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COURSE: English.
LEVEL: III
PRACTICA N° 6
ACIDOS NUCLEICOS
OBJETIVO
Determinar el ADN de un tejido distinguiendo su estructura fibrilar.
Los ácidos nucleicos se encuentran en todas la células vivas y están combinados en casi todos los
casos conciertas proteínas; son polímeros, en ocasiones de enorme tamaño, formados por la
unión de monómeros llamados nucleótidos. Cada uno de estos monómeros está constituido por la
unión de tres componentes esenciales que son:
Algunas funciones biológicas de los ácidos nucleicos son las de almacenamiento, replicación,
recombinación, y transmisión de la información genética (son las moléculas que determinan lo que
es y hace cada una de las células vivas).
El ADN (Ácido Desoxirribonucleico), es una molécula de gran tamaño que guarda y transmite de
generación en generación toda la información necesaria para el desarrollo de todas las funciones
biológicas de un organismo; está formado por una doble hélice, por nucleótidos formados por tres
unidades: una molécula de azúcar llamada desoxirribosa, un grupo fosfato y bases nitrogenadas:
adenina, guanina, timina y citosina.
El ARN (Ácido Ribonucleico), se forma por la polimerización de ribonucleótidos, los cuales se unen
entre ellos mediante enlaces fosfodiéster en sentido 5´-3´ (igual que en el ADN). Estos a su vez se
forman por la unión de un grupo fosfato, una ribosa (una aldopentosa cíclica) y una base
nitrogenada unida al carbono 1’ de la ribosa, que puede ser citosina, guanina, adenina y uracilo. Esta
última es una base similar a la timina. En general los ribonucleótidos se unen entre sí, formando una
cadena simple, excepto en algunos virus, donde se encuentran formando cadenas dobles.
Se conocen tres tipos principales de ARN y todos ellos participan de una u otra manera en la síntesis
de las proteínas. Ellos son: El ARN mensajero (ARNm), el ARN ribosoma (ARNr) y el ARN de
transferencia (ARNt).
FUNDAMENTO TEORICO
Los ácidos nucleicos (AN) fueron descubiertos por Freidrich Miescher en 1869.
En la naturaleza existen solo dos tipos de ácidos nucleicos: El ADN (ácido desoxirribonucleico) y el ARN
(ácido ribonucleico) y están presentes en todas las células.
Su función biológica no quedó plenamente confirmada hasta que Avery y sus colaboradores
demostraron en 1944 que el ADN era la molécula portadora de la información genética.
Los ácidos nucleicos tienen al menos dos funciones: trasmitir las características hereditarias de una
generación a la siguiente y dirigir la síntesis de proteínas específicas.
Tanto la molécula de ARN como la molécula de ADN tienen una estructura de forma helicoidal.
Químicamente, estos ácidos están formados, como dijimos, por unidades llamadas nucleótidos:
cada nucleótido a su vez, está formado por tres tipos de compuestos:
Una pentosa o azúcar de cinco carbonos: se conocen dos tipos de pentosas que forman
parte de los nucleótidos, la ribosa y la desoxirribosa, esta última se diferencia de la primera
porque le falta un oxígeno y de allí su nombre. El ADN sólo tiene desoxirribosa y el ARN tiene
sólo ribosa, y de la pentosa que llevan se ha derivado su nombre, ácido desoxirribonucleico
y ácido ribonucleico, respectivamente.
Una base nitrogenada: que son compuestos anillados que contienen nitrógeno. Se pueden identificar
cinco de ellas: adenina, guanina, citosina, uracilo y timina.
Un radical fosfato: es derivado del ácido fosfórico (H 3PO4-).
MATERIALES Y METODOS
LABORATORIO
2 tubos de ensayo.
1 vaso de precipitación
1 baño maría
1 embudo
2 papeles filtros
1 agitador de vidrio
1 gradilla
1 pipeta Pasteur con embolo o un gotero.
SOLUCIONES A UTILIZAR
1. Material biológico fresco: Hígado.
2. Ácido tricloroacético al 15 %
3. Solución salina con NaCl al 10%
4. Alcohol absoluto o isopropilico frío.
PROCEDIMIENTO
EXPERIENCIA 01:
1. Macera el hígado con un poco de agua destilada.
2. Colocar una pequeña muestra (10 ml) en un vaso de precipitación y agregar 10 ml
de ácido tricloroacetico al 15 % y mezclar con el agitador.
3. Filtrar la muestra a través de un papel filtro. Desechar el filtro.
4. Recuperar la muestra (coagulo seco) del papel, pasándola nuevamente al vaso.
5. Agregar 10 ml de solución salina (NaCl) y mezclar.
6. Poner en baño maría durante 3 minutos sin agitación.
7. Filtrar decantando la fase liquida. Desechar el coagulo y recuperar el filtro en el otro
tubo de ensayo.
8. A la muestra CALIENTE, agregar paulatinamente y lentamente de 1 a 2 ml de alcohol
absoluto o isopropilico frio.
9. Observar las hebras de ADN y la interface que se forma entre el alcohol agregado y
la muestra.
Y al final se obtuvo este resultado:
EXPERIENCIA 02
MATERIALES
1. ½ taza de levadura.
2. 300 ml de agua fría.
3. cuatro cucharaditas de sal fina
4. dos chorros de jugo de limo
5. colador de te
6. tres cucharaditas de alcohol
7. dos gotas de detergente
PROCEDIMIENTO
1. mezclar media taza de levadura con 150 ml de agua fría, una cucharadita de sal y
dos chorros de limón.
2. Agitar suavemente( para que se abran las pareces celulares)
3. Pasar la mezcla por un colador de té y conservar la pulpa.
4. Repetir el filtrado y conservar nuevamente la pulpa.
5. Preparar 150 ml de agua fría con una cucharadita de sal, tres de alcohol, y dos gotas
de detergente.
6. Agregar la pulpa y mezclar (el detergente disuelve el ADN).
7. Revolver suavemente durante 20 minutos.
8. Agregar 3 cucharaditas de sal y agitar 10 minutos más.
9. Dejar reposar hasta que se forme un precipitado solido (se tira). Conservar el líquido.
10. Diluir el líquido con tres veces su volumen de alcohol.
11. El ADN precipita en el fondo del vaso en forma de finas hebras blancas.
CUESTIONARIO
El alcohol estabiliza la molécula del ADN evitando que esta se rompa y precipita
el ADN.
CONCLUSIONES