Preparación y tinción de

muestrasPreparació i tinció de
mostresPreparing and staining
samples
Posted on 8 mayo, 2013 por Adrián Contreras Garrido
Para poder observar un grupo de bacterias, normalmente se prepara una muestra en un
porta que será colocado en el microscopio. La preparación de la muestra empieza por la
fijación de la muestra al porta y termina con la coloración de los organismos.
Fijación: proceso por el cual se preservan y se fijan en una posición los microrganismos de la
forma más parecida posible a la de las células vivas. Este proceso es necesario para la posterior
tinción de la muestra. Fundamentalmente, existen dos tipos diferentes de fijación.
La fijación por calor se utiliza de forma rutinaria para observar procariotas. Normalmente una
película de células (un frotis) se calienta suavemente pasando el portaobjetos por una llama. La
fijación por calor preserva la morfología global pero no las ultraestructuras.
La fijación química se utiliza para proteger las subestructuras celulares finas y la morfología
de los microrganismos más grandes. Los fijadores químicos penetran en la célula y reaccionan
con los componentes celulares, normalmente se unen a proteínas y lípidos para inactivarlos,
insolubilizarlos e inmovilizarlos. Las mezclas comunes de fijadores contienen sustancias como
etanol, ácido acético, cloruro de mercurio, formaldehído y glutaraldehído.

Colorantes y tinción simple: Los numerosos tipos de colorantes utilizados para teñir
microorganismos tienen dos características en común: contienen grupos cromóforos, grupos
con dobles enlaces conjugados que dan al colorante su color, y pueden unirse a las células por
medio de enlaces iónicos covalentes o hidrófobos. La mayoría de colorantes se utilizan para
teñir directamente el objeto de interés pero algunos colorantes como la tinta china y la nigrosina
se utilizan en tinciones negativas, en las que lo que se tiñe no es la célula si no el fondo, las
células aparecen como objetos brillantes en un fondo oscuro.
Los colorantes que se unen a las células por interacciones iónicas son los más utilizados. El pH
puede modificar la eficacia de tinción de estos colorantes ya que la naturaleza y cantidad de
cargas en los componentes celulares varía con el pH.
Per poder observar un grup de bacteris, normalment es prepara una mostra en un porta que serà
col · locat al microscopi. La preparació de la mostra comença per la fixació de la mostra al
porta i acaba amb la coloració dels organismes.
Fixació.
Procés pel qual es preserven i es fixen en una posició els microorganismes de la manera més
semblant possible a la de les cèl · lules vives. Aquest procés és necessari per a la posterior
tinció de la mostra. Fonamentalment, hi ha dos tipus diferents de fixació: la fixació per calor y
la fixació química.