles robotizados
Microjeringas para inyección donde se colocan múltiples viales. No se
necesita práctica. Programables para realizar
inyecciones durante todo el día/noche.

LÍQUIDOS Capacidades típicas: 1 µL, 5 µL e 10 µL

Microjeringa de 10 µ L:

êmbolo aguja (inox 316)

cuerpo (pirex)

Microjeringa de 1 µ L (sección ampliada):

cuerpo aguja

guia
êmbolo

INSTRUMENTACIÓN
Columnas: Definiciones Básicas
Columna capilar

EMPAQUETADAS
∅ = 3 a 6 mm
L = 0,5 m a 5 m
Rellena con sólido pul-
verizado (FE sólida o FE
líquida depositada sobre
las partículas del relleno)
CAPILAR
∅ = 0,1 a 0,5 mm
L = 5 m a 100 m
Paredes internas
recubiertas de fina
película (µ m) de FE
líquida o sólida
 INSTRUMENTACIÓN INSTRUMENTACIÓN
Temperatura de la Columna Horno de la Columna

Además de su interacción con la FE, el tiempo Características deseables de un horno:

que un analito demora para recorrer la columna
depende de su PRESIÓN DE VAPOR (p0).
AMPLIA FRANJA DE TEMPERATURA
Estrutura química DE USO
del analito
p0 = f
Temperatura
de la columna TEMPERATURA INDEPENDENTE DE
LOS DEMAS MÓDULOS No debe estar
afectada por la temperatura del inyector y
detector.
Temperatura Presión Velocidad
de la de de
columna vapor migración

TEMPERATURA UNIFORME EN SU
INTERIOR Sistemas de ventilación
ANALITO ELUYE MAS RAPIDA- interna muy eficientes para mantener
MENTE (MENOR RETENCIÓN) uniforme la temperatura en todo el horno.

INSTRUMENTACIÓN INSTRUMENTACIÓN
Horno de la Columna Efecto de la Temperatura en GC

Características deseables de un horno: Aumento de Tª

FÁCIL ACCESO A LA COLUMNA la

operación de cambio de columna suele
ser frecuente
CALENTAMIENTO Y ENFRIAMIENTO
RÁPIDO Importante tanto en análisis de
rutina como durante el desarrollo de
nuevas metodologías analíticas.
Disminución de la intensidad de las fuerzas de
interacción de los solutos con la fase
estacionaria y los coeficientes de reparto
disminuyen
t´r

TEMPERATURA ESTABLE Y
REPRODUCIBLE
La temperatura debe ser mantenida con Tª
una exactitud y precisión de ± 0,1°C.
¡La variación de la retención con la Tª es
característica de cada soluto y sirve para
optimizar la separación!
 INSTRUMENTACIÓN INSTRUMENTACIÓN
Programación Lineal de Programación Lineal de
Temperatura Temperatura
Mezclas complejas (constituyentes con La temperatura del horno puede ser variada
volatilidades muy diferentes) separadas linearmente durante la separación:
ISOTERMICAMENTE:
TCOL BAJA: Se consigue una
-Componentes más volátiles son
buena separación
separados de los
componentes de la
- Componentes menos volá- muestra en menor
tiles tardan en eluir, saliendo tiempo
como picos mal definidos
Parámetros de una programación de temperatura:

TINI Temperatura Inicial

TFIM

TEMPERATURA
TCOL ALTA:
- Componentes más TFIM Temperatura Final
volátiles no son separados R
tINI Tiempo Isotérmico Inicial
TINI
- Componentes menos
volátiles eluyen más tFIM Tiempo Final del Programa
rápidamente tINI tFIM
R Velocidad de calefacción
TIEMPO

Isotérmicamente Vs Programación lineal PTGC : Cromatografía de Gases con Tª programada

Aplicación: muestras complejas con amplio
Intervalo de volatilidad y/o polaridad en sus
componentes

-Menor tiempo de análisis

● Ventajas -Aumenta la sensibilidad
PTGC -Puede usarse para variar la selectividad
-Aumento de la vida útil de la columna
-Puede disminuir la resolución
● Inconvenientes en algunos casos.
PTGC -Deriva de la línea base
(alteración debida al aumento
de la Pvapor de la Fase
Estacionaria al elevar la Tª).

Línea Base
 Elección del Programa de Tª
BACKFLUSH
Tª f(oC)
t (min)
Gradiente Tª
(oC/min)

Tª o
(oC)
t (min)

Tª inicial: próxima al punto de ebullición de los

solutos más volátiles.
Tiempo a la Tª inicial: es necesario cuando los
solutos más volátiles son difíciles de separar.
Gradiente de Tª: suele oscilar entre 1 y 10 oC/min.
Se ajusta experimentalmente. Ventajas:
Tª final: generalmente entre 80 y 100 oC por debajo del -Reducción de tiempos de análisis
punto de ebullición del soluto menos volátil. -Aumento de la vida útil de la columna
Tiempo a la Tª final: el necesario para que se eluyan
todos los solutos.

TEORIA BÁSICA TEORIA BÁSICA

Tiempo de Retención Corregido, tR‘ Factor de Retención o Capacidad,
Tiempo medio que las moléculas de un
K´
analito pasan absorbidas en la FE:
TIEMPO DE RETENCIÓN CORREGIDO, tR’: El Factor de Retención (K´) o Factor de
Capacidad, es empleado para describir la tasa
tR de migración de un analito en la columna
tR’ = tR - tM cromatográfica.
SEÑAL

K´ = tR – tM / tM
tM

TIEMPO K´ < 1 Rápida elución del analito

tR = Tiempo de Retención (tiempo transcurrido entre
la inyección y el máximo del pico cromatográfico) K´ > 20 Largo tiempo para la elución del
tM = Tiempo de Retención de un compuesto No analito
Retenido (tiempo mínimo para que un compuesto que
no interacciona con la FE atraviese la columna)

K = K´β Relación de
fases
Factor de retención
Constante de Distribución
K´= peso soluto FE / Peso soluto FM
β = Vol. FM / Vol. FE
Cantidad de tiempo que un soluto reside
en el interior o sobre la fase estacionaria,
en comparación con la fase móvil.
K´ comprendidos entre 1 – 15.
TEORIA BÁSICA
Selectividad
Def. Capacidad de un sistema de
diferenciar dos compuestos diferentes
(distancia entre picos cromatográficos)
α (SELECTIVIDAD) = tr2´ / tr1´= K´2 / K´1
¡ Para que dos o más solutos se puedan
separar sus K deben ser diferentes!
α≠1
La selectividad es una característica que
depende de la Tª, la fase estacionaria, la fase
móvil, o de ambas.
TEORIA BÁSICA
Constante de Distribución, KC
Columna cromatográfica: série de estadíos inde-
pendientes donde se produce un equilíbrio entre el
analito disuelto en la fase estacionaria y en el gas de
arraste:
Ocurre un “cuasi-equilibrio” entre
el analito disuelto en la FE y el
disuelto en el gas portador
KC =
[A]S KC = Constante de Distribución
[A]S = concentración del analito en FE
[A]M [A]M = concentración del analito en gas
Afinidad por la FE [A]S
MENOR RETENCIÓN !!!
Volatilidad [A]M
α1,2 = Po1 / Po2
(Po = presión de vapor del soluto puro a la
temperatura de trabajo)
Si la disolución de los solutos en la fase estacionaria
fuese IDEAL, la separación por GC se basaría
exclusivamente en las diferencias de vapor de los solutos
22 TB
ln Po = + 17.6
RT
Los solutos se eluirían siguiendo el orden creciente de
sus temperaturas de ebullición.
Sin embargo, la disolución de los solutos en la fase
estacionaria es REAL, en ese caso:
P parcial del soluto
Pg = γ Po en la fase gas
(γ = coeficiente de actividad, pone de manifiesto las
interacciones entre las moléculas del soluto y la fase
estacionaria)
Los solutos se separan por sus
diferentes puntos de ebullición y por
sus interacciones específicas con FE
 TEORIA BÁSICA TEORIA BÁSICA
Eficacia de un Sistema Cromatográfico Medida de la EFICACIA

La migración de un
analito por la
columna provoca
inevitablemente un Cada estadío de
alargamiento de su equilibrio es llamado
banda: PLATO TEÓRICO
TIEMPO

Efectos del alargamiento excesivo de los picos: EFICACIA = Nº PLATOS TEÓRICOS (N)
Separación deficiente de Picos más largos y
analitos con tr próximos. menos intensos = menor El número de platos teó-
detectabilidad ricos de una columna
(N) puede ser calculado
mediante la expresión:

tR
Columna
N más eficiente
EFICACIA : Capacidad de elución con el wb
mínimo de dispersión de un analito.

TEORIA BÁSICA RESOLUCIÓN

Medida de la EFICACIA (Expresión numérica de la separación cromatográfica)

ALTURA EQUIVALENTE A UN PLATO TEÓRI- R = 2 ∆t / (w2 + w1)

CO (H) “Tamaño” de cada estadío de equilíbrio (t y w en las mismas unidades)

(L = dependiente de la
columna) mm
Valores típicos de H y N: R = 2 (tr2 – tr1) / (w2 + w1)
dC df H N
0.10 0.25 0.081 370370 Matemáticamente:
0.25 0.25 0.156 192308
0.32 0.32 0.200 150000 α-1 K´
0.32 0.50 0.228 131579
R=¼ N ( )( )
Capilares, L = 30 m α K´ + 1
0.32 1.00 0.294 102041
0.32 5.00 0.435 68966
0.53 1.00 0.426 70423
0.53 5.00 0.683 43924
Rellenas, L = 2 m 2.16 10% 0.549 3643 Término Término Término
2.16 5% 0.500 4000 Selectividad Capacidad
Eficacia
Valores de H para columnas capilares y rellenas son (geometría de (naturaleza de las (factor mixto
próximos, pero como L para capilares es MUCHO la columna) fases y Tª) de capacidad)
mayor columnas capilares son más eficaces
 - Término de Eficacia:
Factores que Afectan la
N = 16 (tr/w)2 = 5.5 (tr/w1/2 )2 Eficacia de una Columna
¡¡ Más exacto cuando los picos
no son completamente simétricos !! • Longitud de la Columna
• Diámetro de la Columna (1/4", 1/8",
N=L/H 1/16" de diámetro externo)
• Tamaño de las partículas del
C: 100- 500 x 103 0.1 – 1 mm
R: 5000
empaque
- Valores bajos de H • Naturaleza de las fases
• Grosor de fase estacionaria
Consideraciones

Mayor nº de platos teóricos para • Temperatura de la columna

la misma L • Velocidad del gas portador (ū)
-Cualquier mecanismo que haga • Cantidad de muestra inyectada
que una banda de soluto se ensanche

Aumento de H: disminución de N

TEORIA BÁSICA Ensanchamiento de las bandas de elución

Optimización de la EFICACIA B
Ec. Van Deemter
La altura equivalente a un plato téorico es H=A+—+C·ū (columnas rellenas)
función de la velocidad linear media del gas de ū
arraste ū:
“El ensanchamiento de las bandas de elución se
debe a la suma de los ensanchamientos individuales
El valor de H
provocados por diferentes fenómenos”
puede ser
H minimizado
otimizándo- A (Difusión de Eddy): conjunto de corrientes que
HMIN se el flujo del puede tomar la fase móvil por entre las partículas de la
columna. Se minimiza por técnicas de buen empaquetado.
gas de A es muy bajo o despreciable en columnas capilares.
uMAX arraste
u

Relaciones algebraicas entre H e u:

- Columnas rellenas: Ecuación de van Deemter

B
H=A+—+C·ū (A, B, C = constantes)
ū dp: diámetro de las partículas del
- Columnas Capilares: Ecuación de Golay soporte sólido
A = 2 dp λ λ: factor de relleno (depende de
(B, CM, CS = constantes) la dispersión de tamaños de
las partículas).
 Curva de
B (Difusión Longitudinal): existe porque todos
los solutos se difunden de un área de concentración Van Deemter
elevada a un área de concentración más baja.
H
V (factor de obstrucción): impedimento
que ofrece el relleno a la difusión
longitudinal.
Cs
B = 2 V Dm
Dm: coeficiente de difusión del soluto
en la fase móvil. Depende de la fase Cm
móvil y la Tª. B es elevado cuando la
fase móvil es gas. A
B/ū
C (Resistencia a la transferencia de Ū (cm/s)
materia): tiempo finito requerido por el soluto para
equilibrarse entre las fases móvil y la estacionaria. Se Aumenta con ū
tarda un tiempo en conseguir los equilibrios de
distribución.
Cm: resistencia a la transferencia de
Independiente de ū Al aumentar ū disminuye
materia desde la fase móvil.
B, porque B requiere un
C = Cm + Cs cierto tiempo. Al aumentar
ū no tienen tiempo para
Cs: resistencia a la transferencia de difundir y B no contribuye
materia desde la fase estacionaria a H.

Ecuación de Golay (columnas capilares, 1958)

Eficacia Capilares Vs Eficacia Rellenas

A = 0 (no hay relleno)

B = 2 Dm (no hay relleno, V = 1)

EN GENERAL:

- Incremento de ū : aumento de A y C aunque disminuye B.

- ū mayores: menor tiempo de análisis

 Interacciones más frecuentes entre el
Elección del gas portador soluto y la fase estacionaria
H (mm)

A) Fuerzas entre dipolos permanentes:

permanentes:
N2 Se dan entre moléculas polares. Pertenecen
a este tipo los puentes de H2. Su intensidad
He
disminuye al elevar la Tª.

0.4
H2
B) Fuerzas entre dipolos permanentes y
dipolos inducidos:
inducidos: Se dan entre moléculas
polares y apolares. También disminuyen al
elevar la Tª.

ū (cm/s) C) Fuerzas de dispersión o de London:

London: se dan
entre moléculas no polares. Igualmente
disminuyen al elevar la Tª.

Concepto de POLARIDAD en GC

(se utiliza en la práctica en lugar de Selectividad)

agua
glicoles
POLARIDAD de la Fase Líquida: término amidas
poco preciso. Una fase líquida es polar ácidos inorgánicos
cuando sobre ella se retienen más los aminas
solutos polares que los apolares a igualdad fenoles
de puntos de ebullición. alcoholes
aldehídos
cetonas
ésteres
a) Fase polar – Soluto polar: interacciones entre hidrocarburos aromáticos
dipolos permanentes. (Fuertes: alta retención). hidrocarburos insaturados
hidrocarburos saturados
b) Fase no polar – Soluto no polar: interacciones
Retención Retención
de dispersión. (Fuertes: alta retención)
en fase en fase
POLAR APOLAR
c) Fase polar – Soluto no polar: interacciones
entre dipolos permanentes y dipolos inducidos.
Lo mismo entre Fase no polar y Solutos polares.
(Débiles: baja retención)
 FASES ESTACIONARIAS
Índices de Retención de Kovats: Conceptos Generales
( tienen las mismas características que α)
LÍQUIDOS Depositados sobre la superfície de: só-
Alcano Alcano lidos porosos inertes (columnas empaquetadas) o de
N i N + N´ tubos finos de materiales inertes (columnas capilares)

FE
líquida

SOPORTE
Tubo capilar de
Sólido inerte
material inerte
poroso
Para minimizar la pérdida de FE líquida por
log t´ri - log t´rN volatilización, normalmente es:
Ii = 100N + 100N´ ( ------------------------------)
log tr(N+N´) – log t´rN
Entrecruzada: las Quimicamente ligadas:
N: nº de carbonos del n-alcano eluido antes del soluto i cadenas las cadenas poliméricas
N + N´: nº de carbonos del alcano eluido después del soluto i poliméricas están están “presas” en el
N´: generalmente igual a 1 ó 2. químicamente soporte mediante
ligadas entre si enlaces químicos
SÓLIDOS Columnas rellenas con material finamente
granulado (empaquetadas) o depositado sobre la
superfície interna de un tubo (capilar)

Disposición de la fase estacionaria líquida FASES ESTACIONARIAS

en columnas capilares Características de una FE ideal

SELECTIVA Debe interaccionar

diferencialmente con los componentes de la
muestra.

FE Selectiva:
separación
adecuada de los
constituyentes de
la muestra

FE poco Selectiva:
mala resolución con
columna de buena
eficacia

Regla general: la FE debe tener características lo más

¡¡¡80 % de las columnas capilares usadas!!! próximas posibles a los solutos que queramos
separar (polar, apolar, aromático ...)
 FASES ESTACIONÁRIAS FASES ESTACIONARIAS
Características de una FE ideal FE Sólidas: Adsorción

AMPLIO RANGO DE TEMPERATURAS El fenómeno físico-químico responsable de la

interacción analito + FE sólida es la
DE USO Mayor flexibilidad en la otimización de
la separación ADSORCIÓN

BUENA ESTABILIDAD QUÍMICA Y

TÉRMICA Mayor durabilidad de la columna,
no reacciona con los componentes de la
muestra
La adsorción ocurre en la interfaz entre el gas
de arraste y la FE sólida

POCO VISCOSA Columnas más Sólidos con grandes

áreas superficiales
eficientes (menor resistencia a la (partículas finas, poros)
transferencia del analito entre fases)

Solutos polares
ADSORCIÓN
DISPONIBLE EN ELEVADO GRADO Sólidos con gran
DE PUREZA Columnas reproducibles; número de sitios activos
ausencia de picos “fantasma” en los (hidroxilos, pares de
cromatogramas. eletrones...)

FASES ESTACIONARIAS FASES ESTACIONARIAS

FE Sólidas FE Líquidas: Absorción
Características Generales: El fenómeno físico-químico responsable de la
- Sólidos finamente granulados (diámetros de par- interacción analito + FE líquida es la
tículas típicos de 105 µm a 420 µm). ABSORCIÓN
- Grandes áreas superficiales (hasta 102 m2/g).
Más usados:
Polímeros Porosos Porapak (copolímero estireno-divi-
nilbenzeno), Tenax (polióxido de difenileno)
Sólidos Inorgánicos Carboplot, Carboxen (carbones
activos grafitizados), Alumina, Criba Molecular (arcilla
La absorción ocurre en el interior de la película
microporosa)
de FE líquida (fenómeno INTRAfacial)

-Separación de gases fijos

Principales Aplicaciones: - Compuestos ↓PM Mayor espesor de
- Séries homólogas película de FE líquida

Mayor superfície líquida

expuesta al gas de
GASES DE REFINERIA ABSORCIÓN arraste
Columna:Carboxen-1000 60-80
mesh; 15’ x 1/8”
TCOL: 35oC a 225oC / 20oC. min-1 Fuerte interacción entre
Gas de Arraste: He @ 30 ml.min-1 la FE líquida y el analito
Detector: TCD (gran solubilidad)
 FASES ESTACIONARIAS FASES ESTACIONARIAS
Familias de FE Líquidas Familias de FE Líquidas
POLIGLICOLES Muy polares; sensibles al SILICONAS (polisiloxanos) Las FE más em-
agua y a la oxidación. Principal: pleadas en CG. Cubren una amplio rango de
Polietilenoglicol (nombres comerciales: polaridades y propriedades químicas diversas.
Carbowax, DB-Wax, Supelcowax, HP-Wax, etc.)

Estrutura Química: H O CH2 CH2 OH CH3 R1 CH3

H3C Si O Si O Si CH3 R1, R2 = cualquier
n radical orgánico
CH3 R2 CH3
n

- Ligando Si-O extremamente estable = elevada

estabilidad térmica y química de las FE.

- Siliconas son fabricadas a gran escala para diversas

aplicaciones = minimización del costo del produto +
tecnologia de producción y purificación largamente
estudiada y conocida.

- Praticamente cualquier radical orgánico o inorgánico

puede ser ligado a la cadena polimérica = FE
AMINAS ALIFÁTICAS
“ajustables” a separaciones específicas + facilidad de
Columna:4 % Carbowax 20M s/ Carbopack B + 0,8% KOH
o
TCOL: 200 C (isotérmico) Gas de Arraste: N2 @ 20 mL.min-1
inmobilización por entrecruzamiento y ligación
Detector: FID Muestra: 0,01 µL de mezcla de aminas
química a soportes

FASES ESTACIONARIAS FASES ESTACIONARIAS

Familias de FE Liquidas Familias de FE Líquidas
FE derivadas de polidimetilsiloxano (PDMS) por Separación de pesticidas - FE = 100 % PDMS
substitución de -CH3 por radicales orgánicos, en
orden creciente aproximado de polaridad:
1 - TCNB
2 - Dichloram
3 - Lindano
Substituintes Nomes Comerciais Observações 4 - PCNB
5 - Pentacloroanilina
- - SE-30 OV-1 OV-101 SP-2100 mais apolares da série 6 - Ronilano
pouco seletivas 7 - Antor
carborano ? - Dexsil 300GC similar a PDMS 8 - pp’-DDE
estável até > 400oC 9 - Rovral
fenil 5 % - SE-52 SE-54 OV-3 OV-5 pouco polar 10 - Cypermetrin
OV-73 11 - Decametrin

cianopropil 7% fenil 7% OV-1701 SPB-7 CP-Sil 19CB moderadamente polar

fenil 50 % - OV-17 SP-2250 HP-50+ moderadamente polar

SPB-50 retém aromáticos

trifluoropropil 50% - OV-210 QF-1 moderadamente polar

retémcompostos carbonílicos
17 min
cianopropil 50% fenil 50% OV-225 SP-2300 CP-Sil polar
43CB retemdoadores de elétrons
Columna: CP-Sil 5 (25 m x 0,32 mm x 0,12 µm)
cianopropil 100% - SP-2340 SP-2330 Silar-9 CP altamente polar
TCOL:195oC (6,5 min) / 195oC a 275oC (10oC.min-1)
Gas de Arraste: He @ 35 cm.min-1 Detector: FID

Muestra: 2µL de solución de pesticidas “on-column”

 FASES ESTACIONARIAS FASES ESTACIONARIAS
FE Quirales FE Quirales

Separación de isómeros ópticos: FE opticamente activas mas importantes:

CH3 CH3

PRODUCTOS BIOLÓGICOS Distinción entre O Si O Si

productos de origen sintético y natural (natural = CH3 CH2 CH3
normalmente substancias ópticamente puras; sintético Derivados de aminoácidos: n
CH3 CH O NH C CH3
= muchas veces son mezclas racémicas).
Mezclas de compuestos C
C
CH3

FÁRMACOS En muchos fármacos apenas uno de formadores de puentes O N C* H

los isómeros ópticos tiene atividad farmacológica. de hidrogeno H CH CH3

CH3

Propiedades físico-químicas de isómeros ópticos son Chiralsil-Val

MUY SIMILARES

CH3 CH3
FE convencionales no interaccionan diferencialmente O Si O Si
con isómeros ópticos
CH3 CH2
n
Organometálicos: CH2
Separación de mezclas de isómeros
ópticos sólo es posible con FE Separación de O

opticamente activas enantiómeros formadores Ni

/2
de complejos.
= O

C3F7
FE Quirales
Chiralsil-Metal

FASES ESTACIONARIAS FASES ESTACIONARIAS

FE Quirales FE Quirales: Aplicaciones
Aceite esencial artificial de limón: separación de
Derivados de ciclodextrinas alquiladas: terpenos primarios

β -ciclodextrina: 1 - (+/-) α-pineno

oligosacárído 2 - sabineno
cíclico quiral 3 - (+/-) β -pineno
4 - (+/-) limoneno

Chiralsil-Dex

- Introducidas en 1983

- Cuando ligadas a cadenas de polisiloxano: uso

extremamente favorable como FE líquida (viscosidad
baja, estabilidad ...)
- Pueden ser químicamente inmobilizadas en las
columnas
Columna: Rt-ßDEXsm (30 m x 0.32 mm x 0.25
µm)
TCOL: 1 min a 40°C / 2°C min -1 / 3 min a 200°C

- Columnas disponibles comercialmente Gas de Arraste: H2 @ 80 cm.min-1 Detector: FID

 COLUMNAS RELLENAS COLUMNAS RELLENAS
Definiciones Básicas FE Líquidas: Soporte

Tubo de material inerte relleno de FE sólida gra- área superficial entre 0,5 e 10 m2.g-1
La FE líquida debe
nulada o FE líquida depositada sobre un soporte microporos regulares (~ 1 µm)
estar depositada
sólido.
sobre un NO interaccionar con la muestra
SOPORTE sólido Buena resistencia mecánica

acero inox
MATERIAL vidrio pirex ø = 3 mm a 6 mm
DEL Uso casi universal: TIERRA DIATOMEAS
níquel L = 0,5 m a 5 m
TUBO
TEFLON

MESH dp

60 - 80 mesh 177 - 250 µm secado

Granulometría calcificación
del 80 - 100 mesh 149 - 177 µm Esqueletos fósiles
relleno fusión con sosa
100 - 120 mesh 125 - 149 µm (SiO2 + óxidos
lavado con ácido
metálicos) de algas Chromosorb
silanización Anachrom
microscópicas
Supelcoport
...

COLUMNAS CAPILARES COLUMNAS CAPILARES

Definiciones Básicas Diámetro Interno

Tubo fino de material inerte con FE líquida o sólida  dC =
Eficacia

depositada sobre las paredes internas.
Valores comunes:
0,25 mm
sílice fundida ø = 0,1 mm 0,10 mm 0,53 mm
MATERIAL 0,32 mm
vidrio pirex a 0,5 mm
DEL acero inox
Nylon L=5m
TUBO
Silcosteel a 100 m
1 2 3

Columnas de altísima eficacia (muestras

Columnas de sílice son revestidas externamente con una capa de 1 complejas, “Fast GC”); capacidad volumétrica
polímero (poliimida) para aumentar resistencia mecánica y química limitada de procesamiento de muestra

Columnas Capilares Vs Rellenas: Diámetros más comunes; capacidad

2 volumétrica limitada de muestra requiere
dispositivos especiales de inyección
CAPILARES

L =
N Columnas más eficientes

FC = 1 ... 10 mL.min-1 Control de flujo más difícil
Columnas “megabore”: menor eficacia, pero
 Vi Dispositivos especiales de inyección
3 mayor capacidade de carga, permite uso de
inyectores convencionales
 INSTRUMENTACIÓN INSTRUMENTACIÓN
Detectores Detectores
Dispositivos que examinan continuamente el Más Importantes:
material eluido, generando una señal eléctrica DETECTOR DE IONIZACIÓN DE LLAMA (FID)
proporcional a la banda de elución Iones generados durante la quema de los
eluyentes en una llama de H2 + Aire
DETECTOR DE CAPTURA ELECTRÓNICA
(DCE) Supresión de la corriente causada
por la absorción de electrones por
eluyentes altamente eletrofílicos.
DETECTOR DE NITRÓGENO-FÓSFORO (NPD).
Producción de iones a partir de las
moléculas de N y P.
DETECTOR FOTOMÉTRICO DE LLAMA
(FPD).Sensible a los compuestos
azufrados y fosforados.
ANALÓGICO
Gráfico Señal vsTiempo = CROMATOGRAMA REGISTRO Registradores XY
Idealmente: cada substancia separada aparece DE DIGITAL
como un PICO en el cromatograma. SEÑAL Integradores
Ordenadores

DETECTORES
Definiciones Generales
Dispositivos que generan una señal elétrica
proporcional a la cantidad eluida de un analito
~ 60 detectores ya empleados en CG
DETECTORES
Parámetros Básicos
CANTIDAD MÍNIMA DETECTABLE Masa de un
analito que genera un pico con una altura igual a tres
veces el nivel de ruído

~ 15 equipamientos cromatógraficos S
SEÑAL (S)

=3
comerciales N

4 dan respuesta a la mayor parte de las RUIDO (N)

aplicaciones

RUIDO Cualquier componente de la señal generado

DCT TCD DIC FID
Detector de por el detector que no se origina de la muestra
Detector por
Condutividad Ionización de
Térmica llama
Contaminantes de los gases
Fuentes
EM MS de
Impurezas acumuladas en el
DCE ECD Detector Es- detector
Detector de pectrométrico Ruido
Captura de Masas Toma de tierra elétrica deficiente
Eletrónica
 DETECTORES DETECTORES
Parámetros Básicos Parámetros Básicos

LIMITE DE DETECCION Cantidad de analito que SENSIBILIDAD Relación entre el incremento del
área del pico y el incremento de la masa del analito
genera un pico de S/N = 3 y wb = 1 unidad de tiempo

Mismo detector, nivel de ruido y masa de analito PERO

diferentes anchuras de base de pico:
Factor de
Respuesta, S:

ÁREA
pendiente de la
recta Area del
pico x Masa del
CMD: wb
analito
Detector (señal generada, ruido)
Cantidad
mínima Anchura de pico cromatográfico MASA
detectable = f

Definiéndose el LIMITE DE DETECCION como:

S Sensibilidad
LD = CMD / Wb

LD es independiente de la eficacia del sistema A = área del pico cromatográfico

cromatográfico !
[CMD] = [LD] = m = masa del analito
masa masa / tiempo
(ng, pg ...) (ng.s-1, pg.s-1 ...)

DETECTORES DETECTORES
Parámetros Básicos Clasificación
FRANJA LINEAR DINÁMICA Intervalo de masas
dentro del cual la respuesta del detector es linear
UNIVERSALES:
Generan uma señal para
cualquier
A partir de substancia eluida.
ÁREA

cierto punto la
señal no
aumenta más
linearmente
SELECTIVOS:
Detectan substáncias
MASA
com determinadas propriedades
El fín de la da zona de linearidad puede ser detectado físico-químicas.
cuando la relación (Área / Masa) diverge en más de 5
% de la inclinación de la recta en la región linear:

1,05 S
ESPECÍFICOS:
ÁREA / MASA

Detectan substáncias que

poseen determinado elemento
o grupo funcional en sus
0,95 S estruturas
MASA
 DETECTORES DETECTORES
Detector de ionización de llama Detector de ionización de llama
PRINCIPIO Formación de iones cuando un COLECTOR
compuesto es quemado en una llama de hidrógeno y
oxigeno AIRE
LLAMA

El efluente de la columna es
mezclado con H2 y O2 y H2
quemado. Como en una llama
de H2 + O2 no existen iones,
no se produce conducción de
la corriente elétrica

COLUMNA

Se aplica una diferencia de

potencial elétrico entre la llama
y el colector - quando se forman
Cuando un compuesto íones en la llama se produce un
orgánico eluye, él también es flujo de la corriente eléctrica:
quemado. En su quema se
producen iones (e-) que
conducen la corriente
eléctrica

DETECTORES
Detector de ionización de llama
SELETIVIDAD Seletivo para substancias que
contienen enlaces C-H en su estructura química.
(como virtualmente todas las substancias analizables por CG son
orgánicas, en la prática se le llama Detector UNIVERSAL)
Compuestos que NO producen respuesta en FID:
DETECTORES
Detector de ionización de llama
TEMPERATURA DE OPERACIÓN El efecto de la
temperatura sobre la señal del FID es despreciable
TRATAMIENTO DE LA SEÑAL Debido a la baja
magnitud de la corriente elétrica generada (pA y nA)
éstra debe ser amplificada para poder ser registrada.
2

Gases nobles NH3, NxOy Diagrama

eletrónico 1
H2, O2, N2 SiX4 (X = halogeno) simplificado de 3
CO, CO2, CS2 H2O un FID

CCl4, peralogenados
1 Flame tip / Llama / Colector

VARIACIONES EN LOS VALORES DE AIRE E H2 2 Amplificador Eletrométrico Debe amplificar la

AFECTAN MARGINALMENTE A LA SEÑAL = señal y convertir una corriente variable en una señal
MAYORES REPRODUCIBILIDADES Y de voltage variable (pA → mV).
REPETIBILIDADES

3 Salida del Registro de Señal

 DETECTORES
Detector de captura electrónica
Principio: el efluente
de la columna pasa por
un emisor radioactivo
(63Ni o Tritio) absorbido
sobre una lámina de Pt.
El emisor emite e- al
experimentar la
desintegración, y cada e-
provoca la ionización del
gas portador (normalmente
N2) con el consiguiente
desprendimiento de e-,
generándose una corriente
constante entre un par de
electrodos (ánodo y cátodo)
Cuando un analito se eluye desde la columna cromatográ-
fica pasa entre la lámina y el ánodo. Los compuestos
con grupos funcionales electronegativos (halógenos, peró-
xidos, etc) reducen la corriente estacionaria y dan una
respuesta mensurable.
Inconveniente: poco sensible a alcoholes, aminas e
hidrocarburos. Además, se satura con facilidad
presentando un rango de respuesta lineal limitado.
DETECTORES
Detector de Nitrógeno-Fósforo (NPD)
Principio: de confi-
guración similar al
FID. El efluente pasa
A través de una bola de
Silicato de Rubidio
calentada electricamente
y con una diferencia de
potencial de 180 V con el
colector. En la bola se
forma un plasma que
alcanza Tª de 600 – 800
oC generándose iones a
partir de las moléculas de
P y N.

DETECTORES Métodos Analíticos de Aromas en

Detector fotométrico de llama (FPD) Alimentos

Clasificación de los compuestos aromáticos

► Compuestos impacto o altamente activos: aquellos que

pueden transmitir las características específicas (compuestos
impacto) o sus características primarias (altamente activos)
sin necesidad del soporte de más componentes químicos.

► Familias de compuestos impacto: familias de compuestos

con similitud tanto en sus estructuras químicas como en sus
características sensoriales. Son series de compuestos
homólogos (ej. Lactonas).

Principio: el efluente pasa a través de una llama de
hidrógeno/aire a baja Tª en la que los compuestos
fosforados y azufrados se descomponen dando
compuestos que emiten en bandas de 526 y 394 nm,
respectivamente. Las bandas se aislan mdiante filtros
adecuados y sus intensidades se registran
fotométricamente.
Aplicaciones: determinación de pesticidas
organofosforados y de compuestos sulfurados volátiles
en alimentos.
► Compuestos o familias de papel sutil o secundario:
compuestos o grupos de compuestos que no son capaces de
transmitir sus notas aromáticas específicas pero que
contribuyen de manera neta a alguna nota aromática secun-
daria o genérica (ej, frutal, dulce). Esa nota será el resultado
de la interacción de estos componentes con otros
compartiendo alguna similitud aromática.
► “Off-flavours”: componentes cuya presencia lleva asociada
Una disminución en la calidad general del aroma.
 ¿Por qué realizar análisis aroma en TECNICAS DE EXTRACCIÓN DE AROMAS
alimentos?

► Buscar correlación con al análisis sensorial - Destilación

► Detección de “off-flavor” - Extracción Líquido-

Líquido-líquido
(pentano--diclorometano)
(pentano
► Límites legales
- Headspace (dynamic or static)

- SPE (Solid Phase Extraction)

Aromas en Alimentos
● Mezcla de gran complejidad con un
elevado número de componentes
volátiles involucrados
(uso en columnas o cartuchos)
- SPME (solid Phase Micro-
Micro-Extraction)
mg/L (10-3 g/L)

Umbral Métodos “headspace”

● Umbral de percepción:
concentración mínima a partir de la
cual se reconoce la presencia de
una sustancia
percepción
- Técnicas “static headspace” son rápidas y con poca
manipulación de muestra, aunque su ppal. desventaja es
su baja sensitividad.
ng/L (10-9 g/L) - Técnicas “dynamic headspace” están aumentando su
popularidad.

SPE (Extracción en fase sólida) SPME (Micro-

(Micro-extracción en fase
- Permite la extracción selectiva de compuestos libres
sólida)
y ligados

- Los compuestos libres se inyectan directamente en

GC luego de concentrar eliminando parte del disolvente - Extracción libre de
en corriente de N2 disolventes

- Lo compuestos ligados se deben hidrolizar mediante

métodos enzimáticos previo a su inyección en GC.
- Con sólo 3 tipos de
materiales se cubre la
totalidad de los
analitos a determinar
en las distintas muestras

- Límites de detección
más bajos que para las
técnicas de
“head-space”
 Cromatograma aroma vino blanco
La GC nos da información de un gran
número de compuestos volátiles, pero
¿cuáles son activos aromáticamente?

GC
GC--O

Cromatograma aroma vino tinto - Empleo de narices humanas como detectores

de compuestos aromáticamente activos.

- Asignación de su importancia relativa al aroma

total.

- Métodos basados en 3 tipos: a) frecuencia de

detección, b) umbral de dilución, y c) intensidad
directa.

Gas Chromatography Olfactometry ANÁLISIS CUALITATIVO

Conceptos Generales

Identificación individual de
espécies presentes en la muestra
Aplicaciones
cualitativas de
CG Determinación de la identidad de
la muestra propriamente dicha

Se emplean “narices humanas” como otro sistema de Fuentes de informaciones cualitativas

detección sensitivo y selectivo para compuestos
aromáticos. El propósito de esta técnica es el de
RETENCIÓN Uso de los datos de retención de un
determinar los compuestos impacto olorosos de un analito para su identificación
extracto y asignarles una importancia relativa.
Métodos de umbral de dilución: miden la potencia de DETECCIÓN Detectores que proporcionan
los compuestos olorosos activos empleando una serie informaciones estruturales sobre las substancias
de diluciones del extracto. eluídas

Métodos de frecuencia de detección y de intensidad

directa: medida de la intensidad de lo compuestos
olorosos activos en un extracto concentrado
 ANÁLISIS CUALITATIVO ANÁLISIS CUALITATIVO
Tiempos de Retención Tiempos de Retención
Interacciones analito / FE Comparación de t’R usando dopage (“spiking”)
de muestra con el analito sospechado
t’R = f Presión de vapor del analito
Condiciones operacionales (TCOL, FC
...)
A unas condiciones operacionales fijas, el tiempo
de retención corregido de un analito es constante
Muestra compleja:
MUESTRA incerteza en los t’R
medidos puede llevar a
identificación errônea
Comparación
de
cromatogramas
de muestra y
PATRÓN
de uma
disolución de Comparación con
un patrón cromatograma de la
muestra dopada permite
una identificación más
fiable

¡Identificación sólo por t’R es poco fiable!

ANÁLISIS CUALITATIVO ANALISIS CUALITATIVO

Métodos de Detección Cualitativos
¡Complementar información estructural con métodos
espectroscópicos (MS, NMR, IR, UV)!
Métodos de detección que proporcionan
informaciones cualitativas sobre los analitos eluidos:
Espectrometria de Masas
PRINCIPIO La muestra es fragmentada e ionizada en
un patrón característico de la especie química.
1 Moléculas de la muestra son bombardeadas por
electrones (electron impact = EI) o íones (chemical
ionization = CI):
ABCDE + e- → ABCDE.+ + 2 e-

Cromatografia Gaseosa con Detección 2 El ión formado se fragmenta:

Espectrométrica de Masas (GC-MS) ABCDE.+ → AB. + CDE+
ABCDE.+ → AB+ + CDE.
ABCDE.+ → A+ + BCDE.
Cromatografia Gaseosa con Detección
3 Los fragmentos iónicos formados son separados
Espectrométrica de Emisión Atómica
magnéticamente de acuerdo con sus masas
(CG-EA) moleculares:

Cromatografia Gaseosa con Detección

ABUNDANCIA

El gráfico: número de
íones formados en
Espectrométrica por Absorción en el función de la relación
Infra-rojo (GC-IR) Masa / Carga de los íones
es el ESPECTRO DE
MASAS del analito
Identificación más fiable al combinarlos con las
técnicas de identificación basadas en la retención MASA / CARGA
 Analizador de cuadrupolo
ANÁLISIS CUALITATIVO
Espectrómetro de Masas
1 3

2 4

1 Cámara de Ionización Eletrones generados por un

filamento calentado bombardean la muestra. Los fragmentos
ionizados (carga +1) son repelidos por el electrodo positivo y
conducidos al separador magnético.

2 Salida de Vacío Todo el interior del EM debe estar a alto

vacío .
El cuadrupolo consiste de cuatro cilindros metálicos
3 Separador Magnético La acción del campo magnético paralelos, en donde dos de ellos tienen un potencial (U +
deja sólo a íones con determinada relación Masa / Carga Vcos(wt)) y los otros dos –(U + Vcos(wt)), lo que le da un
atravesar este área del equipo. rango de frecuencia, los iones con cierta relación (m/z),
pasan a través del cuadrupolo, los que no son
4 Detector Una válvula fotomultiplicadora o un fotodiodo eliminados.En este sistema se necesita un alto vacío, para
genera una señal elétrica proporcional al número de íones que el transporte de los iones a través del analizador (10-9
incide sobre el elemento.
torr).

ANÁLISIS CUALITATIVO ANÁLISIS CUALITATIVO

Espectro de Masas GC-MS: Generación del
Cromatograma
Espectros de masas completos registrados y
archivados en intervalos regulares de tempo
Generación de un cromatograma a partir de los
espectros:
CROMATOGRAMA DE IONES TOTALES (TIC =
Total Ion Chromatogram)
Para cada espectro el número total de iones
detectados en una franja de masas barrida es sumado
y representado en función del tiempo, generando un
cromatograma.
0 20 40 60 80 100 120
m/Z MONITORIZACIÓN DEL ION SELECCIONADO
(SIM = Single Ion Monitoring)
- CO
Se selecciona un fragmento resultante de la
m/Z = 80
fragmentación de la especie de interés. Se genera un
cromatograma representándose el número de iones
detectados con la masa de ese fragmento en función
m/Z = 118 m/Z = 79 del tiempo.
- (CO + H)

TIC SIM
Universal Selectivo
m/Z = 90
Similar al FID Mayor Sensibilidad
ANÁLISIS CUALITATIVO ANALISIS CUALITATIVO
GC-MS: TIC x SIM Identificación de compuestos
Busca automática en bibliotecas de espectros:
comparación estatística ( Probability Based Matching )
ESPECTRO
TIC DESCONOCIDO
Aparecen los picos Lista de posibles
candidatos +
correspondientes a PBM porcentage de
todas las substancias confianza
eluídas BIBLIOTECA DE
ESPECTROS
# NOME FÓRM. %
1 1-dodeceno C12H24 99
2 1-dodecanol C12H26O 91
PBM de un C12H24 91
3 ciclododecano
SIM (m/z = 149) compuesto
C12H24 66
4 2-dodeceno
Cromatograma “desconocido” (1-
dodecano) 5 1-undeceno C11H22 35
construido a partir de
los mismos datos de 6 8-metil-3-undeceno C12H24 32
arriba, pero sólo
usando fragmentos con Identificación poco fiable de es-
masa = 149 (ftalatos: pectros muy simples
plastificante)
Limitada por el tamaño de la base
LIMITACIONES:
de datos (NIST = 66.000 espectros)
Diferencias entre espectros
generados por diversos MS
FIN