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CURSO DE ASISTENTE DE LABORATORIO CLÍNICO

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COPROA ALISIS

¿Qué es el Coproanálisis?
Es la identificación de parásitos y protozoarios, así como de otras anomalías gastrointestinales en materia fecal.

Heces: Son el resultado de la ingesta de los jugos digestivos dependiendo del tipo de alimentación.

Peristaltismo Intestinal: Varía según la alimentación con régimen cárnico, de 50 a 100 g/24h; con
régimen vegetariano de 250 a 400 g/24h; finalmente, en régimen mixto, de 100 a 200 g/24 h. Todo ello por día
y en una sola deposición.

Diarrea: Se puede definir la diarrea, dejando a un lado otras muchas definiciones, como la eliminación fecal
que excede los 200 g por día, cuando el contenido de la dieta en fibras es bajo. El agua es el principal
componente, siendo su contenido de aproximadamente un 65%, y el resto por bacterias, nitrógenos, alimentos.

Recolección de la muestra:

Un envase para las heces


Las heces no deben contaminarse con la orina, ni agua.
Se debe recoger una porción de heces de 2 a 5 gr.
En caso de heces diarreicas, se recomienda utilizar los envases de orina.
En los lactantes, las heces se pueden recolectar directamente del pañal desechable o también,
directamente del recto con un aplicador.
Si hay moco y sangre en las heces, deben recogerse preferiblemente de esa parte.
En caso de estreñimiento, se le indica al paciente una dieta rica en fruta y fibras.
Evitar laxantes aceitosos.
Evitar medicamentos, tales como: antidiarreico o antibióticos.

METODOLOGIA A SEGUIR PARA EL ANÁLISIS DE MUESTRAS DE HECES

1. Características macroscópicas o físicas

• Consistencia: Normalmente es pastosa – dura. Puede modificarse en distintas


circunstancias. En las diarreas la consistencia es líquida. En cantidad abundante,

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Dra. Gladys Becerra Depablos, Lcda. Senaida Dávila, Lcda. Luz Yadira Orozco
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cuando se deben a patología del intestino delgado; Escasas y mucosas si proceden del
intestino grueso.
Las deposiciones semiblandas indican un tránsito rápido por el intestino delgado o son
propias de las afecciones pancreáticas o biliares. En el estreñimiento son duras, en
forma de grandes bolos en la atonía, y acintadas en las obstrucciones mecánicas.

• Color:
Pardo. Durante la lactancia, amarillo. Se tornan verdes, por la acción del aire en la
lactancia natural.
Son oscuras, si contienen gran cantidad de pigmentos biliares, (descargas biliares e
ictericia hemolítica); pero son aún más oscuras y de aspecto alquitranado cuando
contienen sangre de procedencia alta (si la sangre es de procedencia baja, es de color
rojo y no bien mezclada) y en pacientes en tratamiento con sales de hierro. El color
claro es típico de las heces acólicas, y en este caso suelen contener mucha grasa no
emulsionada. De color amarillo pardo, pero con gran contenido en grasa, en las
esteatorreas de origen pancreático (conteniendo pigmentos biliares). El color verde es
propio de las diarreas de fermentación del niño. El color negro por medicamentos
como el hierro, también por hemorragias en el tubo digestivo y alimentos como el
hígado, remolacha, etc.

• Moco:
Su presencia en las heces es propia de los estados inflamatorios (enteritis y colitis),
pero también se presenta en el Síndrome de Intestino Irritable, en el que no hay
inflamación.

• Pus:
Se presenta en pequeñas cantidades en la enteritis y colitis de cualquier etiología.

• Sangre:
Muy frecuente en la enteritis y la colitis; aparece en cantidades pequeñas y mezcladas
con moco – pus. Si procede de las porciones altas del intestino, se presenta bien

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mezclada con las heces y suele ser negruzca, aun cuando puede persistir roja, si el
tránsito intestinal ha sido muy rápido. Si la sangre va mal mezclada con las heces,
sugiere una procedencia baja. En ausencia de enteritis o colitis, o en general, de
cualquier infección intestinal, la presencia de sangre hará sospechar una lesión de la
mucosa (ulcera, tumor, angiodisplasia, etc.) o también en una enfermedad hemorrágica.

• Olor:
Se puede reportar como olor fecal u olor fétido; dependiendo del tipo de heces.

• PH:
Normalmente el pH es alcalino; se determina con papel tornasol, solo se le realiza a las
heces liquidas. En un enfermo con diarrea, un pH fecal < 5,3 sugiere que la causa es
una mala absorción de hidratos de carbono, con aumento de las fermentaciones en la
luz intestinal. Cifras superiores a 5,6 indican que probablemente existe una mala
absorción más generalizada; cuanto mayor es el pH, mayor es la concentración de sales
biliares.

2. CARACTERISTICAS QUIMICAS
La presencia de alimentos sin digerir o mal digeridos, es prueba de una perturbación en el
proceso normal de la ingestión.

• Grasas:
Se mide por el método de Van de Kamer, en una muestra de heces recogidas durante
72 horas tras seguir una alimentación con un contenido normal de grasa.

• Compuestos nitrogenados:
El contenido en nitrógeno es de 0,5 a 2,5 gr/24 hrs, lo que varía en relación con la dieta
y especialmente en las enfermedades que afectan a la digestión proteica. A veces,
pueden encontrarse fibras musculares incompletamente digeridas. Los residuos
cárnicos son frecuentes en la hiposecreción gástrica.

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Las heces de los lactantes suelen contener tripsina, cosa que no ocurre en niños
mayores, ni en adultos. La alfa 1-antitripsina se halla a concentraciones de 0,98 mg/g
de peso de heces secas.

• Hidratos de Carbono:
Los glúcidos pueden encontrarse en casi todas las enteropatías y síndromes de mala
absorción. En varias enzimopatías se encuentran azúcares sin desdoblar.

• Calcio:
Se eliminan unos 600 mg/24 Hrs. Esta cantidad aumenta en la deficiencia de la
vitamina D, con dietas ricas en fosfatos y ácidos fiticos, y en general, en los síndromes
de mala absorción... Disminuye en las dietas pobres en calcio y fosfatos, así como en el
hiperparatiroidismo.

• Electrolitos:
La determinación de sodio y potasio en heces, tienen interés para diferenciar diarreas
osmóticas, de diarreas secretoras. En primer lugar debe calcularse la osmolalidad fecal
mediante la fórmula:

Osmolalidad (mOsm/kg) = (Na + K) x 2

Se considera normal un valor equivalente al del plasma, de 290 mOsm/kg.


El anión – gap o hiato osmótico, se calcula restando el valor obtenido del valor normal.
Es elevado ( > 125 mOsm/kg) en la diarrea osmótica pura, y bajo ( < 50 mOsm/kg) en
la diarrea secretora pura.

• Urobilinógeno:
De 40 a 280 mg/día. Aumenta en las ictericias hemolíticas. Disminuye en la
obstrucción biliar y en ciertas hepatopatías, así como la administración de tetraciclinas.

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• Coproporfirinas:
De 400 a 1000 µg/24 h. Aumenta en las hepatopatías y en la porfiria cutánea tarda
(PCT), además de en algunas porfirinuria secundarias.

3. EXAME, MICROSCOPICO

METODO CUALITATIVO:

DIRECTO: Consiste en examinar entre lámina y laminilla una pequeña cantidad de


materia fecal, en una gota de líquido de ssf al 0,85% y solución de yodo (lugol).

Preparación de ssf al 0,85%


• Cloruro de Sodio 0,85 gr
• Agua destilada 1000 cc
Disolver el Cloruro de Sodio en agua destilada; rotular y mantener en nevera.

Preparación del Lugol:


• Yodo 1 gr
• Agua destilada 100 cc
• Yoduro de potasio 2 gr.
Se disuelve el yoduro de potasio en agua, poco a poco se le añaden los cristales de yodo,
se agita hasta disolver completamente y se coloca en un frasco color ámbar.

Materiales para la preparación de la muestra de heces:


• Laminas
• Laminillas
• Aplicadores de madera
• Solución salina
• Lugol
• Guantes
• Tapa boca
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Procedimiento:
• Rotular el recolector y la lámina.
• Agregar una gota de lugol y una gota de solución salina en la misma lamina.
• Mezclar las heces con el aplicador de madera
• Anotar las características macroscópicas
• Cubrir ambas preparaciones con una laminilla de 22 x 22 evitando la malformación
de burbujas.

METODO DIRECTO DE QUE,SEL:


Se usa como una forma rápida y fácil para la identificación de trofozoitos y quistes de
amiba histolitica.

Materiales para la preparación del colorante Quensel:


• Solución alcohólica sudan III 20 cc
• Solución de azul de metileno 30 cc
• Solución de cloruro de cadmio 50 cc

Preparación del colorante:


• Se mezcla la solución de sudan III y azul de metileno en una matraz.
• Se le añade el cloruro de cadmio
• Agitar de 15 a 20 min.
• Filtrar y dejar en reposo hasta el día siguiente.
• Se vuelve a filtrar
• Se lava con 20 a 25cc de agua destilada,
• El precipitado lavado se disuelve en 250 cc de agua y luego se mezcla todo y se envasa.

Técnica de Quensel:
• En una lámina se coloca una gota de Quensel
• Con un aplicador de madera se toma una pequeña cantidad de muestra, mezclar.
• Colocar una laminilla
• Dejar en reposo por 3 minutos.
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METODO DE KATO
Es un método de aclaración utilizado para el diagnóstico de helmintiasis intestinales.
• Solución de Kato
• Glicerina 500 cc
• Verde de malaquita al 3% 6cc
• Agua destilada 450 cc; y completar hasta 1000 cc con agua destilada.
• Envasar en frasco color ámbar.
• Papel 325 – 1 o papel celofán importado: puede ser de color trasparente.
• Recortar el papel celofán en pequeños rectángulos más o menos de 22 x 40 mm
• Colocar en la solución de kato 24 horas antes de ser usados.

Técnica de Kato:
• Con el aplicador de madera, colocar una pequeña cantidad de heces en el centro de la
lámina previamente rotulada.
• Con la pinza tomar un pequeño rectángulo del papel de Kato, previamente humedecido.
• Cubrir la muestra de heces con el papel
• Invertir la preparación sobre un papel absorbente y hacer presión con el dedo pulgar para
que la muestra se extienda.
• Se coloca sobre una lámpara de Word por 5 minutos para clarificar.

METODO DE GRAHAM
Es un método para investigar oxiuros. Se utiliza para aquellos parásitos, que no realizan la
ovipostura en la luz intestinal, ejemplo Enterobius vermicularis (oxiuros), hacen su ovipostura
en la región perianal donde quedan los huevos adosados, y con la ayuda de la cinta adhesiva
transparente se recogen los minúsculos huevos.

Recomendaciones al paciente:
• Cuando se trata de niño, se le indica a la madre, como se debe tomar la muestra.
• El paciente no debe bañarse hasta tomar la muestra, ni evacuar (en la mañana del dia que
va a tomar la muestra y a llevar al laboratorio).
• Tomar un minimo de cinco (5) muestras en cinco días consecutivos.
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Procedimiento para la toma de muestra:
• En el extremo del bajalengua o tubo de ensayo, colocar la cinta adhesiva con la parte
pegante hacia afuera.
• Abrir ambos glúteos con los dedos pulgar e índice de la mano izquierda, y con la mano
derecha tomar la muestra en la región perianal, ejerciendo cierta presión y tocando varias
veces esta región para asegurarse que ha tomado suficiente material.
• La parte adherente se coloca en la lámina (esta se le entrego previamente a la madreo al
paciente)
• En una superficie plana extender la cinta, evitado que se formen burbujas de aire.
• En el extremo de la lámina debe ir la identificación del paciente y la edad.
• Se lleva al laboratorio.

METODO DE CO,CE,TRACIO, DE WILLIS

Reactivos:
• Solución saturada de Nacl (Cloruro de Sodio) 31,5 gr
• Agua destilada 89 cc

Técnica:
• En un tubo de ensayo colocar 1 gr de heces , de 10 a 20 cc de solución saturada de Nacl y
agitar
• Pasar la mezcla a través de un colador para separar las partículas de grasa.
• El filtrado se recoge en un recipiente cilíndrico y de diámetro 2,5 cm
• Se llena el envase con solución de cloruro de sodio hasta la parte superior del cilindro.
• Se deja en reposo la mezcla por espacio de 30 minutos.
• Colocamos una laminilla sobre la superficie del menisco, hasta que el material
acumulado se adhiera a la laminilla
• Se coloca la laminilla sobre un portaobjeto y se observa al microscopio.

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Existen otros métodos como el método de Graham, para la investigación de oxiuros; y el
método de concentración de corriente, para observar formas evolutivas de protozoarios, huevos
y larvas de helmintos.

SA,GRE OCULTA E, HECES

Existen dos métodos para esta investigación:


• Bencidina
• Test rápido (Hema-screen, Hema-test).

La investigación de la sangre oculta en heces adquiere valor cuando se encuentran en pequeñas


cantidades, por eso es llamada oculta y se debe descartar la posibilidad que el cambio de color
se deba a ingesta de alimentos.

Para evitar esto se le recomienda al paciente:


• No ingerir carnes rojas, por lo menos tres días antes de la recolección de muestras para el
examen.
• No ingerir vegetales verdes, tres días antes de la recolección de la muestra.
• No ingerir: remolacha, rábano, pimentón, tomate, plátano, etc, tres días antes de la
recolección de la muestra.
• No ingerir medicamentos que contengan hierro, vitamina C, esteroides.
• No se debe tomar la muestra, teniendo la menstruación.
• Si el paciente no cumplió lo anterior, debe reportarse para tenerlo en consideración al
momento del resultado.

Para determinar la sangre en pequeñas cantidades en una muestra fecal, se hace necesaria
identificarla, a través del uso de sustancias que reaccionen con la hemoglobina, como la
bencidina que al ponerse en contacto con el peróxido de hidrogeno, da como resultado un
determinado color, el cual indicara el resultado de la reacción.

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Técnica de Bencidina:

Reactivos:
• Bencidina al 1%
• Ácido acético al 50%
• Agua oxigenada

Técnica:
• Sobre un papel filtro se agrega unas gotas de bencidina y seguidamente unas gotas de
agua oxigenada.
• Se deja reposar por un minuto: si se forma un halo azulado en el papel filtro es positiva la
reacción, y negativo cuando NO se forma el halo.
• Actualmente existe en el mercado un reactivo ya preparado, llamado Hematest.

Existen otras pruebas como los azucares reductores para determinar absorción intestinal y el
sudan III para la detección de grasas neutras; también se utiliza cuando hay problemas de
absorción intestinal.

INDICACIONES PARA REALIZAR CONCENTRADO DE HECES


(PARA EL PACIE,TE)

Colocar tres (3) muestras de heces diferentes, es decir de tres deposiciones, en el envase
recolector que contiene formol.
No necesita tenerlo en la nevera.
La cantidad, como un granito de maíz.
El paciente no debe tener diarrea, ni haber tomado laxantes.

Materiales a utilizar para montar concentrado de heces:

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Tubo de ensayo (especial para concentrados), embudo, gasa, solución salina fisiológica (ssf),
lugol, palitos de madera, lámina y laminillas.

Método para montar el concentrado de heces:

• Mezclar la muestra vigorosamente


• En un tubo de ensayo, filtrar la muestra (en un embudo e coloca una gasa y se filtra).
• Se centrifuga por 10 minutos
• Se descarta el sobrenadante.
• Se rotula una lámina y se prepara con una gota de solución salina fisiológica, más una
gota de lugol.
• A la lámina se le coloca una pequeña cantidad de muestra de sedimento, lo hacemos con
un palillo de madera.
• Cubrimos con las laminillas.

INDICACIONES PARA PRUEBAS DE ABSORCION INTESTINAL O AZUCARES


REDUCTORES EN HECES

,OTA IMPORTA,TE: Estas indicaciones ,O deben seguirlas en un paciente diabético.

• Consumir durante tres días seguidos azucares; lácteos y grasas, en mayor cantidad de lo
normal
• Al cuarto día, temprano en la mañana, recoger una pequeña cantidad de heces en un
recolector.
• Llevarlo de inmediato al laboratorio.

Materiales a utilizar:
• Tapabocas, guantes, gradilla, cuatro tubos de ensayo, mechero, goteros.
• Un (1) ml de ácido clorhídrico, un (1) ml de agua destilada, un (1) ml reactivo de benedic,
reactivo sudan III, laminas y laminillas.
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Método o Técnica:
• Se rotulan dos (02) tubos, con la letra S de sacarosa.
• Se rotulan dos (02) tubos, con la letra L de lactosa.
• A uno de los tubos marcados con la letra S, se le vierte un (01) ml de ácido clorhídrico
(HCL), más una pequeña cantidad de heces.
• El tubo marcado con la letra S, se pone a baño de maría por tres (03) minutos, se saca a una
gradilla y con un gotero se toman de ahí, diez (10) gotas y se colocan en un tubo con un (01)
ml de reactivo de benedic, el cual se rotula con la letra S.
• Del tubo marcado con la letra L, se sacan diez (10) gotas a un tubo con un (01) ml de
reactivo de benedic.
• Los dos tubos que contienen benedic, los colocamos por diez minutos a baños de maría, se
sacan y se colocan en una gradilla.

SUDA, III
En una lámina rotulada y bien limpia, se hace un directo, se coloca una gota de reactivo de
sudan III y se le agrega con un palito de madera una pequeña cantidad de heces, de la que el
paciente recogió para las pruebas de absorción y se le coloca una laminilla, con este
procedimiento se determinan las grasas.

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