Protocolo de Muestreo-Cathalac PDF

MANUAL
DE
MUESTREO
CENTRO DEL AGUA DEL TRÓPICO HÚMEDO

PARA AMÉRICA LATINA Y EL CARIBE
Protocolo de muestreo, transporte y conservación de
muestras de agua con fines múltiples
Centro del Agua del Trópico Húmedo para América Latina y el Caribe (CATHALAC).
Dirección de Investigación Aplicada y Desarrollo (DIAD)
Manual elaborado por:
M.Sc. Tania Itzel Maure Campos
Química
Idoneidad: 0586
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CONTENIDO
CONTENIDO ......................................................................................................................... 3
ALCANCE ............................................................................................................................. 4
JUSTIFICACIÓN ................................................................................................................... 4
OBJETIVOS DEL MUESTREO ........................................................................................... 4
REFERENCIA LEGAL ......................................................................................................... 5
CAMPO DE APLICACIÓN .................................................................................................. 5
DEFINICIONES ..................................................................................................................... 5
INTRODUCCIÓN .............................................................................................................. 6
FASE PREPARATORIA PARA LA SESIÓN DE MUESTREO...................................... 8
1. Determinación del sitio de muestreo ....................................................................... 8
2. Tipo de muestreo ..................................................................................................... 8
3. Parámetros a evaluar o analizar ............................................................................... 9
4. Recipientes y preservantes ..................................................................................... 11
5. Preparación de los equipos y el personal para el muestreo ................................... 12
6. Fotografías del punto de muestreo ......................................................................... 15
7. Salud y seguridad personal .................................................................................... 16
FASE DE RECOLECCIÓN DE LAS MUESTRAS ........................................................ 17
8. Previo a la toma formal de la muestra .................................................................. 17
9. Recolección formal de las muestras ....................................................................... 17
ALMACENAJE, TRANPOSRTE Y ENVÍO DE LAS MUESTRAS ........................... 25
10. Almacenaje de las muestras ............................................................................... 25
11. Transporte y envío de muestras .......................................................................... 25
12. Control de calidad .............................................................................................. 26
CONSIDERACIONES GENERALES PARA EL MUESTREO ..................................... 27
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ............................................................................. 29
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ALCANCE
Este documento tiene la finalidad de documentar una metodología estándar en CATHALAC, que
permita realizar un muestreo eficiente y representativo de muestras de agua con fines múltiples,
tomando en cuenta todo lo referente a los equipos para las mediciones de campo, los envases
para las muestras, los reactivos preservantes, así como el transporte y la conservación de las
muestras antes de su análisis en el laboratorio.
JUSTIFICACIÓN
El muestreo constituye el primer paso para determinar la calidad de una fuente de agua; por
tanto, las personas que realizan la recolección de las muestras y la llevan al laboratorio, se
convierten en los responsables directos de la validez de los resultados. Tomando en cuenta este
hecho, se debe asegurar la representatividad de la muestra, que no se deteriore o contamine antes
de llegar al laboratorio.
Por lo anterior expuesto, el proceso de toma de muestra (muestreo), debe realizarse con el mayor
cuidado de no contaminar la muestra, a fin de garantizar que el resultado analítico, sea fiel
representante de la composición real de la fuente de origen. Cabe añadir que de nada vale
realizar un excelente análisis, con equipos de punta, si la muestra analizada no es representativa
de la fuente original.
OBJETIVOS DEL MUESTREO
1. Obtener una parte representativa del material en estudio, para la cual se analizarán las
variables físico-químicas, biológicas y microbiológicas de interés.
2. Establecer la información mínima que se deba registrar durante las operaciones en el
campo, así como también en el momento del transporte, almacenaje y recepción de la(s)
muestra(s).
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REFERENCIA LEGAL
La elaboración de este documento, toma como base:
 Reglamento Técnico DGNTI-COPANIT 21-393-99, AGUA. Calidad de Agua. Toma de

muestras.
 Reglamento Técnico DGNTI-COPANIT 35-2000. AGUA. Descarga de efluentes
líquidos directamente a cuerpos y masas de aguas superficiales y subterráneas.
 Reglamento Técnico DGNTI-COPANIT 39-2000. AGUA. Descarga de efluentes
líquidos directamente a sistemas de recolección de aguas residuales.
CAMPO DE APLICACIÓN
Esta metodología de toma de muestras se aplicará a todos los sitios de muestreo de aguas,
cualquiera que sea su procedencia, ya sean manantiales, pozos, ríos, lagos, redes de distribución
de aguas, depósitos, otros.
DEFINICIONES
1. Muestras simples: son aquellas tomadas en un tiempo y lugar determinado, para su

análisis individual.
2. Muestras compuestas: son obtenidas por mezcla y homogenización de varias muestras
simples, recogidas en el mismo punto, pero en diferentes tiempos.
3. Muestras integradas: son las obtenidas por la mezcla de muestras simples, recogidas en
puntos diferentes y simultáneamente.
4. Muestra representativa: se obtiene cuando una porción de la muestra de agua posee las
características, lo más cercana e idénticamente posible, al cuerpo de agua muestreado.
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INTRODUCCIÓN
El punto clave a la hora de planificar una jornada de muestreo, es definir claramente el objetivo
que se pretende alcanzar con dicho muestreo. Es decir, se debe definir qué tipo de análisis se
pretende realizar o qué variables se quieren medir, por ejemplo, si es un análisis físico-químico,
biológico o microbiológico. Otro factor a tomar en cuenta, en el caso específico del muestreo de
aguas, es el uso del agua que se pretende analizar, si esta es para consumo humano, para riego,
acuicultura, ganadería, o si se quiere medir la efectividad de un proceso químico o biológico de
tratamiento de aguas residuales. El conocimiento de estos factores, define los elementos que se
requieren, además de las condiciones en las cuales se realiza el muestreo (tipo de envases,
procedimiento y cuidados para la toma de muestra, transporte, conservación, etc.).
Las técnicas de muestreo varían de acuerdo a situaciones específicas, y también con base en los
objetivos previstos del muestreo. Algunos estudios pueden requerir sólo la toma de muestras
simples o instantáneas; pero en otros casos, se necesitará recoger muestras compuestas o más
elaboradas, en tiempo y espacio.
En la figura 1, se muestra un esquema de los pasos a seguir a la hora de preparar una sesión de
muestreo y que se detallarán más adelante en este documento.
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Figura 1. Esquema a seguir en la preparación de una sesión de muestreo.
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FASE PREPARATORIA PARA LA SESIÓN DE MUESTREO
1. Determinación del sitio de muestreo
El lugar donde se realizará el muestreo es el primer punto a tomar en cuenta, ya que dependiendo
de las características del lugar, se preparará el plan de muestreo; por tanto, si se dispone de un
sistema de posicionamiento global (GPS), se debe posicionar satelitalmente la ubicación o tratar
de especificar la posición del sitio, lo más concretamente posible.
Algunas recomendaciones al preparar el plan de muestreo es conocer como mínimo, la siguiente

información:
 Identificación unívoca del sitio de muestreo. Si cuenta con fotografías o información

previa del lugar, esto le facilitará la tarea en la preparación del muestreo.
 Identificación de la muestra o conjunto de muestras (nombre, código, etc.).
 Origen de la muestra: pozo, perforación, canal, río, represa, red de distribución, otras.
 Destino de la muestra (consumo humano, animal, regadíos, etc.).
 Tipo de análisis a efectuar (físico-químico, biológico o microbiológico).
 Reactivos necesarios para la preservación, si se han de utilizar.
 Características del sitio de muestreo (accesibilidad, distancia, peligros, etc.).
 Cualquier otra información que se considere relevante y que contribuya a las buenas
prácticas de muestreo.
 Si no cuenta con información previa del punto de muestreo, se recomienda que el día del
muestreo porte un equipo GPS (Sistema de Posicionamiento Global), de tal forma que
pueda registrar las coordenadas exactas del punto de muestreo, como futura referencia.
 Es importante de igual forma tomar fotografías del lugar, las cuales, además de anexarse
a la cadena custodia, también servirán de futuras referencias de ese punto de muestreo en
específico.
2. Tipo de muestreo
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El tipo de muestreo (simple, compuesto, integrado), dependerá de los parámetros a evaluar, del
origen de la muestra, de las características del sitio de muestreo y del tipo de evaluación que se
realiza (simple monitoreo, seguimiento, calidad del agua, verificación de cumplimiento, otras).
3. Parámetros a evaluar o analizar
En este punto, hay que estar claros si el análisis que se pretende realizar es físico-químico,
biológico, microbiológico u otro tipo de análisis; pues de ello dependerá la planificación en
cuanto a equipo, envases, reactivos preservantes y otras consideraciones durante la jornada de
muestreo.
3.1. Análisis físico-químico, químico y bioquímico
El análisis físico-químico se puede realizar en campo (mediciones in situ como pH,

conductividad, oxígeno disuelto, otras); los químicos (análisis más específicos y con equipos
especiales, como por ejemplo trazas de metales totales, metales disueltos, concentraciones de
compuestos orgánicos, otros) y los bioquímicos (demanda bioquímica de oxígeno), se realizan en
un laboratorio. En base a esto, es que se determinará el tipo de envase para recolectar la
muestra, el uso o no de preservantes y las buenas prácticas de almacenamiento y transporte de la
muestra.
Como se mencionó anteriormente, las muestras de agua pueden provenir de diferentes fuentes,
ya sean superficiales (ríos, arroyos, canales, represas, lagos) o subterráneas (pozos o
perforaciones); y en definitiva, esto determinará las condiciones en que se realice el muestreo.
3.2. Toma de muestra para análisis biológico
Los análisis biológicos constituyen otro elemento clave, para evaluar la calidad de una fuente
determinada de agua; así por ejemplo, la determinación de organismos invertebrados en el agua,
nos informa de su calidad, ya que hay algunos que son sensibles a la contaminación; por tanto,
sólo se encontrarán en lugares donde la calidad del agua sea tan buena, que les permita su
sobrevivencia, estos son los llamados organismos intolerantes. También están los organismos
tolerantes, los cuales pueden subsistir en aguas con cierto nivel de contaminación. Ambos
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organismos invertebrados, tolerantes e intolerantes, se consideran bioindicadores de la calidad

del agua.
Por otra parte, un estudio biológico de los organismos presentes en el agua es costoso; a su vez,
muy impráctico para un monitoreo constante de una fuente de agua; por lo cual, en este manual,
no se incluye el procedimiento de muestreo biológico, pero si se hace énfasis en la utilidad de
este parámetro, para evaluar la calidad o no de un cuerpo de agua específico.
3.3. Toma de muestra para análisis microbiológico
La toma de muestras para un análisis microbiológico resulta de mucho más cuidado, ya que
cualquier elemento externo o interno puede convertirse en un factor de contaminación de la
muestra. Es importante saber que las especies coliformes totales y fecales, son los dos grupos
más estudiados en función de la calidad del agua; así, los coliformes totales se emplean para
evaluar la calidad higiénica del agua, mientras que los coliformes fecales, nos permiten evaluar
la calidad sanitaria.
Las recomendaciones a seguir en un muestreo para un análisis del tipo microbiológico, se

detallan a continuación:
 Sea cual sea la precedencia del agua, se deben seguir las medidas de seguridad e higiene,
que garanticen la contaminación nula de la muestra tomada. Estas medidas incluyen:
 Utilizar guantes adecuados, sin filtraciones y procurar que no contengan ningún
tipo de polvo.
 Lávese las manos con agua y jabón, antes y después de ponerse los guantes.
 Lávese las manos con agua y jabón, mientras tenga los guantes puestos, así
disminuye el riesgo de contaminación durante el muestreo.
 Si es posible, utilice una mascarilla que le cubra la boca y nariz durante el
muestreo; así evitará contaminar la muestra al estornudar, o con la saliva, al
hablar.
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 Utilice envases completamente estériles para contener la muestra (verifique que estén
sellados). Si tiene dudas de la procedencia del envase, o por cualquier razón se contamina
antes del muestreo, deséchelo.
 El envase debe estar debidamente rotulado.
 Si utiliza un muestreador comercial, procure que el mismo esté totalmente esterilizado y
que sea exclusivamente para el muestreo microbiológico.
 Si durante el muestreo se van a tomar muestras para otro tipo de análisis (físico-químico),
procure que la primera muestra sea para el análisis microbiológico.
 Las muestras para análisis microbiológico requieren un trato especial, entre ellos, el
ambiente más limpio posible.
4. Recipientes y preservantes
Como se mencionó con anterioridad, la etapa de muestreo es la que mayor cuidado requiere,
pues la eficacia y veracidad de un análisis, dependerá casi en su totalidad de este proceso; por
tanto, los recipientes que contendrán las muestras, así como el uso o no de preservantes para las
mismas, contribuirán a un buen muestreo y a mantener la representatividad de las muestras. A
continuación se presentan algunas recomendaciones con respecto a los recipientes para las
muestras.
 Exceptuando el material específico que pueda utilizarse para determinaciones especiales,

los recipientes en los cuales se recoja la muestra deberán ser de vidrio o vidrio
borosilicato, también pueden ser de plástico, preferiblemente de material resistente como
polietileno de alta densidad.
 Debe cuidarse de que los recipientes no desprendan materia orgánica, elementos
alcalinos, boro, sílice u otros materiales que pueda contaminar la muestra recogida.
 Que la absorción ejercida por sus paredes sea mínima sobre cualquiera de los
componentes de la muestra.
 Que el material constituyente del recipiente no reaccione con los componentes de la
muestra.
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 Los envases deben poder cerrar y sellar herméticamente.

 Todo el material que se utilice para la toma de muestras deberá estar escrupulosamente
limpio, siguiendo los requerimientos referidos en el Estándar Methods for Examination
of Water and Wastewater, APHA-AWWA-WPCF.
 Es importante contar con envases suficientes, incluyendo aquellos para muestras
duplicadas. Siempre se deben llevar botellas adicionales en caso de que se quiebren o se
contaminen.
Algunas muestras requieren almacenamiento a baja temperatura y/o preservación con químicos
para mantener su integridad durante el transporte y antes del análisis en el laboratorio. En cuanto
a los reactivos preservantes tome en cuenta lo siguiente:
 El uso de los preservantes, en la mayoría de los casos, sigue los lineamientos descritos
en el Estándar Methods, en caso contrario, se seguirá el procedimiento de preservación
que indique el método utilizado o el laboratorio.
 Se debe tener en cuenta que muchos de los reactivos que se utilizan para preservar las
muestras son oxidantes fuertes que pueden quemar los ojos y la piel, por tanto, deben ser
manejados con cuidado.
 Los envases para las muestras deben estar etiquetados y señalar el tipo de químico
(preservante) utilizado. Se debe asegurar que estos envases se puedan identificar
fácilmente, ya que cuando se toman las muestran en campo, se debe cuidar de no
sobrellenarlos.
5. Preparación de los equipos y el personal para el muestreo
Una vez que defina el punto exacto de muestreo y sus características, el tipo de muestreo que se
efectuará, los parámetros que se evaluarán, los envases y los preservantes, es hora de poner la
mira en otros implementos que son igualmente necesarios para que la tarea de muestreo se
realice con la mayor eficacia posible.
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5.1. Equipo de monitoreo en campo
Algunas recomendaciones básicas que debemos tomar en cuenta al preparar el equipo de campo
son las siguientes:
 Revisar y calibrar el equipo 24 horas antes del muestreo. Además se recomienda

recalibrar los medidores de pH, conductividad y oxígeno disuelto en el campo, antes de
usarlos o según las indicaciones del fabricante. Si la calibración se realiza en campo no
olvide trasladar los estándares de calibración y el manual de usuario, junto con el equipo.
 Se recomienda de igual forma, revisar todo el equipo electrónico y que las baterías
(pilas), operen apropiadamente.
 Se debe descartar las tuberías y cables agrietados o descoloridos. Si existen dudas
respecto a las condiciones de un equipo en particular, se recomienda llevar uno de
remplazo.
 Siempre se debe descontaminar el equipo antes de usar y después de que este haya estado
en contacto con alguna muestra.
5.2. Otros equipos de muestreo
Antes de realizar la tarea de muestreo propiamente dicha, debe contar con un listado del
equipamiento necesario para realizar el muestreo, dependiendo de la ubicación del sitio de
muestreo y del tipo de muestra; además, tomar otros factores externos como el clima. Algunas
recomendaciones en cuanto a este punto son las siguientes:
 Determine la cantidad de personas que realizarán el muestreo (como mínimo deben ser
dos personas capacitadas en esta labor, independientemente de otros factores).
 Coordine la forma de trasladarse al sitio de muestreo y el transporte de las muestras con
usted.
 Es importante que cuente con un botiquín de primero auxilios en todo momento.
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 Recuerde que por lo general, las muestras deben transportarse a una temperatura fría
(recomendablemente 4 °C), por tanto no olvide incluir las hieleras, esto es dependiendo
del tipo de análisis y de la cantidad de muestras que se tomarán.
 No olvide incluir la cadena custodia o cualquier otro formulario, que sean constancia de
la realización del muestreo.
 Si va a llevar cristalería (material de vidrio), tome las precauciones necesarias para
transportarla sin que ello implique el deterioro del material.
5.3. Personal para la labor de muestreo
En toda labor de muestreo es importante contar con personal idóneo, o por lo menos, que tenga
los conocimientos necesarios y la capacidad de llevar a cabo la labor.
Realizar un muestreo, no simplemente consiste en desplazarse hasta el punto de muestreo y

obtener la muestra. Quienes realizan esta labor, deben planificar con anticipación la jornada de
muestreo y tomar en cuenta para ello algunos factores como los siguientes:
 La distancia al punto de muestreo: en base a esto, debe considerar lo siguiente:

 Transporte y tipo de transporte que se requiere para llegar al sitio.
 Tiempo de permanencia en el lugar (dependiendo de la distancia, pueden
necesitar más de un día).
 Si la jornada de muestreo dura más de un día, hay que pensar en un lugar donde
hospedarse (recomendablemente, que esté cercano al punto o puntos de
muestreo), además de la alimentación de las personas encargadas de la labor de
muestreo.
 Personal responsable de la jornada de muestreo: dependiendo del tipo de muestreo, de
la fuente de agua, de la accesibilidad al punto de muestreo y de la cantidad de muestreas
a recolectar, se asignará el personal; sin embargo, es recomendable que sean como
mínimo dos personas las encargadas de realizar el muestreo.
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 Equipo para el monitoreo in situ: la persona a cargo del muestreo debe verificar que el
equipo esté debidamente calibrado, con suficiente carga, con sus estándares
reglamentarios; y de ser posible, un equipo de reemplazo por cualquier emergencia.
 Botellas para la recolección de las muestras: se debe verificar que se cuente con todas
las botellas necesarias para la recolección de muestras, ya sean plásticas o de vidrio, y lo
que es muy importante, se debe incluir botellas extras, por cualquier eventualidad.
Además, también hay que verificar que las botellas estén identificadas, sobre todo
aquellas que requieren la adición de un reactivo para preservar las muestras.
 Reactivos para preservar las muestras: En ocasiones, y dependiendo del tipo de
muestreo y de los parámetros a analizar, se recomienda la adición de un reactivo
preservante, el cual puede agregarse antes o después de recolectada la muestra. Quien
sea el responsable del muestreo debe tomar esta decisión.
 Transporte de las muestras: El responsable de la labor de muestreo debe garantizar que
las muestreas lleguen intactas al laboratorio donde serán analizadas, de tal forma que no
pierdan representatividad. Debe tomar en cuenta el que algunas muestras requieren
mantenerse a temperaturas bajas (recomendablemente a 4°C).
 Otros factores que surjan al momento: estos factores pueden estar directamente
ligados o no, con el proceso de muestreo.
6. Fotografías del punto de muestreo
Es recomendable siempre portar una cámara durante el proceso de muestreo, esto se hace con la
finalidad de fotografiar el lugar de muestreo y el muestreo en sí, ya que la cadena custodia,
además de la información que se registra en campo, debe portar anexas, fotografías de la toma de
muestra.
Las fotos del muestreo, proporcionan un respaldo que le garantiza al solicitante un muestreo
correcto; y al muestreador, un control de calidad de su procedimiento.
Se deben sacar fotos adicionales si hay un cambio significativo en los alrededores del sitio, como
una erosión excesiva del canal, construcción reciente y otros cambios biológicos y ecológicos
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que requieren documentación. En las fotos se deben destacar los aspectos que cambiarán la
calidad de la fuente del agua monitoreada.
7. Salud y seguridad personal
Antes de realizar un muestreo de calidad del agua (sea cual sea el tipo de efluente), las personas
que participarán en el muestreo, deberán estar enteradas de los requisitos apropiados
relacionados con su salud y seguridad. Debido a que muchas veces, la colección de muestras se
hace en sitios contaminados o lejos de atención médica inmediata, es importante tomar en cuenta
las siguientes recomendaciones:
 Recibir entrenamiento de seguridad personal en un nivel apropiado para los tipos de

químicos que se pueden encontrar o manejar en campo (Es recomendable portar las
fichas de seguridad de cada reactivo que se lleve al muestreo).
 Es recomendable que las personas encargadas del monitoreo cuenten con los
conocimientos básicos de primeros auxilios, y sepan cómo responder ante cualquier
emergencia.
 Nunca salir solo al campo.
 Determinar la ubicación del hospital, clínica o médico más cercano.
 Notificar a otras personas de su itinerario y ubicaciones.
 Llevar identificación y un teléfono para comunicarse, si el área de monitoreo lo permite.
 Cuando se manejen preservantes como ácidos, siempre se deben usar lentes de seguridad,
máscara contra gases y guantes no contaminados.
 El uso de guantes es prioritario durante todo el muestreo, en especial si las muestras a
colectar son de aguas residuales, aguas residuales tratadas, o fuentes que muestren algún
tipo de contaminación.
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FASE DE RECOLECCIÓN DE LAS MUESTRAS
8. Previo a la toma formal de la muestra
Cuando se cumplan con los requerimientos estipulados en la fase preparatoria para el muestreo,
se estará listo para la recolección de las muestras.
Una vez en campo, realice el siguiente procedimiento, en el orden que se indica:
 El primer paso es determinar la ubicación exacta del punto de muestreo con un sistema de
posicionamiento global (GPS) y anotarlo en la cadena custodia.
 Seguido, haga las observaciones pertinentes de la zona, y registre las anotaciones que se
piden en la cadena custodia, con respecto a las condiciones climáticas y lo referente al
tipo de efluente; además de cualquier otra información que sea relevante durante el
proceso de muestreo.
 Luego, debe realizarse la medición de los parámetros de campo, que igualmente deben
anotarse en cadena custodia.
 Finalmente, puede proceder a la recolección de la muestra para el análisis de los otros
parámetros.
9. Recolección formal de las muestras
La recolección de las muestras tiene cuatro componentes importantes que siempre deben tenerse
en cuenta.
a. El primero y más importante es la salud y seguridad personal. Por tanto, se debe

asegurar que tanto el jefe de muestreo, así como todo el personal que está bajos su
supervisión, hayan tenido el entrenamiento apropiado de seguridad.
b. El segundo componente es la colecta de la muestra representativa. El objetivo
principal de cualquier plan de muestreo es colectar una muestra que representa la calidad
del agua a ese punto en el tiempo.
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c. El tercer componente lo constituye el control de calidad (este punto está relacionado con
la toma de blancos de muestra, blanco de reactivos y otras medidas que garanticen las
buenas prácticas durante el proceso de muestreo).
d. El cuarto componente es el mantenimiento de archivos, ya que los archivos completos y
precisos son esenciales.
9.1. Recolección de muestras para una análisis físico-químico
Un aspecto muy importante al momento de recolectar las muestras para este tipo de análisis, es
que los recipientes para muestras deben estar completamente limpios, además, cualquiera que
sea la fuente de agua, previo a la toma de muestra, por protocolo, se enjuagará el envase, por lo
menos dos a tres veces con el agua a muestrear.
Otras consideraciones que debemos tomar en cuenta de acuerdo a la fuente de agua son las
siguientes:
 Agua de red
Al momento de requerir una muestra de agua, proveniente de una red, se deben tomar en cuenta
los siguientes puntos:
 Se abrirá el grifo (pluma, llave) y se dejará que el agua corra el tiempo suficiente, de tal
forma que se garantice que atraviese toda la distancia desde el tanque de salida, hasta la
salida propiamente dicha. Este procedimiento permitirá que se elimine cualquier
contaminante en el canal de paso del agua, y que éste no interfiera en el análisis.
 El grifo de salida, debe estar conectado a la cañería principal, proveniente de la red y no
estar conectado al trayecto de otras cañerías, sistemas de filtro, ablandadores u otros
artefactos que puedan alterar la calidad del agua, proveniente de la red principal.
 Es importante también, tener el cuidado de retirar de la boca del grifo mangueras u otros
accesorios conectados a él. De igual forma, se debe verificar que el orificio del grifo esté
limpio, de no ser así, remueva todo residuo de suciedad o sustancias acumuladas en la
parte interna y en el reborde externo del mismo.
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 Agua de perforaciones o pozos
En el muestreo de aguas provenientes de pozos se debe tomar en cuenta las siguientes

consideraciones:
 Lo primero es verificar que el agua del pozo esté libre de contaminantes en la parte
superficial (sedimentos, restos vegetales, otros), que puedan interferir en el análisis.
 Se debe asegurar de extraer una muestra representativa, para lo cual un muestreo
integrado es el más recomendado. Si es un muestreo simple, se debe definir una
profundidad adecuada para extraer la muestra.
 Existen muchas formas de obtener agua de pozos a diferentes profundidades, las más
recomendadas son la utilización de muestreadores de diferentes longitudes o una bomba
de extracción con mangueras adaptables.
 Si observa en la muestra extraída, restos de impurezas vegetales o de animales, debe
descartar la muestra, ya que invalidan el análisis.
 También se deben descartar las muestras que contengan olores o productos de materia
orgánica en descomposición, ya que no son representativas.
 Verifique en campo la conductividad de la muestra de agua que extrae a la profundidad
establecida y compárela con la conductividad del agua de la superficie, ya que si el pozo
es nuevo, se puede tener una gran diferencia en la salinidad del agua. Si esto ocurre, debe
cambiar la altura o profundidad de extracción de la muestra.
 Agua superficial proveniente de un curso de agua en movimiento (río, arroyo, canal,

etc.)
Como estas aguas están en continuo movimiento y mayormente expuestas, requieren otro tipo de
recomendaciones como las siguientes:
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 Lo primero es encontrar un punto estratégico para realizar el muestreo, evitando tomar

muestras en sectores donde el agua se encuentre estancada, ya que una muestra
representativa se logra cuando el agua está en circulación.
 Es importante anotar la velocidad del flujo (lenta, media, rápida), así como también el
nivel del agua, asociado a la profundidad (bajo, medio, alto).
 Si estos muestreos son periódicos, o se realizan para un control de calidad del agua, se
debe tratar de extraer la muestra siempre del mismo punto.
 La muestra que se extrae debe ser de la superficie, a menos que ciertas condiciones
establezcan lo contrario. En este caso, fácilmente se puede tomar la muestra con la mano
(utilice guantes), si esto no es posible, puede utilizarse un muestreador comercial.
 Además de lo mencionado en el punto anterior, hay bombas de extracción, lo cual facilita
este proceso.
 Agua superficial proveniente de un espejo de agua (represa, lago, etc.)
Para este tipo de aguas, la muestra no se debe tomar ni de la superficie, ni tampoco a una gran
profundidad. Es recomendable utilizar un muestreador comercial y extraer la muestra a una
profundidad entre 15 a 30 centímetros.
 Tanque de almacenamiento
Como en el caso anterior, se debe utilizar un muestreador comercial, preferiblemente, o una

bomba de extracción, que permita obtener una muestra a una profundidad de 15 a 30
centímetros, evitando el contacto con las paredes del tanque.
 Efluente de aguas residuales crudas y tratadas
Cuando recolecte muestras de efluentes de aguas residuales o en los cuerpos receptores de éstas,
las personas que realizarán el muestreo, deben llevar equipo de protección personal (guantes,
lentes de seguridad, botas, etc.). Tome en cuenta las siguientes recomendaciones:
 La muestra siempre debe tomarse en el mismo punto dentro del efluente para asegurar la
representatividad de la misma.
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 La ubicación de puntos representativos es donde el efluente se mezcla bien con el cuerpo

receptor.
 Se toman muestras simples cuando no se espera que la concentración del parámetro varíe
significativamente en el tiempo, cuando se desea valorar eventos extremos o cuando el
analito es tal, que el procedimiento de muestreo pudiera destruir la integridad o
representatividad de la muestra, cuando la muestra debe ser enviada al laboratorio en el
envase original.
 Se recomienda muestra compuesta cuando se espera variación en el tiempo o espacio.
Las muestras simples para hacer la compuesta, deben ser de igual volumen o
proporcionales al flujo, al momento del muestreo.
 Cuando el flujo varía, se recomienda tomar muestra compuesta por flujo, por lo cual hay
que medir el flujo del efluente, preferiblemente de manera continua. Se pueden utilizar
auto-muestreadores mientras el material sea aceptable, para que no afecte el análisis.
PROCEDIMIENTO GENERAL RECOMENDADO EN LA TOMA

DE MUESTRAS PARA UN ANÁLISIS FÍSICO-QUÍMICO
1. Antes de recolectar la muestra verifique que el envase esté limpio y debidamente

identificado con el código de la muestra y otra información que permita identificarla.
2. Tomar la cantidad de muestra recomendada para cada tipo de análisis (recomendaciones
generales) o de acuerdo a las disposiciones del laboratorio donde se realizarán los
análisis.
3. Recuerde siempre enjuagar el recipiente recolector de dos a tres veces con la muestra,
aunque usted esté seguro de la limpieza del mismo (siempre y cuando la botella colectora
no contenga el preservante).
4. Llene el recipiente completamente, sin dejar cámara de aire a menos que para un ensayo
se especifique lo contrario. En este punto es importante tomar en cuenta el uso de
preservantes. Si no se adiciona el reactivo preservante con anterioridad a la toma de la
muestra, recuerde dejar el volumen necesario para el mismo.
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5. Cierre el envase asegurando que el cierre es hermético, evitando de esta forma la pérdida
de las muestra.
6. Con papel toalla o una toallita, seque el envase que contiene la muestra, para evitar la
contaminación con el remanente de la misma.
7. Guarde la muestra en un lugar fresco, o en frío, si es necesario, para su transporte al
laboratorio.
9.2. Recolección de muestras para un análisis microbiológico
Como se mencionó anteriormente, el muestreo para un análisis microbiológico debe realizarse

con extremo cuidado, pues la muestra es muy propensa a la contaminación del medio externo;
por tanto, debe ceñirse al procedimiento que a continuación se detalla, esto con la finalidad de
minimizar, en el mayor grado posible, cualquier tipo de contaminación.
PROCEDIMIENTO DE TOMA DE MUESTRA

MICROBIOLÓGICA
1. Antes de muestrear, asegúrese que cuenta con todo el equipo y material que necesita para
la toma de muestra.
2. Ya en el punto de muestreo, póngase los guantes (debidamente lavados), antes de
manipular cualquier equipo para la toma de muestra.
3. Utilice mascarilla, si cuenta con la misma, de lo contrario evite hablar o estornudar
mientras recolecta la muestra.
4. Si la muestra de agua es superficial, puede tomarla directamente con la mano, evitando
que la misma haga contacto con la fuente de agua. En este caso, proceda como sigue:
 Localice el punto exacto de donde extraerá la muestra.
 Colóquese en una posición que le permita extraer la muestra con facilidad, sin
peligro de caer en la fuente de agua o de contaminarla.
 Abra el frasco colector de la muestra (éste debe estar completamente limpio y
recomendablemente debe ser de boca ancha).
22
 El muestreo es directo y no debe enjuagar el frasco con la muestra.

 Tenga cuidado de no colocar la tapa del frasco donde se pueda contaminar.
 Colecte la muestra procurando dejar una cámara de aire, es decir, no llene el
frasco completamente.
 Tape inmediatamente, procurando un cierre perfecto.
5. Si llega a utilizar un muestreador comercial para obtener la muestra, proceda como sigue:
 Procure que el muestreador esté totalmente limpio.
 Introduzca el muestreador en el cuerpo de agua y extraiga la muestra.
 Abra la botella o el frasco colector y agregue la muestra. Recuerde que no se llana
completamente. Tenga cuidado de no contaminar la tapa.
 Tape inmediatamente, procurando un sello perfecto.
6. Con una toalla limpia o papel toalla, seque el frasco colector y almacene la muestra.
7. La muestra se debe guardar en un lugar con poca o nada de luz y a una temperatura fría
(recomendablemente de 4°C). Evite el contacto con otros elementos del muestreo u otros
tipos de muestra.
8. Traslade la muestra al laboratorio lo antes posible (tiempo máximo de dos días, pero en
condiciones ideales, el análisis debe realizarse dentro de las 24 horas de recolectada la
muestra).
Importante: Es indispensable que las muestras permanezcan refrigeradas hasta su análisis, ya

que las temperaturas mayores a 6°C y la luz, tienen como efecto la multiplicación de
microorganismos, lo cual invalida la muestra. También se debe evitar que la muestra se congele,
si esto llegara a ocurrir, los microorganismos mueren y se obtendrá un resultado de no
contaminación, cuando si puede haberla.
23
RECUERDE
Nunca:
 Nunca toque el envase por dentro.

 Nunca enjuague el envase.
 Nunca ponga la tapa del envase en el suelo, mientras colecta la muestra.
 Nunca mezcle las matrices de agua (no mezcle muestras de aguas superficiales con
muestras de aguas residuales o potable).
Siempre:
 Siempre rotule la botella antes de tomar la muestra.

 Siempre colecte la muestra para análisis microbiológico primero que para los otros
parámetros.
Si la botella estéril viene en una bolsa, solo sáquela de la bolsa cuando esté listo para colectar la
muestra y para completar los datos de la muestra en el rotulado. Algunos frascos traen un sello,
no retire el sello hasta el momento de proceder a recolectar la muestra. Si sospecha que la
muestra se ha contaminado, bótela y tome otra.
24
ALMACENAJE, TRANPOSRTE Y ENVÍO DE LAS MUESTRAS
10. Almacenaje de las muestras
Para reducir al máximo la posible volatilización o biodegradación de las muestras, entre la toma
de muestra y el análisis, se deberá asegurar que los recipientes estén herméticamente cerrados y
protegidos de la luz y el exceso de calor, ya que las aguas superficiales son susceptibles a
cambios, debido al crecimiento de microorganismos, por el proceso de eutrofización.
Según el parámetro a analizar, inmediatamente después de llenar el recipiente, agregar el

preservante y colocar la muestra en una bolsa plástica (opcional) o en una hielera, ya que deben
mantenerse a bajas temperaturas (4 °C o menos), pero por encima del punto de congelación
(0 °C) a lo largo de toda la etapa de almacenamiento, manejo y transporte.
Las muestras de control de calidad deben ser empacadas de la misma manera que el resto, para
que el laboratorio no pueda identificarlas. Se anotarán todos los números de identificación en la
libreta de campo.
11. Transporte y envío de muestras
Se notificará al laboratorio, donde se realizará el análisis, la hora de entrega de las muestras (si
es un laboratorio local), o la forma de envío (avión, barco, tren, otros), además de la fecha de
envío, si se trata de un laboratorio fuera del área local. En ambos casos debe adjuntar con las
muestras toda la información recabada en el lugar de muestreo (cadena custodia), ya sea la
propia o la que el laboratorio designe para tal fin.
11.1. Cadena custodia
Debido a que una muestra es evidencia física, se utiliza el procedimiento de cadena de custodia
para mantener y documentar la posesión de las muestras, desde la hora en que se colecta, hasta
su ingreso al laboratorio. Los formatos de cadena de custodia varían entre laboratorio, pero en
general, presentan una estructura base que es común para todos.
Si una muestra está en custodia, esto quiere decir que se tiene posesión física de una muestra,
que se tiene en vista, o se ha sellado para prevenir la falsificación; por lo tanto, el registro de un
25
formato de custodia empieza cuando se reciban los envases de muestra del laboratorio. Desde
este punto en el tiempo, un registro de formato de custodia acompañará siempre a los envases de
muestra hasta su ingreso para análisis en el laboratorio.
12. Control de calidad
Contar con un control de calidad interno permitirá entre otras cosas, garantizar la efectividad del
muestreo, además de la representatividad de la muestra, durante y después de su recolección.
Para evaluar este punto, se tomarán muestras de control de calidad, las cuales serán tratadas y
empacadas de la misma manera que el resto, para que el laboratorio no pueda identificarlas. Así,
para el control de calidad del muestreo existen los blancos y los duplicados.
 Blanco de campo: se llena un envase con una muestra de agua ultrapura en el campo, se
preserva y se transporta igual que las otras muestras. Este blanco sirve para detectar
contaminación por las condiciones de muestreo. Se puede realizar un blanco/día o un
blanco/20 muestras.
 Blanco de frasco: Antes de empezar el muestreo se toma un envase y se llena con agua
destilada y se conserva de igual forma que las muestras, se envía al laboratorio para su
análisis como una muestra más. Sirve para detectar cualquier contaminación del envase.
Se puede realizar un blanco/día o un blanco//20 muestras, o lo que de mayor frecuencia.
 Blanco de transporte: Los frascos se llenan en el laboratorio con agua ultra-pura y son
enviados al lugar de muestreo y retornados al laboratorio para su análisis. No son
manipulados en el muestreo. Este blanco sirve para detectar contaminación por fallas en
la conservación y transporte (1 blanco/hielera).
También se recomienda tomar una muestra duplicada, la cual servirá para verificar la precisión
de los análisis de laboratorio. Se recomienda tomar una muestra duplicada de una estación en la
cual se cree que hay niveles altos de un compuesto en particular. Esta muestra no es una muestra
adicional, sino, una designación especial para una que ya existe.
26
CONSIDERACIONES GENERALES PARA EL MUESTREO
1. Antes de realizar cualquier procedimiento de muestreo, defina primero el tipo de muestra

que desea recolectar (simple o puntual, compuesta, integrada).
2. Establezca un control y vigilancia del muestreo, así como el almacenamiento y el tipo de
análisis requerido, con la finalidad de asegurar la integridad de la muestra, desde su
recolección, hasta el reporte de los resultados.
3. Defina el tipo de muestreo a realizar: manual o automático.
4. Asegúrese de tener los recipientes adecuados para la recolección de las muestras y que
cumplan con el procedimiento establecido para su limpieza.
5. El recipiente muestreador se debe enjuagar con el agua a muestrear (por lo menos tres
veces).
6. La botella en la cual se almacena la muestra, también debe enjuagarse con la muestra, a
menos que para un análisis en específico, se requiera un preservante y se deba omitir este
paso.
7. Si la muestra se cambia de recipiente, se debe cuidar de que esta siga siendo
representativa.
8. Las tapas o cierre de los recipientes deben fijarse adecuadamente para evitar las pérdidas
de la muestra. Es recomendable portar papel toalla para secar los recipientes antes de
transportarlos al laboratorio.
9. Para la preservación de las muestras, solo se deben agregar los preservantes indicados en
las normas de los métodos de prueba.
10. Se recomienda que el intervalo de tiempo entre la recolección de las muestras y su
análisis, sea el menor posible. Tome en cuenta, el tiempo máximo de almacenamiento
que se establece para el análisis de cada parámetro.
11. Es muy importante tomar las debidas precauciones de seguridad e higiene en el muestreo,
en función del tipo de agua que se esté muestreando, por ello, utilice guantes al momento
de muestrear y lávese las manos repetidas veces, luego del proceso de muestreo.
27
12. Todos los equipos que se utilicen en los muestreos de aguas, para hacer un análisis in-
situ, deben estar debidamente calibrados.
13. La persona responsable del muestreo debe portar los manuales donde se incluyan los
protocolos de muestreo tanto in-situ como el muestreo para laboratorio, así como los
manuales de usuario para los equipos de medición en campo.
14. La persona responsable del muestreo debe orientar en el proceso de recolección de
muestras, si hay personal que no esté capacitado en dicho proceso.
28
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Muestreo de Aguas Residuales. Secretaría de Comercio y Fomento Industrial. Norma

Mexicana NMX-AA-003-1980. Dirección General de Normas.
2. Standar Methods For The Examination Of Water & Wastewater. 21st. Edition.
Centennial Edition. Sección 5520-B. 2005.
3. Autoridad Nacional del Ambiente. Informe de Avance (N°5). “El proyecto sobre técnicas
de monitoreo de la calidad del agua (fase II) en la República de Panamá”. Marzo 2011.
4. Aurazo, Margarita. “Manual para análisis básicos de calidad del agua de bebida”.
Organización Panamericana de la Salud. Lima, 2004.
5. Gobierno de Canarias. Dirección General de Aguas. Programa de seguimiento de las
aguas superficiales. Directiva Marco del Agua. Memoria y Anejos. España, 2006.
6. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Protocolo de muestreo, transporte y
conservación de muestras de agua con fines múltiples (consumo humano, abrevado
animal y riego). 2011.
29

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MANUAL

CENTRO DEL AGUA DEL TRÓPICO HÚMEDO

Dirección de Investigación Aplicada y Desarrollo (DIAD)

Manual elaborado por:

M.Sc. Tania Itzel Maure Campos

OBJETIVOS DEL MUESTREO

La elaboración de este documento, toma como base:

 Reglamento Técnico DGNTI-COPANIT 21-393-99, AGUA. Calidad de Agua. Toma de

1. Muestras simples: son aquellas tomadas en un tiempo y lugar determinado, para su

acuicultura, ganadería, o si se quiere medir la efectividad de un proceso químico o biológico de

procedimiento y cuidados para la toma de muestra, transporte, conservación, etc.).

elaboradas, en tiempo y espacio.

muestreo y que se detallarán más adelante en este documento.

Figura 1. Esquema a seguir en la preparación de una sesión de muestreo.

FASE PREPARATORIA PARA LA SESIÓN DE MUESTREO

1. Determinación del sitio de muestreo

Algunas recomendaciones al preparar el plan de muestreo es conocer como mínimo, la siguiente

 Identificación unívoca del sitio de muestreo. Si cuenta con fotografías o información

3. Parámetros a evaluar o analizar

3.1. Análisis físico-químico, químico y bioquímico

El análisis físico-químico se puede realizar en campo (mediciones in situ como pH,

3.2. Toma de muestra para análisis biológico

organismos invertebrados, tolerantes e intolerantes, se consideran bioindicadores de la calidad

3.3. Toma de muestra para análisis microbiológico

Las recomendaciones a seguir en un muestreo para un análisis del tipo microbiológico, se

 Exceptuando el material específico que pueda utilizarse para determinaciones especiales,

 Los envases deben poder cerrar y sellar herméticamente.

5. Preparación de los equipos y el personal para el muestreo

5.1. Equipo de monitoreo en campo

 Revisar y calibrar el equipo 24 horas antes del muestreo. Además se recomienda

5.2. Otros equipos de muestreo

5.3. Personal para la labor de muestreo

Realizar un muestreo, no simplemente consiste en desplazarse hasta el punto de muestreo y

 La distancia al punto de muestreo: en base a esto, debe considerar lo siguiente:

6. Fotografías del punto de muestreo

7. Salud y seguridad personal

 Recibir entrenamiento de seguridad personal en un nivel apropiado para los tipos de

FASE DE RECOLECCIÓN DE LAS MUESTRAS

8. Previo a la toma formal de la muestra

Una vez en campo, realice el siguiente procedimiento, en el orden que se indica:

9. Recolección formal de las muestras

a. El primero y más importante es la salud y seguridad personal. Por tanto, se debe

9.1. Recolección de muestras para una análisis físico-químico

 Agua de perforaciones o pozos

En el muestreo de aguas provenientes de pozos se debe tomar en cuenta las siguientes

 Agua superficial proveniente de un curso de agua en movimiento (río, arroyo, canal,

 Lo primero es encontrar un punto estratégico para realizar el muestreo, evitando tomar

 Agua superficial proveniente de un espejo de agua (represa, lago, etc.)

Como en el caso anterior, se debe utilizar un muestreador comercial, preferiblemente, o una

 Efluente de aguas residuales crudas y tratadas

 La ubicación de puntos representativos es donde el efluente se mezcla bien con el cuerpo

PROCEDIMIENTO GENERAL RECOMENDADO EN LA TOMA

1. Antes de recolectar la muestra verifique que el envase esté limpio y debidamente

9.2. Recolección de muestras para un análisis microbiológico

Como se mencionó anteriormente, el muestreo para un análisis microbiológico debe realizarse

PROCEDIMIENTO DE TOMA DE MUESTRA

 El muestreo es directo y no debe enjuagar el frasco con la muestra.

Importante: Es indispensable que las muestras permanezcan refrigeradas hasta su análisis, ya

 Nunca toque el envase por dentro.

 Siempre rotule la botella antes de tomar la muestra.

ALMACENAJE, TRANPOSRTE Y ENVÍO DE LAS MUESTRAS

10. Almacenaje de las muestras

Según el parámetro a analizar, inmediatamente después de llenar el recipiente, agregar el