UNIVERSIDAD ‘SAN SEBASTIAN INTRODUCCION El examen de quimico de la orina, junto con el andlists microscdpico del sedimento, constituye una vital herramienta para el diagnostico de diversas patologias. Es un examen relativamente simple y de bajo costo, el que técnicamente correctamente permite dlagnosticar con bastante precisién varios tipos de nefropatias, tanto en el laboratorio de rutina como ~ particularmente ~en sistemas de urgencla. La presencia de algunos elementos a la determinactén de algtin compuesto quimico argénica 0 inorganico pueden resultar patognoménicos, asi como la ausencia de otros permite exclu la existencia de ciertas patologias. El andlisis de orina puede realizarse de forma manual o automatizada, requiriendo en todos los casos la evaluacién permanente y validacién constante de las téenicas por parte de un Profesional Tecndlogo Medico. La observacién del se yento urinario, requiere el dominio absoluto del microscopio. En bioquimica clinica, el estudiante debe estar en condiciones éptimas en el uso de este importante instrument 6ptico, que constituye una vallosa herramienta para este examen y ademés para otras especialidades que lo requieren, TOMA DE MUESTRA Elexamen de orina es de méxima importancia en el diagnéstico de las nefropatias y alcanza su mayor utllidad cuando la muestra es fresca, concentrada y de pH dcido, pues la orina tlende esponténeamente a alcalinzarse (accién bacteriana), con lo que sus elementos figurados degeneran. Se debe preferir la primera orina de la mafiana 0 con 8 horas de retencién, debide a la concentracién de ella, permitiendo la mejor visualizacién de los elementos formes presentes. ‘Antes de recolectar la muestra se debe realizar aseos genital externo con jabén sin antiséptico. La recoleccién se debe realizar en un frasco limplo y seco de boca ancha, con un volumen minimo de 50 ml Idealmente se debe contar con orina de segundo chorro y sin contaminacién vaginal El recipiente para este examen no debe estar ester necesariamente, salvo para examenes microbiolégicos. En pacientes pediétricos existen procedimientos especiales. En pacientes hospitalizados a minusvalidas existen procedimientos médicos y/o de enfermeria para la obtencién de muestras para analisis de orina.© UNIVERSIDAD Q SAN SEBASTIAN A) EXAMEN EISICO QUIMICO DE LA ORINA: Se debe informar el aspecto fieiea como color y aspect Ejemplo: Color: Amarillo Aspecto: Transparente Colores tipicos a informar: Amarillo/Amarilo claro/Caté/Anaranjado/Hematico* Aspectos tipicos a informar: Transparente/Opalescente/Turbio/Ligeramente turbio Examen quimico de la orina: El examen quimico puede ser automatico en un equipo el cual cuantifica en mg/dl otras unidades de concentraciin los compuestos presentes. ‘Tambien puede ser manual, en donde el informe es cualitativo. Ejemplo de analisis cualitativo y cuantitativo A) Glucosa t+ 0 500mg/al 8) Glucosa:f| 0 __3_mag/all Para el anallse quimico de la orina actualmente se ulllzan de rutina las Cintas o tas de orina, as que actan por el principio de deteccién de quimica seca. Cada parémetro requilere un tiempo minime de reaccién antes de leer el parametro. Los equipos automaticos tienen incorporado este delay (retraso 0 tiempo de reaccién) por defecto. Estas tras se introducen completa y brevemente en la muestra y luego se ellmina el exceso de orina con toalla absorbente, colocando la cinta de orina de canto sobre el papel. Componentes habituales que trae una cinta de orina: GLUCOSA.PROTEINAS-SANGRE*-LEUICOCITOS-Ph-DENSIDAD- UROBILINOGENO BILIRRUBINA- CETONAS-ACIDO ASCORBICO-NITRITOS. Ejemplo de informe quimico cualitativo: GLUCOSA.[-) onegativa PROTEINAS: ++ UROBILINOGENO: NORMAL (Siempre tenemos un nivel minima} NITRITOS: + (Este parametro, por ejemplo, no importa la cantidad, Solo vemos si esta + of Stelresto de los parémetros estén negatives, debe Indicarse en el informe final Investigue acerca de los métodos de determinaclén que ocupan las cintas de orina. Apréndase los cldsicos.( Glucosa, leucocitos,sangre,densidad,proteinas} ee) CINTAS REACTIVAS LECTURA MANUAL LECTOR@ UNIVERSIDAD Q SAN SEBASTIAN B) SEDIMENTO URINARIO: Para este examen se debe centrifugar un alicuota de la muestra de aproximadamente 1012 ml La ‘muestra para todo examen de orina debe estar bien homogeneizada. La centrifugacién debe ser en un tubo conico ( falcon) ojala con tapa para evitar los aerosoles a una ‘velocidad de 1500 rpm por 10 minutos. Este es un aspecto de cierta controversia respecto al tiempo y RPM adecuadas. El concepto central radica en sedimentar los elementos y concentrarlos por este método pero sin romper estructuras frégiles como los cilindros. Para estandarizar este ftem el ISP ha establecido una serle de normas que estandarizan este examen. Para la centrifugacién de la orina sugiere trabalar @ una fuerza centrifuga relativa (RCF] de 400 La formula de esta RCF es la siguiente: RCF = 1.118 * 1Oexp5*1™ N2 radio del rotor en em, Desde el centro del eje hasta el fondo del tubo. IN2= rotaciones por minuto (al cuadrado) 41.118 * 10exp-5= constante por diez elevado a la menos 5 Una vez centrifugado se debe eliminar el sobrenadante con una pipeta pasteur plastica, dejando un sedimento a resuspender de 0.5 ml apraximados. La resuspension debe ser suave,con la ayuda de la misma pipeta 0 peque‘ios golpes. ( No Vortex) ‘Tambien se puede eliminar invirtiendo el tubo de forma constante y suave, pero se corre el riesgo de perder parte del sedimento, Se hara una discusién de este procedimiento. Luego se debe observar el sedimento al microscopio con 40X. Antes se debe recorrer la preparacién con aumento menor para confirmar la presencia de elementos como cilindros. Se utiliza el términe "Campo" para referirse al aumento mayor del microscopio que no utiliza Inmersién, Elementos habituales que se observan en un sedimento urinari Y Celulas epiteliaes — eritrocitos o hemi otros{mucus,levaduras,ete.) En el sedimento urinario se informan elementos por campo en rangos. Por ejemplo leucocitos 2-4 por ‘campo. Los rangos deben ser acotados, es decir, nose informan rangos amplios como 2-30 por campo (en este caso -5icortesponde- un rango légico podria ser 25-30 por campo, comunicando en su informe la cantidad mas representativa de lo que Ud. aprecia en la muestra) ango por campo Ud. informara: - leucocitos-bacterias-cristales-ilindros- > Eritrocites > Leucocitos > Cilindros Elresto se informara con el sistema cualitativo de cruces. Este sistema considera la siguiente clasificacién: ¢/ MUYESCASO[OS. AS. A) + ESCASOIA.AS, 05) + REGULAR CANTIDAD tt ABUNDANTE ‘+He+ MUY ABUNDANTE + ELCONCEPTO NO SE OBSERVA TAMBIEN ES VALIDO CUANDO CORRESPONDE,© UNIVERSIDAD Q SAN SEBASTIAN Se informa con cédigo “eruces": > CELULAS EPITELIALES Plocitos: N> crtstates > BACTERIAS > mucus Ejemplo de informe de sedimento urina ‘CELULAS EPITELIALES + LEUCOCITOS: 8-10 POR CAMPO. PIociTos: NO SE OBSERVAN ERITROCITOS 50-60 POR CAMPO BACTERIAS, + CRISTALES: OXALATO DE CALCIO +++ CILINDROS NO SE OBSERVAN. NOTA: En el informe final entregado al paciente, las “cruces” se deben traducir en el concepto cequivalente. Asi para bacterias +, se debe informar bacterias escasas. La notacién en cruces es principalmente un recurso interno del Laboratorio. + Eritrocites: Sutamafio ‘con la concentracién urinaria: grandes en orinas diluidas (10 micrones) y pequefios (0 ‘micrones) en orinas concentradas.. ‘Su excrecién normal diaria es de 500.000 En un estudio realizado en una poblacién adulta normal de 1.500 participantes se encontré que en el {90% de los casos habia menos de un glébulo rojo/campo y en el 97% de los casos habia menos de 5 sldbulos rojos/campo, por lo tanto se establecié la siguiente definiciGn: ‘Microhematuria, es el hallazgo de mas de 5 glébulos rojos/campo. £s necesario realizar una buena observacién porque los gldbulos rojas pueden ser confundidos con: = Levaduras, que son més palidas y pueden presentar yeriaciin + Gotas de grasa, brillantes y de variado temafio ~ _ Gristales de uratos que también adoptan diversos tamaiios y formas. © Leucocitos: En su mayoria son polimorfonucleares. En infecciones urinarias degeneran, transformandose en pocitos, los cuales in vitro forman placas de pus. ‘Su excrecién normal es de aproximadamente 1.000.000 en 24 horas. 1.94% de los hombres presentan menos de 2 leucocitos/campo 170% de las mujeres presentan menos de 3 leucocitos/campo, diferencia que prabablemente puede ‘educirse evitando la contaminacién vulvo-vaginal timo de entrada de eritrocitos y leucocitos a le orina normal se desconoce. (Investigar)@ UNIVERSIDAD Q SAN SEBASTIAN © Células epitelial 4) Epitelio tubular: son células redondas cuboidales de nticleo tnico y citoplasma granular. Pueden estar aisladas o dentro de cilindros y su abundancia sugiere dafio tubular. 1b) Epitelio vesical-uretral-vaginal: son células grandes, irregulares, de niicleo pequefio y de origen descamativo. Predominan en muestras mal tomadas en mujeres. Su abundancia en hombres sugiere cistitis. © Cllindros: Los cilindros son masas proteicas aglutinadas en el lumen tubular. Ellos, con la sola excepcién del cilindro prostatico, se originan en el parénquima renal. Su ancho, composicién y forma entregan valiosa informacion sobre las condiciones de los tbulos y su contenido en el momento en que se formaron, La matriz del clindro esté formada por una mucoprateina secretada por la célula tubular, cuya aglutinacién In vitto, puede Inducirse con albximina y pH bajo. Por esto, se deduce que abundan en pacientes con proteinuria. Normalmente se excretan 5.000 2 10.000 cilindros al dia, casi siempre hialinos o granulosos. El digmetro del cilindro es mas o menos el ancho de 3 a4 leucocitos y se cree se forman en el tibulo distal o a comienzos del colector. oTips © Investigue acerca del tipo de cilindros, cristales y células que se pueden encontrar en un sedimento urinario. (= Averigite acerea de Inz pntolagias arocindins al examen de Orina completa (Fisico quimico mas sedimento) © Haga un informe de Orina completa de un paciente Normal y otro alterado. © Anote los valores de referencia de parametros quimicos en la orine. Revise el uso del microscopio.