ETAPA 1 - FUNDAMENTACIÓN DE LA ESTRATEGIA

ERIKA ALEJANDRA RUBIANO GALVEZ

CÓDIGO
1.116.257.254

FEDRA LORENA ORTIZ

TUTORA

CURSO

305689_17

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA

UNAD
CEAD PALMIRA
2018
 LABORATORIO VIRTUAL N. 1

1. QUE FASES DE CRECIMIENTO PUEDE DIFERENCIAR EN LA GRAFICA

Se observa la fase de lactancia que es cuando la población bacteriana es

inoculada en un medio fresco el crecimiento no suele comenzar de
inmediato, sino después de un tiempo llamado latencia, fase de crecimiento
exponencial este periodo es cuando el crecimiento ocurre de manera
exponencial, fase estacionaria en este ocurre limitaciones de crecimiento.
También se observa la fase de aceleración positiva y negativa.

2. EXPLIQUE EL COMPORTAMIENTO DE LA GRÁFICA, DESDE EL

PUNTO DE VISTA METABÓLICO

Este cultivo consiste en proporcionar unas condiciones físicas, químicas y

nutricionales adecuadas para multiplicar de forma controlada. Podemos
distinguir cultivos líquidos y sólidos en función de las características del
medio y cultivos discontinuos y continuos en función de la disponibilidad de
nutrientes en medio.
La curva de crecimiento nos permite identificar las fases de crecimiento
hasta un tiempo de 4 horas, en donde se nota la fase estacionaria de los
microorganismos en este caso si hubiéramos prolongado el análisis en
horas, podríamos observar la fase estacionaria en su esplendor.

3. EN EL GRAFICO ES POSIBLE OBSERVAR TODAS LAS FASES DE

CRECIMIENTO? EXPLOQUE SU RESPUESTA

En la gráfica podemos observar cinco fases de la curva de crecimiento:

Fase de latencia o retardo, dura pocas horas, ya que la célula se adapta al

medio en el que se encuentra. Puede haber muerte de algunos
microorganismos.

Fase de aceleración positiva, en la que las células tienen gran actividad

fisiológica, apareciendo el crecimiento protoplasmático.

Fase de aceleración negativa, dada por la competencia del alimento.

 Fase estacionaria, consiste en el equilibrio entre la multiplicación y muerte de
los microorganismos.

Fase logarítmica.- se lleva a cabo una multiplicación exponencial de los

microorganismos.

4. INVESTIGUE OTROS METODOS CON LOS CUALES SE PUEDE

DETERMINAR LA CURVA DE CRECIMIENTO

Métodos directos:

Recuento del número de células en una cámara Thoma

Peso seco celular
Determinación de nitrógeno o de proteínas totales
Determinación de DNA

Métodos indirectos:

 Recuento de colonias en placa

 Recuento sobre filtro de membrana
 Consumo de oxígeno
 Liberación de dióxido de carbono
 Concentración de un enzima constitutivo
 Decoloración de un colorante
 Incorporación de precursores radiactivos
 Medida de la turbidez

5. CUAL ES LA APLICACIÓN INDUSTRIAL DE CONOCER LA CURVA DE

CRECIMIENTO DE UN MICROORGANISMO?

Te permite predecir la fecha de vencimiento. La curva de crecimiento microbiano

te sirve para determinar la cantidad de microorganismos presentes en el alimento
en función del tiempo. Habiendo determinado la cantidad a la cual el alimento se
considera no viable para el consumo humano, usando la curva se puede sacar en
cuanto tiempo este alimento ya no es recomendable para consumo.
 6. QUE ENTIENDE POR ABSORBANCIA?

La dispersión de la luz es, dentro de ciertos límites, proporcional a la masa del

cultivo. a) Espectrofotómetro: Este aparato es de uso habitual en cualquier
laboratorio de Microbiología o Bioquímica. Mide la densidad óptica (D.O.), es decir
la absorbancia (una medida de la luz transmitida a través de la suspensión).

7. PORQUE ES NECESARIO UTILIZAR UNA SOLUCION BLANCO, CADA

VEZ QUE SE HACE UNA NUEVA LECTURA EN EL
ESPECTROFOTOMETRO.

Para utilizar un espectrofotómetro hay que preparar una serie de diluciones con
concentración conocida. Una de estas muestras no contendrá soluto y es conocido
como el “BLANCO”. Se usa para ajustar el instrumento para leer transmitancia del
100 % o 0 de absorbancia. En la práctica, un valor de transmitancia (la
absorbancia infinita) de 0 % es establecido colocando un objeto opaco la fuente de
luz y la fotocelda. El control electrónico es accionado a fin de que muestre una
lectura de transmitancia de 0 %. La muestra “BLANCO” (no contiene soluto o
colorante) es colocada en el porta celda, y el espectrofotómetro reajustado para
leer transmitancia de 100 %. Todas la demás medidas serán hechas solo por
introducir las muestras en el porta celdas y medir el % de transmitancia. La
mayoría de espectrofotómetros tienen sistema de conversión del % de
transmitancia en absorbancia.

8. QUE ES LO QUE MIDE REALMENTE EL ESPECTROFOTOMETRO Y

COMO SE RELACIONA ESTO CON LAS FASES DE CRECIMIENTO
MICROBIANO?

Nos da información sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra. Esto

podemos lograrlo midiendo la absorbancia (Abs) a distintos largos de onda (l) y
graficar estos valores en función del largo de onda, formando un espectrograma.
Como cada sustancia tiene unas propiedades espectrales únicas, distintas
sustancias producen distintos espectrogramas. Esto se debe a que cada sustancia
tiene un arreglo de átomos tridimensional particular que hace que cada sustancia
tenga características únicas. Al ser expuestos a la luz del espectrofotómetro,
algunos electrones de los átomos que forman las moléculas absorben energía
entrando a un estado alterado. Al recuperar su estado original, la energía
absorbida es emitida en forma de fotones.
2. UNA VEZ REALIZADO EL LABORATORIO VIRTUAL Y SIGUIENDO EL
EJEMPLO CALCULE EL VALOR DE G (TIEMPO DE GENERACIÓN) Y DE K
(VELOCIDAD DE CRECIMIENTO) EN UN EXPERIMENTO DE CRECIMIENTO
EN EL QUE SE INOCULÓ UN MEDIO CON 3 X 10 6 CÉLULAS /ML DE E. COLI
Y QUE DESPUÉS DE UN PERÍODO DE LATENCIA DE UNA HORA CRECIÓ
EXPONENCIALMENTE DURANTE 8 HORAS, ALCANZANDO UNA POBLACIÓN
DE 8,4 X 10 9 CÉULAS / ML.

log 𝑁−log 𝑁𝑜
N= No.2n es igual n=
𝑙𝑜𝑔2

log 8.4𝑥10 9−log 3𝑥106

n=
𝑙𝑜𝑔2

n= 1.026- 0.79

n= 0.23

𝑡 8
G= = 0.23 = 40
𝑛
3. COMPARE Y SEÑALE LAS DIFERENCIAS ENTRE METABOLITOS
SECUNDARIOS Y PRIMARIOS, Y DÉ UN EJEMPLO DE CADA UNO DE
ELLOS. INCLUYA AL MENOS DOS EXPLICACIONES DE LAS BASES
MOLECULARES POR LAS QUE ALGUNOS METABOLITOS SON
SECUNDARIOS, ENVÉS DE PRIMARIOS.

Unas de las diferencias entre plantas y animales es su capacidad de síntesis de

numerosas y diversas sustancias. Las plantas sintetizan y acumulan substancias
muy variadas como el ADN, ARN, proteínas, polisacáridos, azucares y lípidos a
partir de nutrimentos inorgánicos. Las sustancias vegetales, de la naturaleza
química extraordinariamente diferente. Presentan propiedades también muy
diversas, aunque su papel fisiológico en la planta es muchas veces no del todo
conocido. En particular los vegetales, igual que otros organismos mediante sus
procesos metabólicos sintetizan dos categorías de metabolitos: primarios y
secundarios, aunque esta distinción resulta totalmente arbitraria pues no hay una
división precisa entre metabolismo primario y secundario.

Los metabolitos primarios, muy abundantes en la naturaleza, son indispensables

para el desarrollo fisiológico de la planta; se encuentra presentes en grandes
cantidades, son de fácil extracción y su explotación es relativamente barata y
conducen a la síntesis de los metabolitos secundarios.

Diferencias entre metabolitos primarios y secundarios

Metabolismos primarios

Productos del metabolismo general ampliamente distribuidos en plantas y

microorganismos indispensables para la vida

Aminoácidos de proteínas, monosacáridos, lípidos ácidos derivados del ciclo de

los ácidos tricarboxilicos, glucósidos, etc.

Metabolitos secundarios

Productos del metabolismo especial biosintetizados a partir del metabolismo

primario distribución restringida a ciertas plantas, microorganismos distribución
taxonómica restringida a veces característico de un género dado o de una
especie. No indispensables para la vida alcaloides, terpenos flavonoides,
esteroides, etc.
4. DE ACUERDO A LA OVA SOBRE FERMENTACIÓN. DETERMINE POR
MEDIO DE UN ESQUEMA LAS ETAPAS DE UN PROCESO FERMENTATIVO A
NIVEL INDUSTRIAL Y EXPLIQUE CADA UNO DE LOS PASOS.
5. Estudie la ova sobre fermentación, que se encuentra en el entorno de
conocimiento de la unidad uno y describa los problemas que se presentan
en el escalado desde el punto de vista de la aireación, la esterilización y el
control del proceso de fermentación. ¿Por qué está importante la estabilidad
en un fermentador industrial?

En un ambiente aséptico y unas condiciones aeróbicas son, probablemente, los

dos puntos de mayor relevancia que hay que considerar. Los fermentadores más
ampliamente utilizados a nivel industrial están provistos de mecanismos de
agitación, dispersión y aireación así como de sistemas para el control de la
temperatura, pH y formación de espuma.

Factores fisicoquímicos que afectan al rendimiento de las fermentaciones

industriales: oxigeno, temperatura, pH.

Una adecuada agitación de un cultivo microbiano es esencial para la fermentación

ya que produce los siguientes efectos en las tres fases:

Incrementar velocidad de transferencia de oxigeno desde las burbujas de aire al

medio líquido, los microorganismos no pueden utilizar oxigeno gaseoso, sino
solamente el que se encuentra en disolución.

Aumentar la velocidad de transferencia de oxígeno y nutrientes desde el medio a

las células. Debido al movimiento se evita que las células creen arcas estancadas
con bajos niveles de oxígeno y nutrientes.

Aumentar la velocidad de transferencia de productos metabólicos de las células al

medio.

Aumentar la tasa o la eficiencia de la transferencia de calor entre el medio y las

superficies de refrigeración del fermentador.
6. DE ACUERDO A LA OVA SOBRE FERMENTACIÓN REALICE UN CUADRO
COMPARATIVO DONDE DIFERENCIE LOS TIPOS DE FERMENTACIÓN
INDUSTRIAL Y LOS MECANISMOS DE OBTENCIÓN DE PRODUCTOS
FERMENTATIVO.

Tipos de fermentación industrial se dan por la degradación de alguna especie de

microorganismos dando como resultado productos finales que son diversos como:
polisacáridos está el almidón, celulosa y quitina: disacáridos como la lactosa y
maltosa entre otros:

Existen varios tipos de fermentación como:

 Fermentación por excelencia

 Fermentación a partir de pirutavo
 Putrefacción
7. EN LA OVA SOBRE FERMENTACIÓN. IDENTIFIQUE LOS FACTORES QUE
PUEDEN ALTERAR LA PRODUCCIÓN DE ENZIMAS DE INTERÉS
ECONÓMICO A PARTIR DE MICROORGANISMOS EN UN PROCESO
INDUSTRIAL, EXPLIQUE A TRAVÉS DE UN EJEMPLO CADA UNO DE ELLOS.

Pueden existir problemas en el control de temperatura, de la aireación y de la

humedad, por ello se prefieren los cultivos sumergidos a los cultivos en superficie.
Los cultivos en medio líquido, profundos, agitados, son mejor adaptados a los
diferentes controles mediante métodos modernos y reducen los riesgos de
contaminación. Además se prestan mejor a las operaciones de extrapolación y de
optimización necesarias para el paso del fermentador piloto de laboratorio
fermentador industrial

Baja especificidad: aunque en la industria las enzimas sean utilizadas para la

hidrolisis de macromoléculas complejas en las cuales los sitios de acoplamiento
con, frecuencia desconocen, el efecto global que se busca involucra,
generalmente la utilización de un tipo preciso de enzima.

El valor del pH: este factor tiene una influencia variable según las enzimas;
algunas de ellas, como la proteasa alcalina aún son activas a pH: 10, en tanto las
enzimas fúngicas funcionan.

El valor de la temperatura generalmente: quienes utilizan enzimas se interesan en

poder disponer de enzimas que soporten temperaturas elevadas, ya que estas
temperaturas conservan en parte la esterilidad del medio de fermentación:

 PH
 Temperatura
 Transporte de oxigeno
 Interacciones alostericas
 Inhibición competitiva
 Inhibición no competitiva
 Inhibición irreversible
Realice una ponencia científica: Estudie la tutorial unidad I – biotecnología de las
enzimas, cuyo link se encuentra en el foro de la Unidad 1. En dónde además de
una breve contextualización del tema encontrará un problema, en el que se han
planteado tres hipótesis que podrían explicar el fenómeno. A partir de la hipótesis
escogida construya un texto científico, de acuerdo al Modelo de Toulmi.

A. Plantee la Hipótesis. De acuerdo a lo leído escoja una de las tres hipótesis que
se plantean para explicar el fenómeno.

Hipótesis 1: Las variaciones en la actividad enzimática se debe a las

diferencias en las concentraciones de almidón en las fuentes de carbono.

B. Analice la evidencia. Para ello, realice el laboratorio virtual 2, tome los

resultados obtenidos, para responder la pregunta uno que se plantea en el tutorial.
A continuación, lea detenidamente los documentos, los artículos científicos
relacionados sobre el tema, en especial “Inhibidores de la alfa amilasa en
diferentes especies vegetales” cuyo link se encuentra en las referencias
complementarias del contenido de la unidad uno para escoger su hipótesis.

La biotecnología vegetal es una extensión de la tradición de modificar las plantas,

con una diferencia muy importante: la biotecnología vegetal permite la
transferencia de una mayor variedad de información genética de una manera más
precisa y controlada.
Al contrario de la manera tradicional de modificar las plantas que incluía el cruce
incontrolado de cientos o miles de genes, la biotecnología vegetal permite la
transferencia selectiva de un gen o unos pocos genes deseables. Con su mayor
precisión, esta técnica permite que los mejoradores puedan desarrollar variedades
con caracteres específicos deseables y sin incorporar aquellos que no lo son.

C. Establezca la garantía: Respalde su hipótesis con la teoría científica que

corresponda y explique la hipótesis planteada. En este caso debes hablar sobre
inhibición enzimática.

Se utilizó la misma cepa y se obtuvieron resultados diferentes, en el primer ensayo

realizado, se tuvieron en cuenta condiciones claramente cambia la producción de
biomasa. Para el segundo ensayo realizando las condiciones claramente cambia a
pesar de ser la misma cepa estas reacciones, las enzimas actúan sobre unas
moléculas denominadas sustratos, las cuales se convierten en moléculas
diferentes denominadas productos. Casi todos los procesos en las células
necesitan enzimas para que ocurran a unas tasas significativas. A las reacciones
mediadas por enzimas se las denomina reacciones enzimáticas.

Debido a que las enzimas son extremadamente selectivas con sus sustratos y su
velocidad crece solo con algunas reacciones, el conjunto (set) de enzimas
sintetizadas en una célula determina el tipo de metabolismo que tendrá cada
célula. A su vez, esta síntesis depende de la regulación de la expresión génica.

Se reduce entonces que este microorganismo logro generar mayor biomasa

porque su pH ideal para crecer y adaptarse era el que tenía el medio caído
nutritivo.

D. Respalde la Garantía. Una vez analizados los datos de los laboratorios y los
artículos científicos, relaciónelos con la garantía, busca artículos científicos sobre
inhibición enzimática en procesos fermentativos que te ayuden a soportar tu
hipótesis.

Se toma en cuenta los factores que influyen de manera directa en el momento de

producción de biomasa, es el PH de medio y las características de la cepa en
cuanto al PH. Los microorganismos que utilizan el almidón comúnmente
denominados amilo líticos, pueden utilizar este polímero porque tienen enzimas
como la alfa amilasa la cual se encarga de degradar el almidón hasta las
moléculas de glucosa. El yodo se utiliza como indicador de presencia de almidón,
por lo tanto al colorearse de color oscuro, indica la presencia del polisacárido. Los
procesos de producción de enzimas microbianas se realizan mediante cultivos
aeróbicos. En general las enzimas se producen en pequeñas cantidades durante
la fase de crecimiento activo, pero se acumulan en grandes cantidades en la fase
estacionaria del crecimiento. Las enzimas inducibles como la alfa amilasa se
producen sólo cuando en el medio se encuentra el inductor (sustrato)

Se reduce entonces que este microorganismo logro generar mayor biomasa

porque su pH ideal para crecer y adaptarse era el que tenía el medio caído
nutritivo.

E. Encuentre las posibles excepciones, que se puedan presentar sobre la

hipótesis escogida, adelántese a las posibles refutaciones que pueda recibir sus
argumentos.

La hipótesis se basa en que no crecieron suficientes enzimas debido a que es un

inhibidor podemos encontrar otras causas propias de los medios, su temperatura
humedad, acidez, alcalinidad y estar exento de todo microorganismo contaminante
que puede dañar el mismo.
F. Concluya. Ratifique la Hipótesis escogida utilizando un calificador modal.

Es posible que el déficit de crecimiento enzimático del medio se deba a la

presencia del inhibidor que se esté utilizando como fuente.

BIBLIOGRAFÍA

MATEO,F, PEDRO. DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIA Y GENETICA.

CRECIMIENTO MICROBIANO EN:
http://webcd.usal.es/Web/educativo/micro2/tema07.html

PRINCIPIOS DEL METABOLISMO MICROBIANO EN:

http://www.unac.edu.pe/documentos/organizacion/vri/cdcitra/Informes_Finales_Inv
estigacion/Febrero
29/IF_DECHECO%20EGUSQUIZA_FIPA/CAPITULO%20N%BA%201.pdf