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I I Urianálisis y o
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ü Hematol ogia
Esta obra ha sido publicada con el permiso de Teton Newf\,4edia, Jackson,
Wyoming, USA. Está traducida de la l" edición de la obra origtnal en inglés
titulada Labolatory Urinalysis and Hematology.
I
El derecho de los Autores (Carolyn A. S nk y Bernard F. Feldman) a ser identifi
cados como Autores de este Trabajo está regulado por e Copyright.
O 2003. Teton Newl\ledia. Al rights reserved.
Fotografías de: Donna L. Budon CLA (ASCP). I s ii il* l*:tL":ilratorio
@ 2009. Edición en español.
Grupo Asís Biomedia, S.L.
Andador del Palacio de Larrinaga, 2
I s Carolyn A. Sink
[/IS, IMT (ASCP)
5OA13Zaagoza, España.
miento, sea éste mecánico, electrónico, de fotocopia, grabacion o cualquier Bernard F Feldman
otro srn el previo permiso escrito del editor f ]n DVM, Ph.D.
Cualquier forma de reproducción, distribución, comunicación pública o trans l:lc rlel l;rtxlrat<xro /
formacón de esta obra soo puede ser realizada con la autorización de sus
titulares, salvo excepción prevista por la ley. DirÍlase a CEDRO (Centro Español
¡ tn rlt, Sr:rvrc:ios Diaglósticos
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de Derechos Reprográficos, www.cedro.org) sr necesita fotocopiar o escanear
algún fragmento de esta obra. ¡ s Volr,lr,¡r,rr[,Vrr¡1rlia,
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Advertencra:
La ciencia veterinaria está sometida a constantes cambios evolutivos. Del mis
mo modo que la fanracología y el resto de las ciencias también lo están. AsÍ
pues, es responsabilidad ineludible del vetennario clínico, basándose en su
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experiencia profesiona, la deten¡inación y comprobación de la dosis, el méto- ]E
do, el periodo de adnrinistración y las contraindicaciones de los tratamientos
aplicados a cada pac ente. I *
Ni cl editor ni el autor asumen responsabildad alguna por los daños y/o per
luicios que pudieran generarse a personas, antmales o propteoaoes como
consecuencia del uso o la aplicación rncorrecta de los datos que aparecen rE
en esta obra.
Diseño y corrpaginacrón: rs
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Servet editoria Grupo Asís Biomedia, S.L.
Traducción : Nuria Fernández Casamitjana.
ISBN edición orig nal: 9781 893441 101
ISBN edicion española: 978 84 S2569 17-5
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Depósito legal: NA 2526-2009
lmpresión:
Gréificas Lizarra S.L.
Ctra. Tafalla, km. 1
31 1 32 Villatuefta I rE\
rs
Navarra, España
Irrpreso en España
SENTET
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Autores
Carolyn A. Sink
MS, MT (ASCP)
Supervisora del laboratorio de Servicios
Diagnósticos de la Universidad
de Medicina Veterinaria de Virginia,
Maryland.
Bernard F. Feldman
DVM, Ph.D.
Jefe del laboratorio de Servicros
Diagnósticos de la Universidad
de Medicina Veterinaria de Virginia,
Maryland.
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Puesto que reconocemos que no existe ningún libro técnico que
sea un trabalo completamente original de los autores, nos gus,
taría expresar nuestro agradecimiento a todos aquellos que nos
han orientado y ayudado a comprender qué es lo clínicamente
más útil en el día a día. En gran medida, nuestros estudiantes
de veterinaria realizaron muchas de las preguntas "correctas".
También nos gustaría agradecer la atmósfera de nuestro labo-
rator¡o, que promovió este trabajo. Asimismo, gracias a Peggy
Brown, Laura Fidgen, Janice Herzog y Jonathan Austin.
Prefacio
El profesional de la salud veterinaria tiene tanto la oporluniflad
como la obligación de ayudar a sus pacientes comprendiendo
qué es lo que expgrimentan. Con ello en mente, el texto puede
usarse como referencia para ayudar a explicar.los procedimien-
tos usados de forma sistemática.
Alaluzde los avances en los conocimientos y aspectos técni-
cos del laboratorio veterinario de patologia clínica y la continua
evolución de los enfoques de la hematología y del urianálisis ve-
terinario, este material se ha creado pára destacar los principios
básicos de estos importantes aspectos del laboratorio clínico.
Hemos incluido las definiciones más completas de algunos re-
quisitos cruciales para conseguir exactitud y utilidad en cuanto a
las necesidades de nuestros oacientes.
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indice de contenidos f Centrifugación de la muestra de orina .
I
I
lntroducción 3 r 0lóbulos
Gotas de grasa.
Células epiteliales....
. ..
...... ...
26
27
31
Obtención de la muestra . . . .
Métodos de recogida
.
4
r
Otros elementos del sedimento urinario....... 43
Recipientes para la muestra ........, 4
Definición de urianálisis
Prooiedades físicas ...... ........
5
5
r HEMATOLOGíA
Propiedades químicas ........ 7 I :
8
Análisis del sedimento
r
11
Prniein:c nl:smáiin:q 5B
Anállsis de presencia de cetonas .... 12
Frntiq dp q:nore neriferie: 62
Análisis de presencia de glucosa
Análisis del pH .. ..
13
14 r
Análisis de presencia de bilirrubina
Análisis de presencia de sangre .......
15
to
I Función y características físicas 73
Análisis de presencia de urobilinÓgeno . .. . .. . 17
1B
[# Nlulrofilos. 73
Análisis de presencia de nitritos........ I ir lf, r lloS
76
Análisis de presencia de leucocitos.. 19
DE f usrtrofrlos........ 78
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URIANALISIS
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Basóf i1os........... BO
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t y üx-I#ft##mns mediante
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o Glóbulos rojos F tirag #e or¡na
físicas
Función y características e5
Análisis de |aboratorio................. e6 F
índices de glóbulos rojos............,. , .. 98
É
Terminología relativa a los glóbulos rojos........... ,..,..........,..,... 100
Inclusiones de glóbulos r0jos.......,........... .. ... ..... .. .. .. .. ... 1 1 1 :
Parásitos sanguíneos..... .. .. .. .. . .. 1 15
...
.,..,...... ..
..... .. .. .. 12o
120
f I
mtcroscópica..
ldentificación .... . ........ .. 120
- I
Recuento de reticulocitos: método manua1............. .. .... 122
Formas de recuento..... .. . . ... .. .. .. . . . .. 123 l I
Directrices para la evaluac¡ón del frotis de sangre ............. 124
t T
C Plaquetas TI
Estructura y función de las plaquetas. 1to
f :tr
Estructura
Función 1e1
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Análisis de laboratorio. .. .. .. .. ..... .. .. ........ ..
141
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Recogida de muestras...
Métodos de recuento plaquetario...... .............. to¿
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índice alfabético tJc ru
Lecturas recomendadas 143
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tr RECOGIDA DE MUESTRAS Y ANÁLISIS MEDIANTE TIRAS DE ORINA TI
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In trricÍ | n{,)i' i',::'it;
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| | ¡ rr rrrr;r¡ r; rl oIrjotivo de este libro es aportar un texto de referencia de fácil lectura
ts y ; rr:r:.:;il rlc, c¡ue esperamos que sea fácil de encontrar en la mesa de trabajo del
rlorio y rlue esté constantemente abierto y en uso.
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E En todo este texto se han utilizado los siguientes símbolos, con
el objetivo de ayudarle a centrarse en lo que es verdaderamente
E importante.
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rasgo importante. Debe recordarlo.
r il Los aumentos que aparecen en las imágenes (40x, 50x, 1OOx) co-
rresponden al objetivo microscópico utilizado para realizar las foto-
r il
edición está aumentado resoecto a la versión orioinal.
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URIANALISIS
t RECOGIDA DE MUESTRAS Y ANÁLISIS MEDIANTE TIRAS DE ORINA
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Procesado de la muestra
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MJ | ,, ,r¡ rlirrro r::; lk;v¿rr a cabo los análisis de laboratorio inmediatamente despues
EI Una muestra de orina obtenida por cateterización se recoge mediante in D l'4 Ar r tc l;t refrigeración se usa de forma sistemática para evitar la proliferaclon
r, 1L
serción de un catéter en la veliga, por la uretra. Puede obtenerse orina me r u:lr l irrn¿r en las muestras de orina,también puede dar lugar a un aumento de
diante una leringa acoplada al catéter o permitiendo que la orina fluya hacia l I
la cateterización o la micción.
D
M Las muestras recogidas mientras el animal micciona son las menos reco-
mendables. D
A Lo Optiro es que se recojan al menos 1O mililitros de orina. En muchos libros
de texto de vetertnaria pueden encontrarse los detalles de estos métodos de
E EI I I rrrianálisis se compone de pruebas de laboratorio que evalúan las propieda
rles fÍsicas y químicas de una muestra de orina. Además, se evalúa el sedimen-
recogida de orina.
D lo rrinario microscópicamente.
L
EJ La capacidad del recipiente debe ser de, al menos, 10 mililitros de orina. I.T lr:r nrin<ts parecidos. Al estandarizar una "lista de posibilidades", se elimina va
rirrcrrjn. A continuación se exponen las directrices para los infonnes de color y
ú Para el urianálisis, no hay que añadir conservantes a la muestra de orina.
rs Il rr xr1 rarcncia (f iguras 1 .1 y 1 .2).
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URIANÁLISIS I RECOGIDA DE MUESTRAS Y ANÁLISIS MEDIANTE TIRAS DE ORINA
I
tncotora
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t r I r lll r rc;rr:liv;i, rlrinómetro o refractómetro.
pl | ' rr,:lr,'hr tle la tira reactiva se basa en indicadores de concentración
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)ir y, ¡xtr tanto, determina la gravedad especifica mediante colorimetna.
r( )r I (
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I EI I ,,r; Lrrinórnetros determinan la gravedad especifica por comparación del peso
t krorina con un volumen igual de agua. El urinómetro está calibr:ado para
l¿r
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1,0 "C y, por tanto, debe corregirse en función de las variaciones de tempe
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*"ra ,urr..l Marrón Rosa rirlrrra del laboratorio. Los urinómetros detectan un amplio intervalo de gra-
Amarillo pálido, Amarillo I I I I
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amarillo claro oscuro negro amarillo vr r l¡fst especL[icas, pero se necesita un mínimo de 1O mililitros de orina.
o pala
* de gravedad especÍfica obtenidas mediante el método refrac-
I I as lecturas
tonretrico miden la densidad de orina respecto a la densidad de agua. Este
lLieeramente
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EI El análisisquÍmico llevado a cabo como parte del urianálisis se basa en er prrn-
l¡lta tll
I lrtocutenta
¡ cipio de la química de reactivo seco.
E] Las tiras de reactivos secos, o "tiras de orina", son tiras de plástico con 6 a
I il 10 pequeñas almohadillas de papel adheridas al plástico.
E] Llevan sustancias quÍmicas impregnadas en cada almohadilla de análisis, y
I r! cada una de ellas es químicamente distinta. Cada almohadilla está también
irnpregnada con un indicador de color visible.
f l! M El análisis se lleva a cabo sumergiendo la tira de plástico en una muestra
,r'o'rl sunerinot.ntul rE de orina y observando las reacciones quÍmicas que tienen lugar, según los
carnbios de color, a intervalos determinados de tiempo.
r ¡!
ru.Olinorul
"1iffi]:l EI El fabricante aporta plantillas de color de la tira de orina para que se puedan
ir rterpretar estas reacciones.
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RECOGIDA DE MUESTRAS Y ANÁLISIS MEDIANTE TIRAS DE ORINA
URIANÁLISIS G
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EI Existen tiras reactivas en gran variedad de configuraciones de
pruebiis I rt:;
pruebassonpH,proteína,Cetonas,glucosa,bilirrubina,gravedades¡lecifi
I
ca, sangre, urobilinÓgeno, leucocttos y n¡tritos' ¡
pero pueden no
A En general, las tiras reactivas son fáciles de usar y baratas,
ser demasiado exactas
I
I l¡¡rra llevar a cabo un análisis químico mediante una tira reactiva:
r
r cxtraer una tira reactiva del recipiente.
r l;r¡rar el recipiente de inmediato.
elementos formados en la orina.
EJ Los elementos formados son los materiales rnsolubles
que Se han acumula-
I A N, , l, rr;a l¿r zona de la almohadilla de análisis de la tira reactiva.
para estandarizar los resultados del análisis del sedimento de orlna. r EI I r:er y registrar los resultados de
I ¿rs tiras
cada prueba.
r Método manual
I :10 EI I lr:lre ponerse en marcha un cronómetro en cuanto la tira reactiva se retira de
lrrrrLrestra de orina.
f:lE A I ,,,' intervalos de tiempo de lectura de cada almohadilla reactiva vienen especi-
M
I:T I L
vr rlor¿rr
l; rl rricante también aporta una plantilla de colores que se debe consultar para
las reacciones y regrstrar los resultados.
r+ EI I ,
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,
:;ollrr c lirecta.
lir irs reactivas deben leerse en una zona bien iluminada, pero no a la luz
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UR|ANÁLISI5::i ::::::i,
RECOGIDA DE MUESTRAS Y ANAL|S|S MEDIANTE TIRAS DE ORINA I$
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Método autonnatizado M*fmq$r][t}h{lütr u.$* qm$ffi.xil{:ñ} sffi{:ffi
Los lectores automáticos de tiras reactivas constituyen un
método alternativo al
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I or; rnolodos de quÍmica seca permiten llevar a cabo ] 0 pruebas (proteínas, ceto-
análisis visual de la tira reactiva.
como se ha explicado nr:;, i¡lu<;osa, pH, bilirrubina, sangre, urobilinógeno, nitritos, gravedad específica y
Mf La tira reactiva se sumerge en una muestra de orina
I0t rcrrcitos).
anter|ormente,yacontinuaciónsecolocaene||ectorautomático'paraSU
evaluación.
forma correspondiente y el instru- ii, ,l ,
EJ Las reacciones químicas se programan de la r,.!i, r[.tt !.!f'{*-r{*l1i ;,:} iir,: i;:i:t*'irli¡*
mento las lee.
Los resultados pueden imprimlrse o descargarse a un ordenaoor'
Metodología
El
de lectura de una tira
EJ El lector automático puede ser un método más coherente I ir rretodología del análisis de proteínas se basa en el principio del enor de proteí-
prueba en la tira reactiva
reactiva, puesto que la valoración del color de cada na de los indicadores de pH. La almohadilla de análisis de la tira reactiva se tam-
puede ser difícil de llevar a cabo visualmente
l)ona a un pH constante bajo. Las proteínas llevan una carga a pH fisiológico. Un
c;ambio de pH en la almohadilla de análisis causa un cambio de color, que indica la
T ril La orina normal contiene pequeñas cantidades de proteína producidas por el re-
vestimiento epltelial del tracto genitourinario y una pequeña cantidad de albúmina.
E La proteína de la orina normal no suele ser suficiente como para que se pueda de-
=L
E q! [ectar por casi ningún método. Por tanto, la orina normal debería dar un resultado
negativo o contener sólo cantidades traza de proteína.
F Itr l-a determinación de proteÍna en orina siempre debe interpretarse junto con el valor
de gravedad específica de la orina.
E :Í! M Una muestra concentrada de orina puede contener suficiente proteína
como para que pueda medirse como traza hasta 1+ sin ser significativa.
E +! E] Por el contrario, una muestra diluida de orina que contenga una cantidad
Iraza de 1+ puede ser signlficativa, siempre que la cantidad total de proteí-
¡ +r na perdida también se mida.
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T URIANÁLl$f$.,t,,::ri: :i::i,::::,::.,i:.:'i::ir::' :" :
RECOGIDA DE MUESTRAS Y AÑÁLISIS MEDIANTE TIRAS DE ORINA I:
ffi&s
r;rrr llirlirrl. I)or l¿urto, la cantidad de cetonas medida mediante este metodo puede
Enmuestrasdeor|naa|calinasmuytamponadassehanobservadoreacc¡ones
con proouclos ',t il )r i: ;l.r il; rr l, r ,;¡r rlrdad de cetonas presente en el organtsmo.
de falsos positivos, así como en muestras de orina contaminadas
o clorhexidi
de higiene cutánea que contienen compuestos del amonio cuaternario
na. También se han documentado falsos positivos en orina de pacientes que tenran Valores esperables
fiebreoa|osquesehabíarealizadotransfusionesdepo|ivinilpirro|idona(sustitutivos I rrrroncliciones normales, la orina es negativa a cetonas. Las cetonas son pro-
sanguíneos).ExistegranvariedaddefármacosyanestésicosquepuedenCausar rlrrr;lo:; inales del metabolismo de las grasas. Aunque son ligeramente tóxicas, las
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reacciones de falsos Positivos. (;clonils se usan como fuente de energía cuando no se dispone de carbohidratos
o lo ¡trreden usarse.
* ras lecturas positivas para proteína obtenidas mediante tiras reactivas secas
par- [ ¿l evaluación de las cetonas de la orina es importante para el tra{amiento de
pueden validarse mediante pruebas de confirmacion. cuando se mezclan
precipitan pro- r;u;icntes con diabetes mellitus, para detectar el desarrollo de cetoacidosis.
tes iguales de orina centrifugada con ácido sulfosa|icílico a| 5%, ¡
&n;& I i :i i x #** L*r,*s$ *{:: i;} d * i:i:t.*il;t:i f:¡ liza la reacción del peróxido de hidrógeno generado con un cromógeno para crea(
un color detectable en la almohadilla reactiva.
Metodología ril Este método mide entre 100 mg/dl y cantidades superiores a los 20OO mg/dl
EI
rr;c rlrr o contaminación urinaria por bacterias puede alterar el pH de la orina.
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menudo se usan para limpiar) que pueden estar presentes en los recipientes de l'rx el contrario, E coli, puede producir una orina ácida.
recogida de orina.
I or; falsos cambios de pH puede ser consecuencia de:
Falsos negativos: la reactividad de la prueba de la glucosa disminuye a medi-
da que aumenta la gravedad específica; esto puede variar con la temperatura de la
TF EI Muestras cle orina que contienen bacterias y se han guardado'a tempera-
trlra ambiente, pudiendo causar proliferación bacteriana y dando lugar a un
muestra. La muestra de orina debe estar a temperatura ambiente, si la orina está
fría (por una refrigeración) la reacción de la prueba enzimática no tendrá lugar. Los
fabricantes de tiras reactivas difieren en cuanto a la reactividad con ácido ascór
rF M
cambio del pH de la orina.
El hecho de que las tiras reactivas pueden dar resultados nulos cuanoo las
ascórbico. DF EI
de pH,
Limltaciones de¡ análisis rfr rlir;lrrroanilina diazorizada y la bilirrubina. La almohadilla reactiva está a un pH ácido.
or r¿urdo hay bilirrubina en una muestra de orina, la dicloroanilina diazotizada se
lrr lo r¡ la bilirrubina y produce color en la almohadilla reactiva correspondiente a la
Este análisis es específico del pH.
D .ilr r;orlccntración de bilirrubina.
\lalones esperables *'l- []c ¡rLreden observar valores de entre negativo y 3+ (elevado). Este método per
rnlo r jetectar bilirrubina a concentraciones de incluso O,4 mg/dl (1 + o baja)
En perro y gato, los valores esperables son 5,5 a 7,5.
En condiciones normales, las orinas del perro y del gato no contienen bilirrubina. En condiciones normales, la orina no contiene cantidades importantes (lecturas de
sin embargo, el riñón canino puede degradar hemoglobina a bilirrubina, y el umbrral traza o superiores) de eritrocitos, hemoglobina libre ni mioglobina.
renal de bilirrubina del perro es bajo, La magnitud de bilirrubina siempre debe inter-
Los falsos positivos pueden deriyar de:
pretarse en función de la gravedad especÍfica. En el perro, son habituales resultados
'1 EI Contaminantes oxidantes.
de bilirrubina entre traza y bajos cuando la gravedad especÍfica es > ,040. Esto no
EJ Peroxidasa microbiana presente en infecciones del tracto urinario.
es así en el caso del gato, en el que una orina muy concentrada debe seguir dando
Ef Contaminación por secreción estral.
valores negativos de bilirrubina. En el gato, la bilirrubina siempre es patolÓgica.
La bilirrubina Ouede preceder una ictericia clínicamente evidente, y ciertos tras- Los falsos negativos pueden derivar de:
tornos hacen de su detección un indicador precoz de enfermedad. EI Aumento de la gravedad específica.
Pueden aparecer falsos positivos como consecuencia de una orina de color EI Formalina (usada como conservante).
atípico. La clorpromazina y la fenazopiridina también pueden causar falsos positivos. EI Presencia de nitratos.
Los falsos negativos pueden ser consecuencia de la presencia de ácido ascórbi-
co o nitritos.
Análisis de presencia de unrbilinógeno
La bilirrubina es un compuesto muy inestable y se oxida a biliverdina sl se ex-
pone a laluz o se deja a temperatura ambiente. La biliverdina no se mide en prue- Metodología
bas usadas de forma sistemática..Por otra parte, pueden surgir falsos negativos de
Esta metodología une el urobilinógeno con para-dietilaminobenzaldehído o 4-meto-
bilirrubina si la orina no se analiza fresca y protegida de la luz'
xibenceno-diazonio-tetrafluorobrato formando un color detectable en la almohadilla
reactiva.
Análisis de presencia de sangre Puede detectarse urobilinógeno a niveles de O,2 a 8 unidades Ehrlich (UE).
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uRr¡nÁusts 'fFil
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RECOGIDA DE MUESTRAS Y ANÁLISIS MEDIANTE TIRAS DE ORINA Il
rl.
l rr rr io on rl r¿r rnuestra de orina hay cationes, se liberan protones mediante un
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,rr¡r rr r;rcr rtior rkr r;orrplelos presente en la almohadilla reactiva. Estos protones
Ml La ausencia de urobilinógeno no puede detectarse. r.; rr ;r;ior lilr r co¡ cl indicador de color azul de bromotimol dando luqar a un color
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Aq¡'m IIs ü x r,:iq:r i*li r*n*:mq: i¿r'dirx r l ¡ *rlt'i.i*; f I l( r | )r lo(ion cjcterminar gravedactes específicas de entre 1 ,000 y i ,030.
Metodología rF!
r Limitaciones del análisis
Cuando en una muestra de orina hay nitritos, el ácido para arsanílico presente en la
rFf
t I ; r r r rck rr lología de la tira reactiva puede dar lecturas de gravedad especÍfica distin-
almohadilla reactiva forma un compuesto diazonio. Este reacciona con otro reacti-
vo presente ,2,3,4 tetrahidrobenzo(h)-quinolin-3-ol) formando un color detectable
(1
rf
¡
lrr; i li: l¿rs del reÍractómetro o del urinómetro.
rIF
en la almohadilla reactiva. Valores esperables:
En la orina hay nitratos y derivan de la alimentación. Esta metodología se basa
en el hecho de que el nitrato se convierte en nitrito por la acción de bacterias gram
negativas, si están presentes en la orina. Un resultado positivo sugiere la presencia
de 105 o más microorganismos por mililitro.
rF Se hallan falsas elevaciones cuando aumentan las cantidades de ciertos
iuralitos urinarios. El aumento de la concentración de cetona o la proteinuria de
ácido ascórbico oueden oresentar una disminución de la sensibilidad a los nitritos. til nen esterasa. Si en una muestra de orina hay leucocitos granulociticos, la esterasa
leucocÍtica calalizará la hidrólisis de un éster ácido amino a indoxilo en la almoha
Las muestras de orina de pacientes cuya alimentación carece de nitratos o las
muestras de orina que no se han retenido en la vejiga lo suficiente (4 horas o más)
fil dilla reactiva. Este indoxilo formado reacciona con una sal diazonia presente en la
como para que tenga lugar la reducción de nitratos a nitritos, pueden dar falsos
negativos. Esta prueba no detecta bacteriuria causada por microorganismos que
r-il almohadilla reactiva dando lugar a un color visjble.
Los resultados se califican a modo de neqativo a elevado.
''l r{t
l',
(.) URIANA¡.ISIS
Pueden aparecer falsos positivos si ha tenido lugar una contaminación vaginal
de la muestra de orina.
Pueden aparecer falsos negativos si la muestra de orina contiene cefalexina, ce-
Análisis microscópico 'I$.N
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E:
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microscópico.
El objet¡vo del análisis del sedimento en un urianálisis sistemático es detectar
H El
elementos formados en la muestra de orina: células, cilindros y cristales.
La regularidad de la técnica de laboratorio es fundamental en cuanto al proce-
ET sedimento,
EI EI
A
Cuando se refrigera, precipitan cristales amorfos de la muestra de orina.
A
cjt 3. Se OeOe tapar la muestra para evitar la formación de aerosoles durante la
centrifugación. Se debe equilibrar la centrÍfuga.
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ANALTSTS MTCROSCÓP|CO
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A Se deOe dejar que la centrifuga se detenga por sí sola. No se debe usar el t I c r ¡.1 e r ¡t {}I} cil el ft lstil'$"$ m N'N ilffi m"N N:ffi i\.N N.N NlN:N $'N,N)
freno de la centrífuga, puesto que ello podría alterar el sedimento'
A Oele que el sedimento repose durante 30-60 segundos antes de llevar a {..rj,-
cabo el analisis microscóPlco.
OLralquier glóbulo blanco presente en la circuiación sanguínea puede estar pre-
Lleve a cabo el análisis microscópico a bajos aumentos (1 0x) con luz tenue, sente en la muestra de orina (figura 2.1). En el análisis microscópico sistemático
lo cual es necesario para delinear los elementos formados translúcidos en el del sedimento urinario, los glóbulos blancos no están clasificados según tipo, pero
sedimenio urinario. Al observar el porlaobjetos, se debe variar continuamente el conocimiento de la morfología celular de los mismos puede ayudar a identificar
el mtcrÓmetro. glóbulos blancos adecuadamente.
* frtos aumentos son más útiles para detectar cilindros. Observe al menos
lOcamposdelaimagen.Ca|cu|e|amediadecilindrosenestosCamposy
registre la cantidad y tipo de cilindros por campo de bqo aumento
' Pase a usar el obietivo de grandes aumentos (4Ox). A estos aumentos, todos los
elementos formados en el sedimento urinario pueden observarse e identificarse'
observe al menos 10 campos y calcule la cantidad media de elementos ob-
servados por campo. Registre la cantidad y tipo de elementos por campo de Fil
grandes aumentos.
ril
lil
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N\\N[{\$$
UR|ANÁL|SI5:::]: ANÁL|SrS MTCROSCÓP|CO
A por ejemplo, los neutrófilos son difíciles de diferenciar de las células epite- * Colocando una gota de sedimento urinario y una de acido acetico diluido
liales. Colocando una gota de ácido acético diluido con el sedimento de en un poftaobjetos, los glóbulos rolos pueden diferenciarse de las gotas de
orlna, se puede potenciar el detalle nuclear de los glóbulos blancos para grasa: los glóbulos rojos se lisan al añadir el ácido acético, mientras que las
contribuir a diferenciarlos de las células epiteliales. flnlas dc orase no lO hagen.
A Con degeneración continua, los segmentos de los neutrófilos pueden fusio-
Se debe contar y anotar la cantidad total de glóbulos rojos por campo de gran
narse. En orina diluida o hiootónica. los neutrófilos se hinchan.
aumento.
tr
Se debe contar y anotar la cantidad total de glóbulos blancos por campo de
F
gran aumento.
fiü$qlklNilffis, u'ffi${}$i
E
r trIr r\ ,
' ,i{ -' ,*t,
i¡";{ { rl".,"
1}*s
Figura2.3. tigura2.4.
^^+^^ uc
uuLdJ ^-^^^
^^ Btd>d 0rllulas epiteliales
en un sed¡mento oscamosas en
urinario de perro .;rxlimento urinario
(40x). de perro (40x).
Las células epiteliales son de tamaño grande respecto a otros elementos del sedi-
mento urinar¡o.
Sin embargo, el tamaño de la célula epitelial depende de su origen. Asi, las
células epiteliales más pequeñas proceden de los riñones, los uréteres, la vejiga y
la parte proximal de la uretra, mientras que las células epiteliales más grandes se
originan en la parle distal de la uretra, la vagina y el prepucio. Figwa2.5.
Cé1ulas epiteliales
Las células epiteliales pueden contarse y anotarse clasificándolas por grupo o
de transición en
por tipo de células presentes. sedimento urinario
de perro (4Ox).
Tipos de células epiteliales
Células epiteliales escamosas
E-il Células epiteliales de transición
Son más habituales en muestras extraídas mediante cateterizaciÓn y micción, debi-
do a la contaminación vaginal o uretral (figura2.4).
f:l Ibvisten internamente el tracto urinario desde la pelvis renal hasta la uretra.
El tamaño y forma de las células epiteliales de transición no es siempre el mis-
Las células epiteliales escamosas tienen un diámetro grande pero poca anchu- ¡il rro, pero son más pequeñas que las células epiteliales escamosas y más grandes
ra, y tienden a plegarse. El núcleo es pequeño y redondo, y el citoplasma es gran- clrrc lt.rs células epiteliales renales (figura 2.5). El núcleo de la célula epitelial de tran-
de, con una pared celular de contorno irregular. Las células epiteliales escamosas f:il r;ir;irin cs redondo y está centrado en el interior de la célula. La textura de la célula
pueden aparecer de forma asilada o formando hojas. prrxle; tener un aspecto granular.
f{
H
En ocasiones, las células epiteliales de transición son binucleadas.
Existen varios tipos de células epiteliales de transición, que se describen en
función de la forma: redondas, ovaladas, espinosas o caudadas. Las caudadas
tienen colas citoplásmicas y se originan en la pelvis renal. Estas pequeñas células
de transición son 2 a 4 veces más grandes que un glóbulo blanco.
Cilindros
Estos elementos presentan lados paralelos y tienen el mismo diámetro a lo largo de
toda su estructura.
Los cilindros suelen ser varias veces más largos que anchos, y sus extremos
son redondeados o se estrechan progresivamente.
Se trata de moldes cilíndricos formados en el lumen de los túbulos renales y
están constituidos por una combinación variable de células y mucoproteína de la
matriz. La formación de cilindros suele tener lugar en el túbulo contorneado distal
Figura 2.6. Células de la nefrona, pero también pueden formarse en el 'asa ascendente de Henle o en
epiteliales de los el conducto colector.
túbulos renales en el
Los cilindros se denominan y clasifican en función de las células que contiene la
sedimento urinario
del perro (4Ox). mucoproteína de la matriz.
Exlsten cuatro criter¡os necesarios para la formación de cilindros: orina ácida,
concentración de sales elevada, tasa de flujo tubular baja y presencia de muco-
Células epiteliales de transición neoplásicas proteína de la matriz. La mucoproteína de Tamm-Horsfall sirve de malriz para la
Estas células son grandes y redondas, con núcleos excéntricos o multilobulados mayoría de cilindros presentes en la orina humana, lo cual se considera aplicable a
(figura 2.7). Pueden formar grupos o racimos, y es extremadamente difÍcil diferen- los animales. Esta mucoproteína albuminosa se secreta en pequeñas cantidades
ciar células epiteliales de transición neoplásicas de células epiteliales reactivas (pro- en las células epiteliales tubulares normales del asa de Henle, el túbulo distal y el
vocadas por una inflamación). túbulo colector. Estos son los lugares en los que se forman la mayoría de cilindros.
ANÁLISIS MIcRoScÓPIco
Cilindros granulares
Los cilindros granulares son hialinos y contienen gránulos que principalmente proce-
gránu-
den de la desintegración de células epiteliales de los tÚbulos (figura 2.9). Los
los empiezan Siendo gruesos y degeneran pasando a convertirse en gránulos finos'
Los cilindros de gránulos gruesos contienen gránulos más grandes que los cl-
lindros de gránulos finos y son de color más oscuro, a menudo marrón oscuro.
Los cilindros de gránulos finos contienen gránulos de color grisáceo o amarillo
pálido.
Figura 2.9.
Los crlindros de gránulos gruesos suelen ser más codos y de contorno más C lindro granular en
irregular que los de gránulos finos. Asimismo, los de gránulos gruesos suelen tener sedimento urinario
los extremos rotos de forma irregular. Es fácil confundir el cilindro de gránulos grue de perro (40x).
sos con grupos de uratos amorfos; el cilindro tendrá un contorno más marcado
que los grupos de uratos amorfos.
La presencia de cilindros granulares en el sedimento urinario suele indicar algun
trastorno tubulointersticial subyacente o proteinuria de origen glomerular.
rs
FS
,rl ]f, |
I
Cilindros de grasa
Los cilindros de grasa (o cilindros lipídicos) son un tipo de cilindro de gránulos grue- muy refractiva, Se forman en los túbulos colectores cuando el flujo urinario dis-
sos que contiene gotas de grasa (figura 2.10). Estas gotas son muy refractivas y mlnuye, Los cilindros muy enroscados probablemente son cilindros ceruminosos.
se acumulan en forma de cilindros como consecuencia de la degeneración lipídica La degeneración que compoda la formación de cilindros ceruminosos precisa una
celular. Estos cilindros aparecen en caso de enfermedad tubular degenerativa. cantldad considerable de tiempo y de estasis intrarrenal.
Figura 2.1 1.
Figura 2.10. Cilindro ceruminoso
Cilindro lipídico en en sedimento
sedimento urinario urinario de perro
de peno (ztOx). (40x).
.¡" 6d
Otros hallazgos habituales son oxalato cálcico en orina ácida, neutra o alcalina. 0arbonato ooo . @: ; Neutra, alcalina El ácido acético
-- ":ó
.
Asimismo, puede hallarse ácido hipúrico en orina ácida, neutra o ligeramente alca- r;álcico o provoca la
lina, o fosfato triple (fosfato amónico magnésico) en orina ligeramente ácida, neutra liberación de CO,
0
o alcalina. Por otra parte, el carbonato cálcico, los fosfatos amorfos y los uratos de liooramonto
Fosfato triple Ácido acético
amonio se hallan a oH alcalino. ',1ir ácida, neutra o
Los hallazgos clinicos anómalos son: fosfato triple, oxalato cálcico, fosfato cál- alcalina
'¡1'.i
cico, urato, cistina y carbonato cálcico. También pueden hallarse biuratos de amo-
nio en muestras de orina alcalina, y pueden estar presentes en enfermedades en Urato de
amonio
#
s
Ácida, neutra Ácido acético
etilenglicol.
@& ffi
t . "* * 'Ácida Ácido clorhídrico
El siguiente paso hacia la identificación de cristales del sedimento urinario con-
siste en determinar la solubilidad del cristal en medio alcalino y ácido. Esta informa- ril i ' i ¡''lgf'
¡,
a 'z
. .:.,,.;
'f .;,rlil
':&'
ción se resume en la tabla 2.1 .
Figura2.12.
Crist¿les amorfos en
sedimento urinario
de perro (zlOx).
ffiffi
.s
*: J:
@r
',¡fl'
ffi
Figura2.14. Figura 2.16.
{s¡, Cristales de Cristales de urato
carbonato cálcico en de amonio en
'-w
sedimento urinario ;txlir¡ento urinario
,;illl i de perro (40x). rkr perro (40x).
Cristales de bilirubina Otros elementos del sedimento ur¡nar¡o
Los cristales de bilirrubina se encuentran en orina ácida. Estos cristales son de co-
lor amarillo, rolo rubí o marrón oscuro, y tienen aspecto de placas romboides o bien Hilos de mucos¡dad
agujas, láminas o gránulos (figura2.17). Los hilos de mucosidad tienen aspecto de hebras largas, estrechas y onduladas
en 6l sedimento urinario (figura 2.18). Se originan en superficies mucosas; en con-
dlclones normales aparecen en pequeñas cantidades, y aumentan mucho en caso
de Inltación de cualquier tipo.
La presencia de hilos de mucosidad suele clasificarse en: muy infrecuente,
poca, moderada o elevada.
Figura 2.18.
Los siguientes cristales son difíciles de encontrar sin un microscopio
Sedimento urinario
de contraste de fases. de perro en el que
se observan hilos de
Cristales de leucina mucosidad (40x).
Los cristales de leucina se hallan en orina ácida. Estos cristales son de color ama-
rillo o marrón y son muy refractivos. Estas esferas se parecen a las gotas de grasa,
pero tienen estriaciones radiales v concéntricas.
43
ANALI s I s n,r I cnodCó¡jdiil: :::::
il
E
}
C
Figwa2.2O.
Bacterias en
E FI I
Figura 2.21.
lil,r; irngicas en
f
sedimento urinario
de perro (40x). Efl ,rrr iir l:r lkr urinario
r
*l Ii{
l*
En general, las hifas fúngicas son contaminantes de la muestra de orina, pues-
to que ni en el perro ni en el gato suelen tener lugar infecciones fúngicas del tracto ("
urinario.
La presencia de hifas se clasifica en: muy infrecuente, poca, moderada o f)
elevada.
Parásitos
En el sedimento urinario pueden observarse huevos de parásitos. Los huevos de
parásitos son elementos grandes de formas características.
Los que pueden observarse son Dioctophyma renale (huevo de un verme renal
Figwa2.23.
del perro), Capillaia p/lca (huevo de un verme de la vejiga del perro) y microfilarias Microfilaria de
de Dirofilaia immitis. Dirofilaria immitisen
sedimento urinario
Si el sedimento urinario ha resultado contaminado con heces infectadas, podrá
de peno (40x).
observarse gran variedad de huevos de parásitos (figuras 2.22y 2.23).
Debe registrarse la presencia de cualquier parásito.
Artefactos
En el sedimento urinario puede observarse gran variedad de artefactos. Estos ane-
factos pueden adquirirse durante la recogida de la orina o durante el análisis de la-
boratorio. Algunos de ellos pueden ser fibras de algodón, pelo o polvo de guantes
(figuras 2.24,2.25 y 2.26). Existe gran variedad de materiales que pueden convertir
el análisis microscópico del sedimento urinario en todo un reto.
Lo habitual es no registrar la presencia de nlngún artefacto.
Figura2.22.
Capillaria plica en
sedimento urinario
de perro (40x).
tigwa2.24.
Polvo de guante en
sedimento urinario
de peno (40x).
*l ET
Valores de rnfmrmmmilm
para el an¿*ililmfrw Nm wm'ffmTm
Características f ísicas
Golor Amarillo, amarillo claro. ámbar
Sangre Negativo
Glucosa Negativo
Getonas Negativo
FN Bilirrubina Perro: puede tener hasta i + de bilirrubin a urinaria.
*l
ffi
,0, neuRtol-ocfn
WBG (leucocitos) Cistocentesis: O-3/campo de grandes aumentos (hpf)
Cateterización: 0-5/hPf
Micción: O-7/hr:f
Recogida de muestrüs
RBC(eritrocitos) Cistocentesis:0-3/hpf
Cateterización: 0-5/hPf
y realizactmn dm ptruebas
Micción: O'7/hof
I
Célulasepiteliales O-3/hPf
Mucosidad Ausencia
Parásitos Ausencia
,,
l.lll
Proced imientm dm mhffmn'"xmfrmmn
l¡
oe muestras
Metodo de receigfre$m
li r
durante
lrorir posterior a la extracción, aunque lo ideal es preparar frotis de sangre
ir rnlccliatamente después de la venopunción.
-l
Gh RECOGIDA Y REAL¡ZACIÓN DE PRUEBÁS
Macrométodo o micrométodo
ffimff*m&mfrmsru s$w m"mmusmrstw
$rumruffitmffiffi ffiffiwry$m$mtm V ['l rnacrométodo se lleva a cabo mediante un tubo de hematocrito Wintrobe.
Se transfiere sangre completa bien mezclada con anticoagulante en este tubo y
se centrifuga a25OO G durante 30 minutos.
EI El recuento hemático completo (CBC) se basa en pruebas de laboratorio que
se llevan a cabo para examinar las células que contiene la sangre periférica.
V El micrométodo se lleva a cabo mediante un tubo capilar que se centrifuga a
Lrnas 10000 a 13000 G durante 5 minutos. El tubo capilar mide unos 7 centí-
Estas pruebas clasifican, enumeran y diferencian los tipos de células presentes
rTretros de largo y tiene un diámetro uniforme de aproximadamente I mm.
en la sangre periférica.
en glóbulos rolos, glóbulos blancos o plaquetas, y
EI La muestra utilizada debe ser de sangre completa recogida directamente
M Las células se clasifican por venopunción o una muestra de sangre completa bien me¿clada con
se recuentan conforme a ello. Esta tarea puede llevarse a cabo mediante
anticoagulante.
métodos manuales o automáticos. Cuando se usan los automáticos, sue-
EI Existen dos tipos de tubos capilares: heparinizado y no heparinizado.
len registrarse los índices de glóbulos ro1os.
EI Si la muestra de sangre se recoge directamente de una punción en la
EI El recuento diferencial de glóbulos blancos se lleva a cabo examinando un
piel, debe utilizarse un tubo capilar heparinizado. Estos tubos tienen
frotis de sangre teñido al microscopio. Se evalúan las características morfo-
un ribete con una lÍnea roja que indica al usuario que el tubo capilar
lógicas de los glóbulos rolos y las plaquetas
está heparinizado. Una vez la muestra se ha recogido en uno de es-
EI En los recuentos hemáticos completos de medicina veterinaria se suelen incluir
tos tubos, debe agitarse con cuidado para mezclar la heparina con la
los valores de proteínas plasmáticas y de fibrinÓgeno. Esto no suele hacerse en
muestra de sangre completa. Esto da lugar a una dilución de heparina
medicina humana.
de 1:1000.
ül Si la muestra de sangre utilizada procede de un tubo de recogida de
sangre con heparina o EDTA, la muestra, bien mezclada, debe trans-
ffimmmmm$fimwfiwp.m*mm
Llmtl ferirse a un tubo no heparinizado o sin anticoagulante. Estos tubos
ffiE) $d**, ffiB t$#il]$BS H"}Td$t[,ü#$#S tienen un ribete de color azul que indica ai usuario que está empleando
un Lubo capilar sin anticoagulante.
VI Ambos tipos de tubos capilares deben llenarse, y uno de sus extremos
F'&mnHmtmq:s'¡t#
debe taparse con plastilina. Existen dos plastilinas comerciales útiles para
El hematocrito es la proporción del volumen de los eritrocitos respecto al de la este fin, Seal-EaserM y CritosealrM.
sangre comprela. EI gl tuOo lleno se coloca en uno de los surcos radiales de una centrífuga de
microhematocrito, con el extremo del tubo de hematocrito tapado situado
EJ Los términos "volumen del total de glóbulos ro1os" (PCV packed cell volume) y
"hematocrito" (HTC) son intercambiables, aunque se determinan por medlos C en la periferia de la centrífuga. La tapa de la centrífuga debe asegurase
y la centrÍfuga debe cerrase y fijarse. El tubo debe centrifugarse durante
distintos.
MJ El procedimiento de laboratorio mediante el cual se determina el volumen t 5 minutos a 1 0000-1 3000 G. Si el hematocrito es superior al 50%, se preci-
sa otra centrifugación de 5 minutos para garanlizar que la mínima cantidad
del total de glóbulos rojos consiste en centrifugar sangre completa durante
un periodo de tiempo determinado para obtener la agrupaciÓn de glÓbulos C posible de plasma quede atrapado. Una vez terminada la centrifugación, el
lLrbo capilar se coloca en un dispositivo de lectura. Existe gran variedad de
rolos. A continuación, se mide el volumen de glÓbulos ro¡os y el de sangre
completa. Esta proporciÓn se expresa en porcentaje o fracción decimal. - ciispositivos comerciales de este tipo, aunque también puede utilizarse una
EI
VI El hematocrito se determina mediante instrumentos automáticos.
E volumen del total de glóbulos rojos puede determinarse de dos formas
cjn rogla milimétrica. Se mide el volumen total de la muestra y el volumen total
cie los olóbulos roios.
*l F=r
I
EI fl métoOo indirecto de medición del hematocrito es el producto del volumen sustituir el recuento leucocitario automático, puede ser una de las primeras pis-
celular medio (MCV) multiplicado por el recuento de glóbulos rojos, según de- tas de laboratorio de un recuento leucocitario anómalo. A veces, puede obser-
terminación de instrumentos automáticos. Este cálculo conlleva mayor proba- varse una capa de plaquetas de color crema (a menudo con un instrumento de
bilidad de error en muestras veterinarias que los otros dos métodos de hema- aumento) sobre la caoa leucocitaria.
tocrito, puesto que en especies distintas dei perro, los tamaños de glóbulos EI OeOe haber una clara diferencia entre el fondo de la capa leucocitaria y el blo-
rojos pueden ser menores que en el ser humano y la mayoría de métodos con que de glóbulos rolos. Si el fondo de la capa leucocitaria está ligeramente enro-
instrumentos automáticos se basan en los tamaños de las células humanas. jecido, es muy probable que contenga células jóvenes, reticulocitos o glóbulos
rolos nucleados.
Causas de error EI Pueden detectarse microfilarias en la evaluación microscóoica del olasma sr-
tuado justo por encima de la capa leucocitaria, En ocasiones muy infrecuentes
EJ Exceso de anticoagulante en la muestra de sangre. Un exceso de anticoagu-
pueden observarse tripanosomas en el mismo punto. Debe examinarse el tubo
lante puede diluir en exceso la muestra y dar lugar a resultados erróneos.
capilar intacto, a la altura de la interfase entre la capa leucocitaria y el plasma, a
EJ lmposibilidad de obtención de una muestra de sangre circulante a través de
baja potencia microscópica.
la punción cutánea. El exceso de líquido tisular puede dar lugar a resultados
EI El color del plasma también debe observarse. El plasma normal es de color
similares a los derivados de un exceso de anticoagulante.
entre amarillo claro y amarillo oscuro. Así, los tonos anaranjados o verdosos
EI Duración y velocidad suficientes de centrifugación. Las centrÍfugas deben cali-
pueden indicar un aumento de la concentración de bilirrubina, mientras que el
brarse al menos una vez al año. Este procedimiento debe estandarizarse, y la
plasma rosa o rolizo puede indicar hemólisis. Hay que tener en cuenta que una
plantilla técnica debe seguirlo.
mda técnica de recogida de la muestra de sangre es la causa más habitual de
üJ lmposibilidad de mezclar la sangre lo suficiente antes de la medlción del
hemólisis.
hematocrito.
EI E plasma normal es transparente; el plasma turbio indica lipemia.
Ef lmposibilid adde realizar una lectura adecuada. Debe determinarse el volumen
de los glóbulos ro1os. La capa de leucocitos no debe incluirse como parte del
Determinación del hematocrito/PCv mediante el método
volumen de eritrocitos,
microhematocrito
VI lrregularidad del diámetro interno del tubo capilar. Los tubos capilares deben
comprarse a un proveedor fiable. ET Principio
Examen macroscópico del tubo capilar en el micrométodo ET Se centrifuga sangre completa con anticoagulante para conseguir la máxima can-
tidad posible de glóbulos rojos agrupados. Se mide el volumen ocupado por los
GT
Procedimiento {T oao"n evitarse las variaciones extremas de la temperatura ambiente para
t. Dejar que el tubo capilar se llene de sangre entera, al menos hasta 3/4 partes. eliminar lecturas erráticas. Los refractómetros de compensación de la tem-
ü. Tapar un extremo del tubo capilar con plastilina peratura son los ideales.
$. Colocar el tubo capilar en la centrÍfuga con el extremo tapado en la periferia de
Ef El plasma obtenido de sangre recogida en tubos con EDTA o heparinizados
la centrÍfuga y apoyado contra el ribete periférico.
puede usarse para el análisis de proteínas plasmáticas. Se necesita sólo una
4" Centrifugar durante 5 minutos. Un valor de hematocrito de más del 507o re-
gota de plasma. Esta muestra puede obtenerse mediante el uso de plasma
quiere una centrifugación adicional de 5 minutos más.
residual del tubo de microhematocrito utilizado para la evaluación del vorumen
$. Retirar el tubo capilar de la centrÍfuga. Existe una gran variedad de aparatos de
celular corouscular.
lectura. Siga al pie de la leira las instrucciones del fabricante.
EI se necesita plasma transparente para las mediciones exactas de,la proteína
{$, Se determina el volumen total de la muestra y el volumen de glóbulos ro¡os. No
plasmática, Dado que el método de la refractometra para la medición de pro-
debe incluirse la capa leucocitaria en el volumen de glóbulos rolos.
teínas plasmáticas se basa en la transmisión de la luz, cualquier factor que
Resultados interfiera con ésta puede afectar a la lectura de las proteínas plasmáticas
Registre los resultados en porcentaje o fracción decimal. Las unidades son litro/litro,
* frto incluye lipemia, hemólisis e ictericia.
oero en los informes se suelen omitir.
Ert * Ur concentraciones anormalmente elevadas de glucosa, urea, sodio o clo-
Froteínas püasm{ticas r ruros pueden aumentar de forma falsa la lectura de proteÍnas plasmáticas.
Se supone que las concentraciones "normales" de estos analitos permane-
argunas. EI Ef Recuerde que el suero fresco contiene las mismas proteínas que el plasma, ex-
EI Estas proteínas poseen gran variedad de configuraciones químicas y funcio-
nes, como el mantenimiento del equilibrio ácido-base y la presión osmótica r cepto el fibrinógeno, el factor V y el factor Vlll, unos factores que se consumen
durante la formación del coágulo, Por tanto, las proteínas séricas medidas por
üJ
coioidal.
La refractometría se suele utilizar para medir las proteínas plasmáticas. El prin- H EI
refractometría serán más bajas que las del plasma.
Las determinaciones de proteína plasmática obrtenidas en un cBC son útiles
cipio de este método de análisis se basa en el hecho de que las proteínas en
solución ocasionan un cambio en el Índice refractivo que es proporcional a la E! para determinar posibles alteraciones de liquidos y electrolitos, y para diagnos-
ticar anemia.
EI
concentración de proteína,
Los refractómetros son instrumentos manuales que se emplean para obtener
H M Los aumentos de los valores de proteínas plasmáticas
mentos del componente globulinas, y se observan en:
suelen deberse a incre-
,
ffi Recuerde que debe realizarse un control de calidad diario en el refractó-
metro. Se recomiendan al menos dos controles: un nivel bajo y un nivel EI ¡ Ciertos tipos de neoplasias linfoides, aumento de las globulinas.
Principio Procedimiento
Las proteínas en solución dan lugar a un cambio en el índice refractivo que es pro- Colocar el tubo de hematocrito para centrifugación en el baño de agua a 56-
porcional a la concentración de proteína. 58 oC durante al menos 3 minutos. Esto puede realizarse colocado agua en un
tubo de ensayo de 12 x 74 mm e introduciendo el tubo de ensayo en el baño
Equ i po/reactivoVmaterial
de agua o el bloque de calor. Asegúrese de que la línea de plasma del tubo de
. Plasma para la prueba obtenido a partir de la centrifugación de un tubo capilar
hematocrito esté completamente inmersa en el agua (pero sin que se introduz-
de microhematocrito (PC\4 o un tubo de sangre con anticoagulante (EDTA o
ca agua en su interior).
heoarind.
Retire el tubo de hematocrito del baño de agua pasada la incubación de
. Medidor de sólidos totales (refractómetro).
3 minutos. Centrifúguelo en la centrÍfuga de hematocrito.
. Agua destilada.
Tras el procedimiento de determinación de la proteína plasmática, lea el
. Papel limpiaobjetivos.
resultado.
Procedimiento
Resultados
Obtener plasma rompiendo el tubo de microhematocrito por encima de la
El fibrinógeno se calcula restando el valor del aparlado 3 anterior al valor de la
capa leucocitaria o centrifugando la sangre completa con anticoagulante.
proteína plasmática no incubada. En este caso, los resultados se expresan en g%
. Colocar una gota de plasma sobre la placa del medidor de sólidos totales.
(equivalente a gramos por decilitro: g/dl). Los resultados se pueden convertir a
.ri Presionar la tapa de plástico para esparcir el plasma por encima del prisma.
mg% (equivalente a miligramos por decilitro: mg/dl) multiplicando por 1000 (des-
,lj. Se toma la lectura de las proteínas plasmáticas a partir del gráfico adecuado.
plazando la coma del decimal tres lugares hacia la derecha).
(Algunos refractómetros disponen de tres escalas: una para las lecturas de
::,
proteína total y dos para lecturas de gravedad especifica).
El prisma debe limpiarse con agua destilada y papel limpiaobjetivos.
F Ejemplo: Lectura de proteína plasmática
]
7,4 g/dl,
A Un inconveniente es que el cubreobjetos es difícil de manipular y precisa Procedimiento de preparación de frotis de sangre periférica
habilidad y práctica para conseguir frotis legibles. Estas preparaciones no Principio
se oueden teñir mediante sistemas automáticos. Se extiende una gota de sangre sobre un portaobjetos y se deja secar al aire. A
EJ E método del portaobjetos se basa en el uso de portaobjetos de 7,5 x 2,5 cm. continuación, este frotis se puede teñir de la forma adecuada para su evaluación
VI Se coloca una pequeña gota de sangre en el extremo de un portaobjetos. microscópica.
El otro portaobjetos se emplea como utensilio de extensiÓn, de tal forma
Eq u i po/reactivos/material
que uno de sus extremos se coloca delante de la gota de sangre y se des- . Dos portaobjetos para microscopio, limpios, sin polvo y de7,5 x 2,5 cm.
liza oor encima del otro, extendiéndola" La gota de sangre se deja exten- . Muestra de sangre con anticoagulante.
der hacia los márgenes del podaobjetos que la contiene y a continuac¡on . Tubo capilar sin anticoagulante.
se desplaza el porlaobjetos superior hasta el extremo del inferior. El frotis
se deja secar al aire y se etiqueta en el extremo rugoso con un rotulador Procedimiento
indeleble.
E Al lcnninar, un portaobjetos será el frotis, y el otro se habrá usado como medio de
t;xlonsión.
* Recuerde que algunos rotuladores no son indelebles y que se borran con
las sustancias químicas utilizadas para las técnlcas posteriores de tinción. E Ooloque un portaobjetos sobre una supedicie plana. Mediante un tubo capilar,
coloque una gota de sangre de 2-3 mm sobre el poftaobjetos, aproXimada-
ilrcnte a 1 cm de uno de los extremos.
63
HEMATOLOGíA
r RECOGIDA DE MUESTRAS Y REALIZACTÓN DE PRUEBAS
j
Use los dedos pulgar e Lndice para sujetar este portaobjelos sobre la superlier',
plana. Con la otra mano, coloque un extremo del segundo porlaobletos lustct f
i^t-^+^ ¡^ t^
uer¿ir ile ue ^^+^ ¡^
ra gora ue sangre.
Sujete el segundo portaobjetos formando un ángulo de 30-45'y deslícelo ;
^..^^+-^^^^
allaSll¿:ll luu l^
la gOLa i, Sang'e.
^^+^ Ue
Deic nr rc la qannre qo evlicnr-la dclenienr-lose 9OCO antes de IOS exlremOS del
r
portaobletos.
Mediante un movimiento preciso y bien calculado, desplace el segundo por
r
taobjelos hacia el exlremo del primero. Ll total del frotis de sangre debe cuo.ir
alrededor de a pañes del poflaobletos.
F
&
Dele que el lrolis se seqle al aire.
Etiquete el extremo rugoso del frotis con un rotulador indeleble.
r -p #
Discusión
r
El grosor del frotis depende de tres variables; el angulo de colocación del porlaob- F Figura 3.2.
jetos usado para la extensión, la velocidad de extensión y el tamaño de la gota de
sangre. Fn un buen trotis de sangre, la lransición desde la zona gruesa es progre- F I rrtrs de sangre
1rr férica correcto
(linc ón de Wright
siva. Debe haber una distribución uniforme de células sin zonas que contengan
cresfas o agujeros. Esla es la zona del frotis de sangre perilerica que debe utilizarse F r¡odificada. 5Ox). s
para llevar a cabo un recuento diferencial de leucocitos (figura 3.2). Las figuras 3.1
y 3.3 representan zonas que no deben utilizarse para llevar a cabo dicho recuento.
F
F
F
r¡$
F
g
F 'il
@
F
F
Figura 3.1. Frotis F Figura 3.3. Frotis
r, rinll'Lt ¡terfórica
dc <¡norc ncr fcri¡¡
r
1
,'t
poco oenso I J(,r It:riil(lo alf)nso
r;
F I 65
I
I
RECOGIDA DE MUESÍRAS Y REALIZACIÓN DE PRUEBAS
ffiM
T
Métodos de tinción del frotis [l tJn;rvcz lunidc¡, el frotis de sangre periférica adquiere un color macroscópico
E trx;rtrkl.
EI Un frotis de sangre periférica puede teñirse mediante métodos manuales o
El rroscópicamente:
automáticos. E Mir
I rx; I lll0 cleben ser rosas.
Ml En el caso de los métodos manuales, siempre hay que seguir las instrucciones
I rx; n[rclcos de los WBC deben ser de color púrpura.
de los fabricantes, pero en términos generales, el frotis de sangre periférica se
I o:; r¡ránulos neutrófilos deben ser de color vloleta-rosa.
fija, tiñe y lava mediante un proceso que conlleva unos 1O minutos.
I rx; gránulos eosinófilosdeben ser de color naranja-rojo.
VJ La tinción puede precipitar a partir del estado de solución durante el alma-
I os gránulos basófilos deben ser de color púrpura-azul.
cenaje. Puede ser necesario filtrar la tinción antes de cada uso.
I lrs plaquetas deben ser de color purpura azul.
EI La tinción y las soluciones de tinción deben actualizarse o sustituirse segun
I as áreas sin células deben ser transparentes y no debe haber preiipitado
instrucciones del fabricante.
c1o tinción.
EJ Los recipientes Coplin deben limpiarse a fondo al menos con la misma fre-
cuencia con que se sustituye la tinciÓn.
Localización y resoluc¡én
EI Los métodos automáticos paften de sistemas de tinción que aportan veloci-
de los problemas derivados de la tinción
dad y constancia de tinción, pero son caros en comparaciÓn con los métodos
manuales. Problema
llay demasiados núcleos rosas que son de color gris pálido o azul pálido, los eri-
Principios de la tinción trocitos son de color rojo brillante o naranja, y los gránulos eosinófilos son de color
rolo brillante.
EI ft método de Romanowski de tinción de frotis de sangre se puso de moda
hasta principios de los años 1970, cuando se dieron a conocer los métodos de
Giemsa y de Wright.
E Posible causa
. Tinción, tampón o agua demasiado ácidos.
üJ fn la actualidad, la tinción de Wright es el método más utilizado. .
las soluciones con anilina utilizadas en este me-
E .
Tinción insuficiente, lavado prolongado.
EJ Las propiedades de tinción de Colocación de cubreobjetos antes de que el frotis esté seco.
todo constituyen la base de la diferenciación de glÓbulos blancos. tr Solución
EJ Existen dos tipos de tinciones: las tinciones alcalinas y las tinciones . Comprobar el pH de las soluciones, y sustituirlas si es necesario.
ácidas. E . Cambiar las tinciones y tiempos de lavado, y evaluar el efecto.
EJ Las tinciones alcalinas del método de Wright consisten en una compleja . Cambiar las técnicas de preparación del frotis.
mezda de tiaminas, principalmente azul de metileno y azur 3' E
EI La tinción ácida es una solución de eosina en alcohol metílico.
VI Cuando los núcleos y otras estructuras del frotis de sangre periférica captan E:il Problema
(lromatina nuclear azul (de excesivamente azul a negra), eritrocitos azules o verdes,
'
las tinciones alcalinas, se denominan basÓfilos, mientras que las estructuras
que captan las tinciones ácidas se denominan acidófilas o eosinÓfilas. E:I rlriinulos de los eosinófilos de color gris oscuro o azul.
E::I
I'
Solución ú Halle la porción del frotis teñido de sangre periférica en la que los glóbulos ro1os
. Comprobar el pH de las soluciones, y sustituirlas si es necesario. se distribuyen formando una monocapa de células. Mediante un objetivo de 5Ox,
. Cambiar las tinciones y tiempos de lavado, y evaluar el efecto. realice un cálculo de la media de leucocitos oor campo en un total de 10 cam-
. Cambiar las técnicas de preparación del frotis. pos. Mediante la siguiente fórmula, realice una estimación del recuento total:
Cantidad media de leucocitos/campo x 2000 = número de leucocitos/pl.
Problema
Todas las células están oálidas.
ú Las plaquetas pueden estimarse de la misma forma, a padir de un objetivo de
100x y la media de plaquetas por campo en un total de 10 campos. Mediante
Posible causa la siguiente fórmula, realice una estimación del recuento total:
. Tinción insuficiente. Cantidad media de plaquetas/campo x 20000 = número de plaquetas/pl.
¡ Lavado excesivo
Solución
. Cambiar las tinciones y tiempos de lavado, y evaluar el efecto.
Problema
Precipitados de tinción.
Posible causa
. Lavado insuficiente.
Solución
. Usar portaobjetos limpios y sin pelusas.
. Cambiar los tiempos de lavado de la tinción, y evaluar el efecto.
Problema
Áreas refractivas en los glóbulos ro¡os.
Posible causa
o Tinción diluida (artefacto agua).
Solución
. Renovar la tinción, a diario o semanalmente.
V ?ara confirmar los recuentos automáticos debe realizarse una estimación vi-
EI
sual del recuento de glóbulos blancos. Esta estimación también puede llevarse
a cabo cuando no se dispone de análisis automático.
EI
ET
*l Eil
.,,W
ó xemnroloclR t,
3
Glóbulos blancos
:.i
0
+
q.
F
+
q.
Función y características físicas
EI Los glóbulos blancos también se denominan leucocitos.
q. Neutrófilos
H
+
Función
Los neutrófilos maduros se liberan de la médula ósea hacia la sangre periférica.
Atraviesan el endotelio vascular y sirven de primera línea de defensá frente a la
Ef invasión microbiana. Los neutrófilos son responsables tanto de la fagocitosis como
de la acción microbicida, que consiste en una quimiotaxis seguida de ingesta y
Eil
I
dr se limita a las bacterias, puesto que los hongos, las levaduras, las algas, los parási-
tos y los virus tamblén pueden resultar dañados o destruidos por los neutrófilos.
H I
Descripción
H
I
Los neutrófilos son los leucocitos más numerosos de la sangre periférica del perro
]E
Linfocitos
]C
Función
C I or li¡krr;itos constituyen la primera
línea de defensa inmunitaria de la sangre peri-
Iorir;ir. I xistcn básicamente dos tipos de linfocitos: las células T y las células B. Las
r;o[rlirs I circulan por todo el torrente circulatorio y el sistema linfáilco, mientras que
l;r; r;(:[rl¿rs B suelen estar en tejidos linfáticos secundarios (como los ganglios linfáti-
rxrs). No existe diferencia morfológica entre las células T y las células B.
ff-
Descripción
Los linfocitos son más pequeños que los neutrófilos, pero más grandes que los
Figura 4.1. Neutrófilo glóbulos rolos. cuando se aplica la tinción de wright, el citoplasma de los linfocitos
segmentado en frotis adquiere un color entre azul y azul oscuro, que puede poseer pequeños gránulos
de sangre periférica
de gato (tinción de
de color rosa-púrpura. El núcleo es de color púrpura intenso, con cromatina densa
Wright modificada, (figuras 4.3y 4.4).
100x).
ffiw#.%m Cil
E1il
ffi-Wtrffi.,%W*qf'ft
c1il
1Cil ffiWM
ffiffi**w
tigura 4.2. Neutrófilo
sementado en frotis
1Eil Figura 4.3. Linfocitos
W#$5'$fim,
de sangre periférica en frotis de sangre
de perro (tinción de
Eil
periférica de gato
Wright modificada, (tinción de Wright
100x). rnodificada, 100x).
lE:t
]8il
,^l l}{ l',
GLÓBULOS
E
E
E
E
Mlmns*ütms
Función
Los monocitos fagocitan y digieren material extraño, detritos celulares y células
muertas. En la defensa frente a la invasión microbiana, los monocitos son fagocitos
Efl
menos eficaces que los neutrÓfilos. Eril
Los monocitos se liberan a la sangre periférica desde la médula ósea. Una vez
en la circulación, los monocitos pueden abandonar la sangre periférica en ausencia E=l
de inflamación, o bien pueden salir a la circulación en respuesta a una inflamación.
Una vez están distribuidos por el tejido circundante, los monocitos se transforman Eil
en macrófagos, que contienen más enzimas proteolÍticas y gránulos que los mo-
nocitos precursores. En la sangre casi nunca hay macrófagos, pero pueden ob-
tr:l
servarse en frotis de sangre capilar de casos de trastornos como la ehrlichiosis, la
histoplasmosis o la leishmaniosis.
Eil
EJ
Descripción
Los monocitos son menos habituales que los neutrófilos o los linfocitos en la san-
Eil Figura 4.6. Monocrto
gre periférica del perro y el gato. Los monocitos miden entre I5 y 20 pm de diá-
metro. Cuando se aplica la tinción de Wright, el gran citoplasma se tiñe de color
E:l r:n fro[is de sangre
¡x:rifórica de perro
rosa-púrpura, lo cual permite observar que posee finos gránulos, cuyo aspecto Eil (tint:i(rn de Wright
rr rrxlilrr:aria, 100x).
se describe como "vidrio esmerilado". El núcleo puede ser ovalado o tener forma
"arriñonada" (figuras a.5y a.Q. Eil
^l ;ril 77
GLÓBULOS BLANEOS
t
ffimsfrr'¡mffr[os
I
Función
Los eosinófilos poseen propiedades fagociticas y bactericidas pero en estos proce-
F
sos son menos eficaces que los neutrófilos. Los eosinófilos atacan a los helmintos
para matarlos, y resultan atraídos por mediadores químicos liberados por mastoci-
Los durante las reacciones aleroicas v ana[ilácLicas.
Descripción
Los eosinófilos están presentes en pequeña cantidad en animales sanos. Tienen F
un tamaño similar o ligeramente superior al de los neutrófilos. Los eosinófilos son
fáciles de reconocer mediante tinción de Wright, puesto que los gránulos citoplás- F
micos se tiñen de color rojo brillante. Los gránulos de los eosinófilos del gato pue
den ser más ovoides que los del perro (figura 4.7). Los gránulos de los eosinófilos F +I
del perro son redondos y de tamaño y cantidad bastante variabrles (figuras 4.8 y
4.9). El núcleo del eosinófilo se parece al del neutrófilo en que es segmentado, pero Fq Figura 4.8. Eosinófilo
Efl
en frotis de sangre
los segmentos pueden no estar bien definidos.
perifénca de perro
(tinción de Wright
FA rnodificada, 100x).
Eil
tril
Eil
tril
tr.il
Figura 4.7. Eosinófilo
Fil Figura 4.9. Eosinóf lo
r krs¡lranulándose
cn frotis dc qanorc
periférica de gato Eil rrr rolis de sangre
f
lxrrrfirrit:a de perro
Fil
^l Fil
l^
HEMATOLOGíA
.:
rs
[$;***¡'flf
Fr¡nción
fi*¡:¡;
r:r
Los basófilos son una fuente de sustancias mediadoras de la inflamación. Si los
f:f /#Éftmi*fl$Iitrfiffi
hay, están presentes en cantidades pequeñas en la sangre periférica.
f:f, ffi ''',,..,'
i
Ei 't, ;t,
Fil
F{
Eil
tr:E
tr:[
trg
tril
F:N
r:tr
ra
Figura 4.10. Basófilo
en frotis de sangre
ra
perifér ca de gato f:I
ra
(tinción de Wright
modificada, 100x). lr11rr;r 4.12" ll,r ,rl Iror lroli., r1e sangre periiérica de perro (tinción de Wright modificada, 100x)
l"
ffi r GLÓBULOS BLANCOS
: :
"lill
f
ffi **9:*'qrtfr ilc*fi $lfi *,j;$il'd;a
]
Func!ón
Los neutrófilos en banda son una forma inmadura del neutrÓfilo segmentado y pue
r
den liberarse prematuramente de Ia médula ósea como respuesta a infecciones.
]
Descripción f
El neutrófilo en banda posee un núcleo en forma de herradura de caballo. Cuando
se ap|ca tinción de Wright, se obsela un núcleo púrpura que contiene cromatina
r
visible (figuras 4.13 y 4.14). El citoplasma es de color rosa claro a púrpura y puede r
contener gránulos pequeños que pueden ser difíciles de diferenciar,
r
F
tr
E
tr
tr
tr Figura 4.14. Neutrófilo en band¿ r - perro en frotis de sangre periférica
(tincrón de Wright modif cada, 100x)
tr
tr
B
r
r
Figura 4.13. Neutrófio en banda y neutrófilo segmentado de gato en frotis de sangre periférica
(tinción de Wright modificada, 100x). r
r
F
i"
ffi
T
Y'e*wnryru ff rrumm dmwmwfr ptHwmm rm mtfr wmw ffi
.,
m ffimm gffmfumfrmm fu$mrrummm
F
Los siguientes términos se utilizan para describir variaciones en la morfología
leucocitaria.
,rl,
EI Alteración tóxica
en un aumento de la basofilia de los gránulos de los neutrÓfilos y un aumento de la r I r,, ir tl1rt: periférica
cantidad de vacuolas en el citoplasma de los neutrófilos (figura 4.15). rlc ¡rcrro (f nción de
Wrililrl ntodificada,
Los cuerpos de Dóhle también son un indicador de alteración tÓxica. Los cuer-
100x).
pos de Dóhle son inclusiones citoplásmicas aisladas y de color gris azulado, de
forma redondeada u ovalada (figura 4.16).
El Neutrófilos hipersegmentados
F
tr
E
E
l
E
.;"., 1"" E
i,:! Figura 4.11 .
Figura 4.15. Irrr|rx i[ry rtculróf lo
',,r i; r'*t, i:'¡ Alteraciones tóxicas E I rr¡ x'r,,c11rrentado
{;}
en frotis de sangre
periférica de gato
r r,r lrolt', rlc l;;rngre
'ffi*i
¡ r,r rllr rrr,I rk: ¡lalo
(tinción de Wright (lttl totrrkrWr¡1itl
modificada, 100x) lrrrr llf lr,rr l,r, l(X)x).
E
E
GLÓBULOS
EI Linfocitos atípicos
Este término se utiliza para describir linfocitos que son modológicamente dis-
tintos de los linfocitos normales. Esto incluye linfocitos de tamaño normal pero que
poseen un núcleo extremadamente denso y un citoplasma de color azul intenso.
Estas células también pueden denominarse linfocitos reactivos o inmunocitos
(figura 4.18). Las células con un núcleo más grande y menos denso con aumento
de citoplasma también pueden denominarse linfocitos atípicos.
E
E
E
C
E
Figura 4.1 9. Mastocito en frotis de sangre periférica de gato
E (tinción de Wright modificada, 100x).
Los mastocitos son fáciles de reconocer debido a que poseen gránulos abun- E
dantes de color púrpura intenso en el citoplasma. El núcleo del mastocito suele pasar
desapercibido debido a la densidad de los gránulos citoplásmicos (figura 4.19).
E
E
E
GLÓBULOS BLANCoS]
E
Smma.smmrumfrm dm mmds$mmm$mmru E
dm fimm n'nmrutrwfü$mm
l\ll;r\,
Srurüe ffirflmMlffiffi{tiffiffi
Figura 4.21.
EJ Mieloblasto I'ror¡ elocito en frotis
cit: sangre periférica
El mieloblasto presenta una forma ligeramente ovalada. Esta célula está forma- de perro (tinción de
Wright modificada,
da por un citoplasma azul con un gran núcleo que contiene promtnentes nucleolos
100x).
dentro de una cromatina fina y laxa (figura 4.2O).
EI Mielocito
t
E
Figwa4.2O. F
r
Mieloblasto en froiis
de sangre periférica
de perro (tinción de
Wright modificada,
100x). E
VI Promielocito E:I Figura 4.22.
l\4iolocito en frotls
*l I:il ru,
I
HEMATOLOGíA r GLÓBULOS BLANCOS
r
lX[ Metamielocito lv'] f l, ,iltlltl r,r rr lr rtclllrrkr
¡
El metamielocito contiene un núcleo hendido con gránulos citoplásnrii;or ; | | r rr rr ;r x r n lir;o rkr reLrlrófilo segmentado tiene varias hendiduras que dividen
azurófilos (figura 4.23). F r'lrl( f( rr:r rlirrlrloltLllos(fiEra4.24). El nÚcleosetiñedecoiorpúrpuraoscuro,y
L ( rlrr rr rl rr r ():; rkltilil. El citoplasma se tiñe de color pÚrpura-rosado, y se obser
F \,, rtl | )( )r ¡r tct tr l; rlTiinulos.
t
F
F
F
F
F
F
4
F
F
Figura 4.23.
Metamielocito en F
frotrs de sangre
nari{orir ¡ rlo norrn
(tlnción de Wrght
F
modificada, 100x)
F Figura 4"24. Ne utróf lo segmentado y neutróf lo en banda en frotis de sangre perifér r:a rle perro
(tinclón de Wright modif cada, 100x).
tr
l7l Neutrófilo en banda
tr
El neutrófilo en banda posee un núcleo en forma de herradura de caballo. Este
núcleo es de color púrpura y contiene cromatina visible. El citoplasma es de color tr
rosa claro a púrpura y puede contener granulos pequeños (igura 4.24).
tr
tr
F
l''
W
r I r HemRtolocfn
t
Glóbulos roios
s
W
-t
I W
Función y características físicas
Función
El I os glóbulos rqos sirven de vehículos transportadores de ox(geno adquiriendo
oxíc¡eno en el pulmón, llevando oxígeno a las células que lo necesitan de cual-
rlriier parte del cuerpo, intercambiándolo por dióxido de carbono y llevando
cste dióxido de carbono de nuevo al pulmón para que este órgano lo elimine
rrediante la espiración.
V Este ciclo es continuo y se repite durante toda la vida del glóbulo rolo.
g La hemoglobina es el principal componente de los glóbulos ro1os y es la res-
ponsable del transporte del ox(geno y del dióxido de carbono.
EI CaOa molécula de hemoglobina está formada por:
. Cuatro grupos hemo, cada uno de los cuales contiene un átomo de hie-
rro en estado ferroso.
Cada grupo hemo está situado cerca de la superficie de la molécula ,
es responsable de combinarse de forma reversible con una molécula de
ox(geno o de dióxido de carbono.
. Dos pares de cadenas polipeptídicas de globina.
Características f ísicas
EI Los glóbulos rojos son discos bicóncavos anucleados que se tiñen de un color
entre ro¡o y nararya-rojizo con la tinción de Wright.
EI Los glóbulos ro1os se describen en función de su tamaño , tormay grado de
palidez central. La palidez central es una zona de tinción más clara situada en
el centro del glóbulo rolo.
EI Los glóbulos rojos del perro son de tamaño constante, miden unos 7 um de
diámetro y tienen una palidez central acentuada.
VI Los glóbulos ro¡os del gato son de tamaño variable, y miden unos 5 pm de
F.il diámetro, con una palidez central menor que la de los del perro.
Eil EI Las muestras de sangre deben recogerse mediante la técnica de punción ve-
rlr¡t;¿r sistemática.
Bfl
Efl I
I
ú para conseguir valores de hemoglobina y recuentos de glóbulos rolos es nece- @ Parael método automatizado, los glóbulos rojos se cuentan mediante impe-
sario disponer de sangre completa. dancia eléctdca.
Ef El anticoagulante de elección es el EDTA.
ü[ Coulter desarrolló y comercializó por primera vez el método de la impeoan-
cia eléctrica a principios de los años 1960. Este método ya no se limita a
los instrumentos Coulter, y hoy en día se utiliza mucho,
Análisis de laborator¡o W gn lo. sistemas automáticos basados en la impedancia eléctrica, se diluye
una gota de sangre completa con anticoagulante en una solución electro-
EI Los glóbulos rojos pueden contarse mediante métodos manuales o automáti- lÍtica. La solución resultante de células sanguíneas se hace pasar por un
cos. pequeño orificio situado entre dos electrodos. Este orificio se dgnomina la
ú para6 método manual, los glóbulos rojos se cuentan de forma microscópica apertura. Un volumen determinado de sangre diluida se desplaza por la
mediante un hemocitómetro. apertura durante un determinado periodo de tiempo. A medida que los gló-
o se diluye una muestra de sangre bien mezclada con el anticoagulante EDTA bulos rojos se desplazan por la apertura, inhiben el flujo de corriente eléc-
en la proporción 1:200 en solución de oxalato amónico alO,85o/o' trica que pasa por dicha apertura. Los cambios de corriente detecraoos
. Se carga un hemocitÓmetro, se cuentan como glóbulos rojos. El instrumento acumula estos camblos v
. Microscópicamente, los glóbulos rojos tienen aspecto de células redondas. termina registrando la cifra final como recuento de glóbulos ro1os.
. Los glóbulos rojos se cuentan en 5 recuadros pequeños del recuadro
EI La hemoglobina puede evaluarse mediante métodos manuales o automá-
cenlral.
ticos.
La cantidad de glóbulos rojos por milímetro cúbico (1 mm3 = 1 pl) se calcula del EI En bs métodos manuales, la hemoglobina se determina por colorimetría.
siguiente modo: Existe un método comercial de cianometahemoglobina modificado (Uno-
pette, Becton-Dickinson, Rutherford, NJ). Se trata de una solución estándar
Número de células contadas x Dilución (200) x Profundidad (10)
cómoda y estable.
x 5 (1/5 de mm2 contado)
Para este método, se diluye sangre completa con el diluyente adecuado y
se lee mediante espectrofotometría 840 nm). La.concentración de hemoglobi-
Ejemplo: Se han contado 450 glóbulos rojos en los 5 recuadros pequeños ' na se determina mediante una curva que deriva de concentraciones conocidas
del recuadro central.
de hemoglobina.
Cálculo: número total de glóbulos ro¡os = 450 x 200 x 10 x 5
Debido a la excesiva cantidad de tiempo necesario para esta técnica, este
ErI método de determinación de la hemoglobina puede no ser práctico en el con-
automatizada
il Las determinaciones del hematocrito se describen en las páginas 54-58.
GIT
Índices de glóbulos roios M Vt;V rx; ol vo[rrnen medio por glóbulo rolo. Es un indicador del tamaño celular.
I l;to v¡rlor, al compararlo con el intervalo de referencia propio de la especre,
[l La mayoría de instrumentos automáticos calcula y registra índices de glÓbulos
¡xrrnriter clasificar a los glóbulos rolos en:
rojos.
* Nomocíticos: el valor se sitúa dentro del intervalo de referencia, son qlóoulos
# fo. indices de glóbulos ro1os son útiles para clasificar las anemias. rojos rie tamaño medio.
EI A partir del recuento de glóbulos rojos, hemoglobina y hematocrito del pacien- * Microcíticos: el valor queda por debajo del límite inferior del intervalo de referen-
te, los índices de glóbulos rojos pueden calcularse del siguiente modo: r:ia, son glóbulos rojos menores que el tamaño medio.
* Macrocíticos: el valor queda por encima del límite superior del intervalo de refe-
rencia, son glóbulos rojos mayores que el tamaño medio.
* Un valor de MCH que esté por deb4o del límite infedor del intervalo de referen-
cia de la especie indica que el peso de la hemoglobina de los globulos ro1os es
menor oue el oeso medio.
* Un valor de MCH que esté por encima del límite superior del intervalo de refe-
rencia de la especie indica que el peso de la hemoglobina de los globulos rqos
és má\/or nr re el nesn ¡¡gflig.
F
F
F Figura 5.3.
Anisocitosis,
Figura 5.1. m¡crocitos y
Glóbulos rojos
normocíticos en
F rracrocitos en
¡ilribLrlos rolos de
un frotis de sangre rir) lr(t¡s de sangre
periférica de gato
(tinción de Wright
F ¡xrrikrrica de perro
(lirrrrion de Wright
modificada, 100x).
E rr ri x lif ic;lrl¡t, 1OOx).
E
Eil
101
F
Las variaciones en la forma del glóbulo rojo se denominan poiquilocitosis. Los
glóbulos rojos que presentan formas anómalas se denominan poiquilocitos (fi- F
gura 5.4). Existe gran variedad de términos que se utilizan para describir formas
específicas de glóbulos rojos, y pueden relacionarse con estados concretos de
enfermedad.
Figura 5.5.
I :;fcrocilos en un
.' lrotrs de sangre
F{
rrroclificada,1OOx).
F=il M Los estomatocitos poseen una palidez central en forma de rqa circunoaoa
H por una zona densa (figura 5.6). Esto confiere a la célula un aspecto de boca
humana. Los estomatocitos derivan de defectos en la membrana del glóbulo
Fil ro1o. Estas células pueden estar presentes en casos de anemia hemolÍtica.
FT
tril
Eil
Figura 5.4. Poiquilocrtosis en glóbulos rolos de un frotis de sangre periférica de perro
(tinción de Wright modificada, 100x).
Fil
Fil
M
' Los esferocitos tienen un cociente superficie/volumen disminuido. Estas cé-
lulas son hipercrómicas y carecen de palidez central. El grado de esfericidad
tril Figura 5.6.
I stomatoc tos en
puede variar entre glóbulos rojos. Los esferocitos suelen hallarse en anemias
hemolrticas, pero son difíciles de determinar en el gato debido al pequeño ta
Fil r n lrotis de sangre
¡xrrilcrica de perro
maño de los glóbulos rojos felinos (figura 5.5). F:I (lirrt;ii'rn de Wright
r r lr xlrf ii:ada, 100x).
F,il
trl F{t
l'*
EFI
EI Los equinocitos presentan múltiples protrusiones o espículas de márgenes * I
',,'
células espinosas son equinocitos con múltiples espículas puntiaguoas
(li11rrra b.8). Se producen por una rotura de la membrana celular. Pueden obser-
redondeados, que pueden ser romas o puntiagudas, y que se distribuyen de
viu:;o É)n la enfermedad renal.
manera uniforme por todo el glÓbulo rolo (figura 5.7). Los equinocitos con espÍ-
culas romas también se denominan glóbulos rojos crenados. Aunque estas * t ,rs acantocitos tienen múltiples espículas digitiformes e irregulares (figura 5.9).
[]c suclen relacionar con enfermedad heoática.
células suelen Ser un artefa6to in vitro,los equinocitos pueden aparecer debido
a distintos trastornos metabólicos.
+l¡ +*$r"$g;;r
iilir
i,
Figura 5.8.
Células espinosas en
tigura 5.9.
Acantoc¡tos en un
lroti< de q¡norp
Efl
"t
1ñL I F{il
o HrunroLocía F GLOBULOS ROJOS o
I I
F
# Lu. células diana (leptocitos, codocitosl Oo.""n una palidez central car¿rct¡ lvl | , , , .v;rlor;itos .
rística que confiere a la célula el aspecto de una diana (figura 5.1 o). Las células
j ¡ rv rl,¡ i,r (Írr¡Lrrtr 1r.
cli¡
I 1).
rlocilos tienen forma ovalada y poseen una palidez central
tr ,:g
ru
l)r'llll' 1,1
,rk',;;trr¡1tc
(1ir 1 11 )t t(l(,Wtillltl
{l() lxlllo
F
=n
F
=il
q.> r =il
F
=il
F
Figura 5.16.
=tr
G óbu os rojos
hipercrómicos en
F {
un frotis de sangre
^^- f^-i^^
pc¡ t^ ^^--^
cilLd uú pcilu F il
F q¡
(tinción de Wright
mod ticada, 100x).
r{
ri:
r ET
r
r +n
t
Figura 5.18. Punteado basófi o en un frotis de sangre perifér ca de perro
H
(tinción de Wright modificada, 1OOx)
Figura 5.17.
r
Glóbulos rojos
policromatófilos en t =[
un frotis de sangre
perférica de perro
(tinción de Wright
t Tr
mod ficada, 100x).
F
Tr
I +r 111
I
M Los cuerpos de Howell Jolly son inclusiones de color púrpura oscuro en gló- EI Los cuerpos de Heinz no son fáciles de identificar en tinciones de Wright, pero
bulos rojos y miden aproximadamente 1 Lrm de diámetro. Estas inclusiones cuando se emplea la tinción nuevo azul de metileno, tienen aspecto de inclusiones
son fragmentos remanentes de cromatina nuclear y a menudo se hallan en de color azul pálido (figuras 5.2O y 5.21). Estas inclusiones miden de 1 a 4 pm
pacientes con anemia regenerativa y trastornos esplénicos, y en pacientes es de diámetro. Los cuerpos de Heinz se forman en los glóbulos rolos cuando la
plenectomizados (figura 5. 1 9). hemoglobina se desnaturaliza y precipita. Pueden ser consecuencia de una lesión
oxidativa.
i",,r., ill
,":"\ ;: *:,,** ,i,"T,
i'l
i.",-j "l; 'ii) *:i
i i:.r
i ; ';. il: -i.il* i
'iii.,",oi'
# {t #{fr'
rd'"i[
l*! ilI F r:'l:l is 'il)
ttr.,rni F Figura 5.20. Cuerpos
',iTJ,
',,f,;
i#u,.,.,,1,
F de Heinz en un frotis
t"
Figura 5.19. Cuerpo de Howell Jolly en un frotis de sangre periférica de gato (ttnción de Wright
modificada. 1O0x). F
F Figura 5.21.
F Cuerpos de Heinz en
un frotis de sangre
periférica de gato
F (tinción de nuevo
azul de metileno,
1OOx).
E
I"'
GLÓBULO$
E
y
Los residuos de agua muestran un aspecto de inclusiones refractivas a me-
Parásitos sanguíneos
ú C
nudo son de tamaño y forma variables. Este artefacto es consecuencia de una
EI En frotis de sangre periférica pueden hallarse parásitos sanguíneos (figuras 5.24
técnica de tinción inadecuada ffigura5'22)'
púrpura de tama-
E v 5.25).
@ El precipitado de tinciÓn iiene aspecto de gránulos de color
en una zona
ños variables (figura 5.23). Estos gránulos pueden concentrarse
E
del frotis, o bien pueden estar distribuidos por toda la superficie. Este artefacto
puede evitarse aplicando técnicas de tinción adecuadas' É-
qfi} E
*-*T
'ffhT;ru'* '.t',.F
E
.w Ert
ff'
ffiry@ &;*
%-ffi
.ffi' .s"F Irt
¡rl
1' t" Figwa5.22.
str &]"
* Artefacto residuo
de agua en un frotis
Érl Figura5.24.
Dirofilaria en un
-* "r -..M#re
-,:."
de sangre periférica
de gato (tinción de l¡I
frntic .lc q¡norc
periférica de perro
(tinción de Wright
" 5Y
Wright modificada,
100x).
lrr modificada, 10Ox).
rrr
:l'fl'1 i
].r
/ffi
W
.\
,
].1 \:'':
"\éli. til
TEI
W
Figura 5.23.
E:I Figura 5.25.
Artefacto preciPitado
de tinción en un
E¡T Mycoplasma
haemofelis en un
frntis do qanorc
frotis de sangre
periférica de peno
(tinción de Wright
t¡f periférica de gato
(tinción de Wright
modificada, 100x).
E¡T modificada, 10Ox).
Eil
l:
114 |
I
I
Organización celular en el frotis de sangre periférica
Mt Se produce solapamiento celular en zonas del frotis de sangre periférica en
que los glóbulos rojos, los glób,ulos blancos y las plaquetas no están distribui-
las
l
]
I
I
I tr
M La autoaglutinación es la formación de grumos o agregados de glóbulos rqos.
dos de manera uniforme. Este arlefacto puede confundirse con inclusiones de La aglutinación puede observarse en enfermedades hematolóqicas inmunome
glóbulos ro1os. tr! diadas (figura 5.27).
ffi El fenómeno "rouleaux" es la disposición de glóbulos rojos en "pila de mone-
das" (figura 5.26). Esta descripción denota una disposiciÓn lineal y organizada ]
de glóbulos rojos que es más habitual en el gato, Las "pilas de monedas" pue-
=il
den ser un hallazgo anómalo y se asocian a enfermedad inflamatoria. T trl
r il
I trl s*;.I tF
s
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ls
F
$[
T v ffi-
ww. " #
r
]
F .d
F
Figura 5.26. Eritrocitos en 'pila de monedas"en un frotis de sangre periférica de gato
(tinción de Wright modificada, 1O0x).
¡
I ET
r ,in
Figura5.27. Autoaglutinación en un frotis de sangre periférca de gato
(tinción de Wright modificada, 50x)
I
F
t tr
t
F
il r17
Producción de glóbulos rojos t
Los glóbulos rojos se producen en la médula Ósea. La presencia de glóbulos rolos t ú El rubricito es más pequeño que el prorrubricito, tiene el núcleo redondo sin
inmaduros en la sangre periférica, sobre todo de glÓbulos rojos nucleados sin poli- nucleolos; el núcleo contiene grumos de cromatina y el citoplasma es principal
cromasia proporcional. indica patologra. mente azul, pero con cantidades crecientes de azulrojizo.
ij, , I
T
Figura 5.29.
Prorrubricito,
E rubricito,
metarrubricito,
y neutróftlo
segmentado en
un frotis de sangre
periférica de perro
(tinción de Wright
modificada, 1OOx).
r=l
=!
il
Figura 5.28. Rubriblasto en un frotis de sangre periférica de perro
(tinción de Wright modificada, 1OOx). ir
:I
:r
i
l
Reticulocitos EI Los reticulocitos punteados son glóbulos rojos más pequeños y tienen
ARN residual que presenta un patrón intracelular,,punteado', o ,'granular',.
Este tjpo de reticulocitos suele hallarse en el gato (figura 5.Bl
EI Los reticulocitos son glóbulos rojos inmaduros que se liberan de la médula ósea ).
EI
concurrentes.
La reticulocitosis es el rasgo distintivo de una intensificación de la producción
E I
de glóbulos ro1os.
\
E 4*
E
Figura 5.30.
Reticulocitos
agregados en un
#
Hallazgos de laboratorio frntiq dc c¡noro
periférica de perro
ül Los reticulocitos son glóbulos rojos inmaduros y sin núcleo en los que se ob- E (tinción nuevo azul
serya un patrón intracelular característico una vez teñidos con tinción supra- de metileno, 10Ox).
vital. Los reticulocitos oueden cuantificarse mediante métodos automáticos o E
manuales. Asi, en los métodos automáticos se usa citometría de flujo. Para
cuantificar reticulocitos mediante el método manual, se incuba una muestra de l
sangre con anticoagulante con tinción supravital, y se prepara un frotis sanguí-
neo. Se rea|zaun recuento de reticulocitos al microscooio. t
ldentificación microscóp¡ca *-
EI A ác¡Oo ribonucleico residual, las mitocondrias y los orgánulos de los glóbulos
rojos se tiñen de color púrpura oscuro en el interior de unos glóbulos ro1os que
/t@il
con la tinción supravital nuevo azul de metileno se tiñen de azul claro.
#
{} CuanOo se tiñen con tinción de Wright, los reticulocitos tienen aspecto de Figura 5.31.
Reticulocitos
glóbulos rojos policromatófilos. Estas células suelen ser macrocÍticas. punleados y
agregados en un
EI Existen dos tipos de reticulocitos: agregados y punteados. frotis de sangre
üJ Los reticulocitos agregados son células de tamaño más grande y poseen periférica de gato
(tinción nuevo azul
retículo nuclear residual que presenta un patrón intracelular más grueso
de metileno, 100x).
(figura 5.30).
f
üJ La respuesta de los reticulocitos depende de muchos factores, como la espe- Procedimiento
cie, la gravedad, tipo y duración de la anemia, y la existencia y tipo de enferme-
]
1. Coloque volúmenes iguales de nuevo azul de metileno y sangre del paciente en
dad concurrente.
É un tubo de ensayo de 12 x 75 mm.
El Durante una anemia regenerativa, el perro responde enérgicamente con reticu-
2. Mezcle la sangre y deje que repose durante 15 minutos.
ln¡itnc ¡nronadnc
3. Prepare un frotis como el explicado anteriormente.
También hay reticulocitos punteados, pero son demasiado escasos como
4. Cuente 1000 glóbulos rojos consecutivos, diferenciando entre glóbulos rojos
para contarlos de forma independiente de los agregados. E=il normales, reticulocitos punteados y reticulocitos agregados. Lo óptimo es con-
ül En el gato se observan tanto reticulocitos agregados como punteados. Los
agregados maduran pasando a convedirse en punteados, en cuestión de 12
FT tar glóbulos rojos en la monocapa, donde no existe solapamiento de células.
5. Calcule los dos tipos de reticulocitos y registre el resultado a modo de
horas, tras la liberación desde la médula Ósea. Los reticulocitos punteados ma-
duran pasando a convertirse en eritrocitos en unos 10 días. La mayoría de labo-
F! porcentaje.
EI
ratorios enumera los reticulocitos a modo de grupo o bien sólo los agregados.
Los reticulocitos de estrés son reticulocitos que se liberan de la médula osea
F=l Formas de recuento
de forma prematura. Estos reticulocitos se liberan al torrente circulatorio duran-
te periodos de excesiva demanda y persislen en la sangre durante mas tiempo
F+il Los reticulocitos pueden registrarse a modo de porcentaje, recuento absoluto, por-
centaje de reticulocitos corregido o índice de producción de reticulocitos (RPl).
debido a su liberación prematura. En general, los reticulocitos de estrés son F+il
significativamente más grandes que los glóbulos Oos maduros.
Porcentaje de reticulocitos
E=il
EI fste valor se obtiene en el punto 5 del procedimiento anterior.
Recuento de reticulocitos: método manual F:lil $ En pacientes anémicos, este método de enumeración suele dar como resulta-
Cuando se mezcla sangre completa con pades iguales de nuevo azul de metileno,
los restos nucleares se tiñen de un color azul oscuro. E=l do una respuesta de reticulocitos falsamente aumentada. Ello se debe al hecho
de que hay menos globulos ro¡os maduros en la circulacion y, por tanto, parece
Equ i polreactivoVmaterial
f=[ que, en comparación, la respuesta de reticulocitos es mayor La presencia de
reticulocitos de estrés también puede justificar un aumento del porcentaje de
.
r
Nuevo azulde metileno.
Podaobjetos.
EEil Recuento absoluto de reticulocltos
ü Microscooio óotico con disco Miller.
E-+r [l El recuento absoluto de reticulocitos se calcula multiplicando el porcentaje de
reticulocitos por el recuenlo de glóbulos rojos.
Er+l EI fste método corrige el aumento proporcional explicado en el apartado
anterior.
E-+r
I
E+T
Eln
HI
I
GLÓBULOS
) HEMATOLOGíA
I
Tabla 5.1. Anomalías en neutrófilos: cantrdad media en un campo de 100x.
Porcentaje de retict¡locitos corregido
el porcenta¡e
EI El porcentaje de reticulocitos corregido se calcula multiplicando
por el PCV "nor
de reticulocitos por el cociente del PCV del paciente dividido Citoplasma espumoso.
mal" de la esPecle. Basofilia moderada difusa o localizada
Los cuerpos de Dóhle en gatos
Baja I-IO%
se consideran una alteración tóxica leve.
índice de produccién de retlculocitos (RPl) Moderada Citoplasma espumoso o con vacuolas"
reticulocitos corregtoopor el tiempo de maduración de los reticulocitos Esto localizada. Cuerpos de Dóhle.
que depende del
corrige la liberación prematura de reticulocitos de estrés' Elevada Citoplasma espumoso.
grado de anemia. En el perro, el tiempo de maduración de reticulocitos es: Basofilia moderada difusa o localizada
Elevada 51-100%
PCv45%=1día,PCV35%=1,5días,PCv25%=2días,PCV15%=2,5díras. T.
1 y 2 indica
V! En et perro, un RPI < 1 indica anemia no regenerativa' entre
una médula osea activa y regenerativa, > 2 indica eritropoyesis acelerada, ri Tabla 5.2. Morfología de glóbulos rojos: cantidad media en un campo de 10Ox
estánbienaplanadosperonodeformados'Losglóbu|osrojospuedenestar
f otros poiquilocitos
124 |
I
m
.
Ó ] HEMATOLOGÍA
t
Plaquetas
H
H o
E|N W
E+t
qr o
Eil
.il
I
W
E+r
ry
qr
+ I
Estructura y función de las plaquetas
Estructura
EI La plaqueta tiene forma discoide y no contiene núcleo.
I
F
El Los dacriocitos son glóbulos roios en forma de lágrima y se suelen relacionar
con trastornos de la médula Ósea (figura 5.13).
F I lcr
lor;t¡lolurlos rolos también pueden describirse en funcrón de su contenido en
r rr x lk r[ lil r¿1.
F
E
\, F
Figura 5.14.
atÁ4,,t^. "^i^^
utuuutu> tulu)
normocromrcos en
F un frotis de sangre
periférica de perro
F (tinción de Wrighi
ri-
modificada, 100x).
\
F $t
F *"#
F
F
rF &
r il modificada, 100x).
'*l
E =I 109
: l::::i..ll
Funcién
VI La plaqueta es un elemento celular multifuncional del sistema circulatorio. Las
plaquetas ayudan a mantener la integridad vascular, modular la respuesta infla
matoria y potenciar la curación de heridas tras una lesión tisular.
A La función más importante de las plaquetas es intervenir en la hemostasis. Las
plaquetas ayudan a detener la hemorragia, puesto que constituyen el primer
E elemento celular de la sangre periférica que reacciona cuando los vasos san-
quíneos resultan dañados.
E
Análisis de laboratorio
E: Recogida de muestras
Figura 6.2. Plaquetas
de perro en un frotis
ú Las muestras de sangre deben extraerse mediante la técnica sistemática de la
de sangre periférica
(tinción de Wright
E: punción venosa.
modificada, 1OOx). m Para conseguir recuentos plaquetarios se precisa sangre completa, puesto que
E: durante el proceso de coagulación se consumen plaquetas. El anticoagulante
t -^^^
Law ^-.^ t^ "^^^^iA^ de muestras de sangre cuyo objetivo es un recuento
vata,a reuvv,uq
Dta0uelano.
Causas de error
Manual M Las plaquetas se miden por amplificación del pulso generado a partir del des-
plazamiento de plaquetas a través de la apertura. El pulso amplificado se com-
El Las plaquetas se cuentan microscópicamente mediante un hemocitometro.
para con canales de voltaje de referencia internos. Estos canales sólo acep-
üJ Se diluye una muestra de sangre blen mezclada con anticoagulante EDTA a tan pulsos de cierta amplitud; esto clasifica los pulsos en canales de distintos
razón de 1:1OO en solución de oxalato de amonio al 1%. El sistema unopet-
tamaños. Se genera un histograma a partir de estos datos, que compara el
te (Becton-Dickinson, Rutherford, NJ) se puede adquirir a nlvel comercial.
tamaño celular con el número de células presente, y se aplica un algoritmo a
EI Se carga un hemocitómetro y la unidad se deja sin tocar durante 15 minu-
estos datos. Con ello se establece un límite de tamaño superior y uno inferior, o
tos. Esto permite a las plaquetas adoptar su posicion.
umbral, que se emplea para discriminar entre poblaciones de células.
EI Las plaquetas tienen aspecto de células redondas u ovaladas al
EI fn la mayoria de sistemas de análisis de hematología, el umbral plaquetario se
microscoPio.
basa en el tamaño de las plaquetas del ser humano, incluso aunque la máquina
EJ Se cuentan todas las plaquetas del recuadro central del hemocitómetro. Si
vaya destinada a uso veterinario, Se cuentan las células existentes en el inter-
el número total de plaquetas contadas es inferior a 1oo, se cuentan mas re-
valo entre 2 y 20 femtolitros como plaquetas, y las contadas por encima de 35
cuadros pequeños hasta que se han observado al menos 100 plaquetas.
femtolitros se consideran glóbulos rojos. Esto supone un problema cuando se
EJ El número de plaquetas por milÍmetro cúbico se calcula multiplicando el
¡ntenta conseguir un recuento plaquetario de especies que poseen glóbulos
'1000.
número total de plaquetas contadas por
rojos pequeños, puesto que las zonas de recuento de plaquetas y de glóbulos
Causas de error rojos pueden solaparse. Por otra parte, en general no supone un problema en
EI Técnica de dilución inadecuada' los recuentos de glóbulos rolos, puesto que se expresan en millones por micro-
ül Acumulación de plaquetas. litro. Sin embargo, puede afectar negativamente al recuento plaquetario, ya que
éste se expresa en miles por microlitro.
''l
E
A por tanto, es indispensable confirmar todos los recuentos plaquetario micros
E
Indice alfabético
cópicamente con un frotis de sangre periférica teñido.
E
de flujo
A
La citometría de flujo láser es el método más reciente de recuento plaquetario lim¡taciones, I6
m
Ar;;trrloc;ilos, 105 metodología, 16
automático.
Ar;r:lo¿u;ético, ácido, 1 3 Análisis químico, 7
m Con la citometría de flujo, se pasa una suspensiÓn de sangre completa con
Ar;ir1o ribonucleico residual, 1 20 método de las tiras de orina con reactivo
anticoagulante por un haz láser. seco, 9
Arlltrlinacion, 117
V Todas las células sanguíneas adsorben y dispersan luz láser. Cada tipo de célu-
Ar¡Lra, residuo de, 114
procedimiento, 9
la puede clasificarse en función de su tamaño, de los componentes del nÚcleo E Ant¡cuerpo,
Albúnrina concentración plasmática de, 58
y de las inclusiones citoplásmicas. En funciÓn de todo ello puede realizarse un
disminución de los niveles de, 60
recuento 0la0uetario. E Adefacto, 47,48,114
Alleraciones tóxicas, 84
Autoaglutinación, 117
Análisis del sedimento, B
F Azul de metileno, 66
Análisis de orina
Azur B, 66
valores de referencia, 49
F análisis microscópico, 49
EI
v
bacterias, 50
F+I células epiteliales, 50
cilindros, 50 B hidroxibutírico, ácido, 12
F{t esperma, 50
grasa, 50
Bacterias, 44
en sedimento urinario, 44
mucosidad, 50 presencia de inleccron, 45
F=Et parásitos, 50
Bacteriuria, 45
RBC,50
Frl wBc,50
características fÍsicas, 49
detección de, 1B
Basofilia, 84
E:I color, 49
gravedad especilica. 49
Basófilo, 66, 67
descripción, B0
bilirrubina, 49 función, B0
cetonas, 49 núcleo, B0
E glucosa, 49
Bilirrubina
leucocitos, 49
falsos negativos, 16
F nitratos, 49 t^t^^^ ^^^i+i.,^^
rorJUo puDrLtvuJ! rtua
ph, 49
umbral renal del perro para la, 16
proteínas, 49
F valores esperables, 16
sangre, 49
Biliverdina, 16
Análisis de presencia de sangre
E Biuratos de amonio, 36
falsos negativos, 17
falsos positivos, 17 Bromosulfoftaleína, 13
F.
1?L I
I
ía I
-il I
Frl
Carbonato cálcico, 36 Enzimas, Fosfato triple, 36
Crenados, glóbulos rojos, 104 concentraciones plasmáticas de, 58 Frotis
Cateterización, 4
Cristales, 36 Enfermedad tubular degeneraliva, 34 grosor, 64
Cefalexina, 20
Cefalotina, 20
ácido úrico, 38
amodos,38
H Eosrna, 66 métodos de tinción, 66
método automático, 66
Células en ampolla, 107
Células espinosas, 105
de
de
de
ácido hipúrico, 39
bil¡rrubina, 42
carbonato cálcico, 40
ET Eosinófilo, 66, 67
de gato, 78
de perro, 79
principios de la tinción, 66
Frotis de sangre
Er
Centrífuga, 57 desgranulándose, 79 directrices para la evaluación, 124
de cistina, 36, 42
descripción, 7B poco denso, 64
Centrifugación, B, 23
de tubo capilar, 55
Centrífuga para hematocrito,
de fosfato triple, 40, 41
de leucina, 42
de oxalato cálcico, 36, 39
tril función, 78
núcleo, 78
Frotis de sangre periférica
correcto, 65
ul
61 rocnninnoc alÁrninac 7R
de sulfonamida, 36 demasiado denso, 65
Cetonas, análisis de de tirosina, 36, 42 Epitelial, célula,28 estimación del recuento total de
cistitis bacteriana, 1 3
falsos negativos, 13
falsos positivos, 13
limitaciones, 12
de urato de amonio, 40, 41
Cristaluria, 36
por cistina, 36
Ff de transición, 29
de transición neoplásica, 30,
de túbulos renales, 30
epiteliales reactivas, 30
31
glóbulos blancos y de plaquetas, 68
material para el, 63
trr rr oomrde /l rervel I h
metodología, 12
por tirosina, 36
Critoseal, 55
tr1n escamosas, 28
valores esperables, 13 tamaño,28 t
Cilindros, 31
Cromatina
fina y laxa, BB
E+r Equinocitos, 104
Gentamicina,2O
celular, 32
ceruminosos, 34
concentración de sales elevada, 31
fragmentos remanentes,
Cubreobjetos, método del, 62
1 I2
trlr Eritrocito policromaiófilo,
Eritropoyesis acelerada, 1
1
24
19
Glicoproteínas, 12
de células epiteliales, 34
de glóbulos rojos, 35 D
Fil Esferocitos, 102, 103
Fcnantrnfntnmotria Q7
Globina, 95
Glóbulos blancos, 25
de grasa, 34
formación,31 Dacriocitos, 108 tril Espermatozoides, 43, 44
Espiración, 95
alteración tóxica, 84
rena.+^ ¡lol nr rnlon DA
uuPvvrv
contar, 26
glóbulos blancos, 35
granulares, 32
trastorno tubulointersticial, 32
Degeneración celular, 35
Degeneración lipídica celular, 34
Ell Esplénicos, trastornos,
Esquistocitos, 1OB
1 l2 cuerpos de Dóhle, 84
función y características físicas, 73
Esterasa, 19 inmunocitos, BG
hialinos, 32,
lipídicos, 34
Descamación de células tubulares, 34
Diana, célula, 106
tr Estercobilinógeno, 17 linfocito atípico en frotis de sangre, 86
linfnnitnc rtíninnc RA
tasa de flujo tubular, 31 Estomatocito, 103
Diazonio, compuesto,
Cistocentesis, 4
1 B
E Estral, secreción, 17
linfocltos reactivos, B6
Dicloroanilina, 15 mastocitos, B6
Etilendiaminotetraacético, ácido, 53
citometría de flujo, 120,132, 134 Dióxido de carbono, 95 F plasma de muestra procesada con, 59
neutrófilos hipersegmentados, 85
núcleo, 26
Clorpromazina, 16 Dirofilaria immitis, 47
proceso de inflamación, 84
Coagulación intravascular diseminada
(crD),108
tr F términos descriptivos, 84
E Glóbulos rojos, 26, 95
Codocitos, 106
E. coli,15
tr Fenazopiridina, 16 agregados de,117
Colores de la orina, 6 Fibrinógeno, 61 análisis de laboratorio, 96
color y transparencia, 5 EDTA, 96
tr en recuento de sangre completa, 54 características físicas, 95
'*l
URtANÁLrsrs y HEMAToLocín oe ueoRnroRlo lnolcr nuneÉlco
del gato, 95 falsas disrninuciones, 1 9 Indlcador de color, 7 MCV 99. /éase Volumen corpuscular
del perro, 95 falsas elevaciones, 19 lndoxllo, 19 medio (MCV)
fragmentos, 108 limitaciones del, I9 Membrana del glóbulo rojo
Inflamaclón
función, 95 método de tira reactiva, 7 rotura, 105
globullna en la, 59
hallazgos de laboratorio, 120 metodología, 1B
Inmunoglobulina Metamielocito, 90
hipercrómicos, 99, 110 valores esperables, 19
hipocrómicos, 99, 109 dlsminución de la producción de, 60 Metarrubricito, 1 19
Grupos sulfidrilo, 13
inclusiones de, 1 10 Inmunomediada, enfermedad hematológica Método de Romanowski, 66
inclusiones refractivas, 1 14 globulina en, 59 Método de Giemsa, 66
índices de, 98 H
inmaduros, 1l B Micción, 4
intensificación de producción, 1 20 Heces, 46 L Microfilaria
.1
macrocíticos, 99, 100, 101 Heinz, cuerpos de, 13 evaluación microscópica db, 57
maduro, 1 19 Lelshmaniosis, 76
Hematocrito, 54-57 Microhematocrito, método
microcíticos, 99, 100, 101 causas de error, 56 Leptocito, 106 equipo, reactivos y material para el, 57
morfología, 125 definición, 54 Léucocitos lector de, 57
normocÍticos, 99, 100 método ind¡recto de medición, 56 principios, 57
análisis de
normocrómicos,99, 109
Hemocitómetro, 96 falsos negativos, 20 Micrométodo,55
policromatófilos, 111
falsos posit¡vos, 20
por milímetro cúbico, 96 Hemoglobina, 95 Microvasculares, anomalías, 1 0B
actividad peroxidasa, 16 limitaciones del, 19
producción, 1 1B Mieloblasto, BB
análisis automático, 97 metodología, 19
punteado basófilo, 111
valores esperables, 19 Mielocito, 89
recogida de muestra, 95 análisis manual, 97
clasificación de, 66 en frotis de sangre periférica de peno, 89
recuento de,27,96 concentración de, 109
desnaturalizada, 113 en muestras de sangre con EDTA, 53 Mioglobina, 16
métodos automáticos, 96
precipitada, 113 granulociticos, 19
métodos manuales, 96 Mitocondrias, 120
preparación de frotis para el análisis
recuento de sangre completa, 54 Hemoglobina corpuscular media (MCH), 98 Monocitos, 26
anisocitosis, 100, 101 diferencial, 63
Hemo, grupos, 95 descripción, 76
poiquilocitosis, 102 recuento anómalo, 57
en frotis de sangre periférica de gaIo,77
Hemorragia Llnfocito, 26
Glomerulonefritis, 35 en frotis de sangre periférica de perro,77
crónica, 60 dac¡rin¡iAn 7(
Glucosa funcicrn, 76
intrarrenal, 35
en frotls de sangre periférica de perro, 76
análisis de presencia de, 13 Monohidrato, oxalato cálcico, 36
Hipercromasia, 1 10 funclón, 75
concentraciones elevadas de, 59 Mucoproteína albuminosa,
Hipúrico, ácido, 36 31
falsos negativos, 14 Llpemla
l--liclnnlacmncic 7A plasma neblinoso en, 57 Mucoproteína de la matriz, 31
falsos positivos, 14
precipitación, 32
limitaciones, 13 Hormonas, concentraciones plasmáticas, 58
metodología, 13 Mucoproteína de Tamm-Horsfall, 31
valores esperables, 13
Howell Jolly, cuerpos de, 112 M
Muestra
Glucosa oxidasa, I3 Macrólagos, 76 capacidad del recipiente, 4
I métodos de recogida, 4
Glucosuria, 14 M¡ratocltos, B6
obtención, 4
Granulocitos, 84 ldentificación microscópica, 2O r¡rr lrotls de sangre periférica de gato, 87
1 procesado, 5
Gránulos, 84 lónica MOtJ, SS. Véose Hemoglobina corpuscular recipientes, 4
Grasa, gotas de indicadores de concentración, 7 rrredla (MCH)
Muestra de orina
análisis microsc ópico, 27 metodología de la concentración, 1B MO|1C, ge, 1 09, 1 10. Vóase Concentración obtención, 4
Gravedad específica, análisis de la, 7 Inclusiones citoplásmicas, 84 rrrerdla c;orpuscular (MCHC) análisis microsc ópico, 24
íNorce nLrneÉnco
uRrANÁLtsts Y HEMAToLoGíl oE LneoRnroRlo
Plasma Renal
centrifugación de la muestra, 23
procedimiento de centrifugación, 23
o +.^h^^^r^^^i^ F1
^^l^É,, y u or rovor sr rurot u f
uurur ¡lononarrniÁn aC
tril
vv, ,1, I vv' v
"vvuv'v' '
I
función, 73 Pcar"lamnnac cnn
vYH.' 1¡v6
Parásitos Sangre completa, extracción, 96
fusionarse, 26
huevos de, 46 Sangre completa heparinizada,
núcleo del neutrófilo, 73
secuencia de maduraciÓn, BB
segmentados, 73, 91' 1 19
Parásiios sanguíneos,
Dirofilaria, 1 15
1 15
5
trll \I
^ plasma de, 59
Seal-Ease, 55
en frotis de sangre Periférica de
Mycoplasma haemofelis, 1 1 Queratocito, I07
Sedimento urinario
güo,74 PCV por centrifugación, tubo, 60 Química seca, análisis mediante análisis del, B
en frotis de sangre Periférica de pH urinario alcalino, 36 metodología de la, 11 artefacto no identificado, 48
perro,74 polvo de guante, 47
pH, análisis del
artefactos, 47
a
Nitritos, análisis de
alimentaciÓn, 1B
alimentación, 14
alimentación rica en Proteína, 14 f tl material vegetal, 48
bacterias, 44
valores esPerables, 1B alimentación vegetal, 1 4
Reactivo
falsos negativos, 1B metodología, 14 E para la determinación del fibrinógeno, 61
cristales en el, 36
elementos, 25, 43
falsos Positivos, 1B valores esPerables, 14
para el método del microhematocrito, 57 espermatozoides, 43
limitaciones del, 1B
metodología, 1B
Pila de monedas, 116 E Recuento de sangre completa (CBC), 54 glóbulos rojos en el, 27
Pilas de moneda, 1 16 hifas fúngicas, 45
Refractometría, 5B
Nitroprusiato de sodio, 12
Plaqueias, 67 tr Refractómetro, 7
hilos de mucosidad, 43
Núcleo de las células mononucleares, 26 estimaciÓn de la cantidad de' 125 parásitos, 46
recuento de sangre completa, 54 Refrigeración, 5 Capillaria plica,46
Nuevo azul de metileno, 121
r40 I
I
I
I
URIANÁLISIS Y HEMATOLOGíA DE LABORATORIO l
E
Dioctophyma renale (huevo de un Urobilinógeno, análisis del
verme renal del perro), 46 falsos negativos, lB
E Lecturas recomendadas
microfilarias de Dirofilaria immitis, 46 falsos positivos, I7
limitaciones del, 17
Solapamiento de células, 116
Solubilidad, 36
metodología, 17 F Bellamy JEC, Olexson DW: Quality Assurance
valores esperables, 17 Handbook for Veterinary Laboratories, Ames,
Uropatía con pérdida de proteína, 60 lowa State University Press, 2000.
T Feldman BF,Zinkl JG, Jain NC: Scha/m's
Tapado, productos de, 55 V Veterinary Hematology, sth Ed. Philadelphia,
Lippincott Williams & Wilkins, 2000.
Tetraciclina, 20
Volumen celular medio (MC\4, 56
Tinción Harvey JW: Aflas of Veterinary Hematology.
Volumen corpuscular medio (MCV), 98
localización y resolución de los probiemas Philadelphia, WB Saunders, 2001
derivados, 67 Volumen del total de glóbulos rolos (PC\4
macrométodo para la determinación del, 55
F .