Mesopotamia Environmental Journal (MEJ) MEJ

2014, Vol.1, No.1:47-55

El efecto de la exposición aguda de Zn y Pb en algunos marcadores bioquímicos en el caracol de

agua dulce (Viviparus bengalensis)

Ayad M.J.Almamoori 1 * Jasim M.Salman1 Randall Hughes, A2

1 College of science, University of Babylon, Iraq
2 Florida State University, U.S.A.
*Email: ayad@uobabylon.edu.iq
To cite this article:
Almamoori M.J. et al. The effect of acute exposure of Zn and Pb on some Biochemical markers in Fresh Water Snail
(Viviparus bengalensis), 2014, Vol. 1, No.1, pp

Resumen

Los marcadores bioquímicos (proteína total, vitamina C, vitamina E, acetilcolinesterasa y

metalotioneínas) inducidos por la exposición aguda de Zn & Pb en caracol (Viviparus bengalensis)
para mostrar su respuesta contra estos metales. Estos biomarcadores en caracol sp. mostraron una
respuesta de significación diferente según la exposición aguda a Zn. Así que aumentó y disminuyó
la reacción contra la exposición aguda. La misma tendencia se adaptó a partir de biomarcadores
después de la exposición aguda a Pb en caracol sp. mientras que la respuesta diferente apareció a
partir de estos biomarcadores después de la interacción exposición aguda.

Palabras clave: Marcadores bioquímicos, metales pesados, exposición aguda, moluscos, caracol de
agua dulce.

Introducción

Los biomarcadores se pueden definir como cualquier cambio bioquímico, molecular, histológico y
fisiológico que se produce según el estrés ambiental o una variación inducida xenobióticamente en
componentes o procesos celulares, bioquímicos, estructuras o funciones que se puede medir en un
sistema o muestra biológica [1]. La metalotioneína constituye una proteína de unión importante con
bajo peso molecular (6-7) KDa y alto contenido de cisteína (> 30%) que desempeña un papel
importante en la desintoxicación de sustancias químicas tóxicas [2], y las metalotioneínas
desempeñan un papel clave en el procesamiento de desintoxicación en moluscos y han sido
propuestos como biomarcadores de exposición. [3] estudiaron el papel de las metalotioneínas (MT)
en los procesos de depuración de Cd y Zn en los bivalvos de agua dulce Corbicula fluminea se realizó
después de la exposición in situ en el río Lot (Francia). La cantidad de Cd secuestrada por la fracción
MT, después de la cromatografía líquida de exclusión por tamaño, representa en promedio 40% del
Cd total bioacumulado en el cuerpo blando de los moluscos, en comparación con solo 4-9% del Zn
total acumulado. Este metal esencial se unió principalmente a proteínas de bajo peso molecular, las
MTs tuvieron un papel clave en la detoxicidad de Cd en los bivalvos.

La vitamina C es una vitamina soluble en agua. Al igual que la vitamina E, es un antioxidante eficaz;
La vitamina C puede proteger sustancias esenciales en el cuerpo como proteínas, lípidos,
carbohidratos, ADN y ARN del daño de los radicales libres [4]. La vitamina C funciona en
coordinación con la vitamina E y es capaz de regenerar la vitamina E cuando se usa vitamina E un
antioxidante, el ácido ascórbico es bien conocido por su actividad antioxidante, actuando como un
agente reductor para revertir la oxidación en líquidos. Cuando hay más radicales libres (especies de
oxígeno reactivo, ROS) en el cuerpo humano que los antioxidantes, la condición se llama estrés
oxidativo [5].

La acetilcolinesterasa es responsable de hidrolizar el neurotransmisor acetilcolina en colina y ácido

acético que controla las corrientes iónicas en la membrana excitable, y el biomarcador antiguo
puede estar respondiendo al bajo nivel de contaminación en el ambiente [6] y se considera una
enzima única cuya función fisiológica eliminar acetilcolina de hendiduras sinápticas. La medición de
acetilcolinesterasa (AchE) se utiliza ampliamente como estudio presente como biomarcador de
contaminación, la actividad de AchE se controló en la almeja philippinarum en la Laguna de Venecia
(Italia) por [7] sin una correlación particular entre la actividad de AchE y el índice de condición (IC )
y se encontraron diferencias marcadas en la actividad de AchE al comparar la actividad enzimática
de las almejas de varios sitios en la Laguna de Venecia con las de las almejas recolectadas. Se
observaron reducciones significativas en la actividad de AchE en animales recogidos en canales
cercanos y áreas autorizadas, lo que indica la distribución espacial homogénea de compuestos
potencialmente neurotóxicos en toda la Laguna. Por otro lado, la vitamina E es una vitamina
liposoluble y su función principal es no enzimática antioxidante, protege las células del cuerpo de
compuestos tóxicos como metales pesados [8].

Métodos

Experimento de exposición

Las muestras de Caracol Sp. se llevaron rápidamente a un laboratorio vivo y se dejaron en acuario
de agua sin cloro durante 2 días como etapa de aclimatación y depuración con la fijación de todos
los factores ambientales. Después de eso, un grupo de 6 a 10 de cada especie de molusco fue
expuesto a 24, 48, 72, 96 h. como exposición aguda en un recipiente de plástico a diferentes
concentraciones de Pb (20, 50, 100 μg / l) que se prepara a partir de la solución madre 1g / l
(CH3COO) 2pb.3H2o) y Zn (20, 50, 100) μg / l que es preparado a partir de Stock solución 1g / l
(Znso4.7H2O), con fotoperíodo 12:12 ciclo de luz y oscuridad con fijación de todos los factores
ambientales. Estas concentraciones verificadas por absorción atómica tipo 6300 (Shimadzu, Japón),
Todas las muestras recogidas después de cada exposición para determinar todos los biomarcadores
anteriores tan pronto como sea posible para detectar la señal de advertencia temprana (diferentes
biomarcadores) en caracol.

Detección de marcadores bioquímicos

La concentración de proteína se estimó de acuerdo con el método de [9], la vitamina C está presente
tanto en forma reducida de ácido ascórbico (AsA) como en forma oxidada (ácido deshidroascórbico
(DHAsA) .Este método mide la vitamina C total (es decir, AsA + DHAsA) , y de acuerdo con [10] y [11]
la vitamina E se determinó de acuerdo con [12], que incluye la reacción de color con cloruro férrico
y α, α-dipiridilo para dar un color rojo. La metalotioneína se determinó mediante la evaluación del
sulphhydryl (-SH) contenido de residuos de acuerdo con el método de [13] y [14]. Se adaptó una
determinación colorimétrica rápida para calcular la actividad de la acetilcolinesterasa en los
moluscos de acuerdo con el método descrito por [15].

Análisis estadístico
Programas SPSS 17.0 utilizados para la diferencia mínima significativa (LSD ≤ 0.05) y Análisis de
varianza (ANOVA).

Resultados y discusión

Los marcadores bioquímicos en caracol sp. mostraron una respuesta diferente según la exposición
aguda a Zn. Todos estos marcadores aumentaron y disminuyeron a medida que la reacción contra
la exposición aguda, la proteína total en las branquias disminuyó de 7.3 mg / g a las 24 h para 20 μg
/ l a 3.6 mg / g a 96 hy continuó a 2.8 mg / g a 96 h para 100 μg / l mientras estaba en la glándula
digestiva, la proteína total disminuyó de 9.6 mg / g a 96hr para 20μg / l a 7.2 mg / g a 96 h para 100
μg / l, Vit.c disminuyó de 3.4, 3.5 μg / mg a 96 h para 20 μg / l a 2.4, 2.9 μg / mgat 96 h para 100 μg
/ lin ambas branquias y glándula digestiva, mientras que para VE, los valores en branquias
disminuyeron de 7.4 μg / mg a 96 h para 20 μg / l a 6.4 μg / mg a las 96hr. para 100 μg / l, y aumentó
de 8,5 μg / mg a 96hr para 20 μg / l a 12.2 μg / mg a 96hr para 100 μg / l, los valores de
metalotioneína aumentaron en branquias de 34.9 mg / ga 96 h para 20 μg / l para 59.6 mg / g a
96hr. para 100 μg / ly en glándulas digestivas aumentó de 41.9 mg / g a 96 h para 20 μg / l a 42.3
mg / ga 96hr. para 100 μg / l, la acetilcolinesterasa en las branquias disminuyó de 30,9 nm / min /
mg a 96 horas para 20 μg / l a 20,6 nm / min a 96 horas. para 100 μg / l (Tabla 1, Figuras 1 y 2), según
el análisis estadístico, la misma tendencia se adaptó a partir de biomarcadores después de la
exposición aguda a pb en Snail sp (Tabla 2, Figuras 3 y 4).

Diferentes respuestas del caracol aparecieron después de la exposición aguda de Interacción. La

proteína total en las branquias disminuyó de 10.1 a las 24 horas. para 20 μg / l a 6,3 mg / g a 96hr.
y continuó a 9,4 mg / g a 96 horas. para 100 μg / l, mientras que, en la glándula digestiva, la proteína
total disminuyó de 13.7 mg / g a 96hr. para 20 μg / l a 11.8 mg / ga 96hr. para 100 μg / l, Vit.c
disminuyó de 4,9,6,3 μg / mg a 96 horas para 20 μg / l a 3,2,4,8 μg / mg para 96 horas. para 100 μg
/ l en ambas branquias y glándula digestiva mientras que para V.E, los valores en branquias
disminuyeron de 8.9 μg / mg a 96hr para 20 μg / l a 7.2 μg / mg a 96hr. para 100 μg / l, y disminuyó
en las glándulas digestivas de 11.3 μg / mg a 96hr para 20 μg / l a 9.8 μg / mg a 96hr. para 100 μg /
l, los valores de metalotioneína aumentaron en las branquias desde 26,9 mg / g a 96 h para 20 m g
/ l hasta 35,2 mg / g a 96 h. para 100 μg / l y en glándulas digestivas aumentó de 28.1 mg / g a 96hr
para 20 μg / l a 51,2 mg / g a 96 horas. para 100 μg / l, la acetilcolinesterasa en las branquias
disminuyó de 40,2 nm / min / mg a 96 horas para 20 μg / l a 30,6 nm / min a 96 horas. para 100 μg
/ l (Tabla 3, Figuras 5 y 6).
 Tabla 1: Concentraciones de marcadores bioquímicos en Viviparus bengalensis en [branquias y
glándula digestiva (d.g.)] después de la exposición aguda para diferentes concentraciones (Media ±
S.D).

p≤0.05

p≤0.05

p≤0.05

Figura 1: Concentración de marcadores Figura 2: Concentración de marcadores

bioquímicos después de la exposición bioquímicos después de exposición aguda a
aguda a Zn en caracol (branquias). Zn en caracol (glándula digestiva)
Tabla 2: Concentraciones de marcadores bioquímicos en Viviparus bengalensis en [branquias y
glándula digestiva (d.g.)] después de la exposición aguda a pb para diferentes concentraciones
(Media ± S.D)

Figura 3: Concentración de marcadores Figura 4: concentración de marcadores

bioquímicos después de exposición aguda a bioquímicos después de exposición aguda a
Pb en caracol (branquia). Pb en caracol (glándula digestiva).
Tabla (3): Concentraciones de marcadores bioquímicos en Viviparus bengalensis en [branquias
(d.g.)] después de la interacción (Zn + Pb) exposición aguda para diferentes concentraciones
(Media ± S.D) y glándula digestiva

Figura 5: concentración de marcadores Figura 6: concentración de marcadores

bioquímicos después de int. exposición bioquímicos después de int. exposición
aguda en caracol (branquias). aguda en caracol (glándula digestiva).
La importancia de los biomarcadores está relacionada con su capacidad para indicar las
interacciones entre los contaminantes y los organismos, puede ser útil en procesos de
biorremediación antes de que se produzca el daño ecológico, desempeña un papel importante en
las rutas de diagnóstico de contaminantes y son aplicables tanto a laboratorios como a estudios de
campo [16]. La disminución de proteína, vitaminas después de la exposición aguda 24 horas y 96
horas se debe al consumo de estos compuestos para su uso en la generación de energía que utiliza
para mecanismos de defensa contra metales pesados y formación de lipoproteínas que implican en
la reparación de células dañadas y orgánulos tisulares. Este estudio es compatible con la disminución
de la concentración de proteínas debido a la mayor necesidad de energía para los procesos
metabólicos que conducen a una mayor utilización de proteínas para satisfacer la demanda de
energía, y aumentan la proteólisis para alcanzar las demandas de energía bajo estrés por metales
pesados [18]. El cambio en la tasa metabólica tiene una consecuencia para el cambio en la
composición bioquímica, por lo que el cambio en la composición bioquímica es un indicador de
estrés de naturaleza química o física en el ambiente que afecta específicamente el contenido
proteico con catabolismo aumentado y disminución del anabolismo de proteínas [19 ] La fluctuación
en los cambios para diferentes biomarcadores después de la exposición aguda fue indicada por
muchos investigadores como en este estudio [18]. Durante la exposición, el organismo tiende a
cambiar todos los procesos metabólicos para enfrentar los efectos tóxicos de los metales pesados
y esto lleva a cambios en los mecanismos bioquímicos y fisiológicos en el organismo, tanto la
duración de la exposición como la concentración de metales pesados son importantes para
determinar el nivel de la respuesta de biomarcador [20].

En otros estudios se han señalado correlaciones positivas entre los MT y la concentración de metales
pesados en los moluscos después de la exposición [21].

Conclusión

Hemos concluido que los marcadores bioquímicos tienen una respuesta diferente con respecto a la
exposición aguda de metales pesados, y esto dio una buena indicación de toxicidad por metales
pesados.

Agradecimientos
We are grateful to Department of Biology, College of Science, University of Babylon and Marine &Costal Lab
/ Florida State University for their supporting.

Referencias
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 RESUMEN
Los biomarcadores o marcadores biológicos, son sustancias que indican un estado biológico sea
bioquímicos, fisiológicos o morfológicos que se produce en un organismo según el estrés ambiental
o una variación inducida xenobióticamente en componentes o procesos celulares, bioquímicos,
estructuras o funciones que se puede medir en un sistema o muestra biológica [1].

La metalotioneína constituye una proteína de unión importante con bajo peso molecular (6-7) KDa
y alto contenido de cisteína (> 30%) que desempeña un papel importante en la desintoxicación de
sustancias químicas tóxicas [2], y las metalotioneínas desempeñan un papel clave en el
procesamiento de desintoxicación en moluscos y han sido propuestos como biomarcadores de
exposición.

La vitamina C es una vitamina soluble en agua. Al igual que la vitamina E, es un antioxidante eficaz;
La vitamina C puede proteger sustancias esenciales en el cuerpo como proteínas, lípidos,
carbohidratos, ADN y ARN del daño de los radicales libres [4]. La vitamina C funciona en
coordinación con la vitamina E y es capaz de regenerar la vitamina E cuando se usa vitamina E un
antioxidante, el ácido ascórbico es bien conocido por su actividad antioxidante, actuando como un
agente reductor para revertir la oxidación en líquidos. Cuando hay más radicales libres (especies de
oxígeno reactivo, ROS) en el cuerpo humano que los antioxidantes, la condición se llama estrés
oxidativo [5].

La acetilcolinesterasa es responsable de hidrolizar el neurotransmisor acetilcolina en colina y ácido

acético que controla las corrientes iónicas en la membrana excitable, y el biomarcador antiguo
puede estar respondiendo al bajo nivel de contaminación en el ambiente [6] y se considera una
enzima única cuya función fisiológica eliminar acetilcolina de hendiduras sinápticas.

La vitamina E es una vitamina liposoluble y su función principal es no enzimática antioxidante,

protege las células del cuerpo de compuestos tóxicos como metales pesados [8].

La importancia de los biomarcadores está relacionada con su capacidad para indicar las
interacciones entre los contaminantes y los organismos, puede ser útil en procesos de
biorremediación antes de que se produzca el daño ecológico, desempeña un papel importante en
las rutas de diagnóstico de contaminantes y son aplicables tanto a laboratorios como a estudios de
campo [16]. La disminución de proteína, vitaminas después de la exposición aguda 24 horas y 96
horas se debe al consumo de estos compuestos para su uso en la generación de energía que utiliza
para mecanismos de defensa contra metales pesados y formación de lipoproteínas que implican en
la reparación de células dañadas y orgánulos tisulares.