INFORME DE PRÁCTICA EXTRACCION DE ADN

JULDY GINETH RAMON TARAZONA 1005066161, NERLY MARISOL DIAZ RAMIREZ

1005720137, NICOLL DANIELA SAENZ GUTIERREZ 1000136326

Bioquímica de alimentos, Grupo A, Departamento de alimentos, programa ingeniería de

alimentos, Universidad de Pamplona

RESUMEN
El objetivo principal de la práctica fue extraer el ADN de un banano, aplicando técnicas de
ruptura celular y solubilizacion, para poder cumplir con el objetivo de dicho laboratorio,
además de familiarizarnos con las técnicas experimentales que con lleva el estudio del ADN,
para lleva a cabo este procedimiento fue necesario la preparación de una mezcla de sustancias
como lo fueron jabón líquido, agua, bicarbonato de sodio y cloruro de sodio, llamada esta
solución de extracción, aparte de todos estos elementos fue necesario implementar el uso del
hielo, para poder tener dicha solución a temperaturas bajas para el buen funcionamiento del
resultado final de la práctica, seguidamente se realiza un licuado con la solución de extracción
y el banano hasta obtener una mezcla homogénea. Una vez se dio por terminada la práctica se
hizo uso del microscopio con el fin de visualizar mejor en ADN obtenido y así poder sacar las
mejores conclusiones de la jornada.
Palabras claves: ADN, solución de extracción.
INTRODUCCION diferentes elementos de la mezcla como lo
fue, bicarbonato de sodio, cloruro de sodio,
El ADN es una biomolecula de dos cadenas
agua y jabón líquido, dejando esta en hielo
anti paralelas constituida por un grupo
mientras se preparaba el licuado de banano
fosfato, azúcar desoxirribosa y
que se realizó con 100 mililitros de agua,
polinucleótidos, los nucleótidos que
tres veces por un tiempo determinado
presenta son cuatro, adenina, timina,
como lo fue 10*30 segundos , es decir se
guanina y citosina, el ADN está organizado
licuan 10 y se deja en reposo por 30, al
en una estructura compleja como lo es el
tener este licuado se continuo mezclando la
cromosoma. Esta biomolecula tiene como
solución de extracción y el licuado de
función principal almacenar la información
banano, siendo la solución el doble en
genética la cual es necesaria para la síntesis
volumen que el licuado, esta mezcla se llevó
de proteínas.
nuevamente a la licuadora tres veces por 2
La ruptura celular es el proceso en el cual la minutos cada pulso y se dejaba en reposo
membrana de la célula se rompe y es allí 30 segundos, luego de estar homogénea se
donde el material intracelular sale. filtró para después obtener dos mililitros de
dicha solución, a la cual se le agrego etanol
METODOLOGIA previamente frío, siendo esta la mezcla
El laboratorio se ejecutó inicialmente con la visualizadora que arrojó los resultados
preparación de la solución extracción, finales, seguidamente se obtuvo el ADN y se
haciendo el pesaje necesario para los llevó al microscopio.
 RESULTADOS Para el licuado de banano se utilizó:
Para hacer la solución de extracción se  Un banano completo
pesaron:  100ml de agua
 Bicarbonato de sodio: 5,0045g
 Cloruro de sodio: 1,5008g
 Agua: 120ml
 Jabón líquido: 5ml

Imagen3. Licuado de banano

Una vez se obtuvo la solución de extracción

y el licuado de banano se realizó la mezcla
de ambos llevándose a la licuadora
Imagen1. Solución de extracción.
nuevamente

Imagen2. Solución de extracción en frío. Imagen4. Mezcla de extracción y licuado

La mezcla se filtró para obtener 2 mililitros
a los cuales se le agregaron 2 mililitros de
etanol previamente frio. Del filtrado se
obtuvieron 2 muestras.
Se escogió la muestra 2 por cuestiones de
visualización, es decir en la muestra
numero 1 no se observó muy bien las capas
de separación del ADN, caso contrario a la
muestra numero 2 ya que esta fue más
clara.

Imagen8. Extracción del ADN

Se hizo un placa con la muestra de adn, la

cual se llevo al microscopio, dejando ver alli
parte de la cromatina.
Imagen5. Filtración

Imagen6. Muestra 1.

Imagen9. Fibras de ADN

ANALISIS DE RESULTADOS
El jabón líquido permite la emulsión de los
lípidos presentes en la membrana
Imagen7. Muestra 2. provocando su ruptura, además de esto el
jabón líquido hace que las proteínas unidas
al ADN se fraccionen en cadenas pequeñas
y hagan su separación.
El uso de cloruro de sodio hace que se
disminuya la solubilidad de las proteínas
haciendo una precipitación y separación del
ADN. Así como el hielo previene la
desnaturalización del ADN ya que este será
expuesto a energía con el proceso del
licuado, la enzima presente es la
desoxirribonluceasa, esta hace que la
reacción enzimática sea más lenta.
El alcohol en frío permite visualizar de
mejor manera el ADN y separarlo de otros
componentes celulares, cuando el ADN se
encuentra en el alcohol se desenrolla y
precipita en la interface entre el alcohol y el
agua (el ADN es soluble en agua).
El objetivo por el cual se filtró la mezcla fue
para evitar que a la hora de tomar los 2
mililitros de muestra a observar, esta
tuviera partículas sólidas lo cual quizás
desviaría nuestros resultados.
También cabe resaltar que era importante
tener nuestra solución totalmente
homogénea, es decir, que la solución se CONCLUSIONES
encuentre uniforme.
A la hora de observar en el microscopio se
evidencia la cromatina pero no se pudo
diferenciar el ADN ya que había que teñir la
muestra.
BIBLIOGRAFIA