Práctica N° 16

Control del crecimiento microbiano I: Efecto de agentes físicos y químicos

1. Introducción

Las actividades de los microorganismos se ven muy afectadas por las condiciones químicas y físicas
del medio. El conocimiento de los efectos ambientales nos permite explicar la distribución de los
microorganismos en la naturaleza y hace posible diseñar métodos que controlen o potencien las
actividades microbianas. Al respecto, se pueden considerar muchos factores ambientales que
tienen una función destacada en el control del crecimiento microbiano: la temperatura, el pH, la
disponibilidad de agua y el oxígeno, efecto de la luz ultravioleta y efecto de la presión osmótica.
Los microorganismos pueden ser eliminados, inhibidos o muertos por agentes físicos (procesos
físicos) o agentes químicos.

La temperatura es uno de los factores físicos ambientales más importantes, que influyen en el
crecimiento y afecta la sobrevivencia de los microorganismos en dos formas: primero, si
aumentamos la temperatura, las reacciones químicas y enzimáticas en la célula se realizan más
rápidamente y por lo tanto el crecimiento es más rápido; segundo, tanto las proteínas como los
ácidos nucleicos y otros componentes celulares son sensibles a altas temperaturas y pueden ser
irreversiblemente inactivos. Generalmente al aumentar la temperatura dentro un límite dado, el
crecimiento y las funciones metabólicas aumentan hasta un punto en que se inactivan y entonces
las funciones cesan.

En el presente informe se determinara la sensibilidad microbiana a diferentes agentes físicos y

químicos evaluando su crecimiento con el fin de ejercer un control sobre los microorganismos.
 2. Resultados y discusión de resultados
I. Efecto de la luz UV

Figura N° 1: Efecto de la luz ultravioleta (UV).

 A medida que el tiempo de exposición de la placa de Petri a la Luz ultravioleta aumenta,

disminuye el crecimiento microbiano. Los microorganismos se desactivan por medio de la
luz UV como resultado del daño a los ácidos nucleicos. El ADN y el ARN celular absorben la
energía alta asociada con la energía UV de longitud de onda corta, principalmente a 260
nm. Esta absorción de energía UV forma nuevos enlaces entre nucleótidos adyacentes
creando dobles enlaces o dímeros.
 La dimerización de las moléculas adyacentes, especialmente de las timinas, constituye el
daño fotoquímico más frecuente. La formación de numerosos dímeros de timina en el
ADN de bacterias y virus impide la replicación y la capacidad de infectar. Por tanto, la
radiación UV tiene un efecto mutagénico y letal sobre estos microorganismos a
determinadas longitudes de onda.

 Es posible que algunos microorganismos reparen el daño fotoquímico causado por la luz
UV, si su dosis es demasiado baja, mediante la fotorreactivación o reparación oscura. Por
tanto los sistemas UV deben diseñarse con una dosis de radiación UV suficiente como para
garantizar que el daño celular no pueda ser reparado.
II. Efecto de los metales pesados

Figura N° 2: Efecto de metales pesados (plata y cobre).

 El mecanismo de acción de la plata está estrechamente relacionado a la interacción de los

iones plata con grupos suldhidrilo (SH-), y esta actividad antimicrobiana va a depender de
la acumulación intracelular de bajas concentraciones de iones plata, que interactúan con
las enzimas, proteínas y ácidos nucleicos produciendo cambios estructurales en la pared
celular bacteriana, membranas y ácidos nucleicos afectando su viabilidad.
 Los mecanismos antimicrobianos del cobre son complejos y ocurren en distintas formas,
tanto dentro de las células como en los espacios intersticiales entre las células. Un factor
crítico responsable de las propiedades antimicrobianas del cobre es la habilidad de este
metal de aceptar o donar fácilmente sus electrones (es decir, el cobre tiene una alta
oxidación catalítica y alto potencial de reducción). Esta propiedad química permite que los
iones de cobre alteren las proteínas dentro de las células de los microbios para que las
proteínas ya no puedan realizar sus funciones normales. Además, el cobre es responsable
de inhibir el transporte electrónico en las interacciones de la pared celular, ligando el
ADN y desordenando las estructuras helicoidales. A través de estos mecanismos y otros,
el cobre inactiva muchos tipos de bacterias, hongos y virus.

3. Conclusiones
 El objetivo de controlar el crecimiento microbiano es reducir la carga microbiana o el
número de microorganismos viables presentes en un material, alimento o en una
solución.
 La luz UV no requiere transporte, almacenamiento ni manipulación de sustancias
químicas tóxicas o corrosivas, lo que representa un beneficio para la seguridad de los
operarios de las plantas y la población circundante.
  La luz UV no requiere transporte, almacenamiento ni manipulación de sustancias
químicas tóxicas o corrosivas, lo que representa un beneficio para la seguridad de los
operarios de las plantas y la población circundante.
 La habilidad intrínseca del cobre para inactivar las bacterias E. coli, Legionella
pneumophilia, Staphylococcus aureus, Streptococcus grupo D, Pseudomonas
aeruginosa y el reciente descubrimiento de su habilidad para inactivar a la bacteria
MRSA (el mortal patógeno que ha llegado a ser una preocupación mayor de los
administradores de salud en todo el mundo), abre la posibilidad de que el reemplazo
de las superficies de contacto con aleaciones de cobre en las instalaciones de salud,
en conjunto con buenas prácticas higiénicas, puedan ayudar a reducir la incidencia
de las infecciones microbianas debido a las superficies contaminadas.

4. Cuestionario
I. ¿Por qué las bacterias no se lisan cuando están en un medio hipotónico?

En el caso de la Gram positivas, porque tienen una capa gruesa de peptiglucado. En el caso de las
Gram negativas, por poseer una membrana externa (ausente en Gram positivas). Estas estructuras
impiden un lisamiento de las bacterias en medio hipotónico, ya que estas soportan presiones
hidrostáticas altas.

II. Realice una gráfica o tabla comparativa en base a los resultados obtenidos tras el
efecto de la luz ultravioleta. ¿De qué manera se relacionan los efectos de la luz
UV con la composición química o las estructuras bacterianas de los grupos
microbianos estudiados?

Tiempo de exposición a la luz UV (min) Efectos en el crecimiento microbiano

0 minutos (control) Crecimiento normal

10 minutos Crecimiento reducido al 60 %

20 minutos Crecimiento reducido al 80 %

30 minutos Crecimiento reducido al 95 %

A mayor tiempo de exposición de la luz UV, menor será el crecimiento microbiano.

5. Bibliografía
 Enrique Iañez Pareja. 2006. Curso de Microbiología General. Departamento de
Microbiología. Facultad de Ciencias. Universidad de Granada – España.
 Murray, P.; Rosenthal, K.; Kobayashi, G. y M. Pfaller. 2002. Microbiología Médica. 4ta.
Edición. Editorial Elsevier Science. Barcelona – España.