 Desarrollar una prueba para determinar la

presencia de sales con el nitrato de plana

en ciertas muestras.
 Reconocer las características de las
pruebas realizadas.
COMPOSICÍON QUÍMICA DE
LAS CELULAS INTRODUCCIÓN

Antes de realizar la respectiva práctica, se

socializaron las normas de seguridad y el
AUTORES:
adecuado manejo de los materiales de laboratorio
 Silvia Fernanda Martínez Santamaria para evitar accidentes de trabajo.

Código: 22180476 Luego se realizaron pruebas sencillas a una

cantidad finita de muestras. Se utilizo reactivos
 Camilo Alberto Flórez Rojas específicos, con el fin de determinar
cualitativamente compuestos orgánicos,
Código: 22181096 inorgánicos y macromoléculas.

 Mario Jurado Herrera La práctica se divide en dos momentos, en el

primer momento se realizaron las reacciones
Código: 2171586 químicas entre los reactivos y las muestras y en el
segundo momento y más importante se tomaron
 Laura Andrea Rojas Palomino una serie de observaciones visualizadas en los
tubos de ensayo. Al final se tabularon los
Código: 2242747 resultados en las tablas suministradas por el
manual de prácticas de laboratorio de biología
Laboratorio de biología para realizar su respectivo análisis.
Universidad Santo Tomás

OBJETIVOS
MARCO TEÓRICO
 Determinar la presencia de
macromoléculas como azúcares, Las proteínas son macromoléculas que se
almidones, proteínas, lípidos y sales en encuentran en estado coloidal, representan más
una muestra problema. del 50 % de peso seco de la célula.

 Señalar la presencia de azucares Están compuestas por aminoácidos, existen 20

reductores con el reactivo Benedict´s en
las muestras de agua, glucosa 2%, miel
2%, almidón 0.5%, sacarosa 2% y la
muestra problema.
 Identificar la aparición de almidones con el
reactivo de Lugol en las muestras de
glucosa 2%, sacarosa 2%, almidón 2%,
extracto de papa y muestra problema.
 Realizar dos pruebas para determinar la
presencia de proteínas una con el reactivo
Biuret y la segunda con ácido nítrico.
 Elaborar la técnica del Sudam III para
identificar la presencia de lípidos en
algunas muestras.
aminoácidos diferentes que se unen entre sí por
enlaces polipeptídicos.
Un azúcar reductor es todo azúcar con un grupo
carbonilo en su estructura, el cual puede funcionar
como aldehído o cetona según su ubicación en
dicha estructura. Se llaman azúcares reductores
porque poseen la capacidad de reducir otros
compuestos gracias a la alta reactividad del doble
enlace del oxígeno.
El almidón es un polisacárido de reserva
alimenticia predominante en las plantas,
constituido por amilosa y amilopectina.
Proporciona el 70-80% de las calorías consumidas
por los humanos de todo el mundo.

Los lípidos, son un grupo de compuestos
químicamente diversos, solubles en solventes
orgánicos (como cloroformo, metanol o benceno),
y casi insolubles en agua. La mayoría de los
organismos, los utilizan como reservorios de
moléculas fácilmente utilizables para producir
energía (aceites y grasas).
Una sal es un compuesto iónico que contiene
cationes diferentes al del hidrógeno (H+) y aniones
diferente al hidroxilo (OH-). Cuando las sales se
disuelven en el agua se forman iones.
Prueba de reacción de benedit: Esta prueba sirve
para el reconocimiento de azúcares reductores.
Se basa en la reducción de Cu2+ a Cu+ en medio
básico débil. Aunque es similar a la reacción de
Fehling, el medio básico débil (HNaCO3) y el
estabilizante (citrato sódico) usados hacen que
este test sea más sensible y estable.
Prueba de Yodo: El reactivo de Lugol que contiene
una mezcla de yodo y yoduro permite reconocer
polisacáridos, particularmente el almidón por la
formación de una coloración azúlvioleta intensa y
el glicógeno y las dextrinas por formación de
coloración roja.
Prueba xantoproteica: Los anillos aromáticos
presentes en algunos aminoácidos reaccionan
con ácido nítrico concentrado
formando nitroderivados de color amarillo o
anaranjado por lo cual esta reacción permite
reconocer la presencia de Tirosina, Fenilalanina y
Triptófano.
Reactivo de Biuret: Los péptidos y proteínas
producen una reacción coloreada muy usada para
la valoración de estos, llamada reacción del Biuret.
Las proteínas por sus uniones peptídicas
reaccionan con los iones cúpricos del reactivo en
medio alcalino formando un complejo de color
violeta.
Técnica del sudam III: El sudam III es una solución
que se usa en el laboratorio para el
reconocimiento del lípido (grasas), por lo tanto, es
soluble en ellas predominantemente utilizado para
colorear triglicéridos en secciones congeladas de
micrótomos, pero también pueden colorear
algunos lípidos en secciones con parafina.
Nitrato de plata: El nitrato de plata es un
compuesto inorgánico con la fórmula química
AgNO3. Este compuesto es un precursor versátil
para muchos otros compuestos de plata, tales
como los utilizados en la fotografía. Es mucho
menos sensible a la luz de los haluros.
METODOLOGÍA
A) Prueba para azucares reductores
Se tenían seis tubos de ensayo con 3 ml de (agua,
glucosa 2%, miel 2%, almidón 0,5 %, sacarosa y
la muestra problema, en este caso fue un
energizante llamado “vive 100”).
Se añadieron tres gotas de reactivo Benedict’s a
cada tubo de ensayo, se calentó por un minuto
cuidadosamente. Se mantuvo un movimiento de
muñeca para evitar el derrame de la muestra
B) Prueba para almidones
Se tenían seis tubos de ensayo con 3 ml de (agua,
glucosa 2%, almidón 0,5 %, sacarosa, extracto de
papa y “vive 100”).
Se añadieron tres gotas de reactivo Lugol a cada
tubo de ensayo, se agito. cuando la reacción torno
color (azul oscuro, morado o negro) la prueba fue
positiva (+). Negativa (-) si la reacción tornaba un
color diferente.
C) Prueba para proteínas
Se tenían cinco tubos de ensayo con 3 ml de
(agua, albúmina de huevo, gelatina sin sabor 3%,
leche entera, “vive 100”).
Se añadieron tres gotas de reactivo Biuret a cada
tubo, se agito. Cuando se formó un anillo de color
lila la prueba fue positiva (+) e indica que la
muestra tiene proteína.
A) Prueba Xantoproteíca
Se tenían cinco tubos de ensayo con 3 ml de
(agua, albúmina de huevo, gelatina sin sabor 3%,
leche entera, “vive 100”).
Se manejo con mucha precaución el ácido nítrico.
Se añadieron tres gotas del ácido por las paredes
de cada tubo de ensayo, se calentó por un minuto
manteniendo un ligero movimiento de muñeca
para evitar el derrame de la muestra.
B) Prueba para lípidos
Se tenían cinco tubos de ensayo con 5 ml de
(agua, aceite, agua más aceite, leche entera “vive
100”).
Al tubo de ensayo con 5 ml de agua se le añadió
diez gotas de aceite y se siguió el siguiente
procedimiento.
Se añadieron tres gotas de SUDAM III a cada tubo
y se agito, luego se observó si se formaron gotas
coloidales de color rojo, si esto ocurre la prueba
fue positiva (+).

C) Prueba de sales
Se tenían cuatro tubos de ensayo con 3 ml de
(agua, NaCl 3%, suero fisiológico y “vive 100”).

Se manejo con mucha precaución el nitrato de

plata. Se añadieron tres gotas de dicho compuesto
a cada tubo de ensayo, se calentaron los tubos de
ensayo de tres a cinco minutos. Se forma un
precipitado de color blanco.
RESULTADOS
A) Prueba para azúcares reductores:
Se tomaron 5 muestras de 3 ml con distintos
contenidos que se le agrega tres gotas de
reactivo de Benedict’s y se somete a un
calentamiento de un minuto por muestra. Si
alguna de estas muestras da un color de amarillo
ladrillo significa que tiene positivo para azúcares
reductores, de lo contrario será de otro color.
Figura 1. Resultados de la pruebas
La glucosa, la miel y el almidón resultaron que
contienen azúcares reductores gracias a su color
amarillo ladrillo.
B) Prueba para Almidones:
Se tomaron 5 muestras de 3 ml con distintos
contenidos los cuales se le agrega tres gotas de
reactivo de Lugol por muestra. Si alguna de estas
muestras da un color de azul intenso significa que
tiene positivo para almidones, de lo contrario será
de otro color.
Tabla 2. Resultados para prueba B
TUBO MUESTRAS RESULTADO COLOR

Tabla 1. Resultados para prueba A. 1 agua negativo rojo

caramelo
TUBO MUESTRAS RESULTADO COLOR 2 glucosa 2% negativo rojo
caramelo
1 Agua Negativo No
cambió 3 sacarosa negativo rojo
2 Glucosa 3% Positivo amarillo 2% caramelo
ladrillo 4 almidón 0.5 positivo negro
%
3 Miel 2% Positivo Verde 5 extracto de positivo negro
papa
4 Almidón 0.5 Positivo Amarillo
6 vive 100 negativo no
% ladrillo
cambió
5 Sacarosa 2 Negativo No
% cambió
6 Vive 100 Negativo No
cambió
Figura 2. Resultados de la prueba B
Tabla 4. Resultados para la prueba C-2
El mismo almidón y el extracto de papa dieron TUBO
positivos para almidones gracias a su color oscuro MUESTRAS RESULTADO COÁGULO
o azul intenso. 1 Agua negativo no se
C) Pruebas para proteínas: formó
1- Biuret 2 albúmina de positivo sí, amarillo
Se tomaron 5 muestras de 3 ml con distintos huevo
contenidos los cuales se le agrega tres gotas de
reactivo de Biuret por muestra. Si alguna de estas 3 gelatina sin negativo no se
muestras forma un anillo lila en la superficie sabor 3% formó
significa que tiene positivo para proteínas, de lo 4 leche entera positivo sí, amarillo
contrario será que no contiene de estas.
5 vive 100 negativo no se
Tabla 3. Resultados para la Prueba C formó

TUBO MUESTRAS RESULTADOS COLOR

1 agua negativo azulado

completo
2 albúmina de positivo anillo
huevo azulado

3 gelatina sin positivo anillo lila

sabor 3%
4 leche entera positivo anillo
azul
5 vive 100 positivo anillo
azulado
fuerte

Figura 4. Resultados de las pruebas C2

La albúmina de huevo y la leche dieron positiva
con xantoproteínas por su correspondiente
coágulo amarillo al principio de la solución.

D) Prueba para lípidos:

Se tomaron 5 muestras de 5 ml con distintos
contenidos los cuales se le agrega tres gotas de
Sudam III por muestra. Si alguna de estas
muestras forma micelas (partículas coloidales) en
la solución significa que tiene positivo para lípidos,
de lo contrario será que no contiene de estas.
Figura 3. Resultados de las pruebas C. Tabla 5. Resultados para prueba D
La albúmina de huevo, la gelatina sin sabor, la TUBO PARTÍCULAS
leche y el vive 100 dieron positivo para proteínas, MUESTRAS RESULTADO COLOIDALES
gracias a la formación del anillo.
1 Agua Negativo No se formó
2- Xantoproteínas
Se tomaron 5 muestras de 3 ml con distintos 2 Aceite Positivo Se formó
micelas (todo)
contenidos que se le agrega tres gotas de ácido
Nítrico (HNO y se somete a un calentamiento 3 Agua + Positivo Se formó
de un minuto por muestra. Si alguna de estas Aceite (10 micelas en la
muestras da un coágulo amarillo significa que gotas) oleasa
tiene positivo para xantoproteína, de lo contrario 4 Leche Positivo Se formó, un
será de otro color. poco
 5 Vive 100 Negativo No se formó Figura 6. Resultados de las pruebas D
El Cloruro de Sodio, el suero fisiológico y el vive
100 da positivo para sales gracias a la formación
del precipitado blanco en la solución. El vive 100
presentó una separación diluido de fase.

DISCUSIÓN DE RESULTADOS

Con la experiencia realizada se estudiaron los

comportamientos de las macromoléculas de la
siguiente forma:
DETERMINACIÓN PARA AZUCARES
REDUCTORES:
Se realizo la determinación de azucares
reductores en seis patrones distintos: agua,
glucosa 2% miel 2% almidón 0,5%, sacarosa 2%
Figura 5. Resultados de las pruebas D y una muestra problema de una bebida
El aceite, el (agua + aceite) y la leche entera dieron energizante “vive 100”
positivo de contener lípidos gracias a las micelas El nombre de azucares reductoras se debe al
formadas en la solución. comportamiento que tienen los azucares en
E) Pruebas para sales: presencia de agentes oxidantes, lo cual explica
Se tomaron 4 muestras de 5 ml con distintos porque se utiliza el reactivo de benedict ya que es
contenidos que se le agrega seis gotas de ácido una reacción de oxidación, es decir, que en un
Nítrico (HNO y se somete a un calentamiento medio alcalino el ion cúprico (Cu+2) es capaz de
de tres a cincos minutos por muestra. Si alguna de reducirse por efecto del grupo aldehído del azúcar
estas muestras da un precipitado blanco significa (R-CHO) a la forma de Cu+. El cambio visual que
que tiene positivo para sal, de lo contrario será de presenta es la transformación de una solución
otro color. azulada a un precipitado rojo ladrillo indicando la
formación del óxido cuproso (Cu2O). Como se
Tabla 6. Resultados para la prueba E observa en la figura 1, se puede decir que la
muestra de glucosa al 2% (tubo 2) y la miel al 2%
TUBO MUESTRAS RESULTADO PRECIPITADO
(tubo 3) dieron positivas por la formación del
1 Agua Negativo No se formó precipitado amarillo ladrillo, debido presencia de
azucares reductores como glucosa, y fructosa en
2 NaCl 3% Positivo Se formó el caso de la miel que está constituida
precipitado normalmente por estos dos disacáridos, los cuales
color blanco presentan sus OH libres. A pesar de que en la
3 Suero Positivo Se formó imagen se vea de otro color cabe destacar que
fisiológico precipitado luego del calentamiento la reacción continúo
color blanco hidrolizándose. A su vez el agua y el almidón de
4 Vive 100 Positivo Se formó 0,5% dan negativos debido a que no hay
precipitado presencia de azucares reductores en su
color gris estructura. En el caso de la Sacarosa al 2% a
pesar de que es un disacárido, es uno formado por
glucosa + fructuosa que se une por medio de los
carbonos sin dejar opción de carbonos
anoméricos por lo cual no es un azúcar reductor.
Por último, la muestra problema dio negativo, lo
que indica que el azúcar presente es sacarosa y
no glucosa o fructosa debido a que no se presentó
la formación de ningún precipitado amarillo ladrillo,
Como lo dice la etiqueta del producto, este tiene
azucares en su composición, pero no de origen
reductor.
DETERMINACIÓN PARA ALMIDONES.
Con la reacción del Lugol se puede identificar de
modo general polisacáridos, pero de modo
específico entre uno de ellos se encuentra el
almidón, este al ponerse en contacto con el lugol
presenta una coloración violeta, esto se debe a
que cuando el lugol reacciona con las dos
estructuras que forman el almidón ,con la amilosa
proporciona un color azul y cuando reacciona la
amilopectina con lugol proporciona un color rojo
y la combinación de estos dos colores nos
proporciona el color azul oscuro, característico
para la identificación del almidón. Es por esto que
se observa que las muestras en los tubos 4 y 5
dieron positivas, siendo estas; almidón al 2% y
extracto de papa, respectivamente. El tubérculo
de la papa contiene en sus células granos de
almidón, por lo cual para extraerlo se debe triturar
la papa para que los granos de almidón se liberen.
La respuesta positiva para estas dos muestras que
en esta reacción el yodo entra a la estructura
helicoidal del almidón, es decir, que los átomos de
yodo se introducen entre las espirales provocando
la absorción o fijación de yodo en las moléculas
del almidón en la amilosa. Mientras que el agua
dio negativo ya que no es un polisacárido. La
muestra problema a su vez dio negativa, indicando
que no tiene presencia de almidones en su
estructura.
DETERMINACIÓN PARA PROTEÍNAS
El Reactivo de Biuret es aquel que detecta la
presencia de proteínas, péptidos cortos y otros
compuestos con dos o más enlaces peptídicos en
sustancias de composición desconocida, debido a
la coordinación que tiene. Es por eso que al
contacto con proteínas se genera un anillo de color
lila. Como se puede observar en la figura 3 en los
tubos 2 y 3 hay presencia de un anillo color lila,
indicando positivo para proteínas. De las 5
muestras ensayadas solo estas dos dieron
positivas, albumina de huevo y gelatina sin sabor
respectivamente. El caso de la albumina de huevo
que en su composición presenta la mayor
proporción de proteínas y la muestra de gelatina
sin sabor al 3% por su parte dio positivo ya que es
una proteína compleja. Por último, al estudiar la
muestra problema se observa que no se forma
anillo, deduciendo así que la bebida energizante
“vive 100” no tiene presencia de proteínas.
Por otra parte, se realizaron pruebas para la
determinación de las Xantoproteínas. Como las
Xantoproteínas estas conformadas por
aminoácidos como el triptófano y la tirosina, se
identifican con HNO3 debido a que el ácido es
capaz de detectar los anillos bencénicos de estos
aminoácidos. De las cinco muestras realizadas se
observa que la albumina de huevo y la leche
entera presentan en sus estructuras este tipo de
proteínas, debido a la presencia de un coágulo de
color amarillo presente luego de calentar durante
1 minuto. El agua, la gelatina sin sabor y la
muestra problema “vive 100” dan como resultados
que no presentan xantoproteínas en sus
estructuras, debido a que no presentaron
cambios.
DETERMINACIÓN PARA LIPIDOS
Los indicadores para grasas son más solubles en
las propias grasas que en el medio en el que van
disueltos. Así, El indicador Sudam III al estar en
contacto con la grasa hace que este se vaya
cargando del colorante. El reconocimiento que se
da en los lípidos se basa en la no polaridad que
presenta la molécula, es por ello que se observa
la formación de micelas, indicando como positivo
la presencia de lípidos, como es el caso del tubo 2
con la muestra de aceite, al agitar el tubo se
pueden observar la formación de micelas. El tubo
3 con la presencia de la mezcla de agua y aceite,
se observa la formación de micelas en la parte
oleosa indicando positivo para lípidos, ya que por
parte acuosa no se observó ningún cambio. El
tubo 4 con la presencia de leche, se observaron
muy pocas micelas formadas debido a que las
leches comerciales, después de pasar por tantos
procesos les quitan prácticamente toda la grasa. Y
por último para la muestra problema no se observó
ningún cambio, indicando que no presenta lípidos
el “vive 100”.
DETERMINACIÓN PARA SALES
De las moléculas inorgánicas se encuentran, el
agua y algunas sales y para la determinación de
las sales se utiliza AgNO3 que en presencia con
sales forma un precipitado blanco característico.
En la experiencia se pudo observar que luego de
calentar los cuatro tubos con muestra, el único que
no presento cambios fue el tubo 1 (agua), mientras
que en los otros tres; NaCl al 3%, muestra de
suero fisiológico y la muestra problema “vive 100”
presentaron un cambio con la formación de un
precipitado blanco, indicando así la presencia de
sales, como se observa en la figura 6 la muestra
problema presenta un color grisáceo, pero al agitar
se puede observar la presencia del precipitado
blanco, solo que ese color enmascaro la presencia
del precipitado blanco.
CONCLUSIONES
PREGUNTAS ADICIONALES
1) Explique: ¿Por qué en la prueba de
azucares reductores la muestra para miel
 da positiva, mientras que para la sacarosa
da negativa?
La diferencia radica en la composición de la
miel comparada con la sacarosa, mientras que
la constitución de la miel esta basada en
glucosa y fructosa (monosacáridos) la
sacarosa (polisacárido)
2) Analice y escriba: ¿por qué la muestra de
gelatina da positivo con el reactivo de
Biuret pero negativa con el acido nítrico, si
en ambos casos se determina proteínas?
Existen varios métodos para la identificación de
proteínas, en este caso el de Biuret y el de
xantoproteícas , pero a pesar que ambas
determinan proteínas la prueba de las
xantoproteícas determina los aminoácidos
triptófano y tirosina y en la composición de la
gelatina los valores son muy bajos por lo cual la
prueba no da positivo.
3) Consulte: ¿Qué función cumplen:
carbohidratos, lípidos y proteínas en las
células
carbohidratos: Los carbohidratos tienen varias
funciones en las células. Ellos son una excelente
fuente de energía para las distintas actividades
que ocurren en nuestras células. Algunos
carbohidratos pueden tener una función
estructural. Por ejemplo, el material que mantiene
a las plantas de pie y da a la madera sus
propiedades resistentes es una forma del polímero
de glucosa conocida como la celulosa.
Lípidos: Una función principal de los lípidos es la
formación de las membranas biológicas. Las
células están rodeadas por una capa fina de
lípidos. Esta capa está formada por un tipo
especial de lípido que tiene tanto propiedades
hidrofóbicas como hidrofílicas. Las puntas
hidrofílicas de estas moléculas se enfrentan al
espacio dentro y fuera de las células, el cual es
acuoso.
Proteínas: Ellas ayudan en el transporte de
materiales a través de las membranas celulares.
Un ejemplo sería la absorción de la glucosa desde
el flujo sanguíneo a las células. Regresaremos a
discutir sobre esta habilidad importante cuando
hablemos sobre la resistencia de las células
cancerosas hacia los agentes quimoterapeúticos.
4) ¿Cómo se forman las micelas en los
lípidos?
Las micelas tienen una parte hidrofóbica, que está
en el interior y otra hidrofílica en su exterior. La
gran ventaja está en que pueden transportar
moléculas insolubles en un medio acuoso. Sin las
micelas ninguna sustancia insoluble en agua
podría transportarse a través de un solvente polar
como el agua. Las micelas son los transportadores
ideales ya que tienen la capa externa hidrofílica y
el interior hidrofóbico. Esta dualidad convierte a las
micelas en estructuras anfipáticas. El nombre
anfipático hace referencia a tener la parte hidrófila
e hidrófoba a la vez
5) Mencione al menos tres tipos de sales
necesarias para el funcionamiento del
organismo humano y diga cuál es su
importancia.
Calcio: Es el principal componente del esqueleto.
Además, son importantes en funciones
metabólicas, como la función muscular, el
estímulo nervioso, actividades enzimáticas y
hormonal.
Hierro: La principal función es el transporte de
oxígeno a varios sitios del cuerpo. La hemoglobina
en los eritrocitos es el pigmento que lleva el
oxígeno de los pulmones a los tejidos.
Zinc: Es un elemento de esencial importancia em
la nutrición humana. Se encuentra en muchas
importantes y esenciales para el metabolismo. La
mayoría del zinc se halla en el
esqueleto, pero también en otros tejidos (piel y el
cabello y en algunos órganos
como la próstata.
6) Explique el por qué de la composición de
la muestra problema
VIVE 100 COMPONENTES:
Agua carbonatada, azúcar, ácido cítrico, taurina
(300 mg/100 ml), saborizantes naturales e
idénticos al natural, citrato de sodio, ácido
ascórbico, benzoato de sodio y sorbato de potasio,
EDTA di sódico cálcico, cafeína, color natural
caramelo IV, extracto natural de té verde (min.
0.005%), niacina, ácido pantoténico, vitamina B6,
vitamina B12, carotenos naturales.
Se escogió el vive 100 como muestra problema
por su contenido de 18 ingredientes en total, entre
ellos, taurina, cafeína, té verde, aditivos artificiales
y naturales, vitaminas (C, B3, B5, B6, B12),
grandes contenidos de azúcares y compuestos
con sales como el (Na3C6H5O7) Citrato de Sodio
y C7H5NaO2 (Benzoato de Sodio). Y el EDTA
(ácido etilendiaminotetraacético) di sódico cálcico
que es un aditivo usado como agente secuestrante
que frecuentemente lo usan las bebidas con gas.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Astrid Serrano., Manual de prácticas de
biología. Tercera edición (2016) pag 23-32
2. Curtis H., Barnes N., Massarini A.,
Schnerck A., Biologia. Edición 7º. Editorial
Médica Panamericana (2008).
3. Bioquímica, Tercera edición 2005
recuperado:
http://booksmedicos.me/bioquimica-3a-
edicion-mathews/