UNIVERSIDAD ANDRES BELLO

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

LABORATORIO DE BIOLOGÍA CELULAR BIO-035

GUÍA Nº 1:
INSTRUMENTACIÓN Y PREPARACIÓN DE SOLUCIONES
 INTRODUCCIÓN AL TRABAJO DE LABORATORIO

El laboratorio no es un lugar peligroso, siempre y cuando se actúe en él de manera

responsable y cuidadosa. Para esto, es importante tener en cuenta ciertas medidas de orden
que se aplican en todos los laboratorios y por sobre todo un buen uso del sentido común. De
esta forma, es necesario recordar algunos principios básicos generales:

1. El mesón de trabajo debe estar siempre libre de objetos personales tales como
abrigos, carteras y libros, entre otros, que entorpezcan el trabajo y que, además,
puedan dañarse por el contacto con reactivos químicos, agua o calor;

2. Los reactivos químicos a utilizar deben ser manipulados con precaución, de acuerdo
a sus características. Está estrictamente prohibido pipetear directamente con la boca
soluciones altamente alcalinas, ácidos concentrados o material biológico de riesgo.
Si la vía de desecho de estas soluciones es el desagüe del laboratorio (previa
indicación del profesor responsable del trabajo práctico), hacer correr abundante
agua de manera simultánea para reducir el daño que estas soluciones fuertes
pudieran ocasionar a las tuberías. Tener en cuenta que hay soluciones tales como el
H2SO4 que reaccionan violentamente con el agua, por lo tanto se debe proceder con
sumo cuidado;

3. Si usted está manipulando sustancias inflamables, asegúrese antes de destapar el

frasco que no existan llamas abiertas ni material incandescente en las proximidades
de su lugar de trabajo;

4. Si usted calienta una sustancia en un tubo de ensayo, no apunte la boca del tubo en
dirección de alguna persona. Una ebullición violenta de la solución podría quemar a
dicha persona;

5. Cuando trabaje con sustancias tóxicas volátiles debe hacerlo bajo una campana de
extracción. Recuerde que un gas o vapor nocivo no siempre es perceptible por el
olor;

6. Los materiales de desecho no solubles (papel filtro usado, fósforos, corchos

deteriorados, etc.) deben tirarse al basurero o recipiente destinado para esta función,
jamás dentro del desagüe del laboratorio; y

7. Al término de cada sesión experimental, el mesón de trabajo y sus alrededores

deben quedar limpios y secos. Todos los reactivos e implementos utilizados deben
ser guardados en sus sitios respectivos. Asegúrese siempre que las llaves de gas y
agua estén correctamente cerradas.

Objetivo del trabajo Práctico:

El objetivo de este trabajo es el reconocimiento del material de laboratorio y la preparación
de soluciones líquidas utilizando el material de vidrio y equipos.
MATERIAL DE LABORATORIO

I. Material volumétrico

Durante el trabajo de laboratorio, en muchas oportunidades es necesario medir con

exactitud volúmenes de líquidos para la correcta ejecución del paso experimental. Para ello,
existen diversos tipos de materiales volumétricos. Por lo tanto, es necesario conocer los
diferentes tipos de materiales y tener claro cuál utilizar en cada ocasión.

Cabe señalar que la precisión de la medida con estos materiales puede verse alterada.
Considerando que la mayoría de los materiales volumétricos que se usan en el laboratorio
están hechos de vidrio, y teniendo en cuenta que este material puede dilatarse o contraerse
según la temperatura a la que está expuesto, se ha establecido un estándar convencional de
20 ºC para material de laboratorio destinado a medir volúmenes.

La graduación de los utensilios considera dos tipos de posibilidades: un aforo para contener
y un aforo para entregar volúmenes determinados.

El nivel de los líquidos se estima por el aforo, que se define como la tangente horizontal al
menisco inferior del líquido. Para realizar la medida, el nivel del líquido debe encontrarse
frente al ojo del observador en posición vertical. Mientras más estrecho sea el diámetro
interno del material donde se realiza el aforo, éste será más exacto.

FIGURA Nº1: Diagrama representativo de la estimación de un aforo.

A continuación se describen los elementos más usados en la medición de volúmenes en el

laboratorio:

1. Probetas: son cilindros verticales graduados, provistos de una base

hexagonal. Sus capacidades normalmente son de 25, 50, 100, 250, 1000 y
2000 ml. El aforo está previsto para entregar volúmenes. Debido a que su
diámetro interior es amplio, las probetas sirven sólo para mediciones
aproximadas de volúmenes. La graduación de una probeta está en relación a
su capacidad, así la más grande tiene una graduación de 5 a 10 mililitros
(ml) por cada división, en cambio las más pequeñas pueden tener hasta 1/10
de ml.

Probeta de 100 ml
2. Matraces aforados: son botellas redondas de fondo plano, con cuello largo
y estrecho y están confeccionados en vidrio no apto para resistir cambios de
temperatura. Los matraces aforados están previstos para contener
volúmenes con bastante exactitud, por lo que son usados para preparar
soluciones en que es importante conocer la concentración exacta de ellas.
Estas soluciones pueden ser preparadas por dilución de una cantidad
conocida o medida de líquido, agregando agua (u otro solvente) hasta
completar el volumen. También los matraces aforados se emplean para
preparar soluciones de una concentración muy exacta por disolución de una
cantidad precisa de sustancia previamente pesada, completando finalmente
el volumen hasta el aforo con agua u otro solvente según sea el caso. Hay
matraces aforados con capacidad para contener a 20ºC y con bastante
Matraz Aforado 500 ml
exactitud desde 25 a 2000 ml de líquido o solución.

3. Pipetas: se emplean para medir y entregar con precisión volúmenes

menores de líquidos y soluciones. Dado que las pipetas son tubos de
sección estrecha, se logra una buena exactitud en la entrega de volúmenes
por este tipo de material. La succión de líquidos se realiza con la ayuda
de peras de goma o jeringas adaptables a la boca de la pipeta y se
denominan propipetas. El extremo inferior de las pipetas es aguzado y
permite la entrega del líquido gota a gota, el orificio a su vez es estrecho y
esta diseñado para evitar la entrada de aire mientras se transporta el líquido
de un recipiente a otro. Existen pipetas de diferentes capacidades: 0,1; 0,2;
0,5; 1, 2, 5, 10 y 25ml. Generalmente, están diferenciadas por un color en la
graduación. Ellas son capaces de entregar volúmenes totales o parciales.
Pipeta Graduada

Las pipetas aforadas se reconocen por presentar su parte central más

dilatada. Estas pipetas están diseñadas para entregar un único volumen con
exactitud, el cual se ecnuentra indicado en el cuerpo de la pipeta . Este
volumen puede estar delimitado por uno o dos aforos. Si son dos las
marcas, el volumen indicado escurre cuando el menisco del líquido se
mueve desde la marca superior a la marca inferior. Si es una sola
marca (en el tubo superior), el volumen queda comprendido entre aquella
marca y el extremo inferior de la pipeta aforada. Al término del vaciamiento
deben esperarse 15 segundos para que escurra todo el líquido que queda
mojando las paredes de la pipeta.
Pipeta Aforada
4. Buretas: pueden ser definidas como una pipeta graduada, permiten la
entrega de volúmenes y están dotadas de un mecanismo regulable para
vaciarla el cual consiste de una llave de vidrio o plástico inerte (teflón)
intercalada en el extremo inferior de la bureta. Las graduaciones más
comunes de una bureta son 25 y 50 ml, existiendo también microburetas de
1, 5 y 10 ml.

Bureta

5. Matraces Erlenmeyer: son usados comúnmente para efectuar titulaciones,

reacciones y para calentar soluciones, ya que su forma cónica evita en gran
parte la evaporación. También poseen graduaciones, pero las medidas que
se realizan con ellas son sólo aproximadas. Existen matraces Erlenmeyer de
10, 25, 50, 100, 250, 500, 1000 y 2000ml.

Matraz Erlenmeyer

6. Vasos de precipitados: se usan comúnmente para preparar soluciones o

efectuar reacciones. Estos vasos poseen graduaciones de 5, 10, 50, 125, 250
y hasta 2000 ml; sin embargo, hay que tener en cuenta que esta
graduación es sólo aproximada y permite estimar volúmenes, por lo tanto,
no son aptos para preparar soluciones en las cuales se desee un cierto grado
de exactitud.

Vaso de precipitados
II. Equipamiento básico de laboratorio:

En la actualidad, el equipamiento de los laboratorios se ha ampliado de manera

considerable con la invención de nuevas tecnologías. No obstante, a continuación se
describirán instrumentos de uso general y básico de un laboratorio común:

Balanza de laboratorio: la unidad internacionalmente reconocida como

patrón de peso es el kilogramo (kg). Sin embargo, comúnmente en el
laboratorio la unidad de peso más usada es el gramo (g), así como el
miligramo (mg) y el microgramo (μg) que son submúltiplos del gramo. La
balanza es un instrumento que sirve para medir la masa de los cuerpos por el
peso, es decir, para determinar las veces que ellos contienen la unidad de
masa llamada gramo.

a) Balanza de precisión: se caracteriza por un sistema oscilante de

una barra o cruz apoyada sobre una columna. Actualmente, a este
tipo de balanza se le ha adicionado un sistema electrónico que
registra la pesada. La capacidad de carga de las balanzas de
precisión es generalmente hasta 500g y más comúnmente hasta
200g, con una exactitud de pesada al centésimo de gramo.

b) Balanza analítica: es un instrumento de alta precisión empleada

en la pesada de reactivos livianos (del orden de los miligramos).
A pesar de que las balanzas analíticas pueden presentar un
variado tipo de diseños y aspectos exteriores, todas ellas se
construyen basadas en los mismos principios. La base es de gran
solidez y confiere estabilidad al instrumento evitando al máximo
la posibilidad de vibraciones. La columna es un tubo por el cual
se conduce el mando de arresto o bloqueo del sistema oscilante.
La cruz está hecha de una aleación especial de aluminio u otro
metal estable que no permita deformaciones por el peso variable
que debe soportar.

Balanza de precisión Balanza analítica

 APLICACIÓN DE CALOR

Un recurso habitualmente usado en el laboratorio es la aplicación de calor sobre muestras en

orden a acelerar reacciones químicas, esterilizar, secar, calcinar, etc. Con este fin se
emplean materiales resistentes al calor tales como tubos de ensayo, matraces Erlenmeyer,
crisoles, vasos de precipitados, balones o matraces de fondo redondo. A menudo, la
principal fuente de calor utilizada en el laboratorio es el mechero Bunsen.

No obstante, también se pueden utilizar baños termorregulados para cuando la temperatura

de calentamiento que se desea aplicar no sobrepasa los 90 ºC. Los baños termorregulados
además poseen la ventaja de aplicar el calor de forma pareja a toda la solución. Los baños
en general funcionan con agua pero existen otros que emplean sustancias oleosas para
alcanzar temperaturas superiores al punto de ebullición del agua.

El uso de resistencias eléctricas en la generación de calor es otro de los procedimientos

comúnmente usados en el laboratorio. Éstos están presentes en instrumentos tales como
hornos, autoclaves, mantas, baños secos, etc. La principal ventaja que presentan los baños
termorregulados y aquellos instrumentos que utilizan como fuente de calor resistencias
eléctricas es que son cómodos de trabajar, poseen exactitud en la regulación térmica y son
seguros en su manejo.

Mechero Bunsen Baño termorregulado

APLICACIÓN DE FRÍO

En ciertas ocasiones durante el trabajo de laboratorio, es necesaria la aplicación de frío

sobre ciertas muestras. Ello ayuda, por ejemplo, en la caracterización de sustancias puras
por su punto de fusión, en la regulación de reacciones químicas y procesos enzimáticos,
solubilización o licuefacción de gases, condensación o retención de vapores, cristalización y
precipitación, estabilización de material biológico y liofilización, entre otros.

Probablemente, en algunas sesiones de este curso práctico usted trabajará con material
biológico (tejidos, estructuras celulares, etc.), los cuales deberán ser mantenidos en hielo.
Esto tiene como objetivo la preservación funcional de dichos materiales biológicos. Hay que
tener en cuenta que a temperaturas más elevadas (temperatura ambiente o mayor) una gran
variedad de funciones biológicas se deterioran irreversiblemente.
 PREPARACIÓN DE SOLUCIONES:
CÁLCULO DE CONCENTRACIONES

Soluciones acuosas

En una solución acuosa se pueden distinguir dos componentes: el soluto y el solvente. El

solvente es el componente que se encuentra en mayor proporción y el soluto en menor
proporción. Para identificar una solución no basta con indicar sus componentes, sino
también es fundamental conocer la proporción de éstos en la solución:

SOLUTO + SOLVENTE = SOLUCIÓN

Expresiones de concentración

Concentraciones basadas en el volumen o concentraciones basadas en la cantidad de soluto

disuelto por unidad de volumen, son las más ampliamente utilizadas en el trabajo de
laboratorio. Las expresiones más usadas son:

a) Molaridad (M): Se define como el número de moles de soluto por litro de solución.
Para calcular M (molaridad) se necesita conocer el peso del soluto y su peso molecular
(PM):

n° de moles de soluto
Molaridad (M) =
Volumen en Litro de solución

Una solución 1M: contiene 1 mol de soluto por litro de solución; contiene el número de
Avogadro* de moléculas de soluto por litro de solución.

*Número de Avogadro: número de moléculas por gramo-mol; número de átomos por

gramo- átomo; número de iones por gramo-ión; 6,023 x 1023.

Peso del soluto (gramos)

nº moles =
Peso molecular (gramos/mol)

Si se reemplaza el número de moles en la ecuación inicial, la Molaridad queda expresada

como:

Peso del soluto (gramos)

Molaridad (M) =
Peso molecular (gramos/mol) x Volumen (L)
Una vez preparada una solución, ésta se puede mantener como solución stock y a partir de
ella se pueden preparar nuevas soluciones a través del proceso de dilución. Debido a que el
número de moles no se altera al diluir una muestra, se puede establecer que:

Ci Vi = Cf Vf

Donde:

*Ci: corresponde a la concentración inicial, es decir, a la concentración de la solución

stock.
*Cf: corresponde a la concentración final, es decir a la concentración de la
nueva solución que se desea preparar a partir de la solución stock.
*Vi: corresponde al volumen que se debe tomar de la solución stock para
preparar la nueva solución.
*Vf: corresponde al volumen en el cual se preparara la nueva solución.

Es importante destacar que para utilizar esta expresión tanto Ci como Cf y Vi como Vf
deben tener la misma unidad, es decir, si la unidad de concentración utilizada es por
ejemplo M, tanto Ci como Cf deben estar expresadas en M. De forma similiar si la
unidad utilizada para el volumen es ml, tanto Vi como Vf deben estar expresados en
ml.
La expresión de concentración más utilizada es la M, sin embargo para soluciones más
diluidas es posible utilizar otras unidades de concentración como: milimolar (mM),
micromolar (μM) u otras, donde:

De esta manera:

1 mM =10-3 M
1 μM = 10-6 M
1 nM = 10-9 M
1 pM = 10-12M

Tabla 1: Tabla de conversiones de masa.

Equivalente en Equivalente en
Nombre Abreviatura
kilogramos gramos
Tonelada Tm 1000 kg 1000000 g
Kilogramo kg 1 kg 1000 g
Hectogramo hg 0.1 kg 100 g
Decagramo dag 0.01 kg 10 g
Gramo g 0.001 kg 1g
Decigramo dg 0.0001 kg 0.1 g
Centigramo cg 0.00001 kg 0.01 g
Miligramo mg 0.000001 kg 0.001 g
 b) Molalidad: Se define como el número de moles de soluto por 1000 gramos de solvente.
Esta expresión de concentración es usada en ciertos cálculos físico-químicos,
principalmente. La concentración expresada de esta manera se hace independiente de la
temperatura. Dado que la temperatura afecta el volumen de una solución, la
concentración de ésta se verá afectada cuando la expresión de concentración usada está
basada en el volumen. Para soluciones diluidas, la situación es similar a lo descrito
anteriormente en el caso de la expresión de molaridad.

Moles de soluto
Molalidad (m) =
Kilogramo de solvente

c) Normalidad (N): Se define como el número de equivalente de soluto por litro de

solución. Para calcular N se necesita conocer el peso del soluto disuelto y su peso
equivalente (PE).

Peso soluto (gramos)

Nºeq =
PE PM

n*

Por lo tanto… N = M * n*
Donde n*es:

 Número de H+ o OH- reemplazables por la molécula para ácidos o bases

respectivamente; o
 Número de electrones perdidos o ganados por molécula para agentes oxidantes y
reductores.

d) % peso/volumen (% p/v): Se refiere al peso en gramos de un soluto disuelto en 100

mililitros de solución. Depende sólo del peso de la sustancia y del volumen en que está
disuelta. Para soluciones diluidas se puede expresar como:

% p/v = Peso del soluto (gramos) 100

Volumen de la solución (ml)

e) % peso/peso (% p/p): Se refiere al peso en gramos de un soluto disuelto en 100 gramos

de solución. La concentración de la mayoría de los ácidos comerciales vienen dadas en
%p/p.

% p/p = Peso del soluto (gramos) 100

Peso de la solución (gramos)
 PROBLEMAS

1. ¿Cuántos gramos de NaOH sólido se requieren para preparar 500ml de una solución
0,04M?

2. Exprese la concentración de la solución preparada anteriormente en: N y % p/v.

3. ¿Cuántos mililitros (ml) de H2SO4 5M se requieren para preparar 1500ml de una

solución de H2SO4 0,002M y otra de 0,002N?

4. ¿Cuántos gramos de Na2CO3 se requieren para preparar 400ml de una disolución

0,8M?

5. Determine la Molaridad de 500 ml de una disolución que contiene 24g de CuSO4.

6. Determine la molalidad de una disolución formada disolviendo 3,5g de NaCl en 120 ml

de agua.

7. Usted dispone de varias soluciones concentradas: NaCl 3M, KCl 1M, MgCl 2 1M,
CaCl2 0,1M. A partir de éstas, indique cuántos ml de cada una de ellas son necesarios
para preparar 1 litro de soluciones a las siguientes concentraciones: NaCl 0,137mM,
KCl 2,68mM, MgCl2 0,5mM, y CaCl2 0,9mM.

8. Calcule la cantidad de soluto que se necesita para preparar las soluciones que se
indican:
a) NaOH 2M, 1000ml
b) LiCl 0,5M, 500ml
c) CH3-COOH 0,07M, 10 litros
d) NaCl 25mM, 100ml
e) CaCl2 0,2M, 10ml

9. ¿Qué cantidad de moles de glucosa existen en los siguientes volúmenes de una

solución 0,012M?
a) 150 ml
b) 1 ml
c) 104 ml
d) 100 ml

10. Si usted disuelve 170mg de sacarosa en cada uno de los siguientes volúmenes, calcule
la molaridad que obtendría en cada caso:
a) 700 μl
b) 104 μl
c) 2 x 103 μl
d) 3 x 105 μl
e) 17 ml

11. Para 500 mL de una solución 0,2 M de ácido sulfúrico, calcule:

a) los gramos de ácido sulfúrico que contiene
b) el número de moléculas de ácido sulfúrico que contiene
c) la concentración N de dicha solución
12. Para el hidróxido de bario, calcule:
a) los gramos contenidos en 1 mol
b) las moléculas contenidas en 1 g
c) los gramos necesarios para preparar una solución 0,1 M; V= 1000mL
d) los gramos necesarios para preparar una solución 0,5 N; V= 1000mL
e) los gramos necesarios para preparar una solución 5% p/v; V= 1000mL

(Para determinar los pesos moleculares utilice la tabla periódica que se encuentra al final)
 PARTE PRÁCTICA

Actividad Nº 1: Reconocimiento de material

Usted dispondrá de material de vidrio (pipetas, tubos de ensayo, matraces, etc.) que usará
durante su trabajo práctico. Cuídelo y evite golpearlo. Su profesor le mostrará cada
material y le describirá sus características. Además, usted recibirá instrucciones de
cómo trabajar con dicho material.

Actividad Nº 2: Preparación de soluciones

a) Preparación de una solución de NaCl 1M. Pese la cantidad necesaria y transfiérala a un

vaso de precipitados y agregue agua destilada. Con la ayuda de una bagueta (barra de
vidrio) acelere la disolución del NaCl en el agua. Enrase la solución a su volumen final en
un matraz aforado de 100 ml.

b) A partir de la solución antes preparada usted deberá confeccionar tres diluciones de tal
manera que queden a 1,5% p/v, 1% p/v y 0,15M, respectivamente. Vacíe la solución
concentrada en un vaso de precipitados limpio y seco. Tome las alícuotas respectivas con
una pipeta volumétrica y vacíe en matraces aforados de 100 ml cada uno. Complete el
volumen con agua hasta el aforo.
 BIBLIOGRAFÍA

Química. 9a. ed. Chang, Raymond; 2007.

Química general. 8a. ed. Petrucci, Ralph H; 2003.
 Materiales de laboratorio. Instrumentación y preparación de soluciones

Materiales por grupo (~3 alumnos por grupo)

4 Matraces de aforo 100 ml.

1 espátula metálica.
1 embudo.
1 matraz Erlenmeyer 250 ml.
2 vasos de precipitados de 100 ml.
1 vaso de precipitados de 50 ml.
1 piceta.
1 pipeta graduada de 1, 5 y 10 ml.
1 pipeta aforada d2 2 ml.
1 probeta de 100 ml.
1 propipeta de 2ml y 10 ml.
1 marcador.
1 bagueta de vidrio.

Material para el grupo curso.

2 balanzas.
NaCl.
Tabla 2: Tabla de conversiones universal para medidas.
Tabla 3: Tabla Periódica de los Elementos.