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I I Urianálisis y o
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ü Hematol ogia
Esta obra ha sido publicada con el permiso de Teton Newf\,4edia, Jackson,
Wyoming, USA. Está traducida de la l" edición de la obra origtnal en inglés
titulada Labolatory Urinalysis and Hematology.

I
El derecho de los Autores (Carolyn A. S nk y Bernard F. Feldman) a ser identifi
cados como Autores de este Trabajo está regulado por e Copyright.
O 2003. Teton Newl\ledia. Al rights reserved.
Fotografías de: Donna L. Budon CLA (ASCP). I s ii il* l*:tL":ilratorio
@ 2009. Edición en español.
Grupo Asís Biomedia, S.L.
Andador del Palacio de Larrinaga, 2
I s Carolyn A. Sink
[/IS, IMT (ASCP)

5OA13Zaagoza, España.

Reseruados todos los derechos.


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La ciencia veterinaria está sometida a constantes cambios evolutivos. Del mis
mo modo que la fanracología y el resto de las ciencias también lo están. AsÍ
pues, es responsabilidad ineludible del vetennario clínico, basándose en su
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experiencia profesiona, la deten¡inación y comprobación de la dosis, el méto- ]E
do, el periodo de adnrinistración y las contraindicaciones de los tratamientos
aplicados a cada pac ente. I *
Ni cl editor ni el autor asumen responsabildad alguna por los daños y/o per
luicios que pudieran generarse a personas, antmales o propteoaoes como
consecuencia del uso o la aplicación rncorrecta de los datos que aparecen rE
en esta obra.

Diseño y corrpaginacrón: rs
I r
Servet editoria Grupo Asís Biomedia, S.L.
Traducción : Nuria Fernández Casamitjana.
ISBN edición orig nal: 9781 893441 101
ISBN edicion española: 978 84 S2569 17-5
I rI
I r
Depósito legal: NA 2526-2009
lmpresión:
Gréificas Lizarra S.L.
Ctra. Tafalla, km. 1
31 1 32 Villatuefta I rE\
rs
Navarra, España
Irrpreso en España

SENTET
I il .J,
Autores

Carolyn A. Sink
MS, MT (ASCP)
Supervisora del laboratorio de Servicios
Diagnósticos de la Universidad
de Medicina Veterinaria de Virginia,
Maryland.

Bernard F. Feldman
DVM, Ph.D.
Jefe del laboratorio de Servicros
Diagnósticos de la Universidad
de Medicina Veterinaria de Virginia,
Maryland.
'Gl
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Este texto está dedicado a los estudiantes de veterinaria,


los colegas que trabajan en laboratorios clínicos, los vete-
nnarios clínicos, los veterinarios que utilizan nuestros ser-
vicios a diario y todos aquellos cuya formación o proceso
de formación les permite reconocer lo inmenso y necesa-
no que es el recurso del laboratorio clínico veterinario.

También dedicamos este texto a nuestras familias.

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:"i r,ii"üldgc i nr igntos
Puesto que reconocemos que no existe ningún libro técnico que
sea un trabalo completamente original de los autores, nos gus,
taría expresar nuestro agradecimiento a todos aquellos que nos
han orientado y ayudado a comprender qué es lo clínicamente
más útil en el día a día. En gran medida, nuestros estudiantes
de veterinaria realizaron muchas de las preguntas "correctas".
También nos gustaría agradecer la atmósfera de nuestro labo-
rator¡o, que promovió este trabajo. Asimismo, gracias a Peggy
Brown, Laura Fidgen, Janice Herzog y Jonathan Austin.
Prefacio
El profesional de la salud veterinaria tiene tanto la oporluniflad
como la obligación de ayudar a sus pacientes comprendiendo
qué es lo que expgrimentan. Con ello en mente, el texto puede
usarse como referencia para ayudar a explicar.los procedimien-
tos usados de forma sistemática.
Alaluzde los avances en los conocimientos y aspectos técni-
cos del laboratorio veterinario de patologia clínica y la continua
evolución de los enfoques de la hematología y del urianálisis ve-
terinario, este material se ha creado pára destacar los principios
básicos de estos importantes aspectos del laboratorio clínico.
Hemos incluido las definiciones más completas de algunos re-
quisitos cruciales para conseguir exactitud y utilidad en cuanto a
las necesidades de nuestros oacientes.

lxl
I
t
E
indice de contenidos f Centrifugación de la muestra de orina .

T I'r r x'rxlir r riento de centrifugación v análisis microscóoico


URIANÁLISIS t k: u¡a rnuestra de orina .. 23
I Elementos del sedimento urinario . 25
rl
I (l obulos blancos.....
rojos
25

I
I

lntroducción 3 r 0lóbulos
Gotas de grasa.
Células epiteliales....
. ..

...... ...
26
27

Algunas pistas útiles ... . . .. . . . 3


I Cillndros ...
28

31
Obtención de la muestra . . . .
Métodos de recogida
.
4

4 r Cristales..... ... . ..... 36

r
Otros elementos del sedimento urinario....... 43
Recipientes para la muestra ........, 4

Procesado de la muestra 5 Valores de referencia para el análisis de orina ... 49

Definición de urianálisis
Prooiedades físicas ...... ........
5

5
r HEMATOLOGíA
Propiedades químicas ........ 7 I :
8
Análisis del sedimento

Procedimiento para llevar a cabo el análisis


I Procedimiento de obtención de muestras
r
53
químico mediante el método de las tiras de orina Método de recogida 53
I
con reactivo seco .. . .. .
Cómo guardar las tiras reactivas.
.

........ 10 r Definición de recuento hemático completo


Procedimientos de las pruebas manuales
r
.

Metodologías de química seca 11


Hematocrito ..

Análisis de presencia de protelnas...

r
11
Prniein:c nl:smáiin:q 5B
Anállsis de presencia de cetonas .... 12
Frntiq dp q:nore neriferie: 62
Análisis de presencia de glucosa
Análisis del pH .. ..
13
14 r
Análisis de presencia de bilirrubina
Análisis de presencia de sangre .......
15

to
I Función y características físicas 73
Análisis de presencia de urobilinÓgeno . .. . .. . 17

1B
[# Nlulrofilos. 73
Análisis de presencia de nitritos........ I ir lf, r lloS

Análisis de la gravedad especifica..... .


1B IE M,,'¡n1 ¡1Ot
75

76
Análisis de presencia de leucocitos.. 19
DE f usrtrofrlos........ 78

t,, E#
E
E
URIANALISIS
E
Basóf i1os........... BO

Neutrófilos en banda......... 82 E Recmg*dm de rnuestras


Términos descriptivos relativos a los glóbulos blancos
Secuencia de maduración de los neutrófi|os...... .. ......... .. .
B4

BB
t y üx-I#ft##mns mediante
F
o Glóbulos rojos F tirag #e or¡na
físicas
Función y características e5

Análisis de |aboratorio................. e6 F
índices de glóbulos rojos............,. , .. 98
É
Terminología relativa a los glóbulos rojos........... ,..,..........,..,... 100
Inclusiones de glóbulos r0jos.......,........... .. ... ..... .. .. .. .. ... 1 1 1 :
Parásitos sanguíneos..... .. .. .. .. . .. 1 15

Organización celular en el frotis de sangre periférica .. .. .. . .. .. .. .. . ..


.16 .1 ¡
Producción de glóbulos rojos.. ........ .... ..,.. ...,. 118 : :I
........ ...
Reticu1ocitos...,.........
Hallazgos delaboratorio.
..

...
.,..,...... ..

..... .. .. .. 12o
120
f I
mtcroscópica..
ldentificación .... . ........ .. 120
- I
Recuento de reticulocitos: método manua1............. .. .... 122
Formas de recuento..... .. . . ... .. .. .. . . . .. 123 l I
Directrices para la evaluac¡ón del frotis de sangre ............. 124
t T
C Plaquetas TI
Estructura y función de las plaquetas. 1to
f :tr
Estructura
Función 1e1
rI
Análisis de laboratorio. .. .. .. .. ..... .. .. ........ ..
141

I al rT
Recogida de muestras...
Métodos de recuento plaquetario...... .............. to¿
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índice alfabético tJc ru
Lecturas recomendadas 143
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tr RECOGIDA DE MUESTRAS Y ANÁLISIS MEDIANTE TIRAS DE ORINA TI

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In trricÍ | n{,)i' i',::'it;
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| | ¡ rr rrrr;r¡ r; rl oIrjotivo de este libro es aportar un texto de referencia de fácil lectura
ts y ; rr:r:.:;il rlc, c¡ue esperamos que sea fácil de encontrar en la mesa de trabajo del
rlorio y rlue esté constantemente abierto y en uso.
E l, rl x rl;

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E
E
E
E En todo este texto se han utilizado los siguientes símbolos, con
el objetivo de ayudarle a centrarse en lo que es verdaderamente
E importante.

E il EI Es una característica constante del tema que se

r il está explicando. Hemos intentado reducirlos.

r{ * fun
A
rasgo importante. Debe recordarlo.

I T Pasará algo grave si no lo recuerda.

r il Los aumentos que aparecen en las imágenes (40x, 50x, 1OOx) co-
rresponden al objetivo microscópico utilizado para realizar las foto-

r il grafías. El tamaño de alguna de las imágenes que aparecen en esta

r il
edición está aumentado resoecto a la versión orioinal.

r 1!

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URIANALISIS
t RECOGIDA DE MUESTRAS Y ANÁLISIS MEDIANTE TIRAS DE ORINA

E
Procesado de la muestra
E
MJ | ,, ,r¡ rlirrro r::; lk;v¿rr a cabo los análisis de laboratorio inmediatamente despues

D r|r'l; r rrx;rx¡irla de orina.


[4 | r' ,rl r:r ru r ic rlue los análisis de laboratorio se retrasen más de 30 minutos des-
r

M Las muestras de orina pueden obtenerse mediante cateterizaciÓn, cistocente D r |r ' l| l


rol tcnto de la recogida, la muestra de orina puede refrigerarse a 2-B uC
sis o recogiendo orina en el momento de la miccion. r lr n u rlc rr¡ r¡¿iximo de 4 horas.

EI Una muestra de orina obtenida por cateterización se recoge mediante in D l'4 Ar r tc l;t refrigeración se usa de forma sistemática para evitar la proliferaclon
r, 1L

serción de un catéter en la veliga, por la uretra. Puede obtenerse orina me r u:lr l irrn¿r en las muestras de orina,también puede dar lugar a un aumento de
diante una leringa acoplada al catéter o permitiendo que la orina fluya hacia l I

l, r r ¡ rrvcclad especÍfica y precipitación de cristales amodos.

el interior de un recipiente adecuado.


EI La cistocentesis puede usarse para obtener una muestra de orina. Se lleva
D S I ;c r iolrc dejar que las muestras de orina reÍrigeradas lleguen a la temperatura
; rr Irl rir:r rte antes de realiza( el análisis. De esta forma se pueden disolver algunos
a cabo inserlando una aguia en el interior de la vejiga y aspirando orina me-
diante jeringa. Este método es ideal para evitar la contaminación asociada a
D rIo lrx; cristales amodos.

la cateterización o la micción.
D
M Las muestras recogidas mientras el animal micciona son las menos reco-
mendables. D
A Lo Optiro es que se recojan al menos 1O mililitros de orina. En muchos libros
de texto de vetertnaria pueden encontrarse los detalles de estos métodos de
E EI I I rrrianálisis se compone de pruebas de laboratorio que evalúan las propieda
rles fÍsicas y químicas de una muestra de orina. Además, se evalúa el sedimen-
recogida de orina.
D lo rrinario microscópicamente.
L

Recipientes para la muestra D


EJ Las muestras de orina deben recogerse en recipientes limpios y sin fugas.
EJ El recipiente debe ir etiquetado con la información identi¡cativa del paciente, y EiI A I as propiedades físicas de la orina son el color. r transparencia y la gravedad
el momento y fecha de la recogida de orina.
EI cspecífica.

* La muestra de orina debe recogerse en un recipiente y colocarse en otro antes


del análisis de laboratorio. El recipiente utilizado durante el análisis de laborato- fil Color y transparencia de la orina
rio debe ser transparente, para que puedan valorarse fácilmente las caracterLs EI f I color y transparencia de la orina dependen de cada muestra de orina. Para
ticas físicas de la muestra de or¡na. Til krr¡rar coherenc¡a en el informe de color y transparencia, puede ser útil crear

EI El recipiente debe encajar en la centrÍfuga adecuada, y se debe poder tapar


para evitar la formaciÓn de aerosol durante la centrifugacion.
rT rr¿r lista de los colores y transparencias estandarizados, de tal modo que cual-
r qLricr rniembro de Ia plantilla técnica informe del color y transparencia usando

EJ La capacidad del recipiente debe ser de, al menos, 10 mililitros de orina. I.T lr:r nrin<ts parecidos. Al estandarizar una "lista de posibilidades", se elimina va
rirrcrrjn. A continuación se exponen las directrices para los infonnes de color y
ú Para el urianálisis, no hay que añadir conservantes a la muestra de orina.
rs Il rr xr1 rarcncia (f iguras 1 .1 y 1 .2).

fil
'l Fil
I'
I
URIANÁLISIS I RECOGIDA DE MUESTRAS Y ANÁLISIS MEDIANTE TIRAS DE ORINA

Figura l.l. Colores de la orina


I
I Gravedad específ¡ca
[4 L,,¡rrvrxLuIcs¡tecÍficadelaorinapuedellevarseacabomedianteel método

I
tncotora

lnmaritto lo,""' l*''" lrxr:r


lAmarillo

I
veroe
t r I r lll r rc;rr:liv;i, rlrinómetro o refractómetro.
pl | ' rr,:lr,'hr tle la tira reactiva se basa en indicadores de concentración

tttlülÜlllll I
Itll
)ir y, ¡xtr tanto, determina la gravedad especifica mediante colorimetna.
r( )r I (

I I rrrcloclo de la tira reactiva consume una gota de orina en cada prueba.


v
I | 'r rci k r r determinarse mediciones de gravedad entre 1 ,000 y 1 ,030.

I I
I EI I ,,r; Lrrinórnetros determinan la gravedad especifica por comparación del peso
t krorina con un volumen igual de agua. El urinómetro está calibr:ado para
l¿r

I
I

I I
1,0 "C y, por tanto, debe corregirse en función de las variaciones de tempe
I I
I I
I
*"ra ,urr..l Marrón Rosa rirlrrra del laboratorio. Los urinómetros detectan un amplio intervalo de gra-
Amarillo pálido, Amarillo I I I I

I
I

amarillo claro oscuro negro amarillo vr r l¡fst especL[icas, pero se necesita un mínimo de 1O mililitros de orina.
o pala
* de gravedad especÍfica obtenidas mediante el método refrac-
I I as lecturas
tonretrico miden la densidad de orina respecto a la densidad de agua. Este

t nretodo se usa mucho porque es rápido y sencillo para la determinación de

i* la gravedad especifica de la orina. El refractómetro es el instrumento utili-

Figura 1.2. Transparencia de la orina


I
r i*r ttdo para determinar las lecturas de gravedad específica de entre 1.000 y
1,060. Se necesitan dos gotas de muestra de orina para cada lectura.

lLieeramente
I
l''"
t,iniu
lt"'o* i*
s
EI El análisisquÍmico llevado a cabo como parte del urianálisis se basa en er prrn-

l¡lta tll
I lrtocutenta
¡ cipio de la química de reactivo seco.
E] Las tiras de reactivos secos, o "tiras de orina", son tiras de plástico con 6 a
I il 10 pequeñas almohadillas de papel adheridas al plástico.
E] Llevan sustancias quÍmicas impregnadas en cada almohadilla de análisis, y
I r! cada una de ellas es químicamente distinta. Cada almohadilla está también
irnpregnada con un indicador de color visible.
f l! M El análisis se lleva a cabo sumergiendo la tira de plástico en una muestra

,r'o'rl sunerinot.ntul rE de orina y observando las reacciones quÍmicas que tienen lugar, según los
carnbios de color, a intervalos determinados de tiempo.

r ¡!
ru.Olinorul
"1iffi]:l EI El fabricante aporta plantillas de color de la tira de orina para que se puedan
ir rterpretar estas reacciones.

rE A Lor directrices del fabricante relativas a los intervalos de tiempo y análisis

r$ nrediante color deben secuirse al oie de la letra.

r*r
É
RECOGIDA DE MUESTRAS Y ANÁLISIS MEDIANTE TIRAS DE ORINA
URIANÁLISIS G

E
EI Existen tiras reactivas en gran variedad de configuraciones de
pruebiis I rt:;
pruebassonpH,proteína,Cetonas,glucosa,bilirrubina,gravedades¡lecifi
I
ca, sangre, urobilinÓgeno, leucocttos y n¡tritos' ¡
pero pueden no
A En general, las tiras reactivas son fáciles de usar y baratas,
ser demasiado exactas
I
I l¡¡rra llevar a cabo un análisis químico mediante una tira reactiva:

La evaluaciÓn microscópica de la muestra de orina aporla informaciÓn


relativa a los
I l'4 t t, ry
lr'] V ,lv, :r
r 1r rr

r
r cxtraer una tira reactiva del recipiente.
r l;r¡rar el recipiente de inmediato.
elementos formados en la orina.
EJ Los elementos formados son los materiales rnsolubles
que Se han acumula-
I A N, , l, rr;a l¿r zona de la almohadilla de análisis de la tira reactiva.

do en la orina: glÓbulos rolos, glÓbulos blancos,


ganismos, cristales Y cilindros.
células epiteliales, microor
r [/ I ;r rr r u rr r ¡rr la tira reactiva en una muestra de orina no centrifugada y bien mez-

ú paraobtener un sedrmento urinario, la muestra de orrna se centrifuga (vea-


queda en el fon-
r , ;|l u L r. L¿r tira reactiva se saturará de orina.
EJ ljirr r lLrrlarlo, retirar la tira reactiva de la muestra de orina usando la pared del
se la página 23) y se elimtna el sobrenadante El sedimento
dode|tubocentrifugado,ypuederesuspenderseremoviendo|amuestra r [f
rr x ;i¡riente de la muestra para escurrir el exceso de orina de la tira.
I]o:;lcner la tira horizontalmente para evitar una mezcla de las almohadillas
con cuidado mediante una pipeta desechable'
EJ A continuación, el sedimento bien mezclado
puede colocarse en un por- r fi
rr:lurtivas en la tira.

taobjetos para su evaluación microscopica'

EJ Las directrices relativas a la forma de expresar los resultados


pueden ser útiles
r {)orrsultar el intervalo de tiempo de reacción adecuado para cada almohadilla
rr xxliva.

para estandarizar los resultados del análisis del sedimento de orlna. r EI I r:er y registrar los resultados de

I ¿rs tiras
cada prueba.

de reactivos secos pueden leerse por métodos manuales o


* La cuantificación puede ser preferible a la cualificación, puesto
rencia entre "poco" y "muy poco" depende de la interpretacion'
que la dife-
f ; il rl{ )|1t¿]ttzadoS.

r Método manual
I :10 EI I lr:lre ponerse en marcha un cronómetro en cuanto la tira reactiva se retira de
lrrrrLrestra de orina.
f:lE A I ,,,' intervalos de tiempo de lectura de cada almohadilla reactiva vienen especi-

IT Iir:r u krs por el fabricante y deben seguirse al pie de la letra.

M
I:T I L

vr rlor¿rr
l; rl rricante también aporta una plantilla de colores que se debe consultar para
las reacciones y regrstrar los resultados.

r+ EI I ,
',
,
:;ollrr c lirecta.
lir irs reactivas deben leerse en una zona bien iluminada, pero no a la luz

r* EJ I ,,r; rrx;ull¿ldos de las reacciones deben documentarse.

f{
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UR|ANÁLISI5::i ::::::i,
RECOGIDA DE MUESTRAS Y ANAL|S|S MEDIANTE TIRAS DE ORINA I$
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Método autonnatizado M*fmq$r][t}h{lütr u.$* qm$ffi.xil{:ñ} sffi{:ffi
Los lectores automáticos de tiras reactivas constituyen un
método alternativo al
Et
I or; rnolodos de quÍmica seca permiten llevar a cabo ] 0 pruebas (proteínas, ceto-
análisis visual de la tira reactiva.
como se ha explicado nr:;, i¡lu<;osa, pH, bilirrubina, sangre, urobilinógeno, nitritos, gravedad específica y
Mf La tira reactiva se sumerge en una muestra de orina
I0t rcrrcitos).
anter|ormente,yacontinuaciónsecolocaene||ectorautomático'paraSU
evaluación.
forma correspondiente y el instru- ii, ,l ,
EJ Las reacciones químicas se programan de la r,.!i, r[.tt !.!f'{*-r{*l1i ;,:} iir,: i;:i:t*'irli¡*
mento las lee.
Los resultados pueden imprimlrse o descargarse a un ordenaoor'
Metodología
El
de lectura de una tira
EJ El lector automático puede ser un método más coherente I ir rretodología del análisis de proteínas se basa en el principio del enor de proteí-
prueba en la tira reactiva
reactiva, puesto que la valoración del color de cada na de los indicadores de pH. La almohadilla de análisis de la tira reactiva se tam-
puede ser difícil de llevar a cabo visualmente
l)ona a un pH constante bajo. Las proteínas llevan una carga a pH fisiológico. Un
c;ambio de pH en la almohadilla de análisis causa un cambio de color, que indica la

{"s:. l';c .rir!*lr.{r:!l í"l¡ !*I ;\ it:,lf.{¡'li!:, lrresencia de oroteÍna.


Este método mide entre 15 mg/dl y más de 2.000 mg/dl (con cantidades traza
üf Las tiras reactivas utilizadas en el urianálisis deben guardarse en su recipiente de 4+) de proteína. No se pueden detectar menos de 15 mg/dl, de tal forma que
original, el que proporciona el fabricante" los valores inferiores darán un resultado neqativo.
el momento de su uso.
üf Las tiras deben mantenerse en este recipiente hasta
que ayudará a mantener las
El Se incluye un agente desecante en el recipiente' Limitaciones del análisis
tiras libres de humedad. Mantenga el recipiente bien cerrado'
E Las tlras deben guardarse protegidas de la luz solar directa
extremas.
y de temperaturas
r :¡t Esta metodologÍa de análisis es sensible a la albúmina. No es sensible a las globuli-
nas, Ia hemoglobina, la proteÍna de Bence Jones ni las mucoproteínas.

A No refrigere las tiras reactivas. r IT Valores esperab¡es

T ril La orina normal contiene pequeñas cantidades de proteína producidas por el re-
vestimiento epltelial del tracto genitourinario y una pequeña cantidad de albúmina.
E La proteína de la orina normal no suele ser suficiente como para que se pueda de-
=L
E q! [ectar por casi ningún método. Por tanto, la orina normal debería dar un resultado
negativo o contener sólo cantidades traza de proteína.

F Itr l-a determinación de proteÍna en orina siempre debe interpretarse junto con el valor
de gravedad específica de la orina.
E :Í! M Una muestra concentrada de orina puede contener suficiente proteína
como para que pueda medirse como traza hasta 1+ sin ser significativa.
E +! E] Por el contrario, una muestra diluida de orina que contenga una cantidad
Iraza de 1+ puede ser signlficativa, siempre que la cantidad total de proteí-
¡ +r na perdida también se mida.
I

E
"l =F
I
T URIANÁLl$f$.,t,,::ri: :i::i,::::,::.,i:.:'i::ir::' :" :
RECOGIDA DE MUESTRAS Y AÑÁLISIS MEDIANTE TIRAS DE ORINA I:
ffi&s

r;rrr llirlirrl. I)or l¿urto, la cantidad de cetonas medida mediante este metodo puede
Enmuestrasdeor|naa|calinasmuytamponadassehanobservadoreacc¡ones
con proouclos ',t il )r i: ;l.r il; rr l, r ,;¡r rlrdad de cetonas presente en el organtsmo.
de falsos positivos, así como en muestras de orina contaminadas
o clorhexidi
de higiene cutánea que contienen compuestos del amonio cuaternario
na. También se han documentado falsos positivos en orina de pacientes que tenran Valores esperables
fiebreoa|osquesehabíarealizadotransfusionesdepo|ivinilpirro|idona(sustitutivos I rrrroncliciones normales, la orina es negativa a cetonas. Las cetonas son pro-
sanguíneos).ExistegranvariedaddefármacosyanestésicosquepuedenCausar rlrrr;lo:; inales del metabolismo de las grasas. Aunque son ligeramente tóxicas, las
f

reacciones de falsos Positivos. (;clonils se usan como fuente de energía cuando no se dispone de carbohidratos
o lo ¡trreden usarse.
* ras lecturas positivas para proteína obtenidas mediante tiras reactivas secas
par- [ ¿l evaluación de las cetonas de la orina es importante para el tra{amiento de
pueden validarse mediante pruebas de confirmacion. cuando se mezclan
precipitan pro- r;u;icntes con diabetes mellitus, para detectar el desarrollo de cetoacidosis.
tes iguales de orina centrifugada con ácido sulfosa|icílico a| 5%, ¡

Se han documentado reacciones de falsos positivos en muestras de orina que


teínas. La reacción resultante se puede clasificar en:
r;rirr de color rojo o en muestras de orina que contienen grupos sulfidrilo. La orina
Negativa, sin turbidez r contiene bromosulfoftaleína (BSP) también puede dar lugar a falsos positivos.
lLro
1 +, ligeramente neblinosa
Los falsos negativos se han relacionado con cistitis bacteriana, puesto que la
2+ neblinosa <;antidad de ácido acetoacético de la orina puede estar disminuida.
3+ turbia
4+ floculante
. i |. I t- .-.'"'..""..,
. rTl iL ;i_'.)
' -1,
."-!.r. .r-....
..iq" ij: i.!t .-r: :r
i,-¡i f :
glicoproteínas o pro-
Las muestras de onna que contienen albúmina, globulina,
teína de Bence Jones producirán una reacción positiva al usar este
método' Metodología
de la La metodología del análisis de glucosa se basa en un proceso enzimático de dos
Aparecen falsos negativos cuando la orina contiene proteínas distintas
albúmina. Asimismo, la orina acidificada también puede producir falsos negativos
fil pasos. En presencia de glucosa, la glucosa oxidasa calaliza la formación de ácido
glucónico y de peróxido de hidrógeno. A continuación, la enzima peroxidasa cata-

&n;& I i :i i x #** L*r,*s$ *{:: i;} d * i:i:t.*il;t:i f:¡ liza la reacción del peróxido de hidrógeno generado con un cromógeno para crea(
un color detectable en la almohadilla reactiva.

Metodología ril Este método mide entre 100 mg/dl y cantidades superiores a los 20OO mg/dl

Los análisis de cetonas se basan en el método de Legal. El nitroprusiato


reacciona con la orina que contiene ácido acetoacético, dando lugar a
de sodio
un color
r{ (con cantidades traza de 4+) de glucosa. Los valores inferiores a los 100 mg/dl se
consideran negativos.

detectable en la almohadilla reactiva.


Estemétodomideentre5mg/d|y160mg/d|(concantidadestrazae|evadas)
ril Limitaciones del análisis

de ácido acetoacetlco, una Cetona. Las lecturas de menos de


5 mg/dl se detectan Til EsLa prueba es especilica de la glucosa. No lo es de la lactosa. la galaclosa ni la
fructosa. Esta prueba no detecta sustancias reductoras ni azúcares reducidos.
como negativas.
f:! Valores esperables
Limitaciones de la Prueba
Este método detecta ácido acetoacético, pero no acetona ni ácido B-hidroxibutÍrico'
ls La orina normal no contiene qlucosa.

De estas tres cetonas, el ácido B-hidroxibutkico es el


que se produce en mayor

trl
T +
:p
uRrnruÁ¡-¡srs RECOGIDA DE MUESTRAS Y ANÁLISIS MEDIANTE TIRAS DE ORINA [S
$¡ffi;

Puede hallarse glucosuria cuando: I | ¡ rl I rrrir r rrio


ers una estimación bruta del estado ácido-base del organismo;

ilJ E umbral renal de glucosa se supera debido a una hiperglucemia simultánea.


Vf La capacidad de reabsorción tubular ha disminuido.
rF :;irlr:rrl;rirrJO, O|l nluchos estados de enfermedad no es fiable y no debe usarse
r ;or rro ¡r 1ir;;u ior Llnico del estado ácido-base.

ül Se trata de casos graves de cistitis hemorrágica.


ffi Existe obstrucción uretral en el gato.
Pueden aparecer falsos positivos en presencia de agentes muy oxidantes (a
rF I ir rr r ir rk

EI
rr;c rlrr o contaminación urinaria por bacterias puede alterar el pH de la orina.

Muclt¿is bacterias (como Profeus spp., Psedomonas spp.) producen urea-


:i¡1, (lue creará un medio alcalino.

ú
rF
menudo se usan para limpiar) que pueden estar presentes en los recipientes de l'rx el contrario, E coli, puede producir una orina ácida.
recogida de orina.
I or; falsos cambios de pH puede ser consecuencia de:
Falsos negativos: la reactividad de la prueba de la glucosa disminuye a medi-
da que aumenta la gravedad específica; esto puede variar con la temperatura de la
TF EI Muestras cle orina que contienen bacterias y se han guardado'a tempera-
trlra ambiente, pudiendo causar proliferación bacteriana y dando lugar a un
muestra. La muestra de orina debe estar a temperatura ambiente, si la orina está
fría (por una refrigeración) la reacción de la prueba enzimática no tendrá lugar. Los
fabricantes de tiras reactivas difieren en cuanto a la reactividad con ácido ascór
rF M
cambio del pH de la orina.
El hecho de que las tiras reactivas pueden dar resultados nulos cuanoo las

bico; algunas tiras reactivas dejan de reaccionar en presencia de ácido ascórbico


en la muestra de orina. En condiciones normales, la orina canina contiene ácido
DF zonas de análisis adyacentes alazona de análisis de pH filtran sustancias
quÍmicas o colores que pueden interJerir con la interpretación de la prueba

ascórbico. DF EI
de pH,

,#,xsí*i*ts ei*l f¡ñ'* EF Liberación de CO, durante el almacenaje de la muestra a temperatura


ambiente.

Metodología TF EI Contaminación con detergentes.


EI Tratamiento del paciente con furosemida (Lasix)@.

La metodología de la prueba de pH se basa en dos indicadores químicos para


rF
determinar el pH urinario: el rolo de metil y el azul de bromotimol. Cuando se su-
mergen en una muestra de orina, estos dos indicadores producen colores claros ril Metodología
,,,
.,,. i'r r.:i',,f.1{: i* e.!*: L¡¡ [ i rf u hi ¡.:i;;

y diferenciables en la almohadilla reactiva, que corresponden a valores de pH que


oscilanentre5yl0. rF I il rnetodología de la prueba de la bilirrubina se basa en la reacción química de la

Limltaciones de¡ análisis rfr rlir;lrrroanilina diazorizada y la bilirrubina. La almohadilla reactiva está a un pH ácido.
or r¿urdo hay bilirrubina en una muestra de orina, la dicloroanilina diazotizada se
lrr lo r¡ la bilirrubina y produce color en la almohadilla reactiva correspondiente a la
Este análisis es específico del pH.
D .ilr r;orlccntración de bilirrubina.

\lalones esperables *'l- []c ¡rLreden observar valores de entre negativo y 3+ (elevado). Este método per
rnlo r jetectar bilirrubina a concentraciones de incluso O,4 mg/dl (1 + o baja)
En perro y gato, los valores esperables son 5,5 a 7,5.

La alimenLacion delermina en gran medida el pH,


¡r- Limitaciones del análisis
M Una alimentación princlpalmente vegetal dará lugar a una orina alcalina. t!¡ Al rr;r
¡n¿ilisis mediante sustancias quimicas secas, es imporlante el tiempo du-
üi Una alimentación predominantemente cárnica o rica en proteína dará lugar r rr llo ol cLral la reacción tiene lugar en la almohadilla; por tanto, el cambio de color
a una orina ácida. Itrt r I r li r rlrrrolr¿rclllla no debe interpretarse hasta que haya pasado el tiempo indicado

14 l=r ¡ ror r rl ll rl ;rir;anfe de las tiras reactivas.


Valores esperables Valores esperables

En condiciones normales, las orinas del perro y del gato no contienen bilirrubina. En condiciones normales, la orina no contiene cantidades importantes (lecturas de
sin embargo, el riñón canino puede degradar hemoglobina a bilirrubina, y el umbrral traza o superiores) de eritrocitos, hemoglobina libre ni mioglobina.
renal de bilirrubina del perro es bajo, La magnitud de bilirrubina siempre debe inter-
Los falsos positivos pueden deriyar de:
pretarse en función de la gravedad especÍfica. En el perro, son habituales resultados
'1 EI Contaminantes oxidantes.
de bilirrubina entre traza y bajos cuando la gravedad especÍfica es > ,040. Esto no
EJ Peroxidasa microbiana presente en infecciones del tracto urinario.
es así en el caso del gato, en el que una orina muy concentrada debe seguir dando
Ef Contaminación por secreción estral.
valores negativos de bilirrubina. En el gato, la bilirrubina siempre es patolÓgica.
La bilirrubina Ouede preceder una ictericia clínicamente evidente, y ciertos tras- Los falsos negativos pueden derivar de:
tornos hacen de su detección un indicador precoz de enfermedad. EI Aumento de la gravedad específica.
Pueden aparecer falsos positivos como consecuencia de una orina de color EI Formalina (usada como conservante).
atípico. La clorpromazina y la fenazopiridina también pueden causar falsos positivos. EI Presencia de nitratos.
Los falsos negativos pueden ser consecuencia de la presencia de ácido ascórbi-
co o nitritos.
Análisis de presencia de unrbilinógeno
La bilirrubina es un compuesto muy inestable y se oxida a biliverdina sl se ex-
pone a laluz o se deja a temperatura ambiente. La biliverdina no se mide en prue- Metodología
bas usadas de forma sistemática..Por otra parte, pueden surgir falsos negativos de
Esta metodología une el urobilinógeno con para-dietilaminobenzaldehído o 4-meto-
bilirrubina si la orina no se analiza fresca y protegida de la luz'
xibenceno-diazonio-tetrafluorobrato formando un color detectable en la almohadilla
reactiva.
Análisis de presencia de sangre Puede detectarse urobilinógeno a niveles de O,2 a 8 unidades Ehrlich (UE).

Metodología Limitaciones del análisis


Esta metodología se basa en la actividad tipo peroxidasa de la hemoglobina y la
Esta metodología de análisis detecta:
mioglobina. En la almohadilla reactiva hay un indicador de color y peróxido. En
EI Urobilinógeno.
presencia de hemoglobina o mioglobina, este indicador de color se oxida mediante
EJ Estercobilinógeno.
la catálisis del peróxido por la actividad peroxidasa de la hemoglobina o la mioglo-
bina, dando lugar a un color detectable en la almohadilla reactiva. La mayoría de investigadores coinciden en que los análisis de urobilinógeno en
Esta prueba detecta glóbulos roios tanto no hemolizados como hemolizados, perros y gatos no son fiables.
desde un valor negativo a uno elevado (3+).
Valores esperables
Limitaciones del análisis Lo que se considera normal es 0,2 a 1 UE.
Este método detecta eritrocitos intactos, hemoglobina libre o mioglobina' Los falsos positivos se pueden deber a que la muestra de orina tenga un color
oscuro.

"l
T
wffiffi*
uRr¡nÁusts 'fFil
EF
E
RECOGIDA DE MUESTRAS Y ANÁLISIS MEDIANTE TIRAS DE ORINA Il

Los falsos negativos se pueden deber a:


ül Formalina (como conservante). trF ( ,r

rl.
l rr rr io on rl r¿r rnuestra de orina hay cationes, se liberan protones mediante un

rF
,rr¡r rr r;rcr rtior rkr r;orrplelos presente en la almohadilla reactiva. Estos protones
Ml La ausencia de urobilinógeno no puede detectarse. r.; rr ;r;ior lilr r co¡ cl indicador de color azul de bromotimol dando luqar a un color
T

rfr lrlntohadilla reactiva.


vr ;rl r[ r cr I li r

Aq¡'m IIs ü x r,:iq:r i*li r*n*:mq: i¿r'dirx r l ¡ *rlt'i.i*; f I l( r | )r lo(ion cjcterminar gravedactes específicas de entre 1 ,000 y i ,030.

Metodología rF!
r Limitaciones del análisis
Cuando en una muestra de orina hay nitritos, el ácido para arsanílico presente en la
rFf
t I ; r r r rck rr lología de la tira reactiva puede dar lecturas de gravedad especÍfica distin-
almohadilla reactiva forma un compuesto diazonio. Este reacciona con otro reacti-
vo presente ,2,3,4 tetrahidrobenzo(h)-quinolin-3-ol) formando un color detectable
(1
rf
¡
lrr; i li: l¿rs del reÍractómetro o del urinómetro.

rIF
en la almohadilla reactiva. Valores esperables:
En la orina hay nitratos y derivan de la alimentación. Esta metodología se basa
en el hecho de que el nitrato se convierte en nitrito por la acción de bacterias gram
negativas, si están presentes en la orina. Un resultado positivo sugiere la presencia
de 105 o más microorganismos por mililitro.
rF Se hallan falsas elevaciones cuando aumentan las cantidades de ciertos
iuralitos urinarios. El aumento de la concentración de cetona o la proteinuria de

Limitaciones del a¡rállsis


Esta metodología sólo detecta bacteriuria causada por microorganismos que redu-
'F
ril
100 750 mg/dl puede producrr un modesto aumento de la lectura de qravedad
ospecífica.
Se hallan falsas disminuciones en muestras de orina alcalinas muy tampona-
das en comparación con otras metodologías de análisis de la gravedad específica.
cen nitratos a nitritos.
Eil
\falores esperables
FT , ,ir::,r:i #{:l
Ft'r1;,il[?{:ln {** l,**rm*ii*:l
En condiciones normales, la orina no contiene nitritos.
Pueden aparecen falsos positivos en caso de orinas de colores oscuros. Las
muestras de orina con una gravedad especifica elevada o grandes cantidades de
t:n Metodología
Esta metodología se basa en el hecho de que los leucocitos granulocÍticos contie-

ácido ascórbico oueden oresentar una disminución de la sensibilidad a los nitritos. til nen esterasa. Si en una muestra de orina hay leucocitos granulociticos, la esterasa
leucocÍtica calalizará la hidrólisis de un éster ácido amino a indoxilo en la almoha
Las muestras de orina de pacientes cuya alimentación carece de nitratos o las
muestras de orina que no se han retenido en la vejiga lo suficiente (4 horas o más)
fil dilla reactiva. Este indoxilo formado reacciona con una sal diazonia presente en la

como para que tenga lugar la reducción de nitratos a nitritos, pueden dar falsos
negativos. Esta prueba no detecta bacteriuria causada por microorganismos que
r-il almohadilla reactiva dando lugar a un color visjble.
Los resultados se califican a modo de neqativo a elevado.

no convierten nitratos en n¡tritos.


FU Limitaciones del análisis

r-.:"':, ¿l"l i.t. , f.- ,,i¡i r',t\l


i,r'i,. ii.r,'i ,.,..'r . i!-:' ; Bil Deben estudiarse los resultados de traza y otras lecturas positivas.

Metodo!ogía ES Valores esperables


Este método se basa en la metodoloqía de la concentración iónica.
tf, En oondiciones normales, el análisis de leucocitos mediante esta metodoloqía oeoe
riar resultado neqativo.

''l r{t
l',
(.) URIANA¡.ISIS
Pueden aparecer falsos positivos si ha tenido lugar una contaminación vaginal
de la muestra de orina.
Pueden aparecer falsos negativos si la muestra de orina contiene cefalexina, ce-
Análisis microscópico 'I$.N

falotina, tetraciclina, gentamicina o elevadas concentraciones de ácido oxálico. Asimis-


mo, concentraciones elevadas de albúmina (> 499 mg/dl), glucosa (> = 3 g/dl) o una
gravedad especÍfica elevada de la muestra de orina también pueden dar lugar a falsos
negatvos.

{ffi.$

ET
ET
,l ET
EF
I

E:
H
ETI

Centrifugación de la muestra de orina


E|t EI Las muestras de orina se centrifugan para obtener sedimento para análisis

EI EI
microscópico.
El objet¡vo del análisis del sedimento en un urianálisis sistemático es detectar

H El
elementos formados en la muestra de orina: células, cilindros y cristales.
La regularidad de la técnica de laboratorio es fundamental en cuanto al proce-

ET dimiento de concentración del sedimento de una muestra de orina.


Por ejemplo, una variación en la velocidad de centrifugación o en el tiem-

ET po de centrifugado pueden afectar a los resultados del sedimento v su


interpretación.

H Otras variables técnicas, como el tiempo de almacenaje y la temperatu-


ra de almacenaje también pueden afectar a los resultados e interpretación del

ET sedimento,

H EI Cuando se mantiene la muestra a temperatura ambiente, las células y cilindros


empiezan a lisarse en las dos horas posteriores a la recogida de la muestra.

EI EI
A
Cuando se refrigera, precipitan cristales amorfos de la muestra de orina.

ET La regularidad en los métodos de laboratorio es la clave para obtener resuna-


dos útiles.

ET Procedimiento de centrifugac¡ón y análisis


ct microscópico de una muestra de or¡na
ET i". La muestra de orina debe mezclarse bien antes de la centrifugación.

ET H. Se debe vefter una cantidad especificada de la muestra de orina en un


de centrÍfuga desechable y debidamente etiquetado. Esta cantidad debe ser
tubo

EI siempre la misma, lo cual ayudará a la interpretación.

A
cjt 3. Se OeOe tapar la muestra para evitar la formación de aerosoles durante la
centrifugación. Se debe equilibrar la centrÍfuga.

Etl La muestra de orina debe centrifugarse a 400G durante 5 minutos. El tiempo


de centrifugación en revoluciones por minuto (rpm) debe calcularse según la
C:I siquiente fórmula:

Cil
ril
t
WWN\[
ANALTSTS MTCROSCÓP|CO
E
,$\\\\\N\N\N

A Se deOe dejar que la centrifuga se detenga por sí sola. No se debe usar el t I c r ¡.1 e r ¡t {}I} cil el ft lstil'$"$ m N'N ilffi m"N N:ffi i\.N N.N NlN:N $'N,N)
freno de la centrífuga, puesto que ello podría alterar el sedimento'

Cualouier Orueba confirmatoria necesaria debe realizarse en el sobrenadante'


Irrrrtcjor lor lrur rkt observarel sedimento urinario es mediante microscopía de
r lIl¡xrcLilo.
sr no se orecisan pruebas confirmatorias, el sobrenadante se desecha. Esto | | * ¡ r r lc [rz tcnue para el análisis microscópico ayuda a delinear más elemen
debe realizarse rápidamente vediendo el solorenadante en un receptáculo de lo: r lr l r llt rr;ir los formados en la orina.
desechos adecuado. En el fondo del tubro de centríÍuga quedará una pequeña | | r;r rr lir l rcnto de orina sin tinción es suficiente para el análisis microscópico; sin
cantidad de sobrenadante y de sedimento de ortna. , rr r rl r rr r Jo, ¡rLrede usarse unatinción Sternheimer-Malbin modificada (SEDI-STAIN@
Mediante una pipeta desechable, resuspenda con cuidado el botÓn de sedi- I i rr;lot I l)ickinson Biosciences) para mejorar el detalle nuclear y facilitar la diferen-
r ;ir rr;iort rle células y elementos.
mento desde el fondo del tubo.
A r;onlinuación se apodan descripciones de varios elementos no teñidos for-
coloque una gota de esta suspensiÓn en un portaobjetos. Tápela con un cu- r r r rt los en la orina que pueden hallarse al realizar un análisis de sedimento.
breobjetos de 20 mm.

A Oele que el sedimento repose durante 30-60 segundos antes de llevar a {..rj,-
cabo el analisis microscóPlco.
OLralquier glóbulo blanco presente en la circuiación sanguínea puede estar pre-
Lleve a cabo el análisis microscópico a bajos aumentos (1 0x) con luz tenue, sente en la muestra de orina (figura 2.1). En el análisis microscópico sistemático
lo cual es necesario para delinear los elementos formados translúcidos en el del sedimento urinario, los glóbulos blancos no están clasificados según tipo, pero
sedimenio urinario. Al observar el porlaobjetos, se debe variar continuamente el conocimiento de la morfología celular de los mismos puede ayudar a identificar
el mtcrÓmetro. glóbulos blancos adecuadamente.

* frtos aumentos son más útiles para detectar cilindros. Observe al menos
lOcamposdelaimagen.Ca|cu|e|amediadecilindrosenestosCamposy
registre la cantidad y tipo de cilindros por campo de bqo aumento

' Pase a usar el obietivo de grandes aumentos (4Ox). A estos aumentos, todos los
elementos formados en el sedimento urinario pueden observarse e identificarse'
observe al menos 10 campos y calcule la cantidad media de elementos ob-
servados por campo. Registre la cantidad y tipo de elementos por campo de Fil
grandes aumentos.

Es impor-tante estandarizar la terminologÍa del informe y las unidades de


Eltr
A
medida para aportar resultados coherentes y útiles til
Registre los resultados.
Ettr tigura 2.1.

trtr Glóbulos blancos,


sedimento urinario
de perro (40x).

ril
lil
t
N\\N[{\$$
UR|ANÁL|SI5:::]: ANÁL|SrS MTCROSCÓP|CO

A grandes aumentos, los glóbulos blancos son circulares y normalmente 1,5 a


2 veces más grandes que un glóbulo rolo. El aspecto del núcleo depende del tipo
¡^ uvrulo
uv ^Át,,t^ prvovr
^.^^^^+^rLv.

MJ Puede haber monocitos, linfocitos y neutrófilos, pero suelen predominar los


neutrófilos.

S fos segmentos nucleares de los neutrófilos pueden parecer núcleos aisla-


dos. Los gránulos de los neutrófilos pueden presentar movimiento brownia-
no; se denominan células centelleantes.
ff ft núcteo de las células mononucleares puede detectarse como una lrgera
translucidez del centro de la célula, a diferencia del centro vacío del glóbulo Figura2.2.
rojo. ()lcibulos rojos,
;rrrlirncnto urinaro
En una muestra de orina recién extraída, es posible que los detalles del núcleo rlc perro (40x).
de los glóbulos blancos no estén bien definidos. El análisis microscópico debe rea-
lizarse cuanto antes tras la recogida de la muestra, puesto que la degeneración
celular puede provocar alteraciones intracelulares, sobre todo en los neutrófilos.

A por ejemplo, los neutrófilos son difíciles de diferenciar de las células epite- * Colocando una gota de sedimento urinario y una de acido acetico diluido
liales. Colocando una gota de ácido acético diluido con el sedimento de en un poftaobjetos, los glóbulos rolos pueden diferenciarse de las gotas de
orlna, se puede potenciar el detalle nuclear de los glóbulos blancos para grasa: los glóbulos rojos se lisan al añadir el ácido acético, mientras que las
contribuir a diferenciarlos de las células epiteliales. flnlas dc orase no lO hagen.
A Con degeneración continua, los segmentos de los neutrófilos pueden fusio-
Se debe contar y anotar la cantidad total de glóbulos rojos por campo de gran
narse. En orina diluida o hiootónica. los neutrófilos se hinchan.
aumento.
tr
Se debe contar y anotar la cantidad total de glóbulos blancos por campo de
F
gran aumento.

fiü$qlklNilffis, u'ffi${}$i
E
r trIr r\ ,
' ,i{ -' ,*t,
i¡";{ { rl".,"
1}*s

Microscópicamente puede obseryarse que las gotas de grasa tienen el aspecto


{ lc esferas rekáctiles (figura 2.3). Fn muestras de orina normal de perro y de gato
Los glóbulos rojos son circulares y más pequeños que los glóbulos blancos y que
las células epiteliales (figura2.2). Mediante microscopía de campo claro de grandes
r ril 'l ., ,L rr lr.¡ll:rse nnlas r^lc qfasa.
gotas de grasa se confunden fácilmente con glóbulos rojos pero, a dife-
I rrs
aumentos, se observa que los glóbulos ro1os no teñidos del sedimento urinario tie-
nen aspecto de discos pálidos. Los glóbulos roJos pueden ser lisos o rugosos.
r :[ r,,¡
rr
r'
i¡olrrs
i,rJc
esLos. presenlan Lamanos variables que oscilan entre diminuLas goLas
ligeramente más grandes que un glóbulo rojo, a grandes aumentos. Las
En una orina hiperlónica puede tener lugar una crenación de los glóbulos rojos,
mientras que una orina alcalina contribuye a la lisis de estas células.
E il rloliu;rlo grasa pueden obseryarse usando el micrómetro para variar el plano de
oI ;l ;t :tvt tción.
En el sedimento urinario, los glóbulos rolos pueden confundirse con gotas de gra-
sa. Sin embargo, los glóbulos rqos no son tan refráctiles como las gotas de grasa.
E il | )oI ro r contarse y anotarse mediante términos cualitativos definidos, como muy
rrlrrx;l rr:il1()s, trlocas, moderadas o muchas.
E t
F il
Wil

Figura2.3. tigura2.4.
^^+^^ uc
uuLdJ ^-^^^
^^ Btd>d 0rllulas epiteliales
en un sed¡mento oscamosas en
urinario de perro .;rxlimento urinario
(40x). de perro (40x).

ffi u$fi N fi m* mn:¡ü'ftm$ il*ru Hmm

Las células epiteliales son de tamaño grande respecto a otros elementos del sedi-
mento urinar¡o.
Sin embargo, el tamaño de la célula epitelial depende de su origen. Asi, las
células epiteliales más pequeñas proceden de los riñones, los uréteres, la vejiga y
la parte proximal de la uretra, mientras que las células epiteliales más grandes se
originan en la parle distal de la uretra, la vagina y el prepucio. Figwa2.5.
Cé1ulas epiteliales
Las células epiteliales pueden contarse y anotarse clasificándolas por grupo o
de transición en
por tipo de células presentes. sedimento urinario
de perro (4Ox).
Tipos de células epiteliales
Células epiteliales escamosas
E-il Células epiteliales de transición
Son más habituales en muestras extraídas mediante cateterizaciÓn y micción, debi-
do a la contaminación vaginal o uretral (figura2.4).
f:l Ibvisten internamente el tracto urinario desde la pelvis renal hasta la uretra.
El tamaño y forma de las células epiteliales de transición no es siempre el mis-
Las células epiteliales escamosas tienen un diámetro grande pero poca anchu- ¡il rro, pero son más pequeñas que las células epiteliales escamosas y más grandes
ra, y tienden a plegarse. El núcleo es pequeño y redondo, y el citoplasma es gran- clrrc lt.rs células epiteliales renales (figura 2.5). El núcleo de la célula epitelial de tran-
de, con una pared celular de contorno irregular. Las células epiteliales escamosas f:il r;ir;irin cs redondo y está centrado en el interior de la célula. La textura de la célula
pueden aparecer de forma asilada o formando hojas. prrxle; tener un aspecto granular.
f{
H
En ocasiones, las células epiteliales de transición son binucleadas.
Existen varios tipos de células epiteliales de transición, que se describen en
función de la forma: redondas, ovaladas, espinosas o caudadas. Las caudadas
tienen colas citoplásmicas y se originan en la pelvis renal. Estas pequeñas células
de transición son 2 a 4 veces más grandes que un glóbulo blanco.

Células epiteliales de los túbulos renales


Son cúbicas en el riñón, pero redondas una vez liberadas de la membrana basal
tubular.
Las células epiteliales de los túbulos renales son casi pedectamente redondas,
y sólo ligeramente más grandes que los leucocitos presentes en el sedimento uri- Figura 2.7. Célula
epitelial de transición
nario (figura 2,6). Contienen un solo núcleo grande y excéntrico. Esta célula es muy
neoplásica en el
difícil de identificar una vez tiene lugar la degeneración celular. sedimento urinario
del perro (40x).

Cilindros
Estos elementos presentan lados paralelos y tienen el mismo diámetro a lo largo de
toda su estructura.
Los cilindros suelen ser varias veces más largos que anchos, y sus extremos
son redondeados o se estrechan progresivamente.
Se trata de moldes cilíndricos formados en el lumen de los túbulos renales y
están constituidos por una combinación variable de células y mucoproteína de la
matriz. La formación de cilindros suele tener lugar en el túbulo contorneado distal
Figura 2.6. Células de la nefrona, pero también pueden formarse en el 'asa ascendente de Henle o en
epiteliales de los el conducto colector.
túbulos renales en el
Los cilindros se denominan y clasifican en función de las células que contiene la
sedimento urinario
del perro (4Ox). mucoproteína de la matriz.
Exlsten cuatro criter¡os necesarios para la formación de cilindros: orina ácida,
concentración de sales elevada, tasa de flujo tubular baja y presencia de muco-
Células epiteliales de transición neoplásicas proteína de la matriz. La mucoproteína de Tamm-Horsfall sirve de malriz para la
Estas células son grandes y redondas, con núcleos excéntricos o multilobulados mayoría de cilindros presentes en la orina humana, lo cual se considera aplicable a
(figura 2.7). Pueden formar grupos o racimos, y es extremadamente difÍcil diferen- los animales. Esta mucoproteína albuminosa se secreta en pequeñas cantidades
ciar células epiteliales de transición neoplásicas de células epiteliales reactivas (pro- en las células epiteliales tubulares normales del asa de Henle, el túbulo distal y el
vocadas por una inflamación). túbulo colector. Estos son los lugares en los que se forman la mayoría de cilindros.
ANÁLISIS MIcRoScÓPIco

La precipitación de la mucoproteína de lamalriz es el primer acontecimiento de la


formación de cilindros. Sean cuales sean los elementos Celulares presentes en este
punto, se pueden adherir alamalrizde mucoproteína y formar un cilindro celular.
En general, los cilindros indlcan distintos grados de alteraciones renales: irrita-
ción renal, inflamación renal y degeneración renal. Los cilindros sÓlo pueden ob- /"ffiW
servarse en un campo rrttgroscÓpico bien oscurecido; dos ciltndros hialinos y uno
granular por campo de bajo aumento se considera un resultado normal en una ori-
na moderadamente concentrada, mientras que un exceso de cilindros en la orina
indica un proceso patológico en el riñÓn
A continuación se exponen los tipos de cilindros por campo de bajo aumento. \,v
(
Figura 2.8. ffiW
Tipos de cilindros )il rrdro hialino en
;rxlir¡ento urinario
Cilindros hialinos dc perro (4Ox).

Los cilindros hlalinos Son ¡ncoloros, homogéneos y semitransparentes, Con extre-


mos cilíndricos y característicamente redondeados (figura 2 8). Se forman a partir
de mucoproteina gelatinosa y no contienen células. Estos cilindros pasan fácil-
mente desapercibridos microscópicamente si la luz del microscopio es demasiado
intensa.

Cilindros granulares
Los cilindros granulares son hialinos y contienen gránulos que principalmente proce-
gránu-
den de la desintegración de células epiteliales de los tÚbulos (figura 2.9). Los
los empiezan Siendo gruesos y degeneran pasando a convertirse en gránulos finos'

Los cilindros de gránulos gruesos contienen gránulos más grandes que los cl-

lindros de gránulos finos y son de color más oscuro, a menudo marrón oscuro.
Los cilindros de gránulos finos contienen gránulos de color grisáceo o amarillo
pálido.
Figura 2.9.
Los crlindros de gránulos gruesos suelen ser más codos y de contorno más C lindro granular en
irregular que los de gránulos finos. Asimismo, los de gránulos gruesos suelen tener sedimento urinario
los extremos rotos de forma irregular. Es fácil confundir el cilindro de gránulos grue de perro (40x).

sos con grupos de uratos amorfos; el cilindro tendrá un contorno más marcado
que los grupos de uratos amorfos.
La presencia de cilindros granulares en el sedimento urinario suele indicar algun
trastorno tubulointersticial subyacente o proteinuria de origen glomerular.

rs
FS
,rl ]f, |

I
Cilindros de grasa
Los cilindros de grasa (o cilindros lipídicos) son un tipo de cilindro de gránulos grue- muy refractiva, Se forman en los túbulos colectores cuando el flujo urinario dis-
sos que contiene gotas de grasa (figura 2.10). Estas gotas son muy refractivas y mlnuye, Los cilindros muy enroscados probablemente son cilindros ceruminosos.
se acumulan en forma de cilindros como consecuencia de la degeneración lipídica La degeneración que compoda la formación de cilindros ceruminosos precisa una
celular. Estos cilindros aparecen en caso de enfermedad tubular degenerativa. cantldad considerable de tiempo y de estasis intrarrenal.

Figura 2.1 1.
Figura 2.10. Cilindro ceruminoso
Cilindro lipídico en en sedimento
sedimento urinario urinario de perro
de peno (ztOx). (40x).

Cilindros de células epiteliales


Cilindros de glóbulos rojos
Los cilindros de células epiteliales son cilindros hialinos que contienen muchas cé-
Los cilindros de glóbulos rojos son cilindros hialinos que contienen glóbulos rolos.
lulas eoiteliales renales. Se forman como consecuencia de la descamación de célu-
Estos cilindros se forman cuando se agregan glóbulos rojos en el interior del lumen
las tubulares que no se han desintegrado.
tubular, Estos cilindros son muy infrecuentes en perros y gatos, y su presencia in-
Esto tiene lugar en cualquier enfermedad que produzca daños en el epitelio
dica hemorragia intrarrenal. Sin embargo, los perros y gatos con glomerulonefritis
tubular. Estos cilindros a veces son difíciles de diferenciar de los cilindros de glóbu-
pueden excretar cilindros de glóbulos rojos en alguna ocasión.
los blancos, sobre todo si las células epiteliales renales han sufrido algún grado de
degeneración. Cilindros de glóbulos blancos
Los cilindros de glóbulos blancos contienen estas células y su presencia indica un
Cilindros cetuminosos
proceso supurativo en el riñón. Normalmente, los glóbulos blancos son predomi-
Los cilindros ceruminosos son de color grisáceo o incoloros, y muy refractivos (fi-
nantemente neutrófilos. Estos cilindros pueden identificarse fácilmente a no ser que
gura2.11). Son más anchos que los hialinos y tienen un aspecto mucho más con-
haya tenido lugar una degeneración celular.
sistente que éstos; además, suelen tener los extremos rotos en ángulo recto. Estos
cilindros son fáciles de observar al microscopio debido a que son de naturaleza
ANAL|StS MTCROSCÓFidO:'::ll]l::ta

{.1r"$*lt+*$+*lx, Tabla2.1. (lri',l,rlcs dc l¿ orrna: confirmacion qurmrca

La presencia de cristales en el sedimento urinario depende de muchos factores: el


pH urinario, la gravedad específica de la orina, la concentraciÓn de la orina con el
cristaloide y el tiempo total transcurrido entre la recogida de la muestra y el analisis.
Algunos cristales están presentes en el sedimento urinario a temperatura ambiente; I or;l;itrs ''ii",u' Neutra. alcal¡na Acido acético,
otros, precipitan al refrigerar la muestra de orina. La presencia de cristales en el ; lt t tr lrlt ls ácido clorhÍdrico

sedimento urinario indica saturación de la orina con el cristaloide. Asimismo, puede [$


haber cristaluria en caso de urolitiasis, pero no es necesariamente indicativa de este
t Jt;rlos ,rrnorfos
d, Ácida, neufa Álcali diluido
trastorno. Algunos cristales sólo se encuentran en ciertos estados de enfermedad,
pero la cristaluria casi nunca tiene importancia clÍnica. '.i:1,

La identificación de cristales en el sedimento de orina puede ser difÍcil. El primer


r,r tii. ,:
"'t
paso para identificar los cristales hallados en el sedimento urinario es evaluar el pH Oxalato cálcico Acida, neutra Acido clorhídrico Acido acético
¡
\'.i. o alcalina
de la orina. Los hallazgos clínicos habituales a pH urinario normal son ácido Úrico y a¡
uratos amorfos. l,;$ I

.¡" 6d
Otros hallazgos habituales son oxalato cálcico en orina ácida, neutra o alcalina. 0arbonato ooo . @: ; Neutra, alcalina El ácido acético
-- ":ó
.

Asimismo, puede hallarse ácido hipúrico en orina ácida, neutra o ligeramente alca- r;álcico o provoca la

lina, o fosfato triple (fosfato amónico magnésico) en orina ligeramente ácida, neutra liberación de CO,
0
o alcalina. Por otra parte, el carbonato cálcico, los fosfatos amorfos y los uratos de liooramonto
Fosfato triple Ácido acético
amonio se hallan a oH alcalino. ',1ir ácida, neutra o
Los hallazgos clinicos anómalos son: fosfato triple, oxalato cálcico, fosfato cál- alcalina
'¡1'.i
cico, urato, cistina y carbonato cálcico. También pueden hallarse biuratos de amo-
nio en muestras de orina alcalina, y pueden estar presentes en enfermedades en Urato de
amonio
#
s
Ácida, neutra Ácido acético

las oue exista hioeramoniemia.


En el perro, Ia cristaluria por tirosina se asocia a enfermedad hepática, mien-
tras que la cristaluria por cistina se asocia a una alteración del metabolismo de las Bilirru bina Ácida Acido y álcali
oroteínas. .r.

Pueden formarse cristales de sulfonamida, que se asocian a deshidratacion.


Por otra parle, los cristales de tirosina, cistina y sulfonamida se hallan en muestras 6)_tE
wo.
I cucina ^
*^@
\€ &f¡ Acida Hidróxido sódico Ácido
de orina ácida. Los cristales de oxalato cálcico pueden hallarse en muestras de
orina ácida, neutra o alcalina. La forma monohidrato se asocia a intoxicaclón por
&-
w'w clorhídrico

etilenglicol.
@& ffi
t . "* * 'Ácida Ácido clorhídrico
El siguiente paso hacia la identificación de cristales del sedimento urinario con-
siste en determinar la solubilidad del cristal en medio alcalino y ácido. Esta informa- ril i ' i ¡''lgf'
¡,
a 'z
. .:.,,.;
'f .;,rlil
':&'
ción se resume en la tabla 2.1 .

Los cristales de la orina también presentan formas características y pueden


ril ,J)
.,él
V -ia
(lr1 (\ Acida Acido clorhídrico Acido acético

tener un color típico. A continuación se resume esta información. Eil o ,Oi


*l r:il
l''
Tipos de cristales Crlstales de oxalato cálcico
Los crlstales de oxalato cálcico se hallan en orina ácida, neutra o alcalina. Estos
Cristales amorfos
crlstales son incoloros al microscopio (figura 2.13). Existen dos tipos de cristal de
Los uratos-amorfos se encuentran en orina ácida. Estos cristales pueden parecer
oxalato cálcico: el monohidrato y el dihidrato. El cristal de oxalato cálcico mono-
rosas a simple vista y amarillos al microscopio (figura 2.12). Estos cristales tienen
hldrato se describe como "estaca de valla". Estos cristales son habituales en los
aspecto de gránulos en el sedimento urinario. Por otra parte, los fosfatos amor-
casos de intoxicación por etilenglicol. El tipo dihidrato es octaédrico o con forma
fos se encuentran en orina alcalina. Estos gránulos son incoloros al microscopio, y
de "sobre".
también tienen aspecto granular al obseruarlos microscÓpicamente. En ocasiones,
Ouede aoarecer material amorfo en forma de racimos o masas. Puede ser difícil di-
ferenciar cristales amorfos de bacterias, puesto que pueden tener el mismo tama-
ño a la observación microscópica. Sin embargo, los cristales amorfos son solubles
en solución de pH contrario al de su medio habitual, y las bacterias no lo son. Los
uratos amorfos también se disuelven con el calor'

Figura 2.13. Cristales


de oxalato cálcico en
sedimento urinario
de perro (4Ox).

Figura2.12.
Crist¿les amorfos en
sedimento urinario
de perro (zlOx).

Cristales de ácido úrico Cristales de ácido hipúrico


Los cristales de ácido úrico se encuentran en orina ácida. Estos cristales son ama- Los cristales de ácido hipúrico se hallan en orina ácida, neutra o ligeramente al-
rillos o marrones cuando Se observan al microscopio, y tienen aspecto de lámina calina. Estos cdstdes incoloros tienen forma de prisma, lámina o aguja, y suelen
romboide, roseta, prisma u óvalo, con extremos puntiagudos. conglomerarse formando masas.
Qrii¡iñ&ri¡6,ilr,t it::,XX::ii:i:::i:,,,r,,,, , :, :,:

Cristales de carbonato cálcico


Los cristales de carbonato cálcico se encuentran en orina alcalina. Estos cristales
incoloros pueden tener forma de esfera, de pesa o de óvalo (figura 2.14). Son li-
geramente más grandes que los fosfalos amorfos, y pueden observarse formando
masas.

Cristales de fosfato triple


Los cristales de fosfato triple se encuentran en onna ligeramente ácida, neutra o
alcalina. Son incoloros y tienen forma de prisma con los extremos oblicuos (figura
2.15). Se suelen denominar "tapas de ataúd" debido a la semejanza estructural. En rS
ocasiones, estos cristales tienen forma de hoja o de pluma.

Cristales de urato de amonio É'.


Los cristales de urato de amonio se localizan en orina ácida o neutra. Estos cris- '!.
tales son amarillos, y tienen forma de pesa o de fajo de agujas (figura 2.16). En Figura 2.15.

ocasiones tienen aspecto de esferas cubiertas de espículas.


oristales de fosfato \
lriJ;lc en sedimento
rrnnailo 0e perro
(40x).

ffiffi

.s
*: J:

@r

',¡fl'
ffi
Figura2.14. Figura 2.16.
{s¡, Cristales de Cristales de urato
carbonato cálcico en de amonio en
'-w
sedimento urinario ;txlir¡ento urinario
,;illl i de perro (40x). rkr perro (40x).
Cristales de bilirubina Otros elementos del sedimento ur¡nar¡o
Los cristales de bilirrubina se encuentran en orina ácida. Estos cristales son de co-
lor amarillo, rolo rubí o marrón oscuro, y tienen aspecto de placas romboides o bien Hilos de mucos¡dad
agujas, láminas o gránulos (figura2.17). Los hilos de mucosidad tienen aspecto de hebras largas, estrechas y onduladas
en 6l sedimento urinario (figura 2.18). Se originan en superficies mucosas; en con-
dlclones normales aparecen en pequeñas cantidades, y aumentan mucho en caso
de Inltación de cualquier tipo.
La presencia de hilos de mucosidad suele clasificarse en: muy infrecuente,
poca, moderada o elevada.

Figun 2.17. Cristales


de bilirrubina en
sedimento urinario
de perro (40x).

Figura 2.18.
Los siguientes cristales son difíciles de encontrar sin un microscopio
Sedimento urinario
de contraste de fases. de perro en el que
se observan hilos de
Cristales de leucina mucosidad (40x).
Los cristales de leucina se hallan en orina ácida. Estos cristales son de color ama-
rillo o marrón y son muy refractivos. Estas esferas se parecen a las gotas de grasa,
pero tienen estriaciones radiales v concéntricas.

Cristales de tirosina Espermatozoides


Los cristales de tirosina se hallan en muestras de orina ácida. Estos cristales son inco- Los espermatozoides se reconocen por su característico aspecto (figura 2.1 9).
loros, y tienen aspecto de finas agujas agrupadas en haces o en fajos, que se cruzan La presencia de esperma en el sedimento urinario indica que la orlna se ha
entre sÍ a distintos ángulos. Los haces pueden ser negros en la parte media. mezclado con semen. Puede hallarse esperma en orina de machos no castrados
Cristales de cistina cuando se recoge mediante cistocentesis.
La presencia de espermatozoides suelen clasificarse en: muy infrecuente, poca,
Los cristales de cistina se encuentran en orina ácida. Son incoloros y muy refracti-
vos, y tienen aspecto de láminas hexagonales o prismas cuadriláteros. moderada o elevada.

43
ANALI s I s n,r I cnodCó¡jdiil: :::::

Ln condiciones normales, la orina es estéril. Así, una elevada cantidad de bac-


t' Icri¿rs en muestras de orina obtenidas por cateterización o cistocentesis indica
lir ¡rresencia de infección en el tracto urinario. En este caso, además de las bac-
lorias, se suele observar un aumento de la cantidad de glóbulos blancos. Por el
r;ontrario, la bacteriuria que no va acompañada de un aumento de la cantidad de
r¡krbLrlos blancos sugiere contaminación bacteriana. Asimismo, la orina obtenida
rle la micción puede resultar contaminada al pasar por la parle distal de la uretra
r> rjel tracto genital, que pueden albergar bacterias. La contaminación derivada de

la uretra en muestras obtenidas por micción o cateterización no suele dar lugar


a cantidades lo suficientemente elevadas como para que puedan observarse al
microscopio. Si la muestra de orina se deja a temperatura ambiente y contiene
,,,,* {¡ Figura 2.1 9.
bacterias, estas bacterias pueden proliferar.
.': Espermatozoides en
La presencia de bacterias se clasifica en: muy infrecuente, poca, moderada o
!. .,1 sedimento urinario
de peno (40x). etevaOa.

Bacterias Hifas fúngicas


Las bacterias son pequeñas y muy uniformes. Tienen aspecto de bacilos o cocos Las hifas fúngicas son incoloras en sedimento urinario. Presentan tamaños varia-
(figura2.2O). Los cocos pueden agruparse formando cadenas o racimos, mientras bles y pueden ser de forma ovalada, redondeada o de brote (figura2.21).
que los bacilos pueden disponerse de forma alargada. Las hifas fúngicas son ligeramente más grandes que las bacterias, pero
Las bacterias pueden confundirse con cristales amorfos, aunque los cristales más pequeñas que los glóbulos blancos. Asimismo, pueden observarse hifas
amorfos se disuelven al añadir solución de un pH contrario al de su medio habitual, seomenlaoas.
mientras oue las bacterias no lo hacen.

il

E
}
C
Figwa2.2O.
Bacterias en
E FI I
Figura 2.21.
lil,r; irngicas en
f

sedimento urinario
de perro (40x). Efl ,rrr iir l:r lkr urinario
r

rft: Jxrrro (4.0x).

*l Ii{
l*
En general, las hifas fúngicas son contaminantes de la muestra de orina, pues-
to que ni en el perro ni en el gato suelen tener lugar infecciones fúngicas del tracto ("

urinario.
La presencia de hifas se clasifica en: muy infrecuente, poca, moderada o f)
elevada.

Parásitos
En el sedimento urinario pueden observarse huevos de parásitos. Los huevos de
parásitos son elementos grandes de formas características.
Los que pueden observarse son Dioctophyma renale (huevo de un verme renal
Figwa2.23.
del perro), Capillaia p/lca (huevo de un verme de la vejiga del perro) y microfilarias Microfilaria de
de Dirofilaia immitis. Dirofilaria immitisen
sedimento urinario
Si el sedimento urinario ha resultado contaminado con heces infectadas, podrá
de peno (40x).
observarse gran variedad de huevos de parásitos (figuras 2.22y 2.23).
Debe registrarse la presencia de cualquier parásito.

Artefactos
En el sedimento urinario puede observarse gran variedad de artefactos. Estos ane-
factos pueden adquirirse durante la recogida de la orina o durante el análisis de la-
boratorio. Algunos de ellos pueden ser fibras de algodón, pelo o polvo de guantes
(figuras 2.24,2.25 y 2.26). Existe gran variedad de materiales que pueden convertir
el análisis microscópico del sedimento urinario en todo un reto.
Lo habitual es no registrar la presencia de nlngún artefacto.

Figura2.22.
Capillaria plica en
sedimento urinario
de perro (40x).

tigwa2.24.
Polvo de guante en
sedimento urinario
de peno (40x).

*l ET
Valores de rnfmrmmmilm
para el an¿*ililmfrw Nm wm'ffmTm
Características f ísicas
Golor Amarillo, amarillo claro. ámbar

Transparencia Clara a ligeramente turbia

Gravedad específica Perro:1,015- 1,040


Gato:1,015- 1,060
tigura2.25.
Material vegetal en
sedimento urinario
Análisis mediante química seca
de perro (40x).
pH 5,5 a7,5

Proteínas Perro: puede tener hasta 50 mg/dl de proteína urinaria


Gato: negativo

Sangre Negativo

Glucosa Negativo

Getonas Negativo
FN Bilirrubina Perro: puede tener hasta i + de bilirrubin a urinaria.

F:I Gato: negativo

Nitratos El método de la química seca no es fiable en perro ni en gato;


E:E! gs nanllugl oote"gi fa*: Tggli"l-l
tigura2.26.
Artefacto no
identificado en
E=il Leucocitos Perro: método especifico para la piuria, pero se obtienen muchos
falsos negativos.
sedimento urinano
de perro (40x). E,:trl Gato: suelen obtenerse falsos oositivos.

E:il Análisis microscópico


Eil EI I os resultados del análisis microscópico del sedimento urinario pueden va,

E:il rirrr rlol¡ido al método de recogida de la orina, a diferencias en la velocidad de


rxrrlriÍugación, a variaciones en el tiempo de centrifugación o al volumen oe ra

E::! nluostra de orina.

*l
ffi
,0, neuRtol-ocfn
WBG (leucocitos) Cistocentesis: O-3/campo de grandes aumentos (hpf)
Cateterización: 0-5/hPf
Micción: O-7/hr:f
Recogida de muestrüs
RBC(eritrocitos) Cistocentesis:0-3/hpf
Cateterización: 0-5/hPf
y realizactmn dm ptruebas
Micción: O'7/hof
I

Célulasepiteliales O-3/hPf

Cilindros Menos de 1/hpf


W
Bacterias AUSenC¡A

Grasa La presencia de gotas de grasa varÍa; es normal una


oeoueña cantidad.

Esperma Presente en muestras de orina obtenidas por cistocentesis


de machos no castrados o hembras recién cruzadas.

Mucosidad Ausencia

Parásitos Ausencia

,,
l.lll
Proced imientm dm mhffmn'"xmfrmmn

oe muestras
Metodo de receigfre$m

EI I irs rnuestras de sangre destinadas a análisis hematológico pueden obtenerse


pr¡r punción venosa.
EI I l; indispensable que la muestra de sangre no se coagule. Esto puede conse-
gLrirse mezclando la muestra de sangre con un anticoagulante; el de elección
¡rara el análisis hematológico es el ácido etilendiaminotetraacético (EDTA)
EI La muestra de sangre puede recogerse directamente en un tubo de recogroa
de sangre que contenga EDTA o puede extraerse mediante jeringa y transferir-
se rápidamente a un tubo que contenga EDTA. El tubo de recogida de sangre
debe inclinarse para que la sangre descienda por la pared del mismo, redu-
ciendo así la hemólisis. La muestra debe mezclarse con cuidado para evitar la
coagulación de la sangre.
EI rl tubo de recogida de sangre debe llenarse hasta el nivel indicado, lo cual
asegurará que la proporción entre anticoagulante y sangre sea la correcta. Sl el
tubo se llena de modo insuficiente, el exceso de anticoagulante puede crear un
efecto de dilución y disminuir de forma inadvertida los valores de glóbulos rqos,
glóbulos blancos y hematocrito.
EI el tuOo de recogida de sangre debe etiquetarse con los datos del paciente, y el
momento y fecha de la extracción de la muestra.
EI La muestra de sangre debe transportarse al laboratorio de análisis de
inmediato.
EI Cuando se produce un retraso en el análisis, la sangre completa recogida en
tubos de EDTA para recuentos celulares, hematocrito y cálculos de índices
puede permanecer a temperatura ambiente durante un máximo de g horas.
E Las muestras pueden refrigerarse a 4 oC durante un máximo de 24 horas; elro
<;¿lusará muy pocas alteraciones en estos valores.
C
A Siin embargo, las muestras de sangre recogidas en tubos de EDTA pueden
f tliu lugar a alteraciones de los leucocitos y artefactos morfológicos en películas

r rkr r;irrrgre si la sangre se deja reposar a temperatura ambiente durante más


r lo ll f roras. Por tanto, es mejor preparar los frotis de sangre periférica

li r
durante
lrorir posterior a la extracción, aunque lo ideal es preparar frotis de sangre
ir rnlccliatamente después de la venopunción.
-l
Gh RECOGIDA Y REAL¡ZACIÓN DE PRUEBÁS

Macrométodo o micrométodo
ffimff*m&mfrmsru s$w m"mmusmrstw
$rumruffitmffiffi ffiffiwry$m$mtm V ['l rnacrométodo se lleva a cabo mediante un tubo de hematocrito Wintrobe.
Se transfiere sangre completa bien mezclada con anticoagulante en este tubo y
se centrifuga a25OO G durante 30 minutos.
EI El recuento hemático completo (CBC) se basa en pruebas de laboratorio que
se llevan a cabo para examinar las células que contiene la sangre periférica.
V El micrométodo se lleva a cabo mediante un tubo capilar que se centrifuga a
Lrnas 10000 a 13000 G durante 5 minutos. El tubo capilar mide unos 7 centí-
Estas pruebas clasifican, enumeran y diferencian los tipos de células presentes
rTretros de largo y tiene un diámetro uniforme de aproximadamente I mm.
en la sangre periférica.
en glóbulos rolos, glóbulos blancos o plaquetas, y
EI La muestra utilizada debe ser de sangre completa recogida directamente
M Las células se clasifican por venopunción o una muestra de sangre completa bien me¿clada con
se recuentan conforme a ello. Esta tarea puede llevarse a cabo mediante
anticoagulante.
métodos manuales o automáticos. Cuando se usan los automáticos, sue-
EI Existen dos tipos de tubos capilares: heparinizado y no heparinizado.
len registrarse los índices de glóbulos ro1os.
EI Si la muestra de sangre se recoge directamente de una punción en la
EI El recuento diferencial de glóbulos blancos se lleva a cabo examinando un
piel, debe utilizarse un tubo capilar heparinizado. Estos tubos tienen
frotis de sangre teñido al microscopio. Se evalúan las características morfo-
un ribete con una lÍnea roja que indica al usuario que el tubo capilar
lógicas de los glóbulos rolos y las plaquetas
está heparinizado. Una vez la muestra se ha recogido en uno de es-
EI En los recuentos hemáticos completos de medicina veterinaria se suelen incluir
tos tubos, debe agitarse con cuidado para mezclar la heparina con la
los valores de proteínas plasmáticas y de fibrinÓgeno. Esto no suele hacerse en
muestra de sangre completa. Esto da lugar a una dilución de heparina
medicina humana.
de 1:1000.
ül Si la muestra de sangre utilizada procede de un tubo de recogida de
sangre con heparina o EDTA, la muestra, bien mezclada, debe trans-
ffimmmmm$fimwfiwp.m*mm
Llmtl ferirse a un tubo no heparinizado o sin anticoagulante. Estos tubos
ffiE) $d**, ffiB t$#il]$BS H"}Td$t[,ü#$#S tienen un ribete de color azul que indica ai usuario que está empleando
un Lubo capilar sin anticoagulante.
VI Ambos tipos de tubos capilares deben llenarse, y uno de sus extremos
F'&mnHmtmq:s'¡t#
debe taparse con plastilina. Existen dos plastilinas comerciales útiles para
El hematocrito es la proporción del volumen de los eritrocitos respecto al de la este fin, Seal-EaserM y CritosealrM.
sangre comprela. EI gl tuOo lleno se coloca en uno de los surcos radiales de una centrífuga de
microhematocrito, con el extremo del tubo de hematocrito tapado situado
EJ Los términos "volumen del total de glóbulos ro1os" (PCV packed cell volume) y
"hematocrito" (HTC) son intercambiables, aunque se determinan por medlos C en la periferia de la centrífuga. La tapa de la centrífuga debe asegurase
y la centrÍfuga debe cerrase y fijarse. El tubo debe centrifugarse durante
distintos.
MJ El procedimiento de laboratorio mediante el cual se determina el volumen t 5 minutos a 1 0000-1 3000 G. Si el hematocrito es superior al 50%, se preci-
sa otra centrifugación de 5 minutos para garanlizar que la mínima cantidad
del total de glóbulos rojos consiste en centrifugar sangre completa durante
un periodo de tiempo determinado para obtener la agrupaciÓn de glÓbulos C posible de plasma quede atrapado. Una vez terminada la centrifugación, el
lLrbo capilar se coloca en un dispositivo de lectura. Existe gran variedad de
rolos. A continuación, se mide el volumen de glÓbulos ro¡os y el de sangre
completa. Esta proporciÓn se expresa en porcentaje o fracción decimal. - ciispositivos comerciales de este tipo, aunque también puede utilizarse una

EI
VI El hematocrito se determina mediante instrumentos automáticos.
E volumen del total de glóbulos rojos puede determinarse de dos formas
cjn rogla milimétrica. Se mide el volumen total de la muestra y el volumen total
cie los olóbulos roios.

*l F=r
I
EI fl métoOo indirecto de medición del hematocrito es el producto del volumen sustituir el recuento leucocitario automático, puede ser una de las primeras pis-
celular medio (MCV) multiplicado por el recuento de glóbulos rojos, según de- tas de laboratorio de un recuento leucocitario anómalo. A veces, puede obser-
terminación de instrumentos automáticos. Este cálculo conlleva mayor proba- varse una capa de plaquetas de color crema (a menudo con un instrumento de
bilidad de error en muestras veterinarias que los otros dos métodos de hema- aumento) sobre la caoa leucocitaria.
tocrito, puesto que en especies distintas dei perro, los tamaños de glóbulos EI OeOe haber una clara diferencia entre el fondo de la capa leucocitaria y el blo-
rojos pueden ser menores que en el ser humano y la mayoría de métodos con que de glóbulos rolos. Si el fondo de la capa leucocitaria está ligeramente enro-
instrumentos automáticos se basan en los tamaños de las células humanas. jecido, es muy probable que contenga células jóvenes, reticulocitos o glóbulos
rolos nucleados.
Causas de error EI Pueden detectarse microfilarias en la evaluación microscóoica del olasma sr-
tuado justo por encima de la capa leucocitaria, En ocasiones muy infrecuentes
EJ Exceso de anticoagulante en la muestra de sangre. Un exceso de anticoagu-
pueden observarse tripanosomas en el mismo punto. Debe examinarse el tubo
lante puede diluir en exceso la muestra y dar lugar a resultados erróneos.
capilar intacto, a la altura de la interfase entre la capa leucocitaria y el plasma, a
EJ lmposibilidad de obtención de una muestra de sangre circulante a través de
baja potencia microscópica.
la punción cutánea. El exceso de líquido tisular puede dar lugar a resultados
EI El color del plasma también debe observarse. El plasma normal es de color
similares a los derivados de un exceso de anticoagulante.
entre amarillo claro y amarillo oscuro. Así, los tonos anaranjados o verdosos
EI Duración y velocidad suficientes de centrifugación. Las centrÍfugas deben cali-
pueden indicar un aumento de la concentración de bilirrubina, mientras que el
brarse al menos una vez al año. Este procedimiento debe estandarizarse, y la
plasma rosa o rolizo puede indicar hemólisis. Hay que tener en cuenta que una
plantilla técnica debe seguirlo.
mda técnica de recogida de la muestra de sangre es la causa más habitual de
üJ lmposibilidad de mezclar la sangre lo suficiente antes de la medlción del
hemólisis.
hematocrito.
EI E plasma normal es transparente; el plasma turbio indica lipemia.
Ef lmposibilid adde realizar una lectura adecuada. Debe determinarse el volumen
de los glóbulos ro1os. La capa de leucocitos no debe incluirse como parte del
Determinación del hematocrito/PCv mediante el método
volumen de eritrocitos,
microhematocrito
VI lrregularidad del diámetro interno del tubo capilar. Los tubos capilares deben
comprarse a un proveedor fiable. ET Principio

Examen macroscópico del tubo capilar en el micrométodo ET Se centrifuga sangre completa con anticoagulante para conseguir la máxima can-
tidad posible de glóbulos rojos agrupados. Se mide el volumen ocupado por los

A Rt ut¡l¡.ur el método del microhematocrito, el tubo capilar lleno de sangre em-


pleado para la determinación del hematocrito puede aportar información valio-
ET glóbulos rojos y a continuación se expresa como porcentaje respecto al volumen
de sangre completa.

sa además del resultado del hematocrito. Éf Equipo/reactivodmaterial


.
EI Una vez obtenido el resultado del hematocrito, puede observarse todo el tubo
capilar, apreciando las alturas respectivas de la columna de glóbulos rojos,
Eil .
.
Sangre entera bien mezclada con anticoagulante.
Tubos capilares sin anticoagulante.

. capa leucocitarla y plasma. La capa leucocitaria es la capa delgada y grisácea


situada entre los glóbulos rojos y el plasma. Esta capa contiene plaquetas y
H Plastilina Seal-EaserM (Becton Dickinson), CritosealrM (Kendall Healthcare) o
CIay Sealer.
.
leucocitos. Una caoa leucocitaria de más de un I % del volumen total de la
muestra puede indicar un recuento leucocitario aumentado. Aunque no debe
H r
CentrÍfuga para microhematocrito.
Lector de microhematocrito.

GT
Procedimiento {T oao"n evitarse las variaciones extremas de la temperatura ambiente para
t. Dejar que el tubo capilar se llene de sangre entera, al menos hasta 3/4 partes. eliminar lecturas erráticas. Los refractómetros de compensación de la tem-
ü. Tapar un extremo del tubo capilar con plastilina peratura son los ideales.
$. Colocar el tubo capilar en la centrÍfuga con el extremo tapado en la periferia de
Ef El plasma obtenido de sangre recogida en tubos con EDTA o heparinizados
la centrÍfuga y apoyado contra el ribete periférico.
puede usarse para el análisis de proteínas plasmáticas. Se necesita sólo una
4" Centrifugar durante 5 minutos. Un valor de hematocrito de más del 507o re-
gota de plasma. Esta muestra puede obtenerse mediante el uso de plasma
quiere una centrifugación adicional de 5 minutos más.
residual del tubo de microhematocrito utilizado para la evaluación del vorumen
$. Retirar el tubo capilar de la centrÍfuga. Existe una gran variedad de aparatos de
celular corouscular.
lectura. Siga al pie de la leira las instrucciones del fabricante.
EI se necesita plasma transparente para las mediciones exactas de,la proteína
{$, Se determina el volumen total de la muestra y el volumen de glóbulos ro¡os. No
plasmática, Dado que el método de la refractometra para la medición de pro-
debe incluirse la capa leucocitaria en el volumen de glóbulos rolos.
teínas plasmáticas se basa en la transmisión de la luz, cualquier factor que
Resultados interfiera con ésta puede afectar a la lectura de las proteínas plasmáticas
Registre los resultados en porcentaje o fracción decimal. Las unidades son litro/litro,
* frto incluye lipemia, hemólisis e ictericia.
oero en los informes se suelen omitir.
Ert * Ur concentraciones anormalmente elevadas de glucosa, urea, sodio o clo-
Froteínas püasm{ticas r ruros pueden aumentar de forma falsa la lectura de proteÍnas plasmáticas.
Se supone que las concentraciones "normales" de estos analitos permane-

EJ El plasma contiene gran variedad de proteínas: hormonas, enzimas, anticuer-


pos, proteínas de transpode y factores de la coagulación, por mencionar sÓlo
EI cen relativamente constantes entre muestras y en cada especie, y que se
justifican cuando se establecen intervalos de referencia.

argunas. EI Ef Recuerde que el suero fresco contiene las mismas proteínas que el plasma, ex-
EI Estas proteínas poseen gran variedad de configuraciones químicas y funcio-
nes, como el mantenimiento del equilibrio ácido-base y la presión osmótica r cepto el fibrinógeno, el factor V y el factor Vlll, unos factores que se consumen
durante la formación del coágulo, Por tanto, las proteínas séricas medidas por

üJ
coioidal.
La refractometría se suele utilizar para medir las proteínas plasmáticas. El prin- H EI
refractometría serán más bajas que las del plasma.
Las determinaciones de proteína plasmática obrtenidas en un cBC son útiles
cipio de este método de análisis se basa en el hecho de que las proteínas en
solución ocasionan un cambio en el Índice refractivo que es proporcional a la E! para determinar posibles alteraciones de liquidos y electrolitos, y para diagnos-
ticar anemia.

EI
concentración de proteína,
Los refractómetros son instrumentos manuales que se emplean para obtener
H M Los aumentos de los valores de proteínas plasmáticas
mentos del componente globulinas, y se observan en:
suelen deberse a incre-

valores de proteínas plasmáticas. La mayoría de refractÓmetros poseen una


escala para leer las proteínas plasmáticas directamente en gramos por decilitro
EI ¡ Hipovolemia (deshidratación), aumento tanto de la albúmina como oe tas
globulinas.
y son muy precisos en el intervalo de proteínas plasmáticas.
EI o Inflamación, aumento de globulinas.
' Enfermedades inmunomediadas, aumento de las globulinas.

,
ffi Recuerde que debe realizarse un control de calidad diario en el refractó-
metro. Se recomiendan al menos dos controles: un nivel bajo y un nivel EI ¡ Ciertos tipos de neoplasias linfoides, aumento de las globulinas.

intermedio o alto, que se venden. Puede utilizarse agua destilada a modo


de punto cero,
EI
EI
*l E: ru'
V'nrluz¡crón or

E Las disminuciones de los valores de proteínas plasmáticas se suelen deb,er a Fibrinógeno


un descenso de la albúmina, y se observan en:
. Principio
Gastroenteropatía con pérdida de proteÍnas, disminuciÓn tanto de albÚmina
| | lilrrirr<)geno precipita a parlir del plasma cuando se calienta a 56-58 oC. Cuan-
como de las globulinas.
r io se centrifuga, el fibrinógeno cae sobre la capa leucocitaria. Los fibrinógenos
. UropatÍa con pérdida de proteína, disminución de la albúmina.
. ¡rlit;rniiticos se calculan restando el índice refractivo del plasma incubado al índice
Enfermedad hepática de gran alcance, disminución de la albúmina.
relr¿xlivo del plasma no incubado (es decir, el valor de proteína plasmática).
. Falta de producción de inmunoglobulinas, normalmente se trata de una en-
fermedad genetica reconocida en animales muy jóvenes. Equ i po/reactivoVmaterial
. Hemorragia crónica, disminución tanto de la albúmina como de las . Tubro capilar para análisis de microhematocrito (PCV1 por centrifugación.
globulinas. . Valor de la proteina plasmatica de la prueba.
. Medidor de sólidos totales lrefractómetro).
Procedirniento de deterrninación de las proteínas plasmáticas . Baño de agua a 56-58'C o bloque de calor.

Principio Procedimiento
Las proteínas en solución dan lugar a un cambio en el índice refractivo que es pro- Colocar el tubo de hematocrito para centrifugación en el baño de agua a 56-
porcional a la concentración de proteína. 58 oC durante al menos 3 minutos. Esto puede realizarse colocado agua en un
tubo de ensayo de 12 x 74 mm e introduciendo el tubo de ensayo en el baño
Equ i po/reactivoVmaterial
de agua o el bloque de calor. Asegúrese de que la línea de plasma del tubo de
. Plasma para la prueba obtenido a partir de la centrifugación de un tubo capilar
hematocrito esté completamente inmersa en el agua (pero sin que se introduz-
de microhematocrito (PC\4 o un tubo de sangre con anticoagulante (EDTA o
ca agua en su interior).
heoarind.
Retire el tubo de hematocrito del baño de agua pasada la incubación de
. Medidor de sólidos totales (refractómetro).
3 minutos. Centrifúguelo en la centrÍfuga de hematocrito.
. Agua destilada.
Tras el procedimiento de determinación de la proteína plasmática, lea el
. Papel limpiaobjetivos.
resultado.
Procedimiento
Resultados
Obtener plasma rompiendo el tubo de microhematocrito por encima de la
El fibrinógeno se calcula restando el valor del aparlado 3 anterior al valor de la
capa leucocitaria o centrifugando la sangre completa con anticoagulante.
proteína plasmática no incubada. En este caso, los resultados se expresan en g%
. Colocar una gota de plasma sobre la placa del medidor de sólidos totales.
(equivalente a gramos por decilitro: g/dl). Los resultados se pueden convertir a
.ri Presionar la tapa de plástico para esparcir el plasma por encima del prisma.
mg% (equivalente a miligramos por decilitro: mg/dl) multiplicando por 1000 (des-
,lj. Se toma la lectura de las proteínas plasmáticas a partir del gráfico adecuado.
plazando la coma del decimal tres lugares hacia la derecha).
(Algunos refractómetros disponen de tres escalas: una para las lecturas de

::,
proteína total y dos para lecturas de gravedad especifica).
El prisma debe limpiarse con agua destilada y papel limpiaobjetivos.
F Ejemplo: Lectura de proteína plasmática
]
7,4 g/dl,

Resultados F I Lectura tras la incubación 7.0 q/dl I

Los resultados se registran en gramos/decilitro.


F
ffi
E
ffine*tus *$w *;x*grm pmlr"üf$r'$m'n V I rrt¡crrorirl, k¡s frotis deben estar libres de crestas u otras irregularidades
E r ¡l: ¡rtrclieran impedir una distribución uniforme de las células.
El análisis microscópico de los componentes celulares de Ia sangre se lleva a
üJ
E ú l)clx; llaber una dispersión progresiva de células, de tal forma que la den-
cabo mediante la preparación y tinciÓn de un frotis de sangre periférica. Existen lrirlad vaya de más a menos. Así, las variaciones en el tamaño de la gota
dos métodos de preparación: el método del cubreobjetos y el método del rk; r;irngre y en el ángulo que forme el portaobjetos extensor con el inferior,
portaobjetos. ¿rleclarán al grosor y longitud del frotis de sangre. Una gota de sangre más
EI fl métoOo del cubreobjetos se basa en el uso de dos cubreobjetos, del nÚ- r¡rande y un ángulo más grande aumentarán el grosor y disminuirán la lon-
mero I o 1 ,5 (22 mm'?) para frotis de sangre. gitud del frotis.
Vf Se coloca una pequeña gota de sangre sobre uno de los cubreobletos, m Para poder realizar el análisis diferencial de leucocitos se necesita una mo-
se invierte y se sitÚa sobre el otro, de modo que entre ambos se consiga nocapa uniforme de células; al final del podaobjetos debe quedár una figura
la figura de una estrella de ocho puntas, La sangre difundirá entre ambos en forma de ountas de oluma.
cubreobjetos rápidamente y de manera uniforme. Justo cuando la sangre g Los cúmulos de plaquetas, si los hay, harán que el extremo en forma de
haya difundido, separe los cubreobjetos rápidamente y con decisión des- puntas de pluma tenga un aspecto rugoso.
lizándolos uno contra el otro a lo largo del plano paralelo a sus superficies.
EI Microscópicamente no debe haber acumulación de leucocitos en el extre-
Los cubreobjetos deben secarse al aire boca arriba. mo en forma de puntas de pluma.
EJ Los cubreobjetos se pueden manipular para tinciÓn colocándolos en un
corcho. l)navez teñidos, el cubreobletos debe colocarse sobre un por- # fot beneficios del método del porlaobjetos para la preparación de frotis
taotrjetos para su análisis microscópico. de sangre periférica es que el portaobjetos es fácil de manipular tanto en la
tinción manual como en la automática. Asimismo, estos frotis son fáciles de
* fst" método de preparación de frotis de sangre periférica aporta una exce-
leer mediante microscopía convencional.
lente distribución de glóbulos blancos con poco error de muestreo.

A Un inconveniente es que el cubreobjetos es difícil de manipular y precisa Procedimiento de preparación de frotis de sangre periférica
habilidad y práctica para conseguir frotis legibles. Estas preparaciones no Principio
se oueden teñir mediante sistemas automáticos. Se extiende una gota de sangre sobre un portaobjetos y se deja secar al aire. A

EJ E método del portaobjetos se basa en el uso de portaobjetos de 7,5 x 2,5 cm. continuación, este frotis se puede teñir de la forma adecuada para su evaluación
VI Se coloca una pequeña gota de sangre en el extremo de un portaobjetos. microscópica.
El otro portaobjetos se emplea como utensilio de extensiÓn, de tal forma
Eq u i po/reactivos/material
que uno de sus extremos se coloca delante de la gota de sangre y se des- . Dos portaobjetos para microscopio, limpios, sin polvo y de7,5 x 2,5 cm.
liza oor encima del otro, extendiéndola" La gota de sangre se deja exten- . Muestra de sangre con anticoagulante.
der hacia los márgenes del podaobjetos que la contiene y a continuac¡on . Tubo capilar sin anticoagulante.
se desplaza el porlaobjetos superior hasta el extremo del inferior. El frotis
se deja secar al aire y se etiqueta en el extremo rugoso con un rotulador Procedimiento
indeleble.
E Al lcnninar, un portaobjetos será el frotis, y el otro se habrá usado como medio de
t;xlonsión.
* Recuerde que algunos rotuladores no son indelebles y que se borran con
las sustancias químicas utilizadas para las técnlcas posteriores de tinción. E Ooloque un portaobjetos sobre una supedicie plana. Mediante un tubo capilar,
coloque una gota de sangre de 2-3 mm sobre el poftaobjetos, aproXimada-
ilrcnte a 1 cm de uno de los extremos.

63
HEMATOLOGíA
r RECOGIDA DE MUESTRAS Y REALIZACTÓN DE PRUEBAS

j
Use los dedos pulgar e Lndice para sujetar este portaobjelos sobre la superlier',
plana. Con la otra mano, coloque un extremo del segundo porlaobletos lustct f
i^t-^+^ ¡^ t^
uer¿ir ile ue ^^+^ ¡^
ra gora ue sangre.
Sujete el segundo portaobjetos formando un ángulo de 30-45'y deslícelo ;
^..^^+-^^^^
allaSll¿:ll luu l^
la gOLa i, Sang'e.
^^+^ Ue
Deic nr rc la qannre qo evlicnr-la dclenienr-lose 9OCO antes de IOS exlremOS del
r
portaobletos.
Mediante un movimiento preciso y bien calculado, desplace el segundo por
r
taobjelos hacia el exlremo del primero. Ll total del frotis de sangre debe cuo.ir
alrededor de a pañes del poflaobletos.
F
&
Dele que el lrolis se seqle al aire.
Etiquete el extremo rugoso del frotis con un rotulador indeleble.
r -p #

Discusión
r
El grosor del frotis depende de tres variables; el angulo de colocación del porlaob- F Figura 3.2.
jetos usado para la extensión, la velocidad de extensión y el tamaño de la gota de
sangre. Fn un buen trotis de sangre, la lransición desde la zona gruesa es progre- F I rrtrs de sangre
1rr férica correcto
(linc ón de Wright
siva. Debe haber una distribución uniforme de células sin zonas que contengan
cresfas o agujeros. Esla es la zona del frotis de sangre perilerica que debe utilizarse F r¡odificada. 5Ox). s
para llevar a cabo un recuento diferencial de leucocitos (figura 3.2). Las figuras 3.1
y 3.3 representan zonas que no deben utilizarse para llevar a cabo dicho recuento.
F
F
F
r¡$
F
g
F 'il
@
F
F
Figura 3.1. Frotis F Figura 3.3. Frotis
r, rinll'Lt ¡terfórica
dc <¡norc ncr fcri¡¡
r
1
,'t
poco oenso I J(,r It:riil(lo alf)nso
r;

(tinción de Wrlghl (1 rL:ir'rrt rkr Wrigltt


S)
modificada, 50x).
r r r rr ¡ | f r', rr l;r, l¡Ox).

F I 65
I

I
RECOGIDA DE MUESÍRAS Y REALIZACIÓN DE PRUEBAS

ffiM
T
Métodos de tinción del frotis [l tJn;rvcz lunidc¡, el frotis de sangre periférica adquiere un color macroscópico
E trx;rtrkl.
EI Un frotis de sangre periférica puede teñirse mediante métodos manuales o
El rroscópicamente:
automáticos. E Mir
I rx; I lll0 cleben ser rosas.
Ml En el caso de los métodos manuales, siempre hay que seguir las instrucciones
I rx; n[rclcos de los WBC deben ser de color púrpura.
de los fabricantes, pero en términos generales, el frotis de sangre periférica se
I o:; r¡ránulos neutrófilos deben ser de color vloleta-rosa.
fija, tiñe y lava mediante un proceso que conlleva unos 1O minutos.
I rx; gránulos eosinófilosdeben ser de color naranja-rojo.
VJ La tinción puede precipitar a partir del estado de solución durante el alma-
I os gránulos basófilos deben ser de color púrpura-azul.
cenaje. Puede ser necesario filtrar la tinción antes de cada uso.
I lrs plaquetas deben ser de color purpura azul.
EI La tinción y las soluciones de tinción deben actualizarse o sustituirse segun
I as áreas sin células deben ser transparentes y no debe haber preiipitado
instrucciones del fabricante.
c1o tinción.
EJ Los recipientes Coplin deben limpiarse a fondo al menos con la misma fre-
cuencia con que se sustituye la tinciÓn.
Localización y resoluc¡én
EI Los métodos automáticos paften de sistemas de tinción que aportan veloci-
de los problemas derivados de la tinción
dad y constancia de tinción, pero son caros en comparaciÓn con los métodos
manuales. Problema
llay demasiados núcleos rosas que son de color gris pálido o azul pálido, los eri-
Principios de la tinción trocitos son de color rojo brillante o naranja, y los gránulos eosinófilos son de color
rolo brillante.
EI ft método de Romanowski de tinción de frotis de sangre se puso de moda
hasta principios de los años 1970, cuando se dieron a conocer los métodos de
Giemsa y de Wright.
E Posible causa
. Tinción, tampón o agua demasiado ácidos.
üJ fn la actualidad, la tinción de Wright es el método más utilizado. .
las soluciones con anilina utilizadas en este me-
E .
Tinción insuficiente, lavado prolongado.
EJ Las propiedades de tinción de Colocación de cubreobjetos antes de que el frotis esté seco.
todo constituyen la base de la diferenciación de glÓbulos blancos. tr Solución
EJ Existen dos tipos de tinciones: las tinciones alcalinas y las tinciones . Comprobar el pH de las soluciones, y sustituirlas si es necesario.
ácidas. E . Cambiar las tinciones y tiempos de lavado, y evaluar el efecto.
EJ Las tinciones alcalinas del método de Wright consisten en una compleja . Cambiar las técnicas de preparación del frotis.
mezda de tiaminas, principalmente azul de metileno y azur 3' E
EI La tinción ácida es una solución de eosina en alcohol metílico.
VI Cuando los núcleos y otras estructuras del frotis de sangre periférica captan E:il Problema
(lromatina nuclear azul (de excesivamente azul a negra), eritrocitos azules o verdes,

'
las tinciones alcalinas, se denominan basÓfilos, mientras que las estructuras
que captan las tinciones ácidas se denominan acidófilas o eosinÓfilas. E:I rlriinulos de los eosinófilos de color gris oscuro o azul.

Ml Otras estructuras nucleares que se tiñen con una combinaclón de ambas,


se denomina neutrófilas. E:il Posible causa
. Tinción, tampón o agua demasiado alcalinos.
.
EI En conjunto, estos términos se emplean para clasificar los leucocitos como:
basófilos, eosinófilos y neutrófilos.
E::l Tinción prolongada, lavado insuficiente, frotis demasiado denso.

E::I
I'
Solución ú Halle la porción del frotis teñido de sangre periférica en la que los glóbulos ro1os
. Comprobar el pH de las soluciones, y sustituirlas si es necesario. se distribuyen formando una monocapa de células. Mediante un objetivo de 5Ox,
. Cambiar las tinciones y tiempos de lavado, y evaluar el efecto. realice un cálculo de la media de leucocitos oor campo en un total de 10 cam-
. Cambiar las técnicas de preparación del frotis. pos. Mediante la siguiente fórmula, realice una estimación del recuento total:
Cantidad media de leucocitos/campo x 2000 = número de leucocitos/pl.
Problema
Todas las células están oálidas.
ú Las plaquetas pueden estimarse de la misma forma, a padir de un objetivo de
100x y la media de plaquetas por campo en un total de 10 campos. Mediante
Posible causa la siguiente fórmula, realice una estimación del recuento total:
. Tinción insuficiente. Cantidad media de plaquetas/campo x 20000 = número de plaquetas/pl.
¡ Lavado excesivo

Solución
. Cambiar las tinciones y tiempos de lavado, y evaluar el efecto.

Problema
Precipitados de tinción.

Posible causa
. Lavado insuficiente.

Solución
. Usar portaobjetos limpios y sin pelusas.
. Cambiar los tiempos de lavado de la tinción, y evaluar el efecto.

Problema
Áreas refractivas en los glóbulos ro¡os.

Posible causa
o Tinción diluida (artefacto agua).

Solución
. Renovar la tinción, a diario o semanalmente.

Estimación del recuento total de glóbulos blancos


y de plaquetas a partir del frotis de sangre perifér¡ca

V ?ara confirmar los recuentos automáticos debe realizarse una estimación vi-
EI
sual del recuento de glóbulos blancos. Esta estimación también puede llevarse
a cabo cuando no se dispone de análisis automático.
EI
ET
*l Eil
.,,W
ó xemnroloclR t,

3
Glóbulos blancos

:.i
0
+
q.
F
+
q.
Función y características físicas
EI Los glóbulos blancos también se denominan leucocitos.

q. Neutrófilos
H
+
Función
Los neutrófilos maduros se liberan de la médula ósea hacia la sangre periférica.
Atraviesan el endotelio vascular y sirven de primera línea de defensá frente a la
Ef invasión microbiana. Los neutrófilos son responsables tanto de la fagocitosis como
de la acción microbicida, que consiste en una quimiotaxis seguida de ingesta y
Eil
I

desgranulación, y que termina compodando la muerte microbiana. Esta acción no

dr se limita a las bacterias, puesto que los hongos, las levaduras, las algas, los parási-
tos y los virus tamblén pueden resultar dañados o destruidos por los neutrófilos.

H I

Descripción
H
I

Los neutrófilos son los leucocitos más numerosos de la sangre periférica del perro

H y el gato (figuras 4J y a.2). Los neutrófilos segmentados miden entre 10 y 12 pm


de diámetro. El núcleo, único, tiene varias hendiduras que lo dividen en lóbulos, y
lo habitual es observar de 3 a 5 lóbulos por núcleo. Cuando se aplica la tinción de
É Wright, el núcleo del neutrófilo se tiñe de color púrpura oscuro, y la cromatina es
E|I densa. El citoplasma se tiñe de color púrpura-rosado, y pone de manifiesto gránu-
los pequeños
m GLÓBULOS BLANCOS ]

]E
Linfocitos
]C
Función
C I or li¡krr;itos constituyen la primera
línea de defensa inmunitaria de la sangre peri-
Iorir;ir. I xistcn básicamente dos tipos de linfocitos: las células T y las células B. Las
r;o[rlirs I circulan por todo el torrente circulatorio y el sistema linfáilco, mientras que
l;r; r;(:[rl¿rs B suelen estar en tejidos linfáticos secundarios (como los ganglios linfáti-
rxrs). No existe diferencia morfológica entre las células T y las células B.
ff-
Descripción
Los linfocitos son más pequeños que los neutrófilos, pero más grandes que los
Figura 4.1. Neutrófilo glóbulos rolos. cuando se aplica la tinción de wright, el citoplasma de los linfocitos
segmentado en frotis adquiere un color entre azul y azul oscuro, que puede poseer pequeños gránulos
de sangre periférica
de gato (tinción de
de color rosa-púrpura. El núcleo es de color púrpura intenso, con cromatina densa
Wright modificada, (figuras 4.3y 4.4).
100x).

ffiw#.%m Cil
E1il
ffi-Wtrffi.,%W*qf'ft
c1il
1Cil ffiWM
ffiffi**w
tigura 4.2. Neutrófilo
sementado en frotis
1Eil Figura 4.3. Linfocitos

W#$5'$fim,
de sangre periférica en frotis de sangre
de perro (tinción de
Eil
periférica de gato
Wright modificada, (tinción de Wright
100x). rnodificada, 100x).

lE:t
]8il
,^l l}{ l',
GLÓBULOS

E
E
E

Figura 4.4. Linfocito


en frotis de sangre Figura 4.5. Monocito
periférica de perro cn frotis de sangre
,$rtilr r nrifpr aa alc oa+ó
(tinción de Wright
modificada, 100x). E (tinción de Wright
rrrrxlificada, 10Ox).

E
Mlmns*ütms
Función
Los monocitos fagocitan y digieren material extraño, detritos celulares y células
muertas. En la defensa frente a la invasión microbiana, los monocitos son fagocitos
Efl
menos eficaces que los neutrÓfilos. Eril
Los monocitos se liberan a la sangre periférica desde la médula ósea. Una vez
en la circulación, los monocitos pueden abandonar la sangre periférica en ausencia E=l
de inflamación, o bien pueden salir a la circulación en respuesta a una inflamación.
Una vez están distribuidos por el tejido circundante, los monocitos se transforman Eil
en macrófagos, que contienen más enzimas proteolÍticas y gránulos que los mo-
nocitos precursores. En la sangre casi nunca hay macrófagos, pero pueden ob-
tr:l
servarse en frotis de sangre capilar de casos de trastornos como la ehrlichiosis, la
histoplasmosis o la leishmaniosis.
Eil
EJ
Descripción
Los monocitos son menos habituales que los neutrófilos o los linfocitos en la san-
Eil Figura 4.6. Monocrto
gre periférica del perro y el gato. Los monocitos miden entre I5 y 20 pm de diá-
metro. Cuando se aplica la tinción de Wright, el gran citoplasma se tiñe de color
E:l r:n fro[is de sangre
¡x:rifórica de perro

rosa-púrpura, lo cual permite observar que posee finos gránulos, cuyo aspecto Eil (tint:i(rn de Wright
rr rrxlilrr:aria, 100x).
se describe como "vidrio esmerilado". El núcleo puede ser ovalado o tener forma
"arriñonada" (figuras a.5y a.Q. Eil
^l ;ril 77
GLÓBULOS BLANEOS

t
ffimsfrr'¡mffr[os
I
Función
Los eosinófilos poseen propiedades fagociticas y bactericidas pero en estos proce-
F
sos son menos eficaces que los neutrófilos. Los eosinófilos atacan a los helmintos
para matarlos, y resultan atraídos por mediadores químicos liberados por mastoci-
Los durante las reacciones aleroicas v ana[ilácLicas.

Descripción
Los eosinófilos están presentes en pequeña cantidad en animales sanos. Tienen F
un tamaño similar o ligeramente superior al de los neutrófilos. Los eosinófilos son
fáciles de reconocer mediante tinción de Wright, puesto que los gránulos citoplás- F
micos se tiñen de color rojo brillante. Los gránulos de los eosinófilos del gato pue
den ser más ovoides que los del perro (figura 4.7). Los gránulos de los eosinófilos F +I
del perro son redondos y de tamaño y cantidad bastante variabrles (figuras 4.8 y
4.9). El núcleo del eosinófilo se parece al del neutrófilo en que es segmentado, pero Fq Figura 4.8. Eosinófilo

Efl
en frotis de sangre
los segmentos pueden no estar bien definidos.
perifénca de perro
(tinción de Wright

FA rnodificada, 100x).

Eil
tril
Eil
tril
tr.il
Figura 4.7. Eosinófilo
Fil Figura 4.9. Eosinóf lo
r krs¡lranulándose

cn frotis dc qanorc
periférica de gato Eil rrr rolis de sangre
f

lxrrrfirrit:a de perro

Fil rlc Wright


(tinción de Wright (lir rr:rcirt

modificada, 100x). rr rrx lil r;rtl;r, LOOx).

Fil
^l Fil
l^
HEMATOLOGíA
.:

r':f GLOBULOS BLANCOS

rs
[$;***¡'flf

Fr¡nción
fi*¡:¡;
r:r
Los basófilos son una fuente de sustancias mediadoras de la inflamación. Si los
f:f /#Éftmi*fl$Iitrfiffi
hay, están presentes en cantidades pequeñas en la sangre periférica.
f:f, ffi ''',,..,'

i
Ei 't, ;t,

En sangre periférica casi nunca se obseryan basÓfilos. Tienen un tamaño similar al


del neutrófilo. Cuando se aplica la tinción de Wright, en el basÓfilo se obserya un
Fi
citoplasma de color púrpura claro, Asimismo, en los basófilos caninos se pueden rT Figura 4.1
',11 ir r
l. Ncutrófilo
rl;rrlo y basófilo
ri:r
Ir l Iot]s oc sangre
obsen¡ar gránulos citoplásmicos pequeños, redondos y de color púrpura, mientras
que en los basófilos felinos están ausentes. El núcleo esta segmentado pero no
hasta el mismo punto que los neutrófilos maduros (figuras 4.10, 4.11 y Al2).
ril lxrr férica de gato
(li t: ón de Wright
rrrocl I cada. 1OOx).

Fil
F{
Eil
tr:E
tr:[
trg
tril
F:N
r:tr
ra
Figura 4.10. Basófilo
en frotis de sangre
ra
perifér ca de gato f:I
ra
(tinción de Wright
modificada, 100x). lr11rr;r 4.12" ll,r ,rl Iror lroli., r1e sangre periiérica de perro (tinción de Wright modificada, 100x)

l"
ffi r GLÓBULOS BLANCOS
: :
"lill

f
ffi **9:*'qrtfr ilc*fi $lfi *,j;$il'd;a
]
Func!ón
Los neutrófilos en banda son una forma inmadura del neutrÓfilo segmentado y pue
r
den liberarse prematuramente de Ia médula ósea como respuesta a infecciones.
]
Descripción f
El neutrófilo en banda posee un núcleo en forma de herradura de caballo. Cuando
se ap|ca tinción de Wright, se obsela un núcleo púrpura que contiene cromatina
r
visible (figuras 4.13 y 4.14). El citoplasma es de color rosa claro a púrpura y puede r
contener gránulos pequeños que pueden ser difíciles de diferenciar,
r
F
tr
E
tr
tr
tr Figura 4.14. Neutrófilo en band¿ r - perro en frotis de sangre periférica
(tincrón de Wright modif cada, 100x)

tr
tr
B

r
r
Figura 4.13. Neutrófio en banda y neutrófilo segmentado de gato en frotis de sangre periférica
(tinción de Wright modificada, 100x). r
r
F
i"
ffi
T
Y'e*wnryru ff rrumm dmwmwfr ptHwmm rm mtfr wmw ffi
.,
m ffimm gffmfumfrmm fu$mrrummm
F
Los siguientes términos se utilizan para describir variaciones en la morfología
leucocitaria.
,rl,
EI Alteración tóxica

Durante el proceso de inflamaciÓn, los granulocitos pueden experimentar cam-


Figura 4.1 6. 0uerpos
bios morfológicos denominados alteraciones tóxicas. Estas alteraciones consisten
r lc f )iritlc: cn frotis

en un aumento de la basofilia de los gránulos de los neutrÓfilos y un aumento de la r I r,, ir tl1rt: periférica

cantidad de vacuolas en el citoplasma de los neutrófilos (figura 4.15). rlc ¡rcrro (f nción de
Wrililrl ntodificada,
Los cuerpos de Dóhle también son un indicador de alteración tÓxica. Los cuer-
100x).
pos de Dóhle son inclusiones citoplásmicas aisladas y de color gris azulado, de
forma redondeada u ovalada (figura 4.16).

El Neutrófilos hipersegmentados

Los neutrofilos que están hipersegmentados contienen más de 4 lóbulos o


riogmentos nucleares. Los neutrófilos hipersegmentados son células que han esta-
rJo en la circulación durante más tiempo de lo normal (figura 4.17)"

F
tr
E
E
l

E
.;"., 1"" E
i,:! Figura 4.11 .
Figura 4.15. Irrr|rx i[ry rtculróf lo
',,r i; r'*t, i:'¡ Alteraciones tóxicas E I rr¡ x'r,,c11rrentado

{;}
en frotis de sangre
periférica de gato
r r,r lrolt', rlc l;;rngre

'ffi*i
¡ r,r rllr rrr,I rk: ¡lalo
(tinción de Wright (lttl totrrkrWr¡1itl
modificada, 100x) lrrrr llf lr,rr l,r, l(X)x).
E
E
GLÓBULOS

EI Linfocitos atípicos

Este término se utiliza para describir linfocitos que son modológicamente dis-
tintos de los linfocitos normales. Esto incluye linfocitos de tamaño normal pero que
poseen un núcleo extremadamente denso y un citoplasma de color azul intenso.
Estas células también pueden denominarse linfocitos reactivos o inmunocitos
(figura 4.18). Las células con un núcleo más grande y menos denso con aumento
de citoplasma también pueden denominarse linfocitos atípicos.

E
E

E
C
E
Figura 4.1 9. Mastocito en frotis de sangre periférica de gato
E (tinción de Wright modificada, 100x).

Figura 4.18. Linfocito


atípico en frotis de E
c¡noro nerifcri¡¡
de gato (tinción de
Wright modificada,
E
100x).
F
E
EI Mastocitos

Los mastocitos son fáciles de reconocer debido a que poseen gránulos abun- E
dantes de color púrpura intenso en el citoplasma. El núcleo del mastocito suele pasar
desapercibido debido a la densidad de los gránulos citoplásmicos (figura 4.19).
E
E
E
GLÓBULOS BLANCoS]

E
Smma.smmrumfrm dm mmds$mmm$mmru E
dm fimm n'nmrutrwfü$mm
l\ll;r\,

La siguiente secuencia de maduraciÓn se describe para exponer las diferencias


mor.fológicas de las células inmaduras en la línea celular neutrofílica. La producción
^du ,
de leucocitos queda fuera del objetivo de este texto y se describe en muchos libros hlm
de texto sobre hematología veterinaria. Animamos al lector a ulilizar estas referen-
cias para confirmar hallazgos anÓmalos.
i

Srurüe ffirflmMlffiffi{tiffiffi
Figura 4.21.
EJ Mieloblasto I'ror¡ elocito en frotis
cit: sangre periférica
El mieloblasto presenta una forma ligeramente ovalada. Esta célula está forma- de perro (tinción de
Wright modificada,
da por un citoplasma azul con un gran núcleo que contiene promtnentes nucleolos
100x).
dentro de una cromatina fina y laxa (figura 4.2O).

EI Mielocito

El mielocito neutrofílico contiene un núcleo excéntrico que carece de nucleoros.


El citoplasma es más claro y el patrón granular es menos denso que el observado
en el promielocilo (figura 4.22).

t
E
Figwa4.2O. F
r
Mieloblasto en froiis
de sangre periférica
de perro (tinción de
Wright modificada,
100x). E
VI Promielocito E:I Figura 4.22.
l\4iolocito en frotls

El citoplasma del promielocito contiene gránulos tanto de color rosa como de


color púrpura. El núcleo contiene nucleolos menos diferenciables que el mieloblas-
Iil ilo *rrrgre periférica
t k: ¡ x:rro (tinc ón de

Wr lllrl nrodif icada,


to (figura 4.21). f:l I 00x)

*l I:il ru,
I
HEMATOLOGíA r GLÓBULOS BLANCOS

r
lX[ Metamielocito lv'] f l, ,iltlltl r,r rr lr rtclllrrkr
¡
El metamielocito contiene un núcleo hendido con gránulos citoplásnrii;or ; | | r rr rr ;r x r n lir;o rkr reLrlrófilo segmentado tiene varias hendiduras que dividen
azurófilos (figura 4.23). F r'lrl( f( rr:r rlirrlrloltLllos(fiEra4.24). El nÚcleosetiñedecoiorpúrpuraoscuro,y
L ( rlrr rr rl rr r ():; rkltilil. El citoplasma se tiñe de color pÚrpura-rosado, y se obser
F \,, rtl | )( )r ¡r tct tr l; rlTiinulos.

t
F
F
F
F
F
F
4
F
F
Figura 4.23.
Metamielocito en F
frotrs de sangre
nari{orir ¡ rlo norrn
(tlnción de Wrght
F
modificada, 100x)
F Figura 4"24. Ne utróf lo segmentado y neutróf lo en banda en frotis de sangre perifér r:a rle perro
(tinclón de Wright modif cada, 100x).
tr
l7l Neutrófilo en banda
tr
El neutrófilo en banda posee un núcleo en forma de herradura de caballo. Este
núcleo es de color púrpura y contiene cromatina visible. El citoplasma es de color tr
rosa claro a púrpura y puede contener granulos pequeños (igura 4.24).
tr
tr
F
l''
W
r I r HemRtolocfn
t
Glóbulos roios

s
W

-t

I W
Función y características físicas
Función
El I os glóbulos rqos sirven de vehículos transportadores de ox(geno adquiriendo
oxíc¡eno en el pulmón, llevando oxígeno a las células que lo necesitan de cual-
rlriier parte del cuerpo, intercambiándolo por dióxido de carbono y llevando
cste dióxido de carbono de nuevo al pulmón para que este órgano lo elimine
rrediante la espiración.
V Este ciclo es continuo y se repite durante toda la vida del glóbulo rolo.
g La hemoglobina es el principal componente de los glóbulos ro1os y es la res-
ponsable del transporte del ox(geno y del dióxido de carbono.
EI CaOa molécula de hemoglobina está formada por:
. Cuatro grupos hemo, cada uno de los cuales contiene un átomo de hie-
rro en estado ferroso.
Cada grupo hemo está situado cerca de la superficie de la molécula ,
es responsable de combinarse de forma reversible con una molécula de
ox(geno o de dióxido de carbono.
. Dos pares de cadenas polipeptídicas de globina.

Características f ísicas
EI Los glóbulos rojos son discos bicóncavos anucleados que se tiñen de un color
entre ro¡o y nararya-rojizo con la tinción de Wright.
EI Los glóbulos ro1os se describen en función de su tamaño , tormay grado de
palidez central. La palidez central es una zona de tinción más clara situada en
el centro del glóbulo rolo.
EI Los glóbulos rojos del perro son de tamaño constante, miden unos 7 um de
diámetro y tienen una palidez central acentuada.
VI Los glóbulos ro¡os del gato son de tamaño variable, y miden unos 5 pm de

F.il diámetro, con una palidez central menor que la de los del perro.

Fil Recogida de muestra

Eil EI Las muestras de sangre deben recogerse mediante la técnica de punción ve-
rlr¡t;¿r sistemática.

Bfl
Efl I

I
ú para conseguir valores de hemoglobina y recuentos de glóbulos rolos es nece- @ Parael método automatizado, los glóbulos rojos se cuentan mediante impe-
sario disponer de sangre completa. dancia eléctdca.
Ef El anticoagulante de elección es el EDTA.
ü[ Coulter desarrolló y comercializó por primera vez el método de la impeoan-
cia eléctrica a principios de los años 1960. Este método ya no se limita a
los instrumentos Coulter, y hoy en día se utiliza mucho,
Análisis de laborator¡o W gn lo. sistemas automáticos basados en la impedancia eléctrica, se diluye
una gota de sangre completa con anticoagulante en una solución electro-
EI Los glóbulos rojos pueden contarse mediante métodos manuales o automáti- lÍtica. La solución resultante de células sanguíneas se hace pasar por un
cos. pequeño orificio situado entre dos electrodos. Este orificio se dgnomina la
ú para6 método manual, los glóbulos rojos se cuentan de forma microscópica apertura. Un volumen determinado de sangre diluida se desplaza por la
mediante un hemocitómetro. apertura durante un determinado periodo de tiempo. A medida que los gló-
o se diluye una muestra de sangre bien mezclada con el anticoagulante EDTA bulos rojos se desplazan por la apertura, inhiben el flujo de corriente eléc-
en la proporción 1:200 en solución de oxalato amónico alO,85o/o' trica que pasa por dicha apertura. Los cambios de corriente detecraoos
. Se carga un hemocitÓmetro, se cuentan como glóbulos rojos. El instrumento acumula estos camblos v
. Microscópicamente, los glóbulos rojos tienen aspecto de células redondas. termina registrando la cifra final como recuento de glóbulos ro1os.
. Los glóbulos rojos se cuentan en 5 recuadros pequeños del recuadro
EI La hemoglobina puede evaluarse mediante métodos manuales o automá-
cenlral.
ticos.
La cantidad de glóbulos rojos por milímetro cúbico (1 mm3 = 1 pl) se calcula del EI En bs métodos manuales, la hemoglobina se determina por colorimetría.
siguiente modo: Existe un método comercial de cianometahemoglobina modificado (Uno-
pette, Becton-Dickinson, Rutherford, NJ). Se trata de una solución estándar
Número de células contadas x Dilución (200) x Profundidad (10)
cómoda y estable.
x 5 (1/5 de mm2 contado)
Para este método, se diluye sangre completa con el diluyente adecuado y
se lee mediante espectrofotometría 840 nm). La.concentración de hemoglobi-
Ejemplo: Se han contado 450 glóbulos rojos en los 5 recuadros pequeños ' na se determina mediante una curva que deriva de concentraciones conocidas
del recuadro central.
de hemoglobina.
Cálculo: número total de glóbulos ro¡os = 450 x 200 x 10 x 5
Debido a la excesiva cantidad de tiempo necesario para esta técnica, este
ErI método de determinación de la hemoglobina puede no ser práctico en el con-

El texto del laboratorio clínico.

ú Para los métodos automáticos, se aplican los mismos principios de

Se puede adquirir comercialmente el sistema Unopette (Becton-Dickinson, Ru-


q análisis.
Se aspira una muestra de sangre completa y se mezcla con una solución
therford, NJ).
El método manual de análisis de glóbulos rolos es tedioso y tiende a la inexac- EilT electrolÍtica. se añade otro reactivo que lisa los glóbulos rolos. A continuación,
se libera hemoglobina. Se emplea la espectrofotometría para medir la concen-
titud. Por ello, muchos laboratorios clínicos habían eliminado el sistema de re-
cuento manual de glóbulos rojos del CBC antes de la llegada de la tecnologÍa
EII tración de hemoglobina en la solución.

automatizada
il Las determinaciones del hematocrito se describen en las páginas 54-58.

GIT
Índices de glóbulos roios M Vt;V rx; ol vo[rrnen medio por glóbulo rolo. Es un indicador del tamaño celular.
I l;to v¡rlor, al compararlo con el intervalo de referencia propio de la especre,
[l La mayoría de instrumentos automáticos calcula y registra índices de glÓbulos
¡xrrnriter clasificar a los glóbulos rolos en:
rojos.
* Nomocíticos: el valor se sitúa dentro del intervalo de referencia, son qlóoulos
# fo. indices de glóbulos ro1os son útiles para clasificar las anemias. rojos rie tamaño medio.
EI A partir del recuento de glóbulos rojos, hemoglobina y hematocrito del pacien- * Microcíticos: el valor queda por debajo del límite inferior del intervalo de referen-
te, los índices de glóbulos rojos pueden calcularse del siguiente modo: r:ia, son glóbulos rojos menores que el tamaño medio.
* Macrocíticos: el valor queda por encima del límite superior del intervalo de refe-
rencia, son glóbulos rojos mayores que el tamaño medio.

M |\¡C¡ es el peso medio de la hemoglobina por glóbulo rolo.

* Un valor de MCH que esté por deb4o del límite infedor del intervalo de referen-
cia de la especie indica que el peso de la hemoglobina de los globulos ro1os es
menor oue el oeso medio.
* Un valor de MCH que esté por encima del límite superior del intervalo de refe-
rencia de la especie indica que el peso de la hemoglobina de los globulos rqos
és má\/or nr re el nesn ¡¡gflig.

EI VCIC es la concentración media de hemoglobina por glóbulo ro1o. Este varor,


comparado con el intervalo de referencia propio de la especie, permite clasificar
a los glóbulos rojos en:

{} Normocrómicos: el valor se sitúa dentro del intervalo de referencia, son glóbu-


los rolos cuya concentración media de hemoglobina está dentro de la media.
F * ¡ipocrómicos: el valor se sitúa por debajo del lírnite inferior del intervalo de refe-
rencia, son glóbulos rojos cuya concentración media de hemoglobina está por
F debajo de la media.
S
F Hipercrómicos: el valor se sitúa por encima del límite superior del intervalo de
referencia, son glóbulos rolos cuya concentración media de hemoglobina está
Ejemplo: Un gato de 5 años tiene un recuento de glóbulos rojos de
nnr pncim: do le modj¿.
9,79 x 106/mm3, hemoglobina de 15,5 g/dl y hematocrito de F
44.2o/o.
F
E
EII
E:I
*l Eil
Terminología relativa
a los glóbulos rojos
Existe gran variedad de términos que se utilizan para describir variaciones hema-
tológicas del glóbulo ro1o. Los siguientes términos se emplean para describir su
modología.
Las variaciones anómalas del tamaño del glóbulo rojo se denominan anisocito-
sis. Los siguientes términos se utilizan para describir la anisocitosis y, a menudo,
para describir variaciones de tamaño o variaciones del volumen del glÓbulo ro1o.

üJ Los glóbulos rojos normocÍticos tienen un tamaño situado dentro de la media,


el MCV se sitúa dentro del intervalo de referencia (figuras 5.1 V 5.2).
üJ Los glóbulos rolos microciticos presentan un tamaño inferior a la media, el MCV Figura 5.2.
se sitúa por debajo del limite inferior del intervalo de referencia (figura 5.3). Glóbulos rolos
normocÍticos en
EI Los glóbulos rojos macrocÍticos tienen un tamaño superior a la media, el MCV un frotis de sangre
se sitúa por encima del límite superior del interyalo de referencia. periférica de perro
(tinción de Wright
modificada, 1OOx).

F
F
F Figura 5.3.
Anisocitosis,
Figura 5.1. m¡crocitos y
Glóbulos rojos
normocíticos en
F rracrocitos en
¡ilribLrlos rolos de
un frotis de sangre rir) lr(t¡s de sangre
periférica de gato
(tinción de Wright
F ¡xrrikrrica de perro
(lirrrrion de Wright
modificada, 100x).
E rr ri x lif ic;lrl¡t, 1OOx).

E
Eil
101
F
Las variaciones en la forma del glóbulo rojo se denominan poiquilocitosis. Los
glóbulos rojos que presentan formas anómalas se denominan poiquilocitos (fi- F
gura 5.4). Existe gran variedad de términos que se utilizan para describir formas
específicas de glóbulos rojos, y pueden relacionarse con estados concretos de
enfermedad.

Figura 5.5.
I :;fcrocilos en un
.' lrotrs de sangre

Fil ¡xrriférica de perro


(l nción de Wright

F{
rrroclificada,1OOx).

F=il M Los estomatocitos poseen una palidez central en forma de rqa circunoaoa
H por una zona densa (figura 5.6). Esto confiere a la célula un aspecto de boca
humana. Los estomatocitos derivan de defectos en la membrana del glóbulo

Fil ro1o. Estas células pueden estar presentes en casos de anemia hemolÍtica.

FT
tril
Eil
Figura 5.4. Poiquilocrtosis en glóbulos rolos de un frotis de sangre periférica de perro
(tinción de Wright modificada, 100x).
Fil
Fil
M
' Los esferocitos tienen un cociente superficie/volumen disminuido. Estas cé-
lulas son hipercrómicas y carecen de palidez central. El grado de esfericidad
tril Figura 5.6.
I stomatoc tos en

puede variar entre glóbulos rojos. Los esferocitos suelen hallarse en anemias
hemolrticas, pero son difíciles de determinar en el gato debido al pequeño ta
Fil r n lrotis de sangre
¡xrrilcrica de perro

maño de los glóbulos rojos felinos (figura 5.5). F:I (lirrt;ii'rn de Wright
r r lr xlrf ii:ada, 100x).

F,il
trl F{t
l'*
EFI
EI Los equinocitos presentan múltiples protrusiones o espículas de márgenes * I
',,'
células espinosas son equinocitos con múltiples espículas puntiaguoas
(li11rrra b.8). Se producen por una rotura de la membrana celular. Pueden obser-
redondeados, que pueden ser romas o puntiagudas, y que se distribuyen de
viu:;o É)n la enfermedad renal.
manera uniforme por todo el glÓbulo rolo (figura 5.7). Los equinocitos con espÍ-
culas romas también se denominan glóbulos rojos crenados. Aunque estas * t ,rs acantocitos tienen múltiples espículas digitiformes e irregulares (figura 5.9).
[]c suclen relacionar con enfermedad heoática.
células suelen Ser un artefa6to in vitro,los equinocitos pueden aparecer debido
a distintos trastornos metabólicos.

+l¡ +*$r"$g;;r
iilir
i,

Figura 5.8.
Células espinosas en

'Ifu- un frotis de sangre


nartfáriea do norrn
(tinción de Wright
modificada, 1O0x).

Figura 5.7. Glóbulos rojos crenados en un frotis de sangre periférica de perro


(tinción de Wright modificada, 100x).

tigura 5.9.
Acantoc¡tos en un
lroti< de q¡norp

E:T 1x:ril(rrica de pero


(lirri;irin de Wright
trrrxlif ir:ada, l00x).

Efl
"t
1ñL I F{il
o HrunroLocía F GLOBULOS ROJOS o
I I
F
# Lu. células diana (leptocitos, codocitosl Oo.""n una palidez central car¿rct¡ lvl | , , , .v;rlor;itos .
rística que confiere a la célula el aspecto de una diana (figura 5.1 o). Las células
j ¡ rv rl,¡ i,r (Írr¡Lrrtr 1r.
cli¡
I 1).
rlocilos tienen forma ovalada y poseen una palidez central

diana poseen un exceso de rnembrana celular en comparaciÓn con la canticlacj It1 I r r:


' r¡rrcrAtocitos :;r¡n células con dos protrusiones en forma de cuerno (figura
de hemoglobina, y suelen obseruarse en caso de enfermedad hepática.
F r)l')
F {l l} I l,
",, '
r;r'rlLrl¿rs similares, que contienen un arco de membrana entre las dc¡s

¡ rroyccciones se denominan células en ampolla


F
F
''i) F
F
F
'1.,.i
F
i,, ,i Figura5.l1.
tr (Jvalocitos en un
frotis de sangre
perifér ca de gato
(linción de Wright .t
rn¡xlifcada,100x).

tr ,:g
ru

Figura 5.10. Células diana er un frotis de sangre perférica de perro


FT
(tinc ón de Wright modif cada, 1OOx)
trT
/
Fil
Fil W

ril Figura 5.12.


()ili'1,11(n 1()S (]l]
lrll
ril Lr r

l)r'llll' 1,1
,rk',;;trr¡1tc

(1ir 1 11 )t t(l(,Wtillltl
{l() lxlllo

Fil rtr¡illr rri,r l(X)x)


rT
EI tnlosglóbulosroloshipercrómicos,ol vlrkrr rkrMol lorirr;ilLlrlxrr cl
límite superior del interualo de referencia, son glóbulos rojos cLrya c)olr;cr tlr,
rr;lrrrlt:i
ri; ul r
r qr Inclusiones de glóbulos rojos
ff tl punteado basófilo está constituido por gránulos azules de tamaños varia
media de hemoglobina esta por encima de la media (figura 5.16).
La hipercromasia se relaciona con hemólisis y con la presencia de esferoc [os. É ;Ir bles dentro del glóbulo rolo. En la mayoría de los casos, estos gránulos son
üX Los glóbulos rojos policromatófilos (que presentan policromasia) son rras ARN residual y representan reticulocitosis. El punteado basófilo también puede
grandes que los glóbulos rojos maduros y se tiñen de color gris-azulado (figura
F :*r ser consecuencia de una intoxicación por plomo (figura 5.18). También puede
5.17). Estas células jóvenes son reticulocitos cuando se t¡ñen con nuevo azul de
metileno.
rT observarse en anemias reqenerativas.

F
=n
F
=il
q.> r =il
F
=il
F
Figura 5.16.
=tr
G óbu os rojos
hipercrómicos en
F {
un frotis de sangre
^^- f^-i^^
pc¡ t^ ^^--^
cilLd uú pcilu F il
F q¡
(tinción de Wright
mod ticada, 100x).

r{
ri:
r ET
r
r +n
t
Figura 5.18. Punteado basófi o en un frotis de sangre perifér ca de perro

H
(tinción de Wright modificada, 1OOx)

Figura 5.17.
r
Glóbulos rojos
policromatófilos en t =[
un frotis de sangre
perférica de perro
(tinción de Wright
t Tr
mod ficada, 100x).
F
Tr
I +r 111

I
M Los cuerpos de Howell Jolly son inclusiones de color púrpura oscuro en gló- EI Los cuerpos de Heinz no son fáciles de identificar en tinciones de Wright, pero
bulos rojos y miden aproximadamente 1 Lrm de diámetro. Estas inclusiones cuando se emplea la tinción nuevo azul de metileno, tienen aspecto de inclusiones
son fragmentos remanentes de cromatina nuclear y a menudo se hallan en de color azul pálido (figuras 5.2O y 5.21). Estas inclusiones miden de 1 a 4 pm
pacientes con anemia regenerativa y trastornos esplénicos, y en pacientes es de diámetro. Los cuerpos de Heinz se forman en los glóbulos rolos cuando la
plenectomizados (figura 5. 1 9). hemoglobina se desnaturaliza y precipita. Pueden ser consecuencia de una lesión
oxidativa.

i",,r., ill
,":"\ ;: *:,,** ,i,"T,

i'l
i.",-j "l; 'ii) *:i
i i:.r
i ; ';. il: -i.il* i
'iii.,",oi'

# {t #{fr'
rd'"i[
l*! ilI F r:'l:l is 'il)
ttr.,rni F Figura 5.20. Cuerpos
',iTJ,

',,f,;
i#u,.,.,,1,
F de Heinz en un frotis

j;.: jl,J'il] ''-.,J'


de sangre periférica
de gato (trnción de 't,',''
{
r;:;
$: Wright modificada,
1OOx).
'i"',,,,,,i iltm* iT
{r*
F
*'",
i,")
,-.'fi F
ii'

t"
Figura 5.19. Cuerpo de Howell Jolly en un frotis de sangre periférica de gato (ttnción de Wright
modificada. 1O0x). F
F Figura 5.21.

F Cuerpos de Heinz en
un frotis de sangre
periférica de gato
F (tinción de nuevo
azul de metileno,
1OOx).
E

I"'
GLÓBULO$

E
y
Los residuos de agua muestran un aspecto de inclusiones refractivas a me-
Parásitos sanguíneos
ú C
nudo son de tamaño y forma variables. Este artefacto es consecuencia de una
EI En frotis de sangre periférica pueden hallarse parásitos sanguíneos (figuras 5.24
técnica de tinción inadecuada ffigura5'22)'
púrpura de tama-
E v 5.25).
@ El precipitado de tinciÓn iiene aspecto de gránulos de color
en una zona
ños variables (figura 5.23). Estos gránulos pueden concentrarse
E
del frotis, o bien pueden estar distribuidos por toda la superficie. Este artefacto
puede evitarse aplicando técnicas de tinción adecuadas' É-

qfi} E
*-*T
'ffhT;ru'* '.t',.F
E
.w Ert
ff'
ffiry@ &;*
%-ffi
.ffi' .s"F Irt
¡rl
1' t" Figwa5.22.

str &]"
* Artefacto residuo
de agua en un frotis
Érl Figura5.24.
Dirofilaria en un

-* "r -..M#re
-,:."
de sangre periférica
de gato (tinción de l¡I
frntic .lc q¡norc
periférica de perro
(tinción de Wright

" 5Y
Wright modificada,
100x).
lrr modificada, 10Ox).

rrr
:l'fl'1 i
].r
/ffi
W
.\
,
].1 \:'':
"\éli. til
TEI
W
Figura 5.23.
E:I Figura 5.25.
Artefacto preciPitado
de tinción en un
E¡T Mycoplasma
haemofelis en un
frntis do qanorc
frotis de sangre
periférica de peno
(tinción de Wright
t¡f periférica de gato
(tinción de Wright
modificada, 100x).
E¡T modificada, 10Ox).

Eil
l:
114 |

I
I
Organización celular en el frotis de sangre periférica
Mt Se produce solapamiento celular en zonas del frotis de sangre periférica en
que los glóbulos rojos, los glób,ulos blancos y las plaquetas no están distribui-
las
l
]
I
I

I tr
M La autoaglutinación es la formación de grumos o agregados de glóbulos rqos.
dos de manera uniforme. Este arlefacto puede confundirse con inclusiones de La aglutinación puede observarse en enfermedades hematolóqicas inmunome
glóbulos ro1os. tr! diadas (figura 5.27).
ffi El fenómeno "rouleaux" es la disposición de glóbulos rojos en "pila de mone-
das" (figura 5.26). Esta descripción denota una disposiciÓn lineal y organizada ]
de glóbulos rojos que es más habitual en el gato, Las "pilas de monedas" pue-
=il
den ser un hallazgo anómalo y se asocian a enfermedad inflamatoria. T trl
r il
I trl s*;.I tF
s
;i
t lrqsr
fiJ"
*
s
',r\

r FN *,.-*# w
ü
.."' 'o{i\
r trl t

r _il üJ*
o, !
'ifs
t\ -{w "i/'

; +r *'$iis
r fr "F"
*

ls
F
$[
T v ffi-
ww. " #
r
]
F .d

F
Figura 5.26. Eritrocitos en 'pila de monedas"en un frotis de sangre periférica de gato
(tinción de Wright modificada, 1O0x).
¡
I ET
r ,in
Figura5.27. Autoaglutinación en un frotis de sangre periférca de gato
(tinción de Wright modificada, 50x)
I
F
t tr
t
F
il r17
Producción de glóbulos rojos t
Los glóbulos rojos se producen en la médula Ósea. La presencia de glóbulos rolos t ú El rubricito es más pequeño que el prorrubricito, tiene el núcleo redondo sin
inmaduros en la sangre periférica, sobre todo de glÓbulos rojos nucleados sin poli- nucleolos; el núcleo contiene grumos de cromatina y el citoplasma es principal
cromasia proporcional. indica patologra. mente azul, pero con cantidades crecientes de azulrojizo.

EJ E rubriblasto es una célula grande con un núcleo grande y redondo, cromatina


m El metarrubricito es más pequeño que el rubricito; el núcleo es excéntrico,
pequeño y con cromatina densa; el citoplasma es de color azulrqizo.
granular, nucleolos prominentes y citoplasma de color azul oscuro (figura 5.28).
El prorrubricito es una célula grande, a menudo tan grande o más que el rubri-
m El eritrocito policromatófilo es una célula pequeña y sin núcleo; el citoplasma es
M E
de color entre azul y azulrojizo, según la madurez.
blasto, de núcleo redondo y con nucleolos mal definidos o ausentes, cromatina
gruesa y citoplasma predominantemente azul, pero con trazas de rojo (figura t- m El glóbulo rojo maduro es una célula pequeña, que se tiñe de rojo, en forma de
disco bicóncavo v con oalidez central.
5.29).
E

ij, , I

T
Figura 5.29.
Prorrubricito,
E rubricito,
metarrubricito,
y neutróftlo
segmentado en
un frotis de sangre
periférica de perro
(tinción de Wright
modificada, 1OOx).

r=l
=!
il
Figura 5.28. Rubriblasto en un frotis de sangre periférica de perro
(tinción de Wright modificada, 1OOx). ir
:I
:r
i
l

Reticulocitos EI Los reticulocitos punteados son glóbulos rojos más pequeños y tienen
ARN residual que presenta un patrón intracelular,,punteado', o ,'granular',.
Este tjpo de reticulocitos suele hallarse en el gato (figura 5.Bl
EI Los reticulocitos son glóbulos rojos inmaduros que se liberan de la médula ósea ).

como respuesta a una hipoxia tisular. Durante periodos de intensa necesidad,


EI En perros y gatos sanos, la cantidad de reticulocitos es baia.

los reticulocitos pueden ser liberados de la médula ósea a la circulación de


forma prematura.
El Los reticulocitos son metabólicamente más activos que los glóbulos rojos ma-
duros. La cantidad de reticulocitos de la circulación ouede utilizarse como in-
dicador de actividad de la médula ósea y de su respuesta a la anemia. Esta {'}
-4
respuesta depende de la especie, del tipo de anemia, del alcance de la ane-
mia, de la duración de la misma y de la presencia de estados de enfermedad
\ J&: r 'lop
'gX

EI
concurrentes.
La reticulocitosis es el rasgo distintivo de una intensificación de la producción
E I
de glóbulos ro1os.
\
E 4*

E
Figura 5.30.
Reticulocitos
agregados en un
#
Hallazgos de laboratorio frntiq dc c¡noro
periférica de perro
ül Los reticulocitos son glóbulos rojos inmaduros y sin núcleo en los que se ob- E (tinción nuevo azul
serya un patrón intracelular característico una vez teñidos con tinción supra- de metileno, 10Ox).
vital. Los reticulocitos oueden cuantificarse mediante métodos automáticos o E
manuales. Asi, en los métodos automáticos se usa citometría de flujo. Para
cuantificar reticulocitos mediante el método manual, se incuba una muestra de l
sangre con anticoagulante con tinción supravital, y se prepara un frotis sanguí-
neo. Se rea|zaun recuento de reticulocitos al microscooio. t
ldentificación microscóp¡ca *-
EI A ác¡Oo ribonucleico residual, las mitocondrias y los orgánulos de los glóbulos
rojos se tiñen de color púrpura oscuro en el interior de unos glóbulos ro1os que
/t@il
con la tinción supravital nuevo azul de metileno se tiñen de azul claro.
#
{} CuanOo se tiñen con tinción de Wright, los reticulocitos tienen aspecto de Figura 5.31.
Reticulocitos
glóbulos rojos policromatófilos. Estas células suelen ser macrocÍticas. punleados y
agregados en un
EI Existen dos tipos de reticulocitos: agregados y punteados. frotis de sangre
üJ Los reticulocitos agregados son células de tamaño más grande y poseen periférica de gato
(tinción nuevo azul
retículo nuclear residual que presenta un patrón intracelular más grueso
de metileno, 100x).
(figura 5.30).
f
üJ La respuesta de los reticulocitos depende de muchos factores, como la espe- Procedimiento
cie, la gravedad, tipo y duración de la anemia, y la existencia y tipo de enferme-
]
1. Coloque volúmenes iguales de nuevo azul de metileno y sangre del paciente en
dad concurrente.
É un tubo de ensayo de 12 x 75 mm.
El Durante una anemia regenerativa, el perro responde enérgicamente con reticu-
2. Mezcle la sangre y deje que repose durante 15 minutos.
ln¡itnc ¡nronadnc
3. Prepare un frotis como el explicado anteriormente.
También hay reticulocitos punteados, pero son demasiado escasos como
4. Cuente 1000 glóbulos rojos consecutivos, diferenciando entre glóbulos rojos
para contarlos de forma independiente de los agregados. E=il normales, reticulocitos punteados y reticulocitos agregados. Lo óptimo es con-
ül En el gato se observan tanto reticulocitos agregados como punteados. Los
agregados maduran pasando a convedirse en punteados, en cuestión de 12
FT tar glóbulos rojos en la monocapa, donde no existe solapamiento de células.
5. Calcule los dos tipos de reticulocitos y registre el resultado a modo de
horas, tras la liberación desde la médula Ósea. Los reticulocitos punteados ma-
duran pasando a convertirse en eritrocitos en unos 10 días. La mayoría de labo-
F! porcentaje.

EI
ratorios enumera los reticulocitos a modo de grupo o bien sólo los agregados.
Los reticulocitos de estrés son reticulocitos que se liberan de la médula osea
F=l Formas de recuento
de forma prematura. Estos reticulocitos se liberan al torrente circulatorio duran-
te periodos de excesiva demanda y persislen en la sangre durante mas tiempo
F+il Los reticulocitos pueden registrarse a modo de porcentaje, recuento absoluto, por-
centaje de reticulocitos corregido o índice de producción de reticulocitos (RPl).
debido a su liberación prematura. En general, los reticulocitos de estrés son F+il
significativamente más grandes que los glóbulos Oos maduros.
Porcentaje de reticulocitos
E=il
EI fste valor se obtiene en el punto 5 del procedimiento anterior.
Recuento de reticulocitos: método manual F:lil $ En pacientes anémicos, este método de enumeración suele dar como resulta-
Cuando se mezcla sangre completa con pades iguales de nuevo azul de metileno,
los restos nucleares se tiñen de un color azul oscuro. E=l do una respuesta de reticulocitos falsamente aumentada. Ello se debe al hecho
de que hay menos globulos ro¡os maduros en la circulacion y, por tanto, parece

Equ i polreactivoVmaterial
f=[ que, en comparación, la respuesta de reticulocitos es mayor La presencia de
reticulocitos de estrés también puede justificar un aumento del porcentaje de

ü lvluestra del paciente en tubo de EDTA.


E+r reticulocitos.

.
r
Nuevo azulde metileno.
Podaobjetos.
EEil Recuento absoluto de reticulocltos
ü Microscooio óotico con disco Miller.
E-+r [l El recuento absoluto de reticulocitos se calcula multiplicando el porcentaje de
reticulocitos por el recuenlo de glóbulos rojos.
Er+l EI fste método corrige el aumento proporcional explicado en el apartado
anterior.
E-+r
I

E+T
Eln
HI
I
GLÓBULOS
) HEMATOLOGíA
I
Tabla 5.1. Anomalías en neutrófilos: cantrdad media en un campo de 100x.
Porcentaje de retict¡locitos corregido
el porcenta¡e
EI El porcentaje de reticulocitos corregido se calcula multiplicando
por el PCV "nor
de reticulocitos por el cociente del PCV del paciente dividido Citoplasma espumoso.
mal" de la esPecle. Basofilia moderada difusa o localizada
Los cuerpos de Dóhle en gatos
Baja I-IO%
se consideran una alteración tóxica leve.
índice de produccién de retlculocitos (RPl) Moderada Citoplasma espumoso o con vacuolas"

MJ n índice de producción de reticulocitos se calcula dividendo el


porcentaje de Basof ilia de moderada a marcada, difusa o Moderada 11-50%

reticulocitos corregtoopor el tiempo de maduración de los reticulocitos Esto localizada. Cuerpos de Dóhle.
que depende del
corrige la liberación prematura de reticulocitos de estrés' Elevada Citoplasma espumoso.
grado de anemia. En el perro, el tiempo de maduración de reticulocitos es: Basofilia moderada difusa o localizada
Elevada 51-100%

PCv45%=1día,PCV35%=1,5días,PCv25%=2días,PCV15%=2,5díras. T.
1 y 2 indica
V! En et perro, un RPI < 1 indica anemia no regenerativa' entre
una médula osea activa y regenerativa, > 2 indica eritropoyesis acelerada, ri Tabla 5.2. Morfología de glóbulos rojos: cantidad media en un campo de 10Ox

y > 3 indica una respuesta significativamente regenerativa


anemia hemolÍtica (respuesta a hemÓlisis o hemorragia)'
relacionada con
f.
E Policromasia: perro 2-7% 8-r4% >14

E Policromasia: gato 1-2% 3-B% >B


Directrices Para la evaluación Hipocromasia t-ro% rl50% >50
del frotis de sangre E
Células diana t5% 6,15% >15

1. utilizar bajos aumentos, obseruar la calidad de todo el frotis. Los frotis


mal teñi- r Esferocitosis, m icrocitosis, macrocitosis 1.rc% r7-50% >50
dos no deben analizarse.
?. Hallar lazona de recuento. Esta es la zona denominada de monocapa,
en la T Esq uistocitos, acantocitos,
cuerpos de Heinz, punteado basófilo, r-2% 3,8% >B
y glóbulos blancos
que hay muy pocos glóbulos rojos solapados, o ninguno' los

estánbienaplanadosperonodeformados'Losglóbu|osrojospuedenestar
f otros poiquilocitos

muy dispersos si el recuento de los mismos está disminuido'


3" Efectuar un recuento diferencial de glóbulos blancos'
E
Tabla 5.3. Estimación de la cantidad de plaquetas: cantidad media en un campo de lOOx
4. Evaluar anomalías de neutrófilos según la Tabla 5 1 ' E
5. Evaluar la morlología de los glóbulos rolos segÚn laTabla5'2'
la Tabla
6. Realizar una estlmaciÓn del recuento plaquetario y confirmarlo, según E
5.3.Sihaycúmu|osdeplaquetas,debenregistrarse.(Losinterva|osdereferen- Perro z? 4,9 to-25 >26
caso).
cla varían: estos intervalos pueden tener que ajustarse segun cada E
z? 4-14 15-40 >41
E

124 |

I
m
.
Ó ] HEMATOLOGÍA
t
Plaquetas

H
H o
E|N W
E+t
qr o
Eil
.il
I
W

E+r
ry
qr
+ I
Estructura y función de las plaquetas
Estructura
EI La plaqueta tiene forma discoide y no contiene núcleo.

Cuando se tiñe mediante tinción de Wright, la plaqueta adquiere un color púr-


pura claro, y puede observarse que contiene pequeños gránulos de color púrpura
rolo, La plaqueta puede poseer delgadas proyecciones filiformes (figuras 6.1 ,6.2
v 6.3).

EI El tamaño de la plaqueta oscila entre 5 y 7 pm de largo, y tiene 3 pm de


ancho.
Ef El volumen plaquetario medio de las plaquetas del perro es de unos 8 fl
(femtolitros).

EI El volumen plaquetario medio de las plaquetas del gato es de uno l5 fl


ffemtolitros).

tigura 6.1. Plaquetas


de gato en un frotis
de sangre periférica
(tinción de Wright
modificada, l00x).
o, HEMATOLOGíA GLÓBULOS ROJOS o
I
]

I
F
El Los dacriocitos son glóbulos roios en forma de lágrima y se suelen relacionar
con trastornos de la médula Ósea (figura 5.13).
F I lcr
lor;t¡lolurlos rolos también pueden describirse en funcrón de su contenido en
r rr x lk r[ lil r¿1.

EJ Los esquistocitos son fragmentos de glóbulos rojos, y derivan de daños oca


sionados en la membrana del glóbulo roio durante la circulación, normalmente
t EI I n krs g¡lóbulos rojos normocrómicos, el valor de MCHC se sitúa dentro del
inleryalo de referencia, son glóbulos rojos cuya concentración media de hemo-
COmo Conse6uencta de anomalías microvasculares. Los esquistocitoS se sue
len observar en caso de coagulación intravascular diseminada (ClD)'
F r¡krbina está dentro de la medra (figura 5.14).
El En los glóbulos rolos hipocrómicos, el valor de MCHC se sitúa por deb4o del
de referencia, son glóbulos rojos cuya concentracion
lír'nite inferior del intervalo
rnedia de hemoglobina está por debqo de la media (flgura 5.15).

F
E
\, F
Figura 5.14.
atÁ4,,t^. "^i^^
utuuutu> tulu)
normocromrcos en
F un frotis de sangre
periférica de perro

F (tinción de Wrighi

ri-
modificada, 100x).
\
F $t
F *"#
F
F
rF &

Figura 5.13. Dacriocitos en un frotis de sangre periférica de perro


(tinclón de Wright modificada, 10Ox).
F
F
ril Figura 5.15.
Glnhr rln< rnin<
hipocrómicos en
##
r :|l un frotis de sangre
periférica de perro
(tinción de Wright

*r

r il modificada, 100x).

'*l
E =I 109
: l::::i..ll

Funcién
VI La plaqueta es un elemento celular multifuncional del sistema circulatorio. Las
plaquetas ayudan a mantener la integridad vascular, modular la respuesta infla
matoria y potenciar la curación de heridas tras una lesión tisular.
A La función más importante de las plaquetas es intervenir en la hemostasis. Las
plaquetas ayudan a detener la hemorragia, puesto que constituyen el primer
E elemento celular de la sangre periférica que reacciona cuando los vasos san-
quíneos resultan dañados.
E

Análisis de laboratorio

E: Recogida de muestras
Figura 6.2. Plaquetas
de perro en un frotis
ú Las muestras de sangre deben extraerse mediante la técnica sistemática de la
de sangre periférica
(tinción de Wright
E: punción venosa.
modificada, 1OOx). m Para conseguir recuentos plaquetarios se precisa sangre completa, puesto que
E: durante el proceso de coagulación se consumen plaquetas. El anticoagulante

t: de elección es el EDTA, aunque también puede usarse citrato o heparina.


EI ft eOfR actúa como anticoagulante quelando calcio. El calcio es nece-
sario para que tenga lugar la cascada de la coagulacion: asi. su ausencia
É.
detiene el proceso de coagulación. El EDTA es el anticoagulante más utili-

t -^^^
Law ^-.^ t^ "^^^^iA^ de muestras de sangre cuyo objetivo es un recuento
vata,a reuvv,uq
Dta0uelano.

f MJ El citrato también actúa quelando calcio y se suele emplear como anticoa-


gulante de eleccion en pruebas de coagulacion. En casos de aglutinacion
l,\ f plaquetaria dependiente de EDTA, puede utilizarse citrato sódico para la
obtencion de recuentos plaquetarios.
¡ /r\ -
t"J En los tubos comerciales de recogida de sangre, el porcentaje de citrato
,i. I sódico en sangre supera el de EDTA en sangre. Todo recuento plaqueta
rio realizado en muestra de sangre recogida en un tubo con citrato sÓdico
Figura 6.3. Plaquetas
grandes en un frotis É debe aumentarse a razón de un factor de 1,1.
de sangre periférica
de perro (tinción de
Wright modificada,
f EI La heparina actúa como anticoagulante inhibiendo la formación de trombina,
formando comoleios con la antitrombina lll.
100x).
f
,rl E
EJ Históricamente, la heparina no se ha utilizado como anticoagulante para lmpedancia eléctrica
el recuento plaquetario porque interfería con el agente lÍtico utilizado en los
V Lamayoríade analizadores automáticos de hematología se basan en el méto-
sistemas de análisis hematolÓgico de los años 80 Sin embargo, hoy en
do de la impedancia eléctrica para determinar recuentos plaquetarios.
día esta interferencia se ha eliminado de la mayoría de sistemas de análisis
EI Coulter fue quien desarrolló y comercializó por primera vez la máquina de
hematológico.
impedancia eléctrica a principios de los años 60. Hoy en día este método
EI Otro inconveniente es que los frotis de sangre teñidos con la tinciÓn de
ya no se limita a los instrumentos Coulter y su uso es muy amplio,
wrlght llevados a cabo a partir de sangre entera heparinizada pueden pro-
EJ En los sistemas automáticos que se basan en la impedancia eléctrica, se
ducir un artefacto: un fondo de color azul claro que puede interferir con la
diluye sangre completa con anticoagulante en una solución electrolrtica. La
evaluación microscópica de los glóbulos sanguLneos'
solución resultante de células sanguíneas se introduce por un pequeño ori-
A Es necesario determinar el método de recuento plaquetario antes de elegir el ficio situado entre dos electrodos. Este orificio se denomina aoeftura. Por
anticoagulante para la muestra de sangre. la apertura pasa un volumen concreto de sangre diluida durante un periodo
de tiempo determinado, A medida que pasan plaquetas por la apertura,
estas inhiben el flujo de corriente eléctrica que atraviesa la apertura. Así,
Métodos de recuento Plaquetario los cambios de corriente detectados se cuentan como plaquetas. Estos
EJ Existen tres métodos de recuento plaquetario: el manual, el de la impedancia cambios se van acumulando en el instrumento y la cifra final constituye el
eléctrica y el de la citometría de flujo. recuento plaquetario.

Causas de error
Manual M Las plaquetas se miden por amplificación del pulso generado a partir del des-
plazamiento de plaquetas a través de la apertura. El pulso amplificado se com-
El Las plaquetas se cuentan microscópicamente mediante un hemocitometro.
para con canales de voltaje de referencia internos. Estos canales sólo acep-
üJ Se diluye una muestra de sangre blen mezclada con anticoagulante EDTA a tan pulsos de cierta amplitud; esto clasifica los pulsos en canales de distintos
razón de 1:1OO en solución de oxalato de amonio al 1%. El sistema unopet-
tamaños. Se genera un histograma a partir de estos datos, que compara el
te (Becton-Dickinson, Rutherford, NJ) se puede adquirir a nlvel comercial.
tamaño celular con el número de células presente, y se aplica un algoritmo a
EI Se carga un hemocitómetro y la unidad se deja sin tocar durante 15 minu-
estos datos. Con ello se establece un límite de tamaño superior y uno inferior, o
tos. Esto permite a las plaquetas adoptar su posicion.
umbral, que se emplea para discriminar entre poblaciones de células.
EI Las plaquetas tienen aspecto de células redondas u ovaladas al
EI fn la mayoria de sistemas de análisis de hematología, el umbral plaquetario se
microscoPio.
basa en el tamaño de las plaquetas del ser humano, incluso aunque la máquina
EJ Se cuentan todas las plaquetas del recuadro central del hemocitómetro. Si
vaya destinada a uso veterinario, Se cuentan las células existentes en el inter-
el número total de plaquetas contadas es inferior a 1oo, se cuentan mas re-
valo entre 2 y 20 femtolitros como plaquetas, y las contadas por encima de 35
cuadros pequeños hasta que se han observado al menos 100 plaquetas.
femtolitros se consideran glóbulos rojos. Esto supone un problema cuando se
EJ El número de plaquetas por milÍmetro cúbico se calcula multiplicando el
¡ntenta conseguir un recuento plaquetario de especies que poseen glóbulos
'1000.
número total de plaquetas contadas por
rojos pequeños, puesto que las zonas de recuento de plaquetas y de glóbulos
Causas de error rojos pueden solaparse. Por otra parte, en general no supone un problema en
EI Técnica de dilución inadecuada' los recuentos de glóbulos rolos, puesto que se expresan en millones por micro-
ül Acumulación de plaquetas. litro. Sin embargo, puede afectar negativamente al recuento plaquetario, ya que
éste se expresa en miles por microlitro.

''l
E
A por tanto, es indispensable confirmar todos los recuentos plaquetario micros
E
Indice alfabético
cópicamente con un frotis de sangre periférica teñido.

E
de flujo
A
La citometría de flujo láser es el método más reciente de recuento plaquetario lim¡taciones, I6
m
Ar;;trrloc;ilos, 105 metodología, 16
automático.
Ar;r:lo¿u;ético, ácido, 1 3 Análisis químico, 7
m Con la citometría de flujo, se pasa una suspensiÓn de sangre completa con
Ar;ir1o ribonucleico residual, 1 20 método de las tiras de orina con reactivo
anticoagulante por un haz láser. seco, 9
Arlltrlinacion, 117
V Todas las células sanguíneas adsorben y dispersan luz láser. Cada tipo de célu-
Ar¡Lra, residuo de, 114
procedimiento, 9
la puede clasificarse en función de su tamaño, de los componentes del nÚcleo E Ant¡cuerpo,
Albúnrina concentración plasmática de, 58
y de las inclusiones citoplásmicas. En funciÓn de todo ello puede realizarse un
disminución de los niveles de, 60
recuento 0la0uetario. E Adefacto, 47,48,114
Alleraciones tóxicas, 84
Autoaglutinación, 117
Análisis del sedimento, B
F Azul de metileno, 66
Análisis de orina
Azur B, 66
valores de referencia, 49
F análisis microscópico, 49
EI
v
bacterias, 50
F+I células epiteliales, 50
cilindros, 50 B hidroxibutírico, ácido, 12

F{t esperma, 50
grasa, 50
Bacterias, 44
en sedimento urinario, 44
mucosidad, 50 presencia de inleccron, 45
F=Et parásitos, 50
Bacteriuria, 45
RBC,50
Frl wBc,50
características fÍsicas, 49
detección de, 1B
Basofilia, 84

E:I color, 49
gravedad especilica. 49
Basófilo, 66, 67
descripción, B0

Frl transparencia, 49 an fr^lia nlo


uE cannro on
Jar rvru pEr ilsr rud
^órifari^. ^^ garu.
us ^.1^ ou
quÍmica seca, 49 en frotis de sangre periférica de perro, B 1

bilirrubina, 49 función, B0
cetonas, 49 núcleo, B0
E glucosa, 49
Bilirrubina
leucocitos, 49
falsos negativos, 16
F nitratos, 49 t^t^^^ ^^^i+i.,^^
rorJUo puDrLtvuJ! rtua
ph, 49
umbral renal del perro para la, 16
proteínas, 49
F valores esperables, 16
sangre, 49
Biliverdina, 16
Análisis de presencia de sangre
E Biuratos de amonio, 36
falsos negativos, 17
falsos positivos, 17 Bromosulfoftaleína, 13
F.
1?L I

I
ía I
-il I

URrANÁLrsls Y HEMAToLocín oe LneoRffoRlo


-F ít'¡olce tLrneÉlco

c Concentración media corpuscular


Fil Ehdichiosis, 76 Fosfato cálcico, 36
(N/CHC), eB
Coulter, instrumentos, 97
E{l Eliptocitos, 107 Fosfatos amorfos, 38

Frl
Carbonato cálcico, 36 Enzimas, Fosfato triple, 36
Crenados, glóbulos rojos, 104 concentraciones plasmáticas de, 58 Frotis
Cateterización, 4
Cristales, 36 Enfermedad tubular degeneraliva, 34 grosor, 64
Cefalexina, 20
Cefalotina, 20
ácido úrico, 38
amodos,38
H Eosrna, 66 métodos de tinción, 66
método automático, 66
Células en ampolla, 107
Células espinosas, 105
de
de
de
ácido hipúrico, 39
bil¡rrubina, 42
carbonato cálcico, 40
ET Eosinófilo, 66, 67
de gato, 78
de perro, 79
principios de la tinción, 66
Frotis de sangre

Er
Centrífuga, 57 desgranulándose, 79 directrices para la evaluación, 124
de cistina, 36, 42
descripción, 7B poco denso, 64
Centrifugación, B, 23
de tubo capilar, 55
Centrífuga para hematocrito,
de fosfato triple, 40, 41
de leucina, 42
de oxalato cálcico, 36, 39
tril función, 78
núcleo, 78
Frotis de sangre periférica
correcto, 65

ul
61 rocnninnoc alÁrninac 7R
de sulfonamida, 36 demasiado denso, 65
Cetonas, análisis de de tirosina, 36, 42 Epitelial, célula,28 estimación del recuento total de
cistitis bacteriana, 1 3
falsos negativos, 13
falsos positivos, 13
limitaciones, 12
de urato de amonio, 40, 41
Cristaluria, 36
por cistina, 36
Ff de transición, 29
de transición neoplásica, 30,
de túbulos renales, 30
epiteliales reactivas, 30
31
glóbulos blancos y de plaquetas, 68
material para el, 63
trr rr oomrde /l rervel I h

metodología, 12
por tirosina, 36
Critoseal, 55
tr1n escamosas, 28
valores esperables, 13 tamaño,28 t
Cilindros, 31
Cromatina
fina y laxa, BB
E+r Equinocitos, 104
Gentamicina,2O
celular, 32
ceruminosos, 34
concentración de sales elevada, 31
fragmentos remanentes,
Cubreobjetos, método del, 62
1 I2
trlr Eritrocito policromaiófilo,
Eritropoyesis acelerada, 1
1

24
19
Glicoproteínas, 12

de células epiteliales, 34
de glóbulos rojos, 35 D
Fil Esferocitos, 102, 103
Fcnantrnfntnmotria Q7
Globina, 95
Glóbulos blancos, 25

de grasa, 34
formación,31 Dacriocitos, 108 tril Espermatozoides, 43, 44
Espiración, 95
alteración tóxica, 84
rena.+^ ¡lol nr rnlon DA
uuPvvrv

contar, 26
glóbulos blancos, 35
granulares, 32
trastorno tubulointersticial, 32
Degeneración celular, 35
Degeneración lipídica celular, 34
Ell Esplénicos, trastornos,
Esquistocitos, 1OB
1 l2 cuerpos de Dóhle, 84
función y características físicas, 73
Esterasa, 19 inmunocitos, BG
hialinos, 32,
lipídicos, 34
Descamación de células tubulares, 34
Diana, célula, 106
tr Estercobilinógeno, 17 linfocito atípico en frotis de sangre, 86
linfnnitnc rtíninnc RA
tasa de flujo tubular, 31 Estomatocito, 103
Diazonio, compuesto,
Cistocentesis, 4
1 B
E Estral, secreción, 17
linfocltos reactivos, B6
Dicloroanilina, 15 mastocitos, B6
Etilendiaminotetraacético, ácido, 53
citometría de flujo, 120,132, 134 Dióxido de carbono, 95 F plasma de muestra procesada con, 59
neutrófilos hipersegmentados, 85
núcleo, 26
Clorpromazina, 16 Dirofilaria immitis, 47
proceso de inflamación, 84
Coagulación intravascular diseminada
(crD),108
tr F términos descriptivos, 84
E Glóbulos rojos, 26, 95
Codocitos, 106
E. coli,15
tr Fenazopiridina, 16 agregados de,117
Colores de la orina, 6 Fibrinógeno, 61 análisis de laboratorio, 96
color y transparencia, 5 EDTA, 96
tr en recuento de sangre completa, 54 características físicas, 95

'*l
URtANÁLrsrs y HEMAToLocín oe ueoRnroRlo lnolcr nuneÉlco

del gato, 95 falsas disrninuciones, 1 9 Indlcador de color, 7 MCV 99. /éase Volumen corpuscular
del perro, 95 falsas elevaciones, 19 lndoxllo, 19 medio (MCV)
fragmentos, 108 limitaciones del, I9 Membrana del glóbulo rojo
Inflamaclón
función, 95 método de tira reactiva, 7 rotura, 105
globullna en la, 59
hallazgos de laboratorio, 120 metodología, 1B
Inmunoglobulina Metamielocito, 90
hipercrómicos, 99, 110 valores esperables, 19
hipocrómicos, 99, 109 dlsminución de la producción de, 60 Metarrubricito, 1 19
Grupos sulfidrilo, 13
inclusiones de, 1 10 Inmunomediada, enfermedad hematológica Método de Romanowski, 66
inclusiones refractivas, 1 14 globulina en, 59 Método de Giemsa, 66
índices de, 98 H
inmaduros, 1l B Micción, 4
intensificación de producción, 1 20 Heces, 46 L Microfilaria
.1
macrocíticos, 99, 100, 101 Heinz, cuerpos de, 13 evaluación microscópica db, 57
maduro, 1 19 Lelshmaniosis, 76
Hematocrito, 54-57 Microhematocrito, método
microcíticos, 99, 100, 101 causas de error, 56 Leptocito, 106 equipo, reactivos y material para el, 57
morfología, 125 definición, 54 Léucocitos lector de, 57
normocÍticos, 99, 100 método ind¡recto de medición, 56 principios, 57
análisis de
normocrómicos,99, 109
Hemocitómetro, 96 falsos negativos, 20 Micrométodo,55
policromatófilos, 111
falsos posit¡vos, 20
por milímetro cúbico, 96 Hemoglobina, 95 Microvasculares, anomalías, 1 0B
actividad peroxidasa, 16 limitaciones del, 19
producción, 1 1B Mieloblasto, BB
análisis automático, 97 metodología, 19
punteado basófilo, 111
valores esperables, 19 Mielocito, 89
recogida de muestra, 95 análisis manual, 97
clasificación de, 66 en frotis de sangre periférica de peno, 89
recuento de,27,96 concentración de, 109
desnaturalizada, 113 en muestras de sangre con EDTA, 53 Mioglobina, 16
métodos automáticos, 96
precipitada, 113 granulociticos, 19
métodos manuales, 96 Mitocondrias, 120
preparación de frotis para el análisis
recuento de sangre completa, 54 Hemoglobina corpuscular media (MCH), 98 Monocitos, 26
anisocitosis, 100, 101 diferencial, 63
Hemo, grupos, 95 descripción, 76
poiquilocitosis, 102 recuento anómalo, 57
en frotis de sangre periférica de gaIo,77
Hemorragia Llnfocito, 26
Glomerulonefritis, 35 en frotis de sangre periférica de perro,77
crónica, 60 dac¡rin¡iAn 7(
Glucosa funcicrn, 76
intrarrenal, 35
en frotls de sangre periférica de perro, 76
análisis de presencia de, 13 Monohidrato, oxalato cálcico, 36
Hipercromasia, 1 10 funclón, 75
concentraciones elevadas de, 59 Mucoproteína albuminosa,
Hipúrico, ácido, 36 31
falsos negativos, 14 Llpemla
l--liclnnlacmncic 7A plasma neblinoso en, 57 Mucoproteína de la matriz, 31
falsos positivos, 14
precipitación, 32
limitaciones, 13 Hormonas, concentraciones plasmáticas, 58
metodología, 13 Mucoproteína de Tamm-Horsfall, 31
valores esperables, 13
Howell Jolly, cuerpos de, 112 M
Muestra
Glucosa oxidasa, I3 Macrólagos, 76 capacidad del recipiente, 4
I métodos de recogida, 4
Glucosuria, 14 M¡ratocltos, B6
obtención, 4
Granulocitos, 84 ldentificación microscópica, 2O r¡rr lrotls de sangre periférica de gato, 87
1 procesado, 5
Gránulos, 84 lónica MOtJ, SS. Véose Hemoglobina corpuscular recipientes, 4
Grasa, gotas de indicadores de concentración, 7 rrredla (MCH)
Muestra de orina
análisis microsc ópico, 27 metodología de la concentración, 1B MO|1C, ge, 1 09, 1 10. Vóase Concentración obtención, 4
Gravedad específica, análisis de la, 7 Inclusiones citoplásmicas, 84 rrrerdla c;orpuscular (MCHC) análisis microsc ópico, 24
íNorce nLrneÉnco
uRrANÁLtsts Y HEMAToLoGíl oE LneoRnroRlo

Plasma Renal
centrifugación de la muestra, 23
procedimiento de centrifugación, 23
o +.^h^^^r^^^i^ F1
^^l^É,, y u or rovor sr rurot u f
uurur ¡lononarrniÁn aC

evaluación microscópica, 57 enfermedad, 105


Muestra de sangre ObstruccrÓn uretral, 1 4 inflamación, 32
Policromasia, 1 10
almacenaje Y refrigeraciÓn, 53 Organización celular en el frotis de sangre irritación, 32
causas de error, 56 penTenca, I lo Polivinilpirrolidona, 1 2
Reticulocito, 110,120
método de recogida, 53 Orina Proceso supurativo en el riñón, 35
agregados, 121, 122
Muestra de sangre bien mezclada, 96 ácida, 14 Promielocito, BB de estrés, 122
acidificada, 12 en lrolis de sangre periferica de peno, 89 índice de producción (RP),123, 124
alcalina, 38 nnrnantaio cla 12Q
N Prorrubricito, 18, 1 19
tÉl
1
densidad, 7 corregido, 124
Proteína, análisis de
muestra, 4 punteados. 1 2 1

Neutrófilo en banda, 91 falsos negativos, 12


de gato en frotis de sangre periférica'
82
presencia de esPerma, 43
semen, 43 1H falsos positivos, 12
lantr rrrc nnciiirrec 1?
recuenl0 0e
absoluto, I23

de perro en frotis de sangre periférica,


B3
sin tinción, 25
transparencia, 6
Ovalocito, 107
iH limitaciones del,
metodología, 11
11
método manual, 122
respuesta de,122
Reticulocitosis, I20
lEl
descripción, 82 ,,^t^.^^
vorvrvo ^^^^"^ht^^
9Jp9rourEJ! I| I|

función, 82 Oxalato cálcico, 36 respuesta de pacientes anémicos, I23


Proteína de Bence Jones, 12
núcleo, 82 Oxidantes, contaminantes, 1 7 Rubriblasto, 118
núcleo en forma de herradura de
caballo, 91
Oxidativa, lesiÓn, 112 rEn Drn+aína nlocmÁti¡a

aumento de los valores, 59


Rubricito, 1 19

Oxigeno, transPorte de, 95 I disminución de los valores, 60


Neutrófilos, 26,66, 67 ,73' 84
acción microbicida, 73
Itr+l equipamiento, reactivos y material para, 60 S
anomalías, 125
descripción, 73
P tril I
Proteínas de transporte, 58
Proteus spp.,15
Sangre completa anticoagulada
¡on+rifr rnrniÁn ¡la Al

tril
vv, ,1, I vv' v
"vvuv'v' '
I
función, 73 Pcar"lamnnac cnn
vYH.' 1¡v6
Parásitos Sangre completa, extracción, 96
fusionarse, 26
huevos de, 46 Sangre completa heparinizada,
núcleo del neutrófilo, 73
secuencia de maduraciÓn, BB
segmentados, 73, 91' 1 19
Parásiios sanguíneos,
Dirofilaria, 1 15
1 15

5
trll \I
^ plasma de, 59
Seal-Ease, 55
en frotis de sangre Periférica de
Mycoplasma haemofelis, 1 1 Queratocito, I07
Sedimento urinario
güo,74 PCV por centrifugación, tubo, 60 Química seca, análisis mediante análisis del, B
en frotis de sangre Periférica de pH urinario alcalino, 36 metodología de la, 11 artefacto no identificado, 48
perro,74 polvo de guante, 47
pH, análisis del
artefactos, 47
a
Nitritos, análisis de
alimentaciÓn, 1B
alimentación, 14
alimentación rica en Proteína, 14 f tl material vegetal, 48
bacterias, 44
valores esPerables, 1B alimentación vegetal, 1 4
Reactivo
falsos negativos, 1B metodología, 14 E para la determinación del fibrinógeno, 61
cristales en el, 36
elementos, 25, 43
falsos Positivos, 1B valores esPerables, 14
para el método del microhematocrito, 57 espermatozoides, 43
limitaciones del, 1B
metodología, 1B
Pila de monedas, 116 E Recuento de sangre completa (CBC), 54 glóbulos rojos en el, 27
Pilas de moneda, 1 16 hifas fúngicas, 45
Refractometría, 5B
Nitroprusiato de sodio, 12
Plaqueias, 67 tr Refractómetro, 7
hilos de mucosidad, 43
Núcleo de las células mononucleares, 26 estimaciÓn de la cantidad de' 125 parásitos, 46
recuento de sangre completa, 54 Refrigeración, 5 Capillaria plica,46
Nuevo azul de metileno, 121

r40 I
I

I
I
URIANÁLISIS Y HEMATOLOGíA DE LABORATORIO l
E
Dioctophyma renale (huevo de un Urobilinógeno, análisis del
verme renal del perro), 46 falsos negativos, lB
E Lecturas recomendadas
microfilarias de Dirofilaria immitis, 46 falsos positivos, I7
limitaciones del, 17
Solapamiento de células, 116
Solubilidad, 36
metodología, 17 F Bellamy JEC, Olexson DW: Quality Assurance
valores esperables, 17 Handbook for Veterinary Laboratories, Ames,
Uropatía con pérdida de proteína, 60 lowa State University Press, 2000.
T Feldman BF,Zinkl JG, Jain NC: Scha/m's
Tapado, productos de, 55 V Veterinary Hematology, sth Ed. Philadelphia,
Lippincott Williams & Wilkins, 2000.
Tetraciclina, 20
Volumen celular medio (MC\4, 56
Tinción Harvey JW: Aflas of Veterinary Hematology.
Volumen corpuscular medio (MCV), 98
localización y resolución de los probiemas Philadelphia, WB Saunders, 2001
derivados, 67 Volumen del total de glóbulos rolos (PC\4
macrométodo para la determinación del, 55
F .

Hendrix CM: Laboratory Procedures for


Tinciones, 66 micrométodo para la determinación del, 55
ácida, 66 E Veterinary Technicians, 4th Ed. St. Louis, Mosbv
(Elsevier), 2002.
alcalina, 66
de Wright, 66 W F: Rebar AH, MacWilliams PS, Feldman BF,
precipitada como adefacto, 114
Metzger FL, Pollock RVH, Roche J: A Guicte to
Wright, tinción de, 1 16, 120
Sternheimer-Malbin modificada
(sEDr-srAtN@), 25 F Hematology in Dogs and Cats. Jackson, Teton
NewMedia, 2002.
Tiras de reactivos secos, 7
análisis químico mediante, 9 F Reagan WJ, Sanders TG, DeNicola DB:
método automatizado de lectura, 9 Veterinary Hematology Atlas of Common
métodos manuales de lectura, 9 F Domestic Species. Ames, lowa State Universitv
Tiras reactrvas secas Press, 1998.
cómo guardar, 1O F Willard MD, Tvedten H, Turnwald GH: Srna//
Tubo capilar
Animal Clinical Diagnosis by Laboratory Methods,
en el micrométodo, 55
heparinizado, 55
F 3rd Ed. Philadelphia, WB Saunders, 1999.
no heparinizado, 55
para el método del microhematocrito, 57 F
Tubo de recogida de sangre, 53
E
U
E
Unopette, sistema, 96
Urianálisis, 4 E
definición de, 5
unco, actoo, Jo F
Urinario, revestimiento de células epiteliales
de transición en el tracto, 29 E
Urinómetros, 7
E
F t43

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