“Año del buen servicio al ciudadano”

UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL

FACULTAD DE OCEONOGRAFÍA, PESQUERÍA, CIENCIAS

ALIMENTARIAS Y ACUICULTURA

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA EN ACUICULTURA

Métodos de Esterilización

ASIGNATURA:

Microbiología y Control de Calidad

PROFESOR: Ing. Cesar A. Peña Domínguez

N° DE PRÁCTICA: 2

FECHA DE PRÁCTICA: 02/05/2017

INTEGRANTE:

 Nájar Alcántara, Alexandra

FECHA DE ENTREGA: 10/06/2017

2017
 INTRODUCCIÓN

El presente informe explica los pasos que debemos seguir para esterilizar los materiales que se

utilizaran en la preparación de medios de cultivo.

De esta etapa depende el éxito o el fracaso del cultivo, pues si no existe una esterilización adecuada

se corre el riesgo de que el cultivo se contamine y/o se pierda.

Este informe también explica la elaboración de los tampones para tubos y pipetas.
 OBJETIVOS

 General

- Aprender cómo se debe esterilizar instrumentos para el desarrollo de un cultivo.

 Específicos

- Aprender los pasos a seguir para la elaboración de tampones y estuches que

protejan el material de trabajo al momento de esterilizarlo.

- Aprender el uso correcto del horno microbiológico.

- Enseñar al alumno el uso adecuado de la estufa y la autoclave.

 MARCO TEÓRICO

La esterilización es el proceso de destrucción radical de todos los microorganismos, incluidas sus

formas de resistencias (esporas), que pueden existir en la superficie o en el espesos de un objeto

cualesquiera. La esterilización es más una tendencia a una situación ideal que a una realidad,

considerándose esterilizado un objeto cuando los agentes vivos se han reducido en él a una

millonésima parte.

Calor Seco: El calor seco produce desecación de la célula, esto es tóxico por niveles elevados de

electrolitos y fusión de membranas, residuos que quedan adheridos al objeto estéril. Estos efectos se

deben a la transferencia de calor desde los materiales a los microorganismos que están en contacto

con éstos. Aún así se sigue utilizando el calor seco en todos los laboratorios para la esterilización.

Para esterilizar por intermedio del aire caliente es necesario colocar los objetos en aparatos

especiales llamados ESTUFAS

Calor húmedo: La esterilización con calor húmedo (vapor d agua) es mucho más rápida y eficaz que

el calor seco debido a que las moléculas de agua desnaturalizan las proteínas de forma irreversible

mediante rotura de los uniones H entre los grupos peptídicos a temperaturas relativamente bajas.

Se utiliza un Autoclave que es un horno a presión, que consiste en una cámara en la que el aire

puede ser sustituido por vapor de agua sometida a presión. Se opera a 121ºC y 1 atm. De presión

durante 45minutos, de los cuales 15 son específicamente para esterilizar. De esta forma se consigue

destruir todas las formas vegetativas y esporas. Se lo utiliza para esterilizar todo material resistente

a esa temperatura y es muy utilizado para la esterilización de medios de cultivos.

 MARCO EXPERIMENTAL

Materiales requeridos para realizar la esterilización

- Hilo pabilo

- Papel Craf

- Algodón

- Encendedor

- Tijera

Materiales a esterilizar

- Vaso de licuadora

- Cuchilla de licuadora

- Frasco de vidrio

- Pipetas

- Erlenmeyer

- Tubos de ensayo

- Tijera

- Pinza

- Espátula Drigalski

Equipos

- Horno microbiológico

- Mechero Bunsen
Procedimientos

1. Se cortó el papel Craf con la ayuda de una tijera, de acuerdo a las medidas

establecidas para cada material en la guía de práctica.

2. Para el vaso de la licuadora se forró con papel la parte inferior y superior, teniendo

en cuenta que la parte más lisa del papel Craf vaya por dentro. Luego se sujeto con

hilo pabilo.

3. La cuchilla de la licuadora se forró con el papel, iniciando con un dobles del papel

para que tenga más resistencia. Se fue envolviendo de tal manera que no haya

espacios vacios.

4. La tijera y la pinza se forraron juntas, verificando que la dobles del papel conlleve a

un forrado uniforme. Luego se sujeto con hilo para asegurar el forrado.

5. Se forró la espátula Digalski con el papel Craf, ubicando bien el material para que el

forrado sea uniforme y no tener complicaciones.

6. Para la botella de vidrio, solo se forró la boca de esta y luego se sujeto con hilo

pabilo. Sin olvidar que la parte más lisa del papel va por dentro.

7. En el caso de la pipeta se selló la parte superior con algodón, para ello se necesito

de un pedazo delgado y pequeño del mismo. El cual se introdujo con la ayuda de un

clip, verificando que no esté ajustado para así evitar la ruptura del material al

momento de la esterilización. Luego se quemo la parte sobrante del algodón con la

ayuda del mechero. Finalmente se forró con el papel Craf.

8. En el caso de los tubos, se tuvieron que hacer tampones de algodón evitando que no

estén muy ajustados pues el material podría romperse. Luego se forró con el papel

de tres en tres.
9. Para el erlenmeyer se necesito también hacer un tampón de algodón, luego de

colocar el tampón se forró con papel la boca del material y se sujeto con hilo pabilo.

10. Con los materiales ya listos para la esterilización se lleva al horno microbiológico,

el cual trabajara a una temperatura determinada de 180 °C.

 RECOMENDACIONES

I. Antes de realizar la esterilización de todo material este debe estar bien lavado.

II. Verificar que al momento del forrado la parte más lisa del papel vaya por dentro.

III. Darle la dobles necesaria al papel utilizado para que así el forrado sea uniforme y no

vaya a tener rupturas.

IV. El tampón no debe estar ajustado al momento de introducirlo en el material ya que

este podría romperse.

V. Finalizada la esterilización, se debe esperar a que la temperatura del horno

microbiológico disminuya para abrirlo, pues si se somete a un cambio brusco de

temperatura se puede producir una explosión al reventar los materiales causando

daño al usuario.

VI. La buena práctica de las recomendaciones y de los pasos para la esterilización nos
ayudara a tener un cultivo con mayor probabilidad de éxito. No olvidar que el
medio de cultivo es el área donde vivirán las bacterias que cultivaremos así que es
importante no obviar ningún paso en la esterilización.
 ACTIVIDADES

Descripción del procedimiento específico y los tiempos que se utilizan en el laboratorio

para trabajar con el horno Microbiológico.

Horno Microbiológico: Tiene una temperatura de incubación de 37°C, este equipo es

utilizado frecuentemente para el uso de laboratorio, ya que su función esta designada para
incubar medios de cultivos y/o esterilizar materiales secos.

Figura 1.Horno microbiológico (parte exterior).

Figura 2.Horno microbiológico (parte interna).

Figura 3. Botones del Horno microbiológico.
 CONCLUSIÓNES

- La esterilización de los materiales por aire caliente es un proceso sumamente

importante para que se pueda realizar el cultivo o aislamiento de un microorganismo

en condiciones óptimas y sin temor a que este pueda contaminarse con algún agente

extraño presente en el material usado.

- Los únicos materiales a esterilizar en el horno microbiológico son solo los que se

encuentren limpios y secos y los que no sean inflamables.

 REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

 http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_M%C3%A

9todos_de_esterilizaci%C3%B3n.pdf

 http://www.slideshare.net/MConstanzaBl/microbiologia-y-esterilizacion-11340270
 ANEXOS

Figura 4. Espátula de Drigalski. Figura 5. Envolviendo la espátula de Drigalski

Figura 6. Algodón para los tapones Figura 7. Papel craf.

Figura 8. Envolviendo vaso de licuadora.

 Figura 10. Envolviendo tubos de ensayo

Figura 11. Llave de gas. Figura 12.Empaque listo.

Figura 13. Horno Microbiológico Figura 14.Extintor

Figura 15.Cuchilla de licuadora envuelta adecuadamente.