STUDI AWAL PERBANYAKAN DAN PEMANFAATAN

INOKULUM FUNGI MIKORIZA ARBUSKULA (FMA)

LAPORAN PENELITIAN PRAKTEK KERJA LAPANGAN

RHOSA ARISTA
3425111427

PROGRAM STUDI BIOLOGI

JURUSAN BIOLOGI

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS NEGERI JAKARTA

2014
 LEMBAR PENGESAHAN

Studi Awal Perbanyakan dan Pemanfaatan Inokulum Fungi Mikoriza Arbuskula

(FMA)
Praktek Kerja Lapangan
Disetujui,
Pembimbing I Pembimbing II

Eka Putri Azrai, S.Pd., M.Si Ir. Fadliah Salim, M.Sc

NIP. 19700206 199803 2 001 NIP. 19570827 198112 2 001
Pembimbing III

Avi Nurul O., S.Si., M.Si

NIP. 19841021200912 2 002

Mengetahui,

Ketua Jurusan Biologi Ketua Program Studi Biologi

Drs. M. Nurdin Matondang S., M.Si Eka Putri Azrai, S.Pd., M.Si

NIP.19520705 198403 1 001 NIP. 19700206 199803 2 001

Kepala Balai Teknologi Lingkungan

Dr. Ir. Arie Herlambang, M.Si
NIP. 19600929 198812 1 001
 KATA PENGANTAR

Puji syukur ke hadirat Allah SWT, atas segala limpahan rahmat dan
hidayahnya penulis dapat menyelesaikan laporan penelitian Praktek Kerja Lapangan
(PKL) dengan judul “Studi Awal Perbanyakan dan Pemanfaatan Inokulum Fungi
Mikoriza Arbuskula (FMA)”. Laporan ini disusun sebagai salah satu tugas yang
diwajibkan setelah melakukan kegiatan Praktek Kerja Lapangan (PKL) yang
dilaksanakan selama 30 hari, pada tanggal 5 Agustus – 5 September 2014.
Tidak sedikit kendala yang didapat penulis dalam penyusunan laporan
penelitian PKL ini, salah satunya karena masih sedikitnya informasi yang penulis
dapatkan tentang apa yang akan dikerjakan selama PKL di Balai Teknologi
Lingkungan dan juga masih sedikitnya buku referensi yang didapatkan tentang
pemanfaatan Fungi Mikoriza Arbuskula. Namun, hal tersebut menjadi suatu dorongan
tersendiri bagi penulis untuk dapat berkontribusi dalam memberi informasi tentang
studi awal perbanyakan dan pemanfaatan inokulum fungi mikoriza arbuskula (FMA).
Terwujudnya laporan penelitian praktek kerja lapangan ini tidak lepas dari
bantuan berbagai pihak yang telah membantu penulis. Oleh karena itu dalam
kesempatan ini penulis ingin mengucapkan terimakasih kepada:

1. Ibu Eka Putri Azrai, S.Pd, M.Si selaku Pembimbing I dan sekaligus Ketua
Perogram Studi Biologi yang telah memberi pengarahan dan bimbingan
dalam penulisan laporan penelitian Praktek Kerja Lapangan ini.
2. Ibu Ir. Fadliah Salim, M.Sc selaku Pembimbing II yang telah memberi
pengarahan dan bimbingan, baik dalam melaksanakan kegiatan Praktek
Kerja Lapangan (PKL) maupun dalam penulisan laporan penelitian
Praktek Kerja Lapangan ini.
3. Ibu Avi Nurul O, S.Si, M.Sc selaku Pembimbing III yang telah memberi
pengarahan dan bimbingan dalam melakukan berbagai kegiatan Praktek
Kerja Lapangan (PKL) di Balai Teknologi Lingkungan.
 4. Ibu Tuti Suryati S.Si selaku kepala Laboratorium Fitoteknologi yang telah
memberikan bantuan serta pengetahuannya tentang fungi mikoriza
arbuskula.
5. Ibu Sati, Bapak Yunus, dan Bapak Atang yang telah dengan sepenuh hati
membantu dalam berbagai kegiatan di BTL, serta senantiasa memberikan
banyak pengetahuan dan pengalamannya.
6. Bapak Dr. Yadi Setiadi, Ibu Ir. Noor Faiqoh Mardatin, M.Sc, dan Ibu Nana
di Gedung PAU, Institut Pertanian Bogor, yang dengan senang hati
membagi pengalamannya dan pengetahuannya tentang FMA.
7. Dr. Ir. Arie Herlambang, M.Si selaku Kepala Balai Teknologi Lingkungan
(BPPT), yang telah menerima dan memberi kesempatan penulis untuk
melakukan kegiatan PKL di Balai Teknologi Lingkungan.
8. Orangtua terkasih dan adik-adik yang telah memberikan doa, semangat
serta dukungannya.
9. Segenap teman – teman Biologi 2011 untuk motivasi, dukungan, dan
pengalaman yang telah diberikan.
10. Yolanda Diana Sari, dan Agi Karlina yang selalu memotivasi penulis
untuk menyelesaikan laporan penelitian PKL ini.

Penulis menyadari bahwa laporan penelitian ini masih jauh dari

kesempurnaan. Oleh karena itu, kritik serta saran yang membangun dari berbagai
pihak sangat penulis harapkan demi informasi yang lebih baik lagi yang dapat
disampaikan.

Tangerang, 5 Oktober 2014

Penulis,

Rhosa Arista

DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL................................................................................................ i
HALAMAN PENGESAHAN.................................................................................. ii
KATA PENGANTAR.............................................................................................. iii
DAFTAR ISI............................................................................................................. v
DAFTAR GAMBAR................................................................................................ viii
DAFTAR TABEL..................................................................................................... xi
DAFTAR LAMPIRAN............................................................................................ xii
BAB I. PENDAHULUAN........................................................................................ 1

A. Latar Belakang......................................................................................... 1
B. Tujuan...................................................................................................... 3
C. Manfaat................................................................................................... 4

BAB II. TINJAUAN PUSTAKA............................................................................. 5

A. Fungi Mikoriza Arbuskula (FMA).......................................................... 5

1. Terminologi dan Deskripsi Fungi Mikoriza Arbuskula.................. 5
2. Karakteristik Fungi Mikoriza Arbuskula........................................ 6
3. Peranan Fungi Mikoriza Arbuskula................................................. 9
4. Fungi Mikoriza Arbuskula (FMA) pada Pertumbuhan
Tanaman........................................................................................... 10
5. Tanaman Inang yang Tepat untuk Perbanyakan
Inokulum.......................................................................................... 10
B. Perbanyakan FMA dengan Menggunakan Tanaman Pueraria
javanica................................................................................................... 11
1. Taksonomi dan Morfologi Tanaman Pueraria javanica................. 11
2. Persyaratan Tumbuh Tanaman Pueraria javanica.......................... 12
C. Perbanyakan FMA dengan Menggunakan Tanaman Sorghum
bicolor...................................................................................................... 13
1. Taksonomi dan Morfologi Tanaman Sorghum bicolor.................... 13
2. Persyaratan Tumbuh Tanaman Sorghum bicolor............................. 14

BAB III. METODOLOGI......................................................................................... 16

A. Tempat dan Waktu.................................................................................. 16

B. Metode.................................................................................................... 16
C. Alat dan Bahan........................................................................................ 17
1. Perbanyakan Inokulum Fungi Mikoriza Arbuskula........................... 17
 2. Pemanfaatan Inokulum Fungi Mikoriza Arbuskula pada Tanaman
Kangkung........................................................................................... 18
D. Cara Kerja............................................................................................... 18
1. Perbanyakan Inokulum Fungi Mikoriza Arbuskula........................... 18
a. Pengambilan Contoh Tanah dan Akar.................................. 18
b. Ekstraksi Spora atau Penyaringan........................................ 19
c. Analisis Perkembangan Kultur (trapping) FMA................. 22
d. Pembuatan Kultur Spora Tunggal........................................ 23
e. Analisis Perkembangan Kultur Spora Tunggal.................... 27
f. Pewarnaan Akar (staining)................................................... 28
g. Pemanenan Inokulum Fungi Mikoriza Arbuskula............... 30
2. Pemanfaatan Inokulum FMA pada Tanaman Kangkung................... 31
a. Pembuatan Media Tanam dengan Penambahan Mikoriza
Bangka Tengah (MIBATH)................................................. 31
b. Pengaruh Penambahan Mikoriza Bangka Tengah
(MIBATH) pada Tanaman Kangkung................................. 35

BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN................................................................. 36

A. Perbanyakan Inokulum Fungi Mikoriza Arbuskula (FMA)................... 36

1. Ekstraksi Spora atau Penyaringan (Sieving).................................... 36
2. Pembuatan Kultur Penangkaran (Trapping) FMA.......................... 36
3. Analisis Perkembangan Kultur Penangkaran (Trapping) FMA...... 37
4. Pembuatan Kultur Spora Tunggal FMA......................................... 40

5. Analisis Perkembangan Kultur Spora Tunggal FMA..................... 41

6. Pewarnaan Akar (Staining).............................................................. 42
7. Pemanenan Inokulum Mikoriza Bangka Tengah (MIBATH)......... 46
B. Pemanfaatan Inokulum FMA pada Tanaman Kangkung....................... 47

BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN................................................................. 52

A. Kesimpulan............................................................................................ 52

B. Saran...................................................................................................... 52

DAFTAR PUSTAKA.............................................................................................. 54
LAMPIRAN............................................................................................................ 59
 DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman
2.1 Diagram Pohon Klasifikasi FMA berdasarkan Urutan LSU (INVAM,
2013)................................................................................................................ 6
2.2 Penampang longitudinal akar yang terinfeksi fungi mikoriza
(Brundrett et al., 1994)..................................................................................... 9
2.3 Tanaman Pueraria javanica............................................................................. 12
2.4 Tanaman Sorghum bicolor............................................................................... 13
3.1 Laboratorium Fitoteknologi (kiri) dan Green House (kanan) Balai Teknologi
Lingkungan, PUSPITEK Serpong................................................................... 16
3.2 Teknik pengambilan contoh tanah dan akar dari lapangan secara
proporsional (kiri dan tengah) dan secara tidak proporsional
(kanan).............................................................................................................. 18
3.3 Suspensi tanah dan akar tanaman yang sedang dilarutkan dalam air............... 20
3.4 Alat penyaring bertingkat................................................................................. 20
3.5 Pemindahan hasil saring pada penyaring paling bawah ke cawan petri........... 21
3.6 Suspensi dalam tabung sentrifugal untuk dilakukan sentrifugasi.....................21
3.7 Sentrifugasi dilakukan untuk memisahkan antara partikel kecil tanah dan
inokulum FMA terpisah (kiri). Lalu suspensi dituangkan ke atas penyaring
45 µm (kanan)...................................................................................................22
3.8 Spora hasil sieving dipindahkan ke cawan petri (kiri), sehingga dapat
diamati di bawah mikroskop (kanan)............................................................... 22
3.9 Inokulum dari hasil trapping digunakan untuk pembuatan kultur spora
tunggal.............................................................................................................. 24
3.10 Pengelompokkan spora yang memiliki kesamaan karakteristik
morfologi.......................................................................................................... 24
3.11 Pengisian media tanam steril pada tabung reaksi (kiri) dan bibit tanaman
inang (Pueraria javanica) berumur 1.5 bulan (kanan) untuk spora
tunggal.............................................................................................................. 25
3.12 Peletakkan spora pada akar bibit tanaman inang.............................................. 25
3.13 Cawan petri digunakan sebagai wadah tanam untuk kultur spora
tunggal.............................................................................................................. 26
3.14 Pemberian kertas label pada media kultur tunggal (kiri). Penyiraman
tanaman kultur spora tunggal dilakukan dengan bantuan botol semprot
(kanan).............................................................................................................. 26
3.15 Perendaman akar tanaman inang dengan larutan KOH 10%............................28
3.16 Perendaman akar dengan larutan HCL 2%.......................................................29
3.17 Perendaman akar dalam larutan gliserol, asam laktat dan tripan biru
(2:2:1)............................................................................................................... 29
3.18 Akar dipotong sepanjang 1 cm (kiri) lalu diletakkan pada kaca objek (kanan)
untuk diamati di bawah mikroskop...................................................................30
3.19 Batang tanaman sorgum sebelum dipotong (kiri) dan sesudah dipotong
(tengah), lalu pot plastik ditutup dengan kertas HVS (kanan)..........................31
3.20 Pot – pot berisi inokulum FMA dikelompokkan berdasarkan kode asal
tanaman (Kiri). Pot-pot tersebut kemudian disimpan di rak laboratorium
Fitoteknologi (kanan)........................................................................................31
3.21 Media tanam dengan perbandingan 1:1:1 komposisi pupuk, pasir dan
kompos..............................................................................................................32
3.22 Inokulum FMA dari zeolit dan akar tanaman inang yang telah dipotong –
potong dan dicampur (kiri), dan rock phosphate yang telah ditimbang
sebanyak masing-masing 10 gram (tengah), kemudian zeolit dan rock
phosphate dimasukan ke dalam lubang pada media tanam
(kanan).............................................................................................................. 32
3.23 Tiga benih kangkung diletakan di atas zeolit yang mengandung inokulum
Mikoriza Bangka Tengah (MIBATH).............................................................. 33
3.24 Pupuk NPK (16:16:16) diletakan mengelilingi tanaman..................................34
4.1 Penampang akar tanaman inang yang telah melalui proses pewarnaan........... 44
4.2 Kenampakan struktur fungi mikoriza pada akar yang telah diwarnai. Hifa
bercabang seperti huruf H (kiri) sering digunakan sebagai penciri Glomus.
Spora berkecambah dan kemudian menjulurkan hifa ke dalam akar tanaman
(tengah). Ujung hifa ekstraradikal membengkak dan kemudian membentuk
spora (kanan) (Sumber: Nusantara, 2012)........................................................ 45
4.3 Perbandingan antara akar pada kelompok tanaman kontrol dan akar pada
tanaman dengan pemberian 5 gram zeolit inokulum FMA.............................. 50
 DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

1 Kriteria pengukuran densitas pertumbuhan miselia dan spora...................... 38

2 Densitas pertumbuhan miselia dan spora hasil kultur penangkaran
(trapping) pada tanaman inang sorgum......................................................... 38
3 Densitas pertumbuhan miselia dan spora hasil kultur penangkaran
(trapping) pada tanaman kudzu..................................................................... 39
4 Analisis perkembangan kultur spora tunggal................................................. 41
5 Penentuan kategori pada akar terkolonisasi FMA......................................... 44
6 Persentase akar terkolonisasi dari tanaman inang P. javanica berkode Cp2,
S3, V1, V4 dan “?”.........................................................................................46
7 Rerata parameter pada pemanfaatan inokulum FMA pada tanaman
kangkung........................................................................................................ 48
 DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1 Perbandingan tanaman kangkung (Ipomoea reptans) tanpa perlakuan

dan dengan pemberian inokulum FMA........................................................ 59
2 Hasil Panen Inokulum Mikoriza Bangka Tengah (MIBATH)...................... 61
3 Perbanding kondisi akar dan tajuk tanaman kangkung (Ipomoea reptans)
dengan dan tanpa perlakuan........................................................................... 62
 BAB I

PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

Fungi Mikoriza Arbuskula (FMA) adalah suatu mikoriza yang

bersifat simbiosis mutualisme dengan tanaman. FMA adalah jenis fungi
yang masuk dalam genus Glomales, dan bersifat parasit obligat, sehingga
tidak dapat diinokulasi dengan teknik mikrobiologi, dan hanya tumbuh
pada akar tumbuhan hidup.
Kehadiran mikoriza penting bagi ketahanan suatu ekosistem,
stabilitas tanaman dan pemeliharaan keragaman biologi. Peranan mikoriza
dalam menjaga keragaman hayati dan ekosistem sekarang mulai dikenal,
terutama sekali karena pengaruh mikoriza untuk mempertahankan
keanekaragaman tumbuhan dan meningkatkan produktivitas (Moreira et
al., 2007). Mikoriza yang berasosiasi dengan akar tanaman mampu
menggunakan sukrosa dalam tanaman inang dan mengubahnya menjadi
bentuk yang tidak dapat diubah oleh inang seperti gula, alkohol dan
glikogen (Islami dan Utomo, 1955).
Selain bersifat simbiosis mutualisme dengan tanaman, fungi
mikoriza arbuskula juga bersifat antagonis terhadap parasit dan hidup
bebas secara alami di daerah rizosfer. FMA juga diketahui dapat
mengkolonisasi hampir pada seluruh akar tanaman pertanian. Kemampuan
asosiasi FMA dengan berbagai jenis tanaman mencapai 90% (Gadkar dan
Vijay, 2001). Peranan FMA sangat penting terutama dalam hal konservasi
siklus nutrisi, membantu memperbaiki struktur tanah, transportasi karbon
di sistem perakaran, mengatasi degradasi kesuburan tanah serta
melindungi tanman dari penyakit, juga sebagai agen fitoremediasi (Jeffries
et al., 2003).

Banyaknya manfaat yang didapatkan dari keberadaan fungi

mikoriza arbuskula menyebabkan banyak peneliti, petani serta berbagai
pihak lainnya untuk terus mengembangkan atau menggunakan FMA.
Untuk memanfaatan FMA tersebut tentunya membutuhkan proses
perbanyakan inokulum FMA.
Inokulum atau propagul FMA terdiri atas hifa, spora, akar dan
tanah terinfeksi fungi. Ciri dan kelimpahan propagul mikoriza dalam tanah
akan berbeda – beda bergantung kepada kemampuannya dalam
menanggapi perubahan yang terjadi pada tanah. Pada hutan alami yang
belum disentuh manusia dan pada kondisi iklim yang sama, jaringan hifa
lebih cocok untuk digunakan sebagai sumber kolonisasi mikoriza
arbuskula (Jasper et al., 1997), sedangkan spora FMA lebih cocok sebagai
sumber propagul dari tanah-tanah terdegradasi dan tanah-tanah dengan
iklim yang fluktuatif, karena pada kondisi demikian, jaringan hifa
mengalami kerusakan (Abbot dan Gazey, 1994).
Hambatan utama dalam produksi inokulum FMA yang efisien dan
dapat diandalkan terletak pada perilaku simbiotiknya. Sifat obligat dari
fungi mengindikasikan bahwa fungi memerlukan tanaman inang untuk
pertumbuhannya. Secara tradisional, FMA diperbanyak melalui kultur pot
dengan inokulum starter berupa spora dan atau potongan – potongan akar
terinfeksi yang dibenamkan ke dalam substrat tumbuhan di pembibitan
(Brundett et al., 2001). Fungi akan menyebar di dalam substrat dan
mengkolonisasi akar bibit, substrat yang sudah dikolonisasi dan akar bibit
terinfeksi kemudian dapat digunakan sebagai inokulum mikoriza.
Adanya potensi yang besar untuk dijadikan pupuk hayati, sejumlah
produk FMA telah diusahakan secara komersial baik di luar negeri
maupun di Indonesia. Produk-produk FMA yang berupa inokulum
 umumnya berbentuk spora dari spesies tertentu ataupun campuran lebih
dari satu spesies FMA. Spora dan miselia yang dihasilkan dicampur
dengan bahan pembawa (carrier) yang umumnya berupa mineral lempung
atau zeolit (Prematuri dan Faiqoh, 1999).
Menurut Setiadi (2000), salah satu hambatan lainnya adalah belum
meluasnya penggunaan teknologi FMA di masyarakat (petani) Indonesia
adalah masih terbatasnya ketersediaan inokulan FMA yang diproduksi
dalam skala besar secara komersial. Di Indonesia, pemanfaatan FMA juga
dapat dipakai di lahan – lahan pasca tambang atau Hutan Tanaman Industri
(HTI).
Pemanfaatan FMA yang bersimbiosis pada tanaman tertentu untuk
proses remediasi suatu lahan sudah banyak dikembangkan di Indonesia. Di
Balai Teknologi Lingkungan, Puspitek Serpong sendiri sedang melakukan
perbanyakan inokulum FMA menggunakan tanaman inang Pueraria
javanica dan Sorghum bicolor. Hasil perbanyakan FMA tersebut
kemudian akan dibawa ke Bangka Tengah untuk proses remediasi lahan
pasca tambang timbah.
Dengan berbagai potensi dan manfaat yang masih perlu
dikembangkan, studi awal untuk mempelajari tentang perbanyakan dan
pemanfaatan inokulum fungi mikoriza arbuskula (FMA) dirasakan perlu
untuk memberikan informasi tentang perbanyakan dan pemanfaatan
inokulum FMA yang tengah dilakukan di Balai Teknologi Lingkungan,
PUSPITEK Serpong.
B. Tujuan
Adapun tujuan dari praktek kerja lapangan ini, yaitu sebagai berikut:
- Untuk menerapkan Ilmu pengetahuan yang diperoleh ketika
perkuliahan pada dunia kerja.
- Memperoleh keterampilan dan pengalaman kerja sesuai dengan bidang
keahlian.
 - Membuka wawasan serta memperoleh sebanyak-banyaknya informasi
yang mungkin didapatkan dari berbagai sumber tentang perbanyakan
dan pemanfaatan inokulum fungi mikoriza arbuskula.
C. Manfaat
- Memberikan informasi tentang studi awal perbanyakan dan
pemanfaatan inokulum fungi mikoriza arbuskula (FMA).
- Mendapatkan kemampuan dalam mempraktekkan penelitian studi awal
perbanyakan dan pemanfaatan inokulum fungi mikoriza arbuskula
(FMA).
- Mendapatkan pengalaman dan gambaran bekerja pada suatu instansi.
 BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

A. Fungi Mikoriza Arbuskula (FMA)

1. Terminologi dan Definisi Fungi Mikoriza Arbuskula
Fungi Mikoriza Arbuskula (FMA) adalah salah satu jenis fungi tanah,
yang keberadaannya dalam tanah memberikan banyak manfaat. Hal ini
disebabkan karena FMA dapat meningkatkan ketersediaan dan pengambilan
unsur fosfor, air, dan nutrisi lainnya, serta untuk pengendalian penyakit yang
disebabkan oleh pathogen luar tanah.
FMA pertama kali ditemukan oleh botanis Jerman, yaitu Frank (1855),
pada akar pepohonan hutan yang menunjukkan adanya asosiasi simbiotik.
Mikoriza berasal dari bahasa Yunani, yaitu Mykes yang artinya fungi dan
Rhiza yang artinya akar, sehingga secara harfiah berarti fungi akar. Fungi ini
dibagi dalam dua golongan yaitu: 1) Ektotropik mikoriza, fungi ini berasosiasi
di luar sel akar tumbuhan, yang selubung funginya membungkus permukaan
akar. Umumnya fungi ektomikoriza biasanya ditemukan pada tanaman
kehutanan. 2) Endotropik mikoriza, fungi ini berasosiasi di dalam sel akar
tumbuhan yang umumnya ditemukan pada tanaman perkebunan.
Menurut Gunawan (1994) istilah Fungi Mikoriza Arbuskular (FMA)
digunakan karena semua fungi dari jenis ordo Glomales dapat membentuk
struktur arbuskular dalam asosiasinya dengan akar dan hanya sebagian saja
yang dapat membentuk vesikular.
Klasifikasi terbaru dari Glomeromycota didasarkan pada konsensus
daerah mencakup gen RNA ribosom: 18S (SSU), ITS1-5.8S-ITS2 (ITS),
dan/atau 28S (LSU). Rekonstruksi filogenetik yang mendasari klasifikasi ini
dibahas dan diringkas dalam Redecker et al. (2013). Bagian – bagian dari
pohon klasifikasi yang telah disepakati (berdasarkan dengan urutan LSU yang
dimiliki lembaga INVAM), digambarkan dalam ilustrasi di bawah ini.
 Gambar 2.1 Diagram Pohon Klasifikasi FMA berdasarkan Urutan LSU
Sumber : INVAM (2013)

2. Karakteristik Fungi Mikoriza Arbuskula

Menurut Smith dan Read (2008), FMA dapat berasosiasi dengan

hampir 90% jenis tanaman. Walaupun demikian, tingkat populasi dan
komposisi jenis FMA sangat beragam dan dipengaruhi oleh karakteristik
tanaman dan faktor lingkungan seperti suhu, pH tanah, kelembaban tanah,
kandungan fosfor dan nitrogen, serta konsentrasi logam berat (Daniels dan
Trappe, 1980).
 Setiap FMA mungkin berbeda-beda dalam kemampuannya
membentuk hifa di dalam tanah, baik distribusi maupun kuantitasnya yang
berhubungan dengan kemampuan dalam meningkatkan pertumbuhan tanaman
(Delvian, 2003).
Secara umum mikoriza dikelompokkan menjadi dua tipe yaitu
ektomikoriza dan endomikoriza. Ektomikoriza dicirikan oleh adanya miselia
padat yang menyelimuti akar dan infasi cendawan secara intersellular pada
jaringan korteks akar. Sedangkan endomikoriza dicirikan oleh adanya jaringan
hifa eksternal dalam tanah dan tumbuh secara intensif dalam sel korteks
(Gianinazzi-Pearson, 1986).
Karakteristik ektomikoriza, yaitu: a) Perakaran yang terinfeksi akan
membesar dan bercabang serta rambut-rambut akar tidak ada, b) dalam suatu
penampang melintang Nampak permukaan akar ditutupi oleh miselia yang
disebut dengan fungal sheat (mantel), c) terdapat beberapa hifa yang menjorok
ke luar. Hifa ini berfungsi sebagai organ untuk penyerapan unsur hara dan air,
d) hifa tidak masuk ke dalam sel, tetapi hanya berkembang diantara dinding –
dinding sel jaringan korteks (Setiadi, 1989).
Sedangkan karakteristik endomikoriza, yaitu; a) perakaran yang
terkena infeksi tidak membesar, b) cendawan tidak membentuk struktur
khusus sistem percabangan hifa yang disebut arbuskula (Ervayenri, 1998).
Menurut Gunawan (1993) endomikoriza dicirkan oleh adanya hifa-hifa
cendawan yang menembus akar secara intraselular, jenis mikoriza ini kini
lebih dikenal sebagai Mikoriza Arbuskula.
Menurut Kabirun (tanpa tahun), mikoriza arbuskular (AM, dulu
disebut mikoriza vesikular-arbuskular, VAM) tumbuh dari luar perakaran lalu
masuk ke dalam jaringan perakaran dan pada gilirannya memasuki sel-sel
perakaran. AM di dalam jaringan akan membentuk arbuskula, yaitu jaringan
hifa yang menembus sela-sela sel dan bahkan menembus sel
melalui plasmalema. Di dalam sel, hifa akan membentuk vesikula, suatu
gelembung-gelembung kecil di sitoplasma. AM sulit ditumbuhkan secara
aksenik (media buatan) sehingga FMA dianggap merupakan simbion obligat
(wajib).
Vesikula berbentuk butiran – butiran di dalam sitoplasma yang
mengandung lipid dan menjadi organ reproduksi vegetatif mikoriza,
khususnya bila sel pecah akibat rusaknya korteks akar. Arbuskula berwujud
kumpulan hifa yang menembus plasmalema dan membantu transportasi hara
di dalam sel tumbuhan. Pembentukan vesikula dan arbuskula dalam sel
menunjukkan bahwa simbiosis telah terjadi dengan sempurna dan tanaman
sudah dapat menikmati hasil kerja sama dengan mikoriza berupa
meningkatnya ketersediaan unsur hara yang diserap dari dalam tanah.
Selain vesikula dan arbuskula, terbentuk hifa eksternal yang dapat
membantu memperluas ruang penyerapan hara oleh akar. Pada bawang merah,
misalnya, panjang hifa eksternal dapat mencapai 80 cm per satu cm panjang
akar. Di luar akar, hifa dapat membentuk sporangium yang menghasilkan
spora sebagai organ reproduksi.

Mikoriza vesikular arbuskular pada umumnya membentuk resting

spore dalam tanah, baik secara tunggal ataupun dalam bentuk sporokarp
sebelum berinteraksi dengan akar suatu inang. Spora mikoriza dapat terbentuk
pada ujung hifa eksternal, ukuran spora bervariasi antara 100-600 µm
tergantung pada jenisnya. Dengan ukuran ini, untuk mendapatkan spora
mikoriza dapat dilakukan melalui penyaringan tanah (Anas, 1992).
 Gambar 2.2 Penampang longitudinal akar yang terinfeksi fungi mikoriza
(Brundrett et al., 1994)

3. Peranan Fungi Mikoriza Arbuskula

Manfaat FMA dapat dikelompokkan menjadi dua, yaitu untuk

tanaman, dan ekosistem. Bagi tanaman, FMA sangat berguna untuk
meningkatkan serapan hara, khususnya unsur fosfat (P). Bolan (1991)
melaporkan bahwa kecepatan masuknya hara P ke dalam hifa FMA dapat
mencapai enam kali lebih cepat pada akar tanaman yang terinfeksi FMA
dibandingkan dengan tidak terinfeksi FMA. Hal ini terjadi karena jaringan
hifa eksternal FMA mampu memperluas bidang serapan. Hasil penelitian
serapan hara lainnya dilaporkan oleh Kabirun (2002), Hasanudin (2003), dan
Musfal (2008), yaitu FMA dapat meningkatkan serapan nitrogen (N) dan
kalium (K). Tarafadar dan Rao (1997) juga melaporkan bahwa pemberian
FMA pada tanaman kacang-kacangan dapat meningkatkan serapan unsur
mikro Cu dan Zn.
 Manfaat FMA bagi ekosistem dilaporkan oleh Bolan (1991). FMA
menghasilkan enzim fosfat yang dapat melepaskan unsur P yang terikat unsur
Al dan Fe pada lahan masam dan Ca pada lahan berkapur sehingga P akan
tersedia bagi tanaman. FMA juga berperan dalam memperbaiki sifat fisik
tanah, yaitu membuat tanah menjadi gembur. Menurut Wright dan
Uphadhyaya (1998), FMA melalui akar eksternalnya menghasilkan senyawa
glikoprotein glomalin dan asam – asam organik yang akan mengikat butir-
butir tanah menjadi agregat mikro. Selanjutnya melalui proses mekanis oleh
hifa eksternal, agregat mikro akan membentuk agregat yang mudah diserap
tanaman.

4. Fungi Mikoriza Arbuskula (FMA) pada Pertumbuhan Tanaman

Penggunaan inokulan FMA dan pupuk organik yang dapat diproduksi

sendiri merupakan alternatif yang lebih baik dibandingkan pupuk kimia
buatan untuk mengatasi hambatan pertumbuhan pada tanaman. Cameron
(2010) melaporkan bahwa tanaman yang diberi inokulan FMA mempunyai
produktivitas yang lebih tinggi dibandingkan tanaman yang tumbuh tanpa
diberi inokulan FMA. Hasil penelitian Garsoni (Prihastuti et al. 2010)
menunjukkan bahwa tanaman bermikoriza dapat menghemat penggunaan
pupuk nitrogen hingga 50%, pupuk fosfat sebesar 27% dan pupuk kalium
mencapai 20%.

Menurut Marx (1982), akar tanaman yang terbungkus oleh fungi

mikoriza menyebabkan akar tersebut terhindar dari serangan penyakit dan
hama. Infeksi patogen terhambat, disamping itu fungi mikoriza menggunakan
semua kelebihan dan eksudat akar lainnya, sehingga tercipta lingkungan yang
tidak cocok bagi pertumbuhan patogen.
 5. Tanaman Inang yang Tepat untuk Perbanyakan Inokulum

Kriteria yang paling penting dalam penentuan tanaman inang ialah

harus berpotensi tinggi untuk dikolonisasi oleh strain FMA dan merangsang
pertumbuhan serta sporulasi FMA tinggi. Selain itu, juga mampu tumbuh baik
dalam ruang pertumbuhan dan kondisi rumah kaca, memiliki sistem perakaran
yang ekstensif dan solid tapi kadar ligninnya rendah atau tanpa lignifikasi
(Herryawan, 2012).
Bawang daun (Allium porrum L.), rumput Sudan (Sorghum bicolor (L)
Moench), rumput Bahia (Paspalum notatum Flugge), Jagung (Zea mays L.)
dan Puero (Pueraria javanica L.) merupakan tanaman-tanaman yang paling
sering digunakan sebagai inang dalam perbanyakan inokulum (Struble dan
Skipper, 1988).
Pemilihan tanaman inang yang tepat, perlu diperhatikan karena adanya
interaksi antara tanaman inang, jenis FMA, komposisi media dan iklim selama
pertumbuhannya. Sebagai contoh, Pueraria javanica lebih tahan terhadap
kelembaban dan suhu rendah dibandingkan dengan Sorghum bicolor.
Selanjutnya, Noertjahyani et al. (2003) meneliti kompatibilitas empat kultivar
tomat terhadap mycofer yang mengandung Glomus etunicatum, Glomus
manihotis, Gigaspora margarita dan Acaulospora tuberculata, ternyata
infektifitasnya kurang memuaskan karena kurang dari 70%.
Komposisi hara yang tidak lengkap dapat mempengaruhi pembentukan
dan perkembangan fungi mikoriza. Faktor-faktor lainnya seperti pH, suhu
media, intensitas cahaya, kelembaban relatif udara dan sanitasi lingkungan
juga harus diawasi dan dikendalikan agar pertumbuhan dan perbanyakan FMA
menjadi optimal. Kadangkala harus diperhatikan terjadinya kompetisi antara
FMA indigenus dengan FMA yang diinokulasikan.
B. Perbanyakan Inokulum FMA Menggunakan Tanaman Peuraria javanica
1. Taksonomi dan Morfologi Tanaman Peuraria javanica
Taksonomi tanaman Pueraria javanica adalah sebagai berikut:
 Divisio : Magnoliophyta
Kelas : Magniolopsida
Ordo : Fabales
Famili : Fabaceae
Genus : Pueraria
Spesies : Pueraria javanica

Gambar 2.3 Tanaman Pueraria javanica

Pueraria javanica atau kudzu merupakan tanaman asli Asia Tenggara,

seperti Indonesia dan Malaysia dan kini telah tersebar luas di seluruh daerah
tropis basah. Adapun morfologi dari tanaman ini adalah tanaman yang melilit
kuat dan mendaki, sedikit berkayu, berbulu legume abadi, berakar dalam dan
cukup ramping. Batang utama berdiameter 0.6 cm dan dapat memperpanjang
hingga 5 – 6 meter. Akar tanaman memiliki nodus dan dari nodus terbentuk
sejumlah cabang lateral atau sekunder. Tunas muda yang padat ditutupi
dengan rambut cokelat. Daun yang besar dan trifoliata, ditanggung pada
petioles 5-10 cm panjangnya.
2. Persyaratan Tumbuh Tanaman Peuraria Javanica
Pada dasarnya tanaman kudzu merupakan tanaman dari ketinggian
rendah, umumnya tumbuh di bawah ketinggian 600 m, tetapi di Tanzania
mencapai 1.000 meter di Kolombia 2.000 meter (Crowder, 1960). Tanaman
kudzu dapat tumbuh dengan baik pada daerah dengan curah hujan melebihi
2.500 mm atau di lahan rawa di daerah dengan curah hujan rendah. Di
Tanzania, kudzu tumbuh dalam curah hujan minimum 850 mm sebagai
 tanaman penutup di sisal tetapi tumbuh lebih baik pada curah hujan 1.160 mm
di Mlingano, Tanzania (Hopkinson, 1969).
Dalam adaptasi tanah, tanaman kudzu memiliki rentang yang luas,
yaitu dari pasir sampai tanah liat, meskipun tidak tumbuh dengan baik di
tanah liat. Loustalot dan Telford (1948) berpendapat bahwa pH 4 sampai 5
adalah tingkat pH yang paling baik untuk tanaman kudzu.
C. Perbanyakan Inokulum FMA Menggunakan Tanaman Sorghum bicolor
1. Taksonomi dan Morfologi Sorghum bicolor
Berdasarkan klasifikasi botaninya, Sorghum bicolor (L.) Moench
termasuk ke dalam :
Divisio : Magnoliophyta
Kelas : Liliopsida
Ordo : Cyperales
Familia : Poaceae
Genus : Sorghum
Spesies : Sorghum bicolor (L.) Moench

Gambar 2.4 Tanaman Sorghum bicolor

Sorgum adalah jenis serealia yang di Indonesia belum banyak
dimanfaatkan kegunaannya. Tanaman sorgum masih demikian kurang
perkembangannya, padahal hasilnya dapat merupakan bahan pangan
pengganti beras atau untuk diekspor (Kartasapoetra, 1994).
Daun sorgum berbentuk mirip seperti daun jagung, tetapi daun sorgum
dilapisi oleh sejenis lilin yang agak tebal dan berwarna putih. Lapisan lilin ini
berfungsi untuk menahan atau mengurangi penguapan air dari dalam tubuh
 tanaman sehingga mendukung resistansi terhadap kekeringan (Mudjisihono,
1987).
Menurut Sumantri (1994), batang sorgum tegak lurus dan beruas-ruas,
setiap ruas mempunyai alur yang letaknya berselang-seling. Dari setiap buku
keluar daun berhadapan dengan alur. Tinggi batang sorgum beragam mulai
kurang dari 150 cm hingga lebih dari 2,5 meter.
Sistem perakaran sorgum terdiri dari akar-akar primer dan sekunder
yang panjangnya hampir dua kali panjang akar jagung pada tahap
pertumbuhan yang sama sehingga merupakan faktor utama penyebab toleransi
sorgum terhadap kekeringan (Thomas et al. 1976).
2. Persyaratan Tumbuh Tanaman Sorghum bicolor
Sorgum (Sorghum bicolor (L.) Moench) banyak ditanam di daerah
beriklim panas dan daerah beriklim sedang. Sorgum dibudidayakan pada
ketinggian 0-700 mdpl. Memerlukan suhu lingkungan 23° - 34° C tetapi suhu
optimum berkisar antara 23° C dengan kelembaban relatif 20 – 40%. Sorgum
tidak terlalu peka terhadap keasaman (pH) tanah, tetapi pH tanah yang baik
untuk pertumbuhannya adalah 5.5 – 7.5 (Rismunandar 1989). Tanaman
sorgum tahan terhadap kekeringan, sebagai perbandingan satu kg bahan
kering sorgum hanya memerlukan sekitar 332 kg air selama pembudidayaan,
sedangkan pada jumlah bahan kering yang sama, jagung membutuhkan 368
kg, jelai (barley) 434 kg, dan gandum 514 kg air (Suprapto dan Mudjisihono,
1987).
Selain persyaratan diatas sebaiknya sorgum jangan ditanam di tanah
podzolik merah kuning (PMK) yang masam, namun untuk memperoleh
pertumbuhan dan produksi yang optimal perlu dipilih tanah ringan atau
mengandung pasir dan bahan organik yang cukup (Yanuwar, 2002).
 BAB III

METODOLOGI

A. Tempat dan Waktu

Praktek Kerja Lapangan dilaksanakan selama satu bulan, yaitu pada
tanggal 5 Agustus – 5 September 2014 di Laboratorium Fitoteknologi dan
Green house, Balai Teknologi Lingkungan, PUSPITEK, Serpong.

Gambar 3.1 Laboratorium Fitoteknologi (kiri) dan Green House

(kanan) Balai Teknologi Lingkungan, PUSPITEK Serpong
B. Metode

Dalam memperoleh informasi dan referensi yang dibutuhkan untuk

melakukan kegiatan penelitian tentang studi awal perbanyakan dan
pemanfaatan inokulum fungi mikoriza arbuskula (FMA), digunakan beberapa
metode, yaitu:
1. Studi Literatur
Pengambilan informasi melalui buku, jurnal, maupun diktat yang terkait
erat dengan kegiatan dan mendukung dalam penyusunan laporan Praktek
Kerja Lapang (PKL).
2. Observasi
Pengambilan data dan informasi dengan cara mengamati dan terlibat
secara langsung dalam kegiatan, seperti melakukan penelitian sederhana
 tentang pemanfaatan FMA pada tanaman kangkung yang dilakukan
selama Praktek Kerja Lapang (PKL).
3. Dokumentasi
Pengumpulan data dengan pencatatan dan pengambilan foto kegiatan yang
berlangsung sebagai bukti hasil pengamatan.
4. Bimbingan
Melakukan konsultasi dan bimbingan dalam mengumpulkan data dan
informasi selama kegiatan maupun selama penyusunan laporan Praktek
Kerja Lapangan (PKL).
C. Alat dan Bahan
1. Perbanyakan Inokulum Fungi Mikoriza Arbuskula
Dalam kegiatan perbanyakan inokulum Fungi Mikoriza Arbuskula
(FMA), alat - alat yang digunakan antara lain gunting, cangkul, kantung
plastik, satu set alat saringan bertingkat (ukuran garis tengah mata saring
250 µm, 125 µm, 63 µm, dan 45 µm), gelas piala 1000 mL, tabung
sentrifugasi, cawan petri, pinset spora, mikroskop stereo, tabung reaksi,
kertas saring, alumunium foil, pinset spora, pisau pemotong, spidol, kertas
label, timbangan, labu takar 1000 ml, gelas ukur, dan alat pengaduk.
Sedangkan bahan – bahan yang digunakan dalam penelitian ini
adalah sampel tanah dan akar tanaman, inokulum FMA yang akan
dikembangbiakan, larutan sukrosa 60%, air, larutan pewarna, bibit
tanaman inang, media tanam steril, larutan KOH 10%, HCl 2%
(volume/volume), larutan pewarna biru tripan, larutan laktogliserin.
2. Pemanfaatan Inokulum Fungi Mikoriza Arbuskula pada Tanaman
Kangkung
Alat yang digunakan dalam pemanfaatan inokulum FMA pada
tanaman kangkung antara lain pot, baki, alat pengaduk, gunting, cawan
petri plastik.
Sedangkan bahan yang digunakan dalam pemanfaatan inokulum
FMA pada tanaman kangkung antara lain, media tanam berupa pupuk,
pasir, kompos dengan perbandingan 1:1:1, tanaman sorgum hasil
 penangkaran FMA sebagai sumber inokulan Mikoriza Bangka Tengah
(MIBATH), rock phosphate, benih kangkung (Ipomoea reptans), air.
D. Cara Kerja
1. Perbanyakan Inokulum Fungi Mikoriza Arbuskula
a. Pengambilan Contoh Tanah dan Akar
Pengambilan contoh tanah dan akar dari lapangan
merupakan kegiatan untuk menyiapkan bahan atau materi yang
akan digunakan untuk mempelajari keberadaan dan perilaku
propagul FMA (spora, hifa, ekstraradikal, dan akar bermikoriza)
yang masih hidup. Prinsip pengambilan contoh tanah ini memiliki
prinsip yang sama dengan pengambilan contoh tanah untuk
analisis fisika, kimia dan biologi tanah, serta contoh jaringan
tanaman. Contoh tanah dan akar dapat diambil secara proposional
(Gambar 3.2, kiri dan tengah) ataupun nonproposional (Gambar
3.2, kanan).

Gambar 3.2 Teknik pengambilan contoh tanah dan akar dari

lapangan secara proporsional (kiri dan tengah) dan secara tidak
proporsional (kanan)
Langkah – langkah yang dilakukan dalam pengambilan contoh
tanah dan akar adalah sebagai berikut:

1. Memilih jenis tanaman yang akan dilihat atau

dieksplorasi inokulan FMA-nya.
2. Lalu tentukan cara pengambilan sampel berdasarkan
vegetasi bentang lahannya. Jika bentang lahannya
ditanami tanaman yang dibudidayakan secara monokultur
maka pengambilan contoh tanah dan akar dilakukan
secara proporsional. Sedangkan jika bentang lahannya
 ditumbuhi berbagai jenis tanaman, maka pengambilan
contoh dilakukan secara nonproposional.
3. Setelah menentukan cara pengambilan contoh tanah dan
akar, maka dengan cangkul tanah disekitar akar tanaman
diambil dan diletakkan dalam kantung plastik.
4. Sampel tanah dan akar kemudian dapat dibawa ke lab
untuk segera dilakukan ekstraksi atau penyaringan spora,
sehingga spora dapat dilihat di bawah mikroskop stereo
atau untuk diidentifikasi.
b. Ekstraksi Spora atau Penyaringan
Untuk mendapatkan sampel inokulum FMA yang berasal
dari alam atau dari laboratorium kultur maka harus dilakukan
ekstraksi spora atau penyaringan spora. Berikut cara penyaringan
yang dilakukan pada media tanam berupa tanah:
1. Memasukkan contoh tanah dan akar tanaman inang yang telah
diambil ke dalam wadah. Tambahkan air secukupnya, lalu aduk
hingga tanah terlihat larut dalam air.

Gambar 3.3 Suspensi tanah dan akar tanaman yang sedang

dilarutkan dalam air
2. Untuk bongkahan tanah yang sulit dihancurkan dengan hanya
menggunakan pengaduk. Proses pengadukkan dilakukan agar
spora terlepas dari agregat hifa yang menempel pada akar atau
tanah.
3. Setelah suspensi tanah dan akar telah diaduk kemudian
suspensi siap disaring. Biarkan air mengaliri saringan secara
perlahan, lalu tuangkan suspensi tersebut ke penyaring
bertingkat. Bagian atas adalah penyaring dengan ukuran paling
besar lalu diikuti dengan ukuran lebih kecil dibawahnya, yaitu
250 µm, 125 µm, 63 µm dan 45 µm.

Gambar 3.4 Alat penyaring bertingkat

4. Endapan yang ada pada penyaring terbawah (ukuran lubang
paling kecil) dipindahkan ke piala gelas dengan bantuan air
dari botol semprot.

Gambar 3.5 Pemindahan hasil saring pada penyaring paling

bawah ke cawan petri

5. Aduk dan tuangkan ke tabung sentrifugasi. Tinggi ekstrak

sebaiknya tidak melebihi 1 cm dan harus tersedia cukup
ruangan agar suspensi tidak tumpah.
6. Pipetkan larutan sukrosa 60% ke dalam suspensi tanah
sebanyak 2 kali volume ekstrak.

Gambar 3.6 Suspensi dalam tabung sentrifugal untuk dilakukan

sentrifugasi
7. Lakukan sentrifugasi dengan kecepatan 3.000 rpm selama
kurang lebih 3 menit atau 2.500 rpm selama 5 menit.

Gambar 3.7 Sentrifugasi dilakukan untuk memisahkan antara

partikel kecil tanah dan inokulum FMA terpisah
8. Spora akan mengapung pada larutan gula atau bagian atas
suspensi jernih.
9. Tuangkan suspensi jernih pada penyaring 45 µm, segera
bersihkan dengan air mengalir untuk mencegah terjadinya lisis
spora.
10. Dengan bantuan semprotan air dari botol semprot, pindahkan
spora ke cawan petri untuk dilihat keberadaan spora di bawah
mikroskop.
 Gambar 3.8 Spora hasil sieving dipindahkan ke cawan petri (kiri),
sehingga dapat diamati di bawah mikroskop (kanan)
c. Analisis Perkembangan Kultur Penangkaran (Trapping) FMA
Analisis Perkembangan Kultur Penangkaran FMA biasanya
dilakukan setelah kultur penangkaran kurang lebih 3 bulan. Hal ini
dilakukan untuk mengukur densitas pertumbuhan spora dan
miselia pada tanaman inang. Langkah – langkah yang dilakukan
adalah sebagai berikut,
1. Mengambil tanaman inang, yaitu tanaman Pueraria
javanica dan Sorghum bicolor yang telah dikultur selama
10 bulan
2. Dari media kultur penangkaran tersebut diambil
sedikitnya 10 gram zeolit beserta akar tanaman inang,
lalu dilakukan proses penyaringan dengan alat saringan
bertingkat
3. Hasil dari penyaringan kemudian dituangkan ke cawan
petri
4. Cawan petri kemudian diletakkan di atas meja objek pada
mikroskop stereo
5. Dengan menggunakan mikroskop stereo, hitunglah
jumlah spora atau miselia yang diambil dari hasil
penyaringan
6. Tentukan densitas pertumbuhan spora atau miselia
berdasarkan ketentuan dalam tabel di bawah ini
d. Pembuatan Kultur Spora Tunggal
Pembuatan kultur spora tunggal pada dasarnya dilakukan untuk
menghasilkan spora dari satu jenis FMA yang tidak tercampur
dengan jenis FMA lainnya. Berikut adalah langkah – langkah yang
dilakukan dalam pembuatan kultur spora tunggal:
1. Ekstrak spora yang terdapat dalam medium kultur
penangkaran, atau inokulan FMA yang akan diuji
menggunakan prosedur baku.

Gambar 3.9 Inokulum dari hasil trapping digunakan untuk

pembuatan kultur spora tunggal

2. Kelompokkan spora yang memiliki kemiripan karakteristik

morfologi, misalnya diameter, warna, ada tidaknya bulbous
suspensor dan dudukan spora, tunggal atau menggerombol, dan
lain sebagainya. Setiap kelompok spora dimasukkan ke cawan
petri berisi air.

Gambar 3.10 Pengelompokkan spora yang memiliki kesamaan

karakteristik morfologi
3. Siapkan wadah (tabung reaksi, cawan petri atau wadah yang
bersifat tembus pandang) dan isi dengan media tumbuh steril
basah.

Gambar 3.11 Pengisian media tanam steril pada tabung reaksi

(kiri) dan bibit tanaman inang (Pueraria javanica) berumur 1.5
bulan (kanan) untuk spora tunggal

4. Siapkan bibit tanaman inang dan letakkan di atas kertas saring

basah dalam cawan petri.
5. Dengan bantuan mikroskop dan pinset spora, ambil 1 (satu)
buah spora, letakkan pada 0.5 cm di belakang ujung akar. Pilih
spora yang masih memperlihatkan tanda – tanda kehidupan,
segar, dan tidak terserang penyakit atau parasit.

Gambar 3.12 Peletakkan spora pada akar bibit tanaman inang

6. Letakkan bibit yang akarnya telah diinokulasikan dengan spora

FMA pada medium tumbuh dalam wadah. Harus dijaga agar
spora tidak jatuh atau pindah tempat.
7. Jika menggunakan cawan petri, maka cawan petri ditutup dan
bagian sisinya ditutup rapat dengan selotip, kecuali bagian
lubang tanaman. Beri tanda dengan spidol letak spora tersebut
untuk memudahkan pengamatan berikutnya. Bungkus cawan
petri atau tabung reaksi dengan aluminium foil.

Gambar 3.13 Cawan petri digunakan sebagai wadah tanam

untuk kultur spora tunggal

8. Tempelkan kertas label yang sudah ditulis kode isolat, nama

tanaman 8. inang, tanggal dimulainya kultur, kode nama
pembuat kultur, sumber contoh, dan informasi lain yang
dipandang perlu.
9. Jika menggunakan cawan petri maka letakkan pada wadah
plastik yang berisi air setinggi kurang lebih 1 cm (Gambar
3.13). Jika menggunakan tabung reaksi maka dapat dilakukan
penyiraman setiap pagi dan sore dengan air hingga media
tanam terlihat basah tanpa membanjiri media tanam.
 Gambar 3.14 Pemberian kertas label pada media kultur tunggal
(kiri). Penyiraman tanaman kultur spora tunggal dilakukan
dengan bantuan botol semprot (kanan)

10. Pengamatan dapat dilakukan setiap hari dan dicatat kapan spora
mulai berkecambah dan hal-hal lain yang terjadi selama
pembuatan kultur.
11. Pemupukan dilakukan dengan menyiram larutan hara berkadar
P rendah dan N tinggi, misalnya hiponeks merah (1 g per 2 L
air) dengan periode 1 minggu 2 kali.
12. Pemangkasan dilakukan 2 minggu atau sebulan sekali,
bergantung kepada kerimbunan tanaman. Jika menggunakan
tanaman Pueraria javanica, utamakan membuang sulur-sulur
karena dapat mengganggu pengambilan kultur. Tujuan
pemangkasan adalah untuk merangsang sporulasi.
e. Analisis Perkembangan Kultur Spora Tunggal
Langkah – langkah yang dilakukan dalam kegiatan analisis
perkembangan kultur spora tunggal adalah sebagai berikut:
1. Mengambil tabung – tabung reaksi yang digunakan sebagai
media kultur spora tunggal yang telah berumur 1 bulan.
2. Letakkan di dekat mikroskop stereo yang akan digunakan
untuk melihat perkembangan hifa maupun spora.
3. Menyalakan mikroskop stereo, lalu meletakkan secara
mendatar tabung reaksi pada meja objek.
4. Lihatlah keberadaan spora menggunakan mikroskop stereo
tersebut, apakah telah terbentuk simbiosis (spora atau miselia)
di antara akar tanaman inang. Dari jumlah tanaman seluruhnya
dan jumlah tanaman inang yang telah terbentuk simbiosisnya
maka akan didapatkan persentase keberhasilan kultur tunggal
FMA yang dilakukan.
f. Pewarnaan Akar (Staining)
Tujuan utama kegiatan pewarnaan akar adalah untuk menetapkan
apakah akar tanaman dikolonisasi FMA atau tidak dan untuk
menentukan derajat perkembangan mikoriza dalam sistem
perakaran tanaman. Kolonisasi akar dapat dihitung berdasarkan
kenampakan struktur intraradikal FMA, yaitu arbuskula, hifa,
spora, vesikel, atau struktur lain. Struktur tersebut dapat diamati
jika senyawa yang mewarnai dinding akar berhasil dihilangkan
dengan senyawa alkali. Berikut adalah langkah – langkah yang
dilakukan untuk pewarnaan akar:
1. Mencuci akar yang ingin diketahui asosiasinya dengan
mikoriza dengan air destilata.
2. Merendam akar dalam KOH 10% selama 12 jam atau dalam
KOH 10% panas (90°C) selama 10-30 menit (tergantung kadar
lignin atau umur akar).

Gambar 3.15 Perendaman akar tanaman inang dengan larutan

KOH 10%
3. Cuci dengan air 3-5 kali, gunakan penyaring the sebagai
wadah.
4. Apabila akarnya masih tetap berwarna kelam, rendam semalam
atau rendam dalam larutan pemutih komersial panas (90°C)
selama 10-30 menit.
5. Kemudian cuci dengan air 3-5 kali. Larutan pemutih komersial
sebaiknya diencerkan sekitar 10 kali.
6. Rendam akar dalam HCl 2% selama 12 jam sampai pH larutan
mencapai 0.8 – 1.4.
 Gambar 3.16 Perendaman akar dengan larutan HCL 2%
7. Rendam dalam larutan pewarna biru tripan panas, suhu
minimal 90°C atau larutan yang dingin tapi perendamannya 12
– 18 jam.

Gambar 3.17 Perendaman akar dalam larutan gliserol, asam

laktat dan tripan biru (2:2:1)

8. Rendam dalam larutan destaining untuk menghilangkan

kelebihan pewarna biru tripan.
9. Potong akar sepanjang kurang lebih 1 cm dan kemudian
letakkan berjajar pada gelas objek. Setiap 5 potong akar ditutup
dengan sebuah cover slip.
 Gambar 3.18 Akar dipotong sepanjang 1 cm (kiri) lalu
diletakkan pada kaca objek (kanan) untuk diamati di bawah
mikroskop
g. Pemanenan Inokulum Fungi Mikoriza Arbuskula

Pemanenan inokulum FMA dilakukan pada tanaman inang

Sorgum. Tanaman inang Sorgum ditanam pada tanggal 6
November 2013, dan kemudian dipanen pada tanggal 25 Agustus
2014. Pemanenan dilakukan pada tanaman Sorgum.
1. Tanaman sorgum dan media tanamnya yang telah mengalami
pengeringan (stressing) sampai tanaman dan media zeolit
benar-benar kering, lalu dilakukan pemotongan tajuk.
2. Pemotongan tajuk tanaman (topping) bertujuan agar tanaman
inang dan mikoriza mengalami kondisi tekanan sangat tinggi.
Pada keadaan tersebut mikoriza mempertahankan diri dengan
membentuk spora.
 Gambar 3.19 Batang tanaman sorgum sebelum dipotong (kiri)
dan sesudah dipotong (tengah), lalu pot plastik ditutup dengan
kertas HVS (kanan)
3. Setelah dilakukan pemotongan tajuk, zeolit serta sisa tanaman
sorgum di dalam pot kemudian ditutup dengan kertas HVS, lalu
ikat dengan karet gelang sehingga dapat menutup mulut pot
dengan sempurna. Inokulum FMA dalam pot tersebut dapat
disimpan untuk kemudian digunakan kembali.

Gambar 3.20 Pot – pot berisi inokulum FMA dikelompokkan

berdasarkan kode asal tanaman (Kiri). Pot-pot tersebut
kemudian disimpan di rak laboratorium Fitoteknologi (kanan).
2. Pemanfaatan Inokulum FMA pada Tanaman Kangkung
a. Pembuatan Media Tanam dengan Penambahan Mikoriza Bangka
Tengah (MIBATH)
Langkah – langkah yang dilakukan dalam pembuatan media tanam
adalah sebagai berikut:
1. Media tanam dibuat dari campuran pasir, pupuk, dan kompos
dengan perbandingan 1:1:1, lalu dimasukkan ke dalam pot
masing-masing 250 gram.
 Gambar 3.21 Media tanam dengan perbandingan 1:1:1
komposisi pupuk, pasir dan kompos
2. Pada media tanam yang telah dilubangi sedalam 5 cm,
diletakkan rock phosphate sebanyak 10 gram pada tiap pot.

Gambar 3.22 Inokulum FMA dari zeolit dan akar tanaman

inang yang telah dipotong-potong dan dicampur (kiri atas), dan
rock phosphate yang telah ditimbang sebanyak masing-masing
10 gram (kanan atas), kemudian zeolit dan rock phosphate
dimasukan ke dalam lubang pada media tanam (bawah)
3. Lalu di atas rock phosphate ditambahkan lagi zeolit
berinokulum FMA sebanyak 2.5, 5, dan 10 gram masing-
masing pada 5 pot untuk 5 kali pengulangan.
4. Sedangkan sebagai control 5 pot lainnya dibiarkan tanpa
perlakuan atau pemberian inokulum FMA.
5. Penanaman kangkung dilakukan dengan meletakkan 3 benih
kangnkung (Ipomoea reptans) pada tiap pot (Gambar 3.23). hal
ini dilakukan untuk menghindari kemungkinan bila salah satu
tanaman tidak dapat tumbuh, sehingga masih menyisakan benih
lain yang dapat tumbuh.
 Gambar 3.23 Tiga benih kangkung diletakkan di atas zeolit
yang mengandung inokulum Mikoriza Bangka Tengah
(MIBATH)
6. Benih yang diletakkan kemudian ditutupi dengan media tanam
disekitarnya secara perlahan dan tidak begitu dalam, sehingga
benih dapat tumbuh dengan mudah mencapai permukaan media
tanam.
7. Penyiraman tanaman dilakukan selama dua kali dalam sehari,
yaitu pada pagi dan sore. Penyiraman dilakukan dengan air
secukupnya atau tidak membanjiri media tanam karena keadaan
tersebut tidak akan menguntungkan bagi tanaman kangkung
(Ipomoea reptans)
8. Pemberian pupuk hanya dilakukan sebanyak satu kali, yaitu
ketika tanaman telah tumbuh setinggi 5 – 7 cm. pupuk yang
diberikan adalah pupuk NPK (16:16:16) sebanyak 2.5 gram
untuk tiap pot termasuk pot tanpa perlakuan. Pupuk NPK
diletakkan mengelilingi tanaman kangkung dengan jarak yang
cukup jauh. Hal ini dikarenakan pupuk NPK yang terlalu dekat
dengan tanaman akan membuat tanaman tersebut layu,
kecoklatan dan dapat menyebabkan tanaman mati. Menurut
Rukmi (2010), NPK Mutiara (16:16:16) adalah pupuk dengan
komposisi unsur hara yang seimbang dan dapat larut secara
perlahan-lahan sampai akhir pertumbuhan.
 Gambar 3.24 Pupuk NPK (16:16:16) diletakkan mengelilingi
tanaman
9. Selama penanaman, parameter yang diamati tiap minggunya
adalah panjang tanaman dan jumlah daun pada tiap tanaman.

b. Pemanenan Kangkung (Ipomoea reptans)

1. Pemanenan dilakukan setelah 1.5 bulan penanaman benih
kangkung.
2. Tanaman-tanaman dibiarkan masih tertanam pada pot,
kemudian dilakukan pengukuran klorofil daun. Lalu tanaman
dapat dicabut bagian tajuk beserta akarnya dari dalam pot.
3. Tanaman kangkung yang telah dicabut kemudian dibersihkan
dari sisa-sisa media tanam yang mungkin masih tersangkut atau
menempel.
4. Akar dari tiap tanaman kemudian diukur panjangnya dengan
menggunakan penggaris.
5. Kemudian dilakukan penimbangan berat basah tajuk dan akar.
Setelah itu, tiap tanaman dibungkus dengan kertas HVS dan
diberi keterangan jenis perlakuannya.
6. Semua tanaman yang telah dibungkus kemudian dimasukkan
ke dalam oven selama 48 jam dengan suhu 60 °C untuk
ditimbang berat keringnya.

BAB IV
 HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Perbanyakan Inokulum Fungi Mikoriza Arbuskula (FMA)

1. Ekstraksi Spora atau Penyaringan (Sieving)
Spora FMA yang ada di dalam tanah atau yang ada di permukaan
akar dapat diekstraksi secara langsung dengan atau tanpa penghancuran
contoh tanah dan akar menggunakan air yang mengalir. Spora kemudian
ditangkap dengan penyaring bertingkat. Prosedur berikut berlaku untuk
ekstraksi spora hasil perbanyakan di pot plastik dalam rumah kaca, tetapi
juga dapat diterapkan untuk ekstraksi spora dari dalam tanah (Nusantara,
2012).
Kegiatan ekstraksi atau penyaringan spora yang pertama kali
dilakukan dalam kegiatan Praktek Kerja Lapangan, tidak membuahkan
hasil, yaitu tidak adanya spora atau hifa yang tertangkap oleh alat saring
bertingkat.
Menurut Nusantara et al. (2012), fungi MA akan banyak
membentuk spora jika keadaan lingkungan pertumbuhan tidak kondusif.
Spora terbentuk dari ujung hifa yang menggelembung, kemudian lepas
dan menjadi struktur yang mandiri yang kemudian mampu bertahan lama
pada kondisi kering sekalipun.
Hal ini lah yang mungkin mempengaruhi hasil penyaringan yang
dilakukan dalam kegiatan Praktek Kerja Lapangan, mengingat bahwa
sampel tanah dan akar diambil dari tanaman yang tumbuh subur di
lingkungan yang terawat (taman di sekitar Balai Teknologi Lingkungan)
dimana penyiraman tanaman dilakukan tiap pagi dan sore hari.
2. Pembuatan Kultur Penangkaran (Trapping) FMA
Kultur penangkaran pada dasarnya digunakan untuk menstimulasi
sporulasi atau meningkatkan jumlah propagul FMA yang ada di dalam
tanah yang diambil dari lapangan. Hal tersebut perlu dilakukan,
mengingat tidak semua FMA aktif pada periode waktu yang sama.
Sebagian FMA jumlahnya melimpah pada musim hujan, sebagian lainnya
 pada waktu musim kemarau, dan sebagian lainnya ada sepanjang tahun
(Oehl et al. 2009).
Kultur penangkaran dibuat dengan cara mencampur tanah atau akar
dari lapangan sebagai sumber inokulum dengan medium tumbuh steril
dan tanaman inang yang sesuai. Apabila dalam tempo empat bulan tidak
dijumpai propagul FMA baru, kultur penangkaran tetap dilanjutkan dan
jika perlu sampai beberapa daur sampai diperoleh spora. Jumlah jenis
FMA yang bersporulasi pada umumnya berlipat 2-3 untuk setiap daur
kultur. Sekalipun kultur penangkaran memerlukan waktu yang cukup
panjang (±3 bulan), tetapi menghasilkan spora segar yang mudah
diidentifikasi karakteristik morfologinya.
Tanaman inang merupakan faktor yang penting artinya. Apabila
akan digunakan untuk menyelidiki kelimpahan dan keragaman FMA pada
satu ekosistem, maka tanaman inang yang digunakan ialah tanaman yang
ada di lapangan tempat pengambilan contoh tanah. Penggunaan tanaman
inang lain selain tanaman yang tumbuh pada daerah asal propagul FMA
dapat dilakukan, namun sering kali menghasilkan kelimpahan dan
keragaman yang jauh berbeda (Eom et al., 2000; Vogelsang dan Bever,
2009).
3. Analisis Perkembangan Kultur Penangkaran (Trapping) FMA
Kultur penangkaran (trapping) fungi mikoriza arbuskula (FMA)
yang telah berumur 10 bulan, diamati perkembangan miselia dan
sporanya pada berbagai sampel dari tanaman inang yang berbeda. Kultur
trapping dilakukan dengan menggunakan 2 (dua) jenis tanaman, yakni
sorgum (Sorghum bicolor) dan kudzu (Pueraria javanica).
Metode analisis perkembangan kultur trapping FMA mengacu pada
tingkat perkembangan terbentuknya simbiosis, yakni dengan mengamati
densitas pertumbuhan miselia dan spora di mikroskop. Ketentuan densitas
pertumbuhan miselia dan spora seperti pada tabel 1 di bawah ini.
Tabel 1. Kriteria pengukuran densitas pertumbuhan miselia dan spora
Tanda Miselia Spora
- Belum terbentuk miselia Belum terbentuk
spora
+ Miselia sudah terbentuk sebanyak <25% 1 – 3 spora baru
pada akar sampel
++ Miselia sudah terbentuk sebanyak 25-50% 4 – 10 spora baru
pada akar sampel
+++ Miselia sudah terbentuk sebanyak 50-75% 11 – 25 spora
pada akar sampel baru
++++ Miselia sudah terbentuk sebanyak 75-100% >25 spora baru
pada akar sampel
Hasil pengamatan di bawah mikroskop terhadap sampel akar dan
tanah yang berbeda (sesuai dengan kode tanaman) adalah sebagai berikut:
Tabel 2. Densitas pertumbuhan miselia dan spora hasil kultur
penangkaran (trapping) pada tanaman inang sorgum

No. Kode Miselia pada Sorgum Spora pada Sorgum

Tanaman + ++ +++ ++++ + ++ +++ ++++
1 ?  
2 Ac  
3 Cp1  
4 Cp2  
5 Ff  
6 Pp1  
7 Pp2  
8 S1  
9 S2  
10 S3  
11 S4  
12 V1  
13 V2  
14 V3  
15 V4  
Dari Tabel 2 di atas dapat diketahui bahwa terdapat satu sampel
yang memiliki miselia sebanyak 25%, 3 sampel dengan miselia 25-50%,
8 sampel dengan miselia 50-75%, dan 3 sampel dengan miselia sebanyak
75-100%.
Dari Tabel 2 juga diketahui densitas spora pada 15 sampel tanaman
inang, yaitu 2 sampel memiliki 1-3 spora, 3 sampel memiliki 4-10 spora,
 3 sampel memiliki 11-25 spora dan 7 sampel memiliki lebih dari 25
spora.
Tabel 3. Densitas pertumbuhan miselia dan spora hasil kultur
penangkaran (trapping) pada tanaman inang kudzu

No. Kode Miselia pada kudzu Spora pada kudzu

Tanaman + ++ +++ ++++ + ++ +++ ++++
1 ?  
2 Ac  
3 Cp1  
4 Cp2  
5 Ff  
6 Pp1  
7 Pp2  
8 S1  
9 S2  
10 S3  
11 S4  
12 V1  
13 V2  
14 V3  
15 V4  

Dari Tabel 3 dapat diketahui bahwa terdapat 2 sampel dengan

miselia sebanyak 25%, 5 sampel dengan miselia 25-50%, 7 sampel
dengan miselia 50-75% dan hanya 1 sampel dengan miselia sebanyak 75-
100%.
Dari Tabel 3 juga dapat diketahui bahwa terdapat 1 sampel memiliki
1-3 buah spora, 5 sampel dengan 4-10 spora, 7 sampel dengan 11-25
spora, dan 2 sampel dengan jumlah spora lebih dari 25 buah.

4. Pembuatan Kultur Spora Tunggal FMA

Pembuatan kultur spora tunggal pada dasarnya dilakukan untuk

menghasilkan spora dari satu jenis FMA yang tidak tercampur dengan
jenis FMA lainnya. Kultur tunggal sering kali disebut sebagai kultur
monoexic yang bermakna with one foreigner. Kultur monoexic dengan
demikian ialah kultur yang mengandung sel atau organ dari dua jenis
jasad hidup yang berbeda, misalnya FMA Claroideoglomus etunicatum
dalam akar kudzu yang ditumbuhkan dalam medium zeolit. Pengkulturan
dapat dilakukan dengan tabung reaksi, cawan petri, atau pot plastik
menggunakan tanaman inang dan medium tumbuh yang sesuai. Spora
tunggal sebelum diinokulasikan dapat disterilkan terlebih dahulu untuk
menghindari terikutnya hifa FMA yang tidak diinginkan. Perkecambahan
spora juga dapat dilakukan secara in vitro atau tanpa tanaman inang.
Spora dan hifa kemudian diinokulasikan pada akar tanaman inang
sebelum ditanam dalam medium tumbuh yang sesuai.
Spora hasil kultur tunggal kemudian dapat digunakan sebagai bahan
identifikasi morfologi atau molekuler untuk menetapkan nama FMA yang
bersangkutan. Penetapan nama jenis FMA penting artinya, maksudnya
identitas inokulan yang wajib dicantumkan pada kemasan. Kultur tunggal
juga dapat digunakan untuk kajian FMA lainnya, misalnya interaksi inang
dengan perkecambahan spora, optimasi jenis dan kadar hara untuk satu
jenis FMA tertentu, dan sebagainya.
Masalah teknik yang biasanya sering ditemui ialah dormansi spora
FMA yang menyebabkan laju perkecambahan spora turun drastik.
Dormansi tersebut dapat dipecahkan misalnya dengan perlakuan suhu
rendah (Juge et al., 2002).
Pada kegiatan PKL ini dilakukan kegiatan kultur tunggal FMA pada
tanggal 20 Agustus 2014, yaitu dengan menginokulasikan spora FMA
pada akar tanaman kudzu sebanyak 15 tanaman (tabung nomor 1-15), dan
juga menginokulasikan hifa FMA pada akar tanaman kudzu sebanyak 5
tanaman (tabung nomor 16-20). Spora dan hifa FMA yang diinokulasikan
berasal dari tanaman Cp2 pada tanaman inang kudzu.
Pengamatan pada kultur tunggal FMA ini dilakukan setelah
umurnya 2 minggu. Pengamatan dilakukan dengan melihat perkembangan
spora atau hifa yang telah diinokulasikan pada akar tanaman kudzu,
 seperti terbentuknya hifa dari spora yang diinokulasi atau semakin
banyaknya hifa yang terdapat pada akar tanaman inang.

5. Analisis Perkembangan Kultur Spora Tunggal

Kultur spora tunggal FMA yang telah berumur kurang lebih 1

bulan, diamati keberadaan dan perkembangan miselia dan sporanya pada
tanaman inang Pueraria javanica. Kultur spora tunggal dilakukan dengan
menggunakan FMA dari tanaman asal yang berbeda-beda, yaitu tanaman
Ac, Cp, Cp1, dan E1. Metode analisis perkembangan kultur tunggal FMA
mengacu pada ada atau tidak adanya bentuk simbiosis (spora atau
miselia) yang telah terbentuk antara akar tanaman inang dengan FMA.
Dari jumlah tanaman seluruhnya dan jumlah tanaman inang yang telah
terbentuk simbiosisnya maka akan didapatkan persentase keberhasilan
kultur tunggal FMA yang dilakukan dengan menggunakan rumus.

Tabel 4. Analisis perkembangan kultur spora tunggal

Kode Jumlah Jumlah Tanaman Persentase
Tanaman Tanaman yang Terdapat (%)
Kultur Tunggal Spora/Miselia baru
E1 (1-7-14) 12 5 46.67
Cp1(2-7-14) 11 5 45.45
Ac (4-7-14) 24 8 33.33
Cp (3-7-14) 12 3 25

Dari tabel di atas dapat diketahui persentase keberhasilan kultur

spora tunggal yang dilakukan pada tiap kode tanaman asal FMA.
Persentase paling besar, yaitu didapatkan dari kultur spora tunggal FMA
 yang berasal dari tanaman E1. Sedangkan persentase terkecil terdapat
pada kode tanaman asal Cp.
Keberhasilan kultur spora tunggal FMA ditentukan oleh beberapa
faktor, salah satunya adalah waktu yang dibutuhkan untuk sporulasi.
Menurut Nusantara et al. (2012), jumlah jenis FMA yang bersporulasi
pada umumnya berlipat 2-3 untuk setiap daur kultur. Waktu yang
dibutuhkan oleh kultur FMA membutuhkan waktu yang cukup panjang,
yaitu kurang lebih 3 bulan. Sehingga dapat disimpulkan bahwa
pengamatan kultur spora tunggal FMA pada umur 1 bulan belum
memperlihatkan hasil yang optimal.
Hasil persentase keberhasilan kultur spora tunggal yang berbeda
juga kemungkinan karena jenis FMA yang digunakan adalah jenis FMA
yang berbeda karena berasal dari tanaman yang berbeda.
Menurut Nursanti et al. (2012), hasil perbanyakan FMA dengan
kultur spora tunggal yang telah dilakukan didapatkan bahwa antara
genus-genus spora yang diperbanyak memiliki kecepatan perkecambahan
dan kolonisasi serta sporulasi yang berbeda.

6. Pewarnaan Akar (Staining)

Pewarnaan FMA diperlukan untuk menentukan derajat dan

intensitas kolonisasi akar tanman oleh FMA. Tujuan utamanya adalah
untuk menetapkan apakah akar tanaman dikolonisasi FMA atau tidak dan
untuk menentukan derajat perkembangan mikoriza dalam system
perakaran tanaman. Kolonisasi akar dapat dihitung berdasarkan
kenampakan struktur intraradikal FMA, yaitu arbuskula, hifa, spora,
vesikel, atau struktur lain. Struktur tersebut dapat diamati jika senyawa
yang mewarnai dinding akar berhasil dihilangkan dengan senyawa alkali.
Struktur intraradikal akan bersenyawa dengan senyawa pewarna pada
kondisi asam. Pengasaman akar akan efektif jika seluruh larutan alkali
yang digunakan sebelumnya dapat dihilangkan dengan bantuan air.
Prinsip demikian digunakan pada berbagai metode pewarnaan akar.
Struktur mikoriza arbuskular (arbuskula, vesikel, dan hifa) tidak
akan dapat diamati secara langsung di bawah mikroskop karena baur
dengan adanya berbagai pigmen dan isi sel dalam akar. Oleh karena itu,
pigmen-pigmen dan isi sel dalam akar. Oleh karena itu, pigmen-pigmen
dan isi- isi sel harus dihilangkan lebih dulu dengan bahan kimia tertentu,
misalnya lignin dan kadar senyawa fenoliknya, maka semakin beragam
pigmen dan isi selnya atau akar-akar yang diambil langsung dari lapangan
biasanya semakin sulit dibersihkan dengan KOH. Oleh karena itu,
penggunaan otoklaf selama 15-20 menit dengan suhu 120°C atau
penambahan beberapa tetes H2O2 sangat dianjurkan (Brundett et al.
1996).
Struktur fungi dalam jaringan tanaman dapat diamati jika warnanya
lebih mencolok dibandingkan dengan struktur akar lain yang sudah
dihilangkan warnanya dengan KOH. Larutan KOH bertugas melarutkan
sitoplasma dan inti sel-sel akar, sehingga memudahkan reaksinya dengan
larutan pewarna. Warna yang mencolok akan terjadi jika struktur fungi
bereaksi dengan zat pewarna tertentu pada kondisi tertentu, misalnya
dengan biru tripan (trypan blue) dalam asam laktogliserol. Kondisi yang
kurang asam akan menyebabkan struktur fungi tidak bereaksi dengan biru
tripan, sehingga tidak akan membentuk warna yang tegas tetapi agak
kemerah-merahan. Kemungkinan lainnya adalah biru tripan tidak melekat
dengan kuat, sehingga mudah hilang (Nusantara, et al. 2012).
Pada kegiatan pewarnaan akar, digunakan 5 tanaman kudzu dengan
kode Cp2, S3, V1, V4, dan “?”. Sehingga hasil persentase perkembangan
mikoriza dalam akar dapat kita bandingkan satu dengan lainnya.
Persentasi akar terkolonisasi didapatkan dengan menggunakan rumus.
 Akar kolonisasi dikategaorikan sebagai berikut menurut Rajapakse
dan Miller (1992) dan menurut O’Connor et al. (2001):
Tabel 5. Penentuan kategori pada akar terkolonisasi FMA

Rajapakse dan Miller (1992) O’Connor et al. (2001)

Persen kolonisasi Kategori Persen kolonisasi Kategori
0–5 Kelas 1 0 Tidak
dikolonisasi
6 – 25 Kelas 2 <10 Rendah
26 – 50 Kelas 3 10 – 30 Sedang
51 – 75 Kelas 4 >30 Tinggi
75 – 100 Kelas 5

Dari pengamatan di bawah mikroskop pada akar yang telah

diwarnai, dapat dilihat bahwa terdapat vesikula di bagian dalam akar
tanaman inang. Sedangkan hifa, baik hifa intraradikal maupun
ekstraradikal, tidak tampak. Tidak terlihat pula spora yang biasanya
terletak di luar dinding akar tanaman (Gambar 4.1).

Vesikula
dalam akar
tanaman
inang

Gambar 4.1 Penampang akar tanaman inang yang telah melalui proses
pewarnaan
Sedangkan sebagai perbandingan kenampakan struktur fungi
mikoriza pada akar tanaman yang telah melalui rangkaian pewarnaan.
Gambar 4.2 menunjukkan kenampakan struktur fungi mikoriza yang lebih
lengkap, yaitu terdapat hifa intraradikal, hifa ekstraradikal, dan spora.
Gambar 4.2 Kenampakan struktur fungi mikoriza pada akar yang telah
diwarnai. Hifa bercabang seperti huruf H (kiri) sering
digunakan sebagai penciri Glomus. Spora berkecambah
dan kemudian menjulurkan hifa ke dalam akar tanaman
(tengah). Ujung hifa ekstraradikal membengkak dan
kemudian membentuk spora (kanan) (Sumber:
Nusantara, 2012)

Dengan penggunaan rumus persentase akar terkolonisasi diatas,

didapatkan persentase dari kelima kode tanaman kudzu, yaitu Cp2, S3,
V1, V4, dan “?” (Tabel 6). Dari tabel, dapat diketahui bahwa persentase
terbesar akar terkolonisasi adalah akar tanaman V4, yaitu 77.84%.
Sedangkan persentase terkecil akar terkolonisasi terdapat pada tanaman
S3, yaitu 16.67%.
Tabel 6. Persentase akar terkolonisasi dari tanaman inang P. javanica
berkode Cp2, S3, V1, V4 dan “?”.

Bidang
Total
Tipe Pandang
Akar Bidang Persentase
Tanaman (Terdapat
Pandang
mikoriza)
1 6 3
2 15 9
3 11 4
Cp2
4 12 2
5 11 3
55 21 38.18%
S3 1 12 1
2 8 -
3 6 1
4 8 3
 5 8 2
42 7 16.67%
1 9 1
2 8 3
3 11 4
V1
4 10 4
5 10 1
48 13 27.08%
1 5 -
2 7 3
3 9 6
V4
4 9 5
5 5 1
35 15 77.85%
1 12 1
2 10 1
3 9 3
?
4 13 4
5 5 3
49 12 24.48%

Bakhtiar (2002) melaporkan, perkecambahan spora berperan

penting didalam infeksi akar, yang dipengaruhi oleh beberapa faktor
diantaranya kompatibilitas inang, komposisi eksudat akar, jenis inokulum
dan faktor lingkungan. Eksudat akar dari berbagai tanaman menunjukkan
efek yang berbeda pada kolonisasi akar, ada yang dapat menstimulasi ada
juga yang dapat menghambat (Vierheilig et al., 2003).
7. Pemanenan Inokulum Mikoriza Bangka Tengah (MIBATH)

Pemanenan inokulum FMA dilakukan pada tanaman inang

Sorghum bicolor. Tanaman inang Sorgum ditanam pada tanggal 6
November 2013, dan kemudian dipanen pada tanggal 25 Agustus 2014.
Pemanenan dilakukan pada tanaman Sorgum dan media tanamnya yang
sudah kering. Tanaman sorgum dan media tanamnya yang telah
mengalami pengeringan (stressing) sampai tanaman dan media zeolit
benar-benar kering kemudian diambil, batang tanaman sorgum dipotong
sehingga hanya menyisakan 2-3 cm batangnya.
Pemotongan tajuk tanaman atau biasa juga disebut topping
bertujuan agar tanaman inang dan dan mikoriza mengalami kondisi
tekanan sangat tinggi. Tanaman inang akan mati dan mikoriza akan
berusaha mempertahankan diri dimana hifa-hifa akan mengerut dan
membentuk spora.
Setelah dilakukan pemotongan tajuk, zeolit serta sisa tanaman
sorgum di dalam pot kemudian ditutup dengan kertas HVS, lalu ikat
dengan karet gelang sehingga dapat menutup mulut pot dengan sempurna.
Inokulum FMA dalam pot tersebut dapat disimpan untuk kemudian
digunakan kembali.
Pemanenan inokulum FMA kali ini dilakukan dengan tahap
pemotongan tajuk tanaman inang (topping) yang kemudian ditutup kertas
HVS dan disimpan. Pemanenan inokulum FMA juga biasa dilakukan
dengan cara membongkar tanaman inang lalu campur dan aduk media
tanam, potong kecil-kecil akar tanaman menggunakan gunting, campur
potongan akar tersebut dengan zeolit kemudian dapat dikemas dalam
kantong plastik.
Hasil panen inokulum dari perbanyakan inokulum FMA yang telah
dilakukan ternyata dapat berbeda jumlahnya, meskipun ditanam pada
tanaman inang yang sama. Dalam kasus ini, meskipun tidak dilakukan
identifikasi spesifik tentang penggunaan jenis FMA yang diperbanyak,
namun kemungkinan jenis FMA yang digunakan pada tidap kultur
tidaklah jenis FMA yang sama karena berasal dari tanaman yang berbeda.
Faktor lainnya yang lebih nyata adalah, adanya mikroba indigenus yang
berpengaruh buruk bagi inokulan FMA.
Dalam penelitiannya, Kartika et al. (2014), menyatakan bahwa
syarat lain dari produksi inokulan yang berkualitas adalah tingkat
sterilisasi media. Media (bahan pembawa) yang baik ialah media yang
 steril dari mikroba indigenus sehingga inokulan mampu bertahan hidup
tanpa adanya persaingan dengan mikroba indigenus dalam bahan
pembawa.

B. Pemanfaatan Inokulum FMA pada Tanaman Kangkung

Pemanenan dilakukan setelah 1.5 bulan penanaman benih kangkung
dengan cara mencabut tanaman kangkung beserta akarnya. Tanaman
kangkung yang telah dicabut kemudian dibersihkan dari sisa-sisa media tanam
yang mungkin masih tersangkut atau menempel. Akar dari masing-masing
tanaman kemudian diukur panjangnya dengan penggaris. Kemudian dilakukan
penimbangan berat basah tajuk dan akar. Setelah itu, tiap tanaman dibungkus
dengan kertas HVS dan diberi keterangan jenis perlakuannya. Semua tanaman
yang telah dibungkus kemudian dimasukkan ke dalam oven selama 48 jam
dengan suhu 60° untuk ditimbang berat keringnya.

Selama 1.5 bulan penanaman kangkung, beberapa parameter yang

diamati setiap minggu adalah pertambahan tinggi tanaman, dan jumlah daun.
Sedangkan setelah panen, parameter yang diamati adalah kadar klorofil dalam
daun, panjang akar, berat basah dan berat kering tajuk, serta berat basah dan
berat kering akar. Hal ini dilakukan untuk mengetahui pengaruh penambahan
zeolit bermikoriza dengan konsentrasi berbeda, yaitu 0 (kontrol), 2.5, 5 dan 10
gram terhadap parameter yang diamati pada tanaman kangkung (Tabel 7).

Tabel 7. Rerata parameter pada pemanfaatan inokulum FMA pada tanaman

kangkung

Penambahan zeolit inokulum mikoriza

Parameter Bangka Tengah (MIBATH)
0 gr 2.5 gr 5 gr 10 gr
Tinggi tanaman (cm) 35.5 37.4 32.8 31.8
Jumlah daun 22.25 22.2 18.8 15
Kandungan klorofil (%) 42.7 40.14 39.6 46.8
Panjang akar (cm) 21.257 19.1 19.2 16.5
Berat basah tajuk (gram) 9.725 11.74 8.02 6.78
Berat kering tajuk (gram) 1.35 1.6 1.07 0.94
Berat basah akar (gram) 2.75 2.88 2.54 2.4
Berat kering akar (gram) 0.425 0.54 0.44 0.48

Berdasarkan hasil penghitungan data penelitian menggunakan

ANOVA, diketahui bahwa pemberian fungi mikoriza arbuskula (FMA) tidak
berpengaruh nyata pada taraf 5% terhadap pertumbuhan tanaman kangkung
(Ipomoea reptans) pada semua parameter, yaitu tinggi tanaman, jumlah daun,
kandungan klorofil, panjang akar, berat basah dan berat kering tajuk, serta
berat basah dan berat kering akar.
Tidak adanya pengaruh nyata pada semua parameter kemungkinan
disebabkan oleh beberapa hal, yaitu (1) kondisi inokulum yang digunakan, (2)
waktu penanaman yang sebentar, (3) pemberian pupuk NPK (16:16:16) yang
berpengaruh buruk terhadap kolonisasi FMA, (4) kandungan air yang normal
menyebabkan hifa eksternal FMA kurang berkembang dan (5) tidak dilakukan
pengujian kolonisasi FMA pada akar tanaman kangkung, sehingga konsentrasi
zeolit inokulum FMA yang semakin besar belum tentu menghasilkan
kolonisasi yang semakin padat.
Menurut Chalimah et al. (2007), kondisi inokulum yang dimaksud
adalah infektivitas dan efektivitas inokulum yang selalu memberikan respon
berbeda terhadap tumbuhan inang. Infektivitas adalah jumlah akar tanaman
yang terinfeksi oleh FMA tanpa melihat kemampuan menginfeksi dan
penyebaran hifa jenis lain. Infektivitas sangat bergantung pada jumlah
inokulum atau kepadatan inokulum. Menurut Delvian (2005), setidaknya ada
empat faktor yang berhubungan dengan keefektivan dari suatu spesies FMA,
(a) kemampuan FMA untuk membentuk hifa yang ekstensif dan penyebaran
hifa yang baik di dalam tanah, (b) kemampuan FMA untuk membentuk
infeksi yang ekstensif pada seluruh sistem perakaran yang berkembang dari
suatu tanaman, (c) kemampuan dari hifa FMA menyerap fosfor dari larutan
tanah, dan (d) umur dari mekanisme transport sepanjang hifa ke dalam akar
tanaman.
Dalam penelitiannya Hayman (1982) mengungkapkan, bahwa
pemupukkan N berpengaruh buruk terhadap populasi FMA. Petak yang tidak
dipupuk mengandung jumlah spora 2 hingga 4 kali lebih banyak dan derajat
kolonisasi 2 hingga 4 kali lebih tinggi dibandingkan dengan petak yang
menerima pemupukkan.
Menurut Moreira et al. (2007), adanya hifa eksternal menyebabkan
tanaman ber-FMA lebih mampu mendapatkan air daripada tanaman yang
tidak ber-FMA. Tanaman bermikoriza juga lebih tahan terhadap kekeringan
karena mikoriza dapat memperpanjang hifa. Hal ini tidak dapat dibuktikan
dalam penelitian ini karena dengan penyiraman rutin setiap pagi dan sore hari,
media tanam tidak akan mengalami kekurangan air. Keadaan media yang kaya
kandungan air ini menyebabkan perpanjangan hifa pada akar terinfeksi tidak
begitu berkembang.
Pada tanaman kangkung (Ipomoea reptans) sebagai kontrol, akarnya
tidak memiliki banyak serabut atau percabangan, dan pertumbuhan akar
cenderung memanjang daripada melebar kesamping dengan membentuk
serabut akar. Berbeda dengan yang terjadi pada tanaman kangkung dengan
pemberian zeolit inokulum FMA, yaitu akarnya memiliki banyak serabut, dan
pertumbuhan akar cenderung melebar dengan membentuk serabut akar. Hal
tersebut dibuktikan dengan berat kering akar tanpa perlakuan hanyalah 0.425
gram (rerata terkecil), sedangkan rerata terbesar berat kering akar didapatkan
pada tanaman dengan pemberian 2.5 gram zeolit inokulum FMA (Tabel 7).
 Gambar 4.3 Perbandingan antara akar pada kelompok tanaman kontrol
dan akar pada tanaman dengan pemberian 5 gram zeolit
inokulum FMA

Menurut Abbot dan Robson (1984), adanya fungi mikoriza sangat

penting bagi ketersediaan unsur hara seperti P, Mg, K, Fe dan Mn untuk
pertumbuhan tanaman. Hal ini terjadi melalui pembentukan hifa pada
permukaan akar yang berfungsi sebagai perpanjangan akar terutama di daerah
yang kondisinya miskin unsur hara, pH rendah dan kurang air. Akar tanaman
bermikoriza ternyata meningkatkan penyerapan seng dan sulfur dari dalam
tanah lebih cepat daripada tanaman yang tidak bermikoriza. Manfaat fungi
mikoriza ini secara nyata terlihat jika kondisi tanahnya miskin hara atau
kondisi kering, sedangkan pada kondisi tanah yang subur peran fungi ini tidak
begitu nyata (Setiadi, 2001; Lakitan, 2000).

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan
1. Fungi Mikoriza Arbuskula (FMA) adalah mikroorganisme yang memiliki
peran penting dalam ketahanan suatu ekosistem, stabilitas tanaman dan
pemeliharaan keragaman biologi.
2. Perbanyakan dan pemanfaatan FMA dilakukan dengan beberapa tahapan,
yaitu: pengambilan contoh tanah dan akar, ekstraksi spora, pembuatan
kultur penangkaran, pembuatan kultur spora tunggal, dan pemanenan.
 3. Dalam penelitian ini, pemanfaatan FMA pada tanaman kangkung
(Ipomoea reptans) tidak berpengaruh nyata terhadap tinggi tanaman,
jumlah daun, kadar klorofil, panjang akar, berat basah dan berat kering
tajuk, serta berat basah dan berat kering akar.
4. Tidak nyatanya pengaruh pemberian FMA pada pertumbuhan kangkung
kemungkinan disebabkan oleh beberapa hal, yaitu kondisi inokulum yang
digunakan, waktu penanaman yang sebentar (6 minggu), pemberian pupuk
NPK (16:16:16) yang berpengaruh buruk terhadap kolonisasi FMA, dan
kandungan air yang normal menyebabkan hifa eksternal FMA kurang
berkembang.
B. Saran
1. Untuk melihat pengaruh pemberian FMA pada tanaman, sebaiknya waktu
penanaman lebih dari 3 bulan. Semakin lama waktu penanaman maka
akan semakin baik untuk melihat asosiasi antara fungi mikoriza arbuskula
dengan tanaman inangnya.
2. Sebaiknya dilakukan pengujian viabilitas inokulum sebelum digunakan,
sehingga dapat diketahui dengan pasti keadaan inokulum FMA.
 DAFTAR PUSTAKA

Abbot, L.K. dan Gazey, C. 1994. An Ecological View of The Formation of VA

Mycorrhizas. Plant and Soil, 159: 69.

Abbot, L.K. dan Robson, A.D. 1984. The Effect of Mycorrhizae on Plant Growth.
CRC Press, Inc. Boca Raton. Florida.

Al-Karaki, G., B. McMichael, and J. Zak. 2003. Field Response of Wheat to

Arbuscular Mycorrhizal Fungi and Drought Stress. Mycorrhiza
doi.10.1007/s00572-003-0265-2.

Anas, I. 1992. Bioteknologi Pertanian 2. Bogor: Pusat Antar Universitas

Bioteknologi, Institut Pertanian Bogor. 187-237.

Anonimous. 1999. Phytoremediation Technologies.

http://www.phytotech.com/index.html (Diakses pada tanggal )

Auge, R. M. 2001. Water Relations, Drought and Vesicular-Arbuscular Mycorrizhal

Symbiosis. Mycorrizha 11:3-42

Batty, A.L., Dixon, K.W., Brundett, M., Sivasithamparam, K. 2001. Constraints to

Symbiotic Germination of Terrestrial Orchid Seed in A Mediterranean
Bushland. New Phytologist, 152, pp. 511-520.

Bolan, N. S. 1991. A critical review on the role of mycorrizhal fungi in the uptake of
phosphorus by plants. Plant Soil 134: 189-207.

Brundett, M.C. 2004. Diversity and classification of mycorrhizal associations. Biol

Rev. 78:473 – 495.

Brundett, M.C., Bougher, N., Dell, B., Grove, T., Malaczuk, N. 1996. Working with
Mycorrhizal in Forestry and Agriculture. Canberra: Australian Centre for
International Agriculture Research.

Chalimah, S., Muhadiono, Aznam, L., Haran, S. dan T. M Nurita. 2007. Perbanyakan
Gigaspora sp. dan Acaulospora sp. dengan Kultur Pot di Rumah Kaca.
Bogor: Institut Pertanian Bogor.

Daniels, B.A. and J.M. Trappe. 1980. Factors affecting spore germination of
vesicular-arbuscular mycorrhizal fungus, Glomus epigaeus. Mycologi. 72 :
457-463.
Delvian. 2005. Respon Pertumbuhan dan Perkembangan Cendawan Mikoriza
Arbuskula dan Tanaman terhadap Salinitas Tanah. Universitas Sumatera
Utara, Medan.

Doggett, H. 1970. Sorghum. Longmans Publisher, London. P.187.

Eom, A.H., Hartnett, D.C., Wilson, G.W.T. 2000. Host Plant Species Effects on
Arbuscular Mycorrhizal Fungal Communities in Tallgrass Prairie. Oecologia.
122:435 – 444.

Ervayenri. 1998. Studi Keanekaragaman dan Potensi Inokulan Cendawan Mikoriza

Arbuskula (CMA) di Lahan Gambut (Studi Kasus di Kabupaten Bengkalis,
Proponsi Riau). Tesis. Program Pasca Sarjana IPB. Bogor.

Gadkar, H. dan Vijay, H. 2001. Arbuscular Mycorrhizal Fungal Colonization Factors

Involved in Host Recognition. Plant Physiology. 127: 1439-1499.

Gunawan, Agustin Widya. 1993. Bahan Pengajaran Mikoriza Arbuskula. Pusat

Antar Universitas Ilmu Hayat. Institut Pertanian Bogor. Bogor. Hal. 174.

Gupta, R., and K. G. Mukerji. 2000. The Growth of VAM Fungi Under Stress
Conditions, In M. Singh, ed. Mycorrizhal Biology. Kluwer Academic, New
York, Boston, Dordrecht, London, Moscow.

Hasanudin. 2002. Peningkatan Ketersediaan Serapan N dan P serta Hasil Tanaman

Jagung Melalui Inokulasi Mikoriza, Azotobakter dan Bahan Organik pada
Ultisol. Jurnal Ilmu Pertanian Indonesia 5(2): 83-89.

Hayman, D.S. 1970. Endogone Spore Numbers in Soil and Vesicular Arbuscular
Mycorrhiza in Wheat as Influenced by Season and Soil Treatment. Trans. Br.
Mycol. Soc. 54: 53-63.

Herryawan, K. M. 2012. Perbanyakan Inokulum Fungi Mikoriza Arbuskula (FMA)

Secara Sederhana. Pastura Vol. 2 No. 2 :57-60. Fakultas Peternakan
Universitas Padjajaran.

INVAM. Classification of Glomeromycota. Diakses pada tanggal 28 Agustus 2014,

http://www.invam.wvu.edu/the -fungi/classification.

Islami, T dan Utomo, W. H. 1955. Hubungan Tanah, Air, dan Tanaman. Semarang:
IKIP Semarang Press.
Jeffries, P., Ginaninazzi, S., Perotto, S., Turanu, K. and Barea, M. 2003. The
Contribution of Arbuscular Mycorrhizal Fungi in Sustainable Maintenance of
Plant Health and Soil Fertility. Biology and Fertility of Soils 37: 1-16.

Kabirun, S. 2002. Tanggap Padi Gogo terhadap Inokulasi Mikoriza Arbuskula dan
Pemupukan Fosfat di Entisol. Jurnal Ilmu Tanah dan Lingkungan 3(2): 49-56.

Kabirun, S. (t.t). Diktat Perkuliahan ‘Mikoriza’.

Kartika, Y., A. Nurbaity, B. N. Fitriatin, dan E. Trinurani Sofyan. 2014. Efek

Sterilisasi dan Komposisi Mikoriza Arbuskula (MA) dan Mycorrhizal Helper
Bacteria (MHB) terhadap Jumlah Spora MA, Populasi MHB, dan Nisbah
Pupus Akar Sorgum (Sorghum bicolor). Agric. Scl. J. Vol. 1(4): 262-268
(2014).

Khan, A.G., C. Kuek., Chaudrhry., C.S. Khoo dan W.J. Hayes. 2000. Role of Plant,
Mycorrhizae and Phytochelator in Heavy Metal Contaminated Land
Remediation. Chemosphere 41:197-207.

Moreira et al. 2007. Biodiversity and distribution of arbuscular mycorrhizal fungi in

Araucaria angustifolia forest. SCIENTIA AGRICOLA. 64(4):393-399.

Musfal. 2008. Efektivitas Cendawan Mikoriza Arbuskula (CMA) terhadap Pemberian

Pupuk Spesifik Lokasi Tanaman Jagung pada Tanah Inceptidsol. Tesis,
Universitas Sumatera Utara. 79 hlm.

Norland, M. 1993. Soil Factor Affecting Mycorrizhal use in Surface Mine

Reclamation. Bureu of Mines Information Circular. United States Department
on The Interior.

Nurmala, S.W.T. 1998. Sumber Karbohidrat Utama. Jakarta: Rineka Cipta. Hlm. 93.

Nusantara AD, Bertham YH, dan Mansur I. 2012. Bekerja dengan Fungi Mikoriza
Arbuskula. Bogor: SEAMEO BIOTROP.

Oehl, F., Sieverding, E., Ineichen, K., Mader, P., Wiemken, A., Boller, T. 2009.
Distinct sporulation dynamics of arbuscular mycorrhizal fungal communities
from different agroecosystem in long-term microcosms. Agric Ecosyst
Environm 134:257 – 268.

Panjaitan, Sorba. 2008. Fitoremediasi. http://fitoremediasi.blogspot.com/search.01

April 2009
Prematuri, R., dan Noor Faiqoh. 1999. Produksi Inokulum Cendawan Mikoriza
Arbuskula. Laboratorium Bioteknologi Hutan, PAU Biotknologi IPB.

Prihastuti et al. 2010. Isolasi dan Karakterisasi Mikoriza Vesikular-Arbuskular di

Lahan Kering Masam, Lampung Tengah. Berk. Penel. Hayati: 12 (99-106).

Priyanto, B. dan Prayitno, J. 2006. Fitoremediasi sebagai Sebuah Teknologi

Pemulihan Pencemaran, Khususnya Logam Berat.
http://ltl.bppt.tripod.com/sublab/lfloral.htm (diakses pada tanggal 1 November
2014).

Redecker, D., A. Schüβler, H. Stockingher, S. Stümer, J. Morton, and C. Walker.

2013. An evidence-based concensus for the classification of arbuscular
mycorrhizal fungi (Glomeromycota) Mycorrhiza doi:10.1007/S00572-013-
0486.y.

Rismunandar. 1989. Mendayagunakan Tanaman Rumput. Bandung: Sinar Baru.

Rukmana, Rahmat. 1995. Bertanam Kangkung. Yogyakarta: Kanisius.

Salt D. E., Smith R. D., dan Raskin I. 1998. Phytoremediation. Annual Revolution
PlantPhysiology,49:643648.hhtp://lbewww.epfl.ch/COST837/WG2_abstracts.
html (Diakses 1 Oktober 2014)

Santoso, B. Hieronymus. 1992. Sereh Wangi Bertanam dan Penyulingan. Yogyakarta:

Penerbit Kanisius.

Setiadi, Y. 2000. Pengembangan Cendawan Mikoriza Arbuskula sebagai Alat

Biologis untuk Merehabilitasi Lahan Kritis di Indonesia. Prosiding Seminar
Peranan Mikoriza dalam Pertanian yang Berkelanjutan. 28 September 2000,
Universitas Padjajaran Bandung.

Smith, S.E. and D.J. Read. 2008. Mycorrizhal Symbiosis. Third Edition : Academic
Press. Elsvier Ltd. New York, London, Burlington, San Diego. 768 p.

Struble, J. E. and Skipper, H. D. 1988. Vesicular arbuscular mycorrhizal fungal spore

production as influenced by plant species. Plant Soil 109 :1194-1196.

Suprapto dan R. Mudjisihono. 1987. Budidaya dan Pengolahan Sorgum. Jakarta:

Penebar Swadaya.

Tarafadar, J.C. dan Rao, A.V. 1997. Response of Arid Legumes to VAM Fungal
Inoculation. Symbiosis, v.22, p. 265-274.
Thomas, J.C., K.W. Brown and W.R. Jordan. 1976. Stomata Response to Leaf Water
Potential as Affected by Preconditioning Water Stree in The Field. Agron. J.,
68:706-708.

TN22102/Rem/ES 2.2.1/III/2013. Pengambilan Sampel Tanaman di Area Sekitar

Kolong Nibung, Jongkong, Kayu Ara. Kabupaten Bangka Tengah.

Tropical Forages. Pueraria phaseoloides.

(http://www.tropicalforages.info/key/Forages/Media/Html/Pueraria_phaseoloi
des.htm)

Vierheilig, H., Lerat, S., Piche, Y. 2003. Systemic Inhibition of Arbuscular

Mycorrhizal Development by Root Exudates of Cucumber Plants Colonized
by Glomus mosseae. Mycorrhiza. 13: 167-175.

Vogelsang, K.M, dan Bever, J.D. 2009. Mycorrhizal densities decline in association
with nonnative plants and contribute to plant invasion. Ecology.90:399 – 407.

Yanuwar, W. 2002. Aktivitas Antioksidan dan Imunomodulator Serealia Non-Beras.

Institut Pertanian Bogor.
 LAMPIRAN

Lampiran 1. Perbandingan tanaman kangkung (Ipomoea reptans) tanpa

perlakuan dan dengan pemberian inokulum FMA

Tanaman kangkung tanpa pemberian inokulum FMA (kontrol)

Tanaman kangkung dengan penambahan 2.5 gram zeolit inokulum mikoriza Bangka
Tengah (MIBATH)

Tanaman kangkung dengan penambahan 5 gram zeolit inokulum mikoriza Bangka

Tengah (MIBATH)
Tanaman kangkung dengan penambahan 10 gram zeolit inokulum mikoriza Bangka
Tengah (MIBATH)
Lampiran 2. Hasil Panen Inokulum Mikoriza Bangka Tengah (MIBATH)
Lampiran 3. Perbanding kondisi akar dan tajuk tanaman kangkung (Ipomoea
reptans) dengan dan tanpa perlakuan