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Microbiología
1
Catabolismo de nutrientes
• Proporciona:
– Energía
– Electrones
– Átomos
Prescott, 5th ed 2
Prescott, Harley and Klein 3
Trabajo Químico
reacciones reacciones
exergónicas endergónicas
A+B C+D
A+B C+D Keq < 1
Keq >1 Go positiva
Go negativa (reacción no espontánea)
(reacción espontánea)
4
Trabajo Químico
5
Trabajo Químico
6
Transporte a través de
membrana
7
Trabajo Mecánico
8
Almacenamiento de la energía
• Monedas energéticas
– Moléculas de alta energía y potencial de
transferencia de grupo
9
Clase Ejemplo ΔG (pH 7,
Kcal/mol)
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Uso de los electrones y C
• Anabolismo
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Fuentes de C:
Autótrofos CO2
Heterótrofos Compuestos orgánicos
Fuentes de energía:
Fotótrofos Luz
Quimiótrofos Oxidación compuestos
orgánicos e inorgánicos
Fuentes de e-:
Litótrofos Compuestos inorgánicos
reducidos
Compuentos orgánicos
Organótrofos reducidos
12
13
Prescott, Harley and Klein
Prescott, Harley and Klein
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Respiración
• Membrana
• Cadena de transporte de electrones
• Aeróbica o anaeróbica
• Aceptor de electrones exógeno
• Síntesis de ATP por fosforilación
oxidativa
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Transportadores de electrones móviles
• NAD
– “Nicotinamide
adenine dinucleotido”
• NADP
– “Nicotinamide
adenine dinucleotido
phosphate”
• FAD
– “flavin adenine
dinucleotido”
• FMN
– “flavin
mononucleotido “
– Fosfato de
riboflavina
riboflavina
20
Potencial de reducción estandar (E0)
• Estándar de referencia:
• 2H + + 2e- ↔H 2
Go más negativa
Figure 8.7
Diferencia grande
entre E0 de NADH
y E0 de O2
• Flavoproteínas
• Proteínas Fe/S o FeS
• Citocromos
Quinonas
Proteínas Lípidos
Proteínas transportadoras de e-
• Oxidoreductasas
• Constituidas por una parte proteica y una
no proteica (grupo prostético)
• El grupo prostético transporta electrones
• El grupo prostético puede o no, transportar
hidrógeno
Flavoproteínas
Quinonas:
•Altamente movibles en la fase lipídica de la
membrana
•Cargan protones y electrones de una cara a
la otra cara de la membrana.
•Dos tipos en bacterias:
-ubiquinonas (respiración aérobica)
-menaquinonas (respiración anaeróbica)
Transportadores estructurales lipídicos
• Coenzima Q
(CoQ)
– quinona
– también
llamada
ubiquinona
• 2 e-, 2 H+
Figure 8.11
Fosforilación Oxidativa
• Hipótesis quimiosmótica
– “Energía liberada durante el transporte
de electrones es utilizada en el
establecimiento de un gradiente de pH y
una diferencia de carga a través de la
membrana”
– Fuerza protónica motriz {proton motive
force (PMF)}
movement of ATP synthase
protons uses proton
establishes flow down
PMF gradient to
make ATP
Figure 9.17
Transportadores no móviles o
estructurales
35
37
Figure 9.19a
Figure 9.19b
Inhibidores de la síntesis de ATP
• Bloqueadores
– Inhiben el flujo de electrones a través de la
cadena
• Desacopladores (uncouplers)
– permiten el flujo, pero lo deconectan de la
fosforilación oxidativa
– muchos permiten el movimiento de iones sin
activar la ATP sintetasa
• destruyen gradientes de pH y de iones
– algunos se unen a la ATP sintetasa y la inhiben
Remoción de oxigeno
Adición de Cianuro
Adición de Cianuro
Desacopladores
Desacopladores
Cadena transportadora de electrones en
procariotes
O → O2
O→ O2
Dehidrogenasas
• Dependiendo de la fuente de e-:
– NADH y succinato dehidrogenasas
– H2 dehidrogenasas
– Formato dehidrogensas
– Lactato dehidrogenasas
– Metanol dehidrogenasas
– Metilaminadehidrogenasas
Paracoccus denitrificans - aeróbica
Figure 9.16a
Cadena de transporte de e- en E. coli
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Rendimiento energético
• En procariotes, depende:
– Puntos de acople
– Tipo de citocromos empleados
– Aceptor final de e-
– Eficiencia de la ATP sintetasa
51
52
Los organismos que respiran
también pueden obtener
energía por fosforilación a
nivel de sustrato (SLP)
FAS
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Prescott, Harley and Klein
Respiración anaeróbica
54
ETC de P. denitrificans - anaeróbica
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Prescott, Harley and Klein 57
Fermentación
• Quimioorganoheterótrofos
– Azúcares, aminoácidos, ácidos
orgánicos, nucleótidos
• Aceptores de e- endógenos:
– Oxaloacetato, piruvato, Acetil-CoA,
acetona, aldehidos, etc
Prescott, Harley and Klein 59
Fermentación
• Características de grupos microbianos:
– Bacterias, hongos, algas, protozoarios
• Utilidad:
– Identificación y clasificación
• No se necesita O2
• Citosol:
– No depende de membrana
• Obtención de energía
– Fosforilación a nivel de sustrato
Fosforilación a nivel de sustrato:
ADP ATP
NAD+ NADH
Gliceraldehído- 1,3-bifosfo-
3-fosfato 3-Fosfoglicerato
glicerato
fermentación
homoláctica alcohólica
heteroláctica
daño de la
comida
yogurt,
encurtidos, etc.
• Reacción de
Stickland
– Oxidación de un
amino ácido,
usando un
segundo
aminoácido como
aceptor de
electrones
Test de Voges-Proskauer –
detección de acetoína
Tests:
Rojo de metilo y Voges-
Proskauer permiten distinguir
Enterobacteriaceae sp patógenas
Pueden células que no respiran generar
fuerza protónica motriz?
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Condiciones Tipo de ATP/ molécula
Proceso de crecimiento fosforilación de glucosa
• Fotosíntesis:
– Oxigénica
– Anoxigénica
• Fototrofía basada en rodoxina
Organismos Fotosintéticos
Eucariotes Procariotes
Plantas Cianobacterias
Algas verde-azuladas
Algas multicelulares: Bacterias verdes
Verdes sulfurosas
Cafés Bacterias verdes no
Rojas sulfurosas
Algas unicelulares: Bacterias púrpuras
Euglenoides sulfurosas
Dinoflagelados
Fotosíntesis Bacterias púrpuras no
oxigénica – eucariotes y cianobacterias
Diatomeas sulfurosas
Prochloron
Fotosíntesis anoxigénica – las otras bacterias
“Sea squirts",
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http://microbewiki.kenyon.edu/index.php/Prochloron
Estadíos
Luz Oscuridad
ADP+P→ATP
Fijación de CO2
NADP+ →NADPH
Fotosíntesis oxigénica
Prescott
Pigmentos:
Pigmentos accesorios:
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Fotosíntesis anoxigénica
ATP
Luz
2e-
6CO2+12H2S+Luz → C6H12O6+6H2O+12 S
Bacteria púrpura no sulfurosa
electron source for
generation of NADH
by reverse electron
flow
Bacteria verde sulfurosa
Bacterias fotosintéticas verdes y
púrpuras
• No hay producción directa de NADPH
• Se usan donores de e- con Eo más negativo
que el H2O
• Bacterioclorofilas
• Carecen del fotosistema II (anaerobios>)
• Cuatro grupos:
– Verdes sulfurosas, Chlorobium
– Verdes no sulfurosas, Chloroflexus
– Púrpuras sulfurosas, Chromatium
– Púrpuras no sulfurosas, Rhodospirillum
Propiedades Eucariotes Cianobacterias Bacterias púrpuras y
verdes, heliobacterias
Pigmento Clorofila a Clorofila a Bacterioclorofila
fotosintético
Fotosistema II Presente Presente Ausente
Donadores de e- H2O H2O H2, H2S, S, materia
orgánica
Patrón de Oxigénica Oxigénica Anoxigénica
producción de
O2
Productos ATP+NADHP ATP+NADHP ATP
Fuente de CO2 CO2 Orgánica/CO2
carbono
84
Rxs oscuridad
Peroxisomas
86
Fototrofía basada en rodopsina
87