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1.

Esquematice el proceso de electroforesis indicando todas sus etapas, desde la preparación y


extracción del ADN bacteriano, hasta el revelado de los geles

Equipo para la electroforesis

Electroforesis horizontal

Electroforesis vertical
Extraccion y preparacion de ADN por medio de electroforesis

Se prepara un gel de agarosa o acrilamida a la concentración requerida, y se mezcla con bromuro de


etidio al 1% para que con el peine se determine el espacio en donde se colocará la muestra, y se coloca
el gel en la base para que solidifique.

Se lleva a cabo un cultivo de bacterias, para poder extraer el ADN, luego se toma una muestra del
cultivo y se utilizan 3 tubos para poder conservar las muestras

se lleva a cabo la lisis de bacterias dentro de los tubos por medio de calor, luego de cierto tiempo de
ebullición, se colocan en un recipiente con hielo y se guardan en el congelador.
luego se vierte el gel dentro de la cámara de electroforesis y el buffer TBE 1x garantizando que el
buffer cubra el gel

Sobre un papel parafilm se mezclan 10 Ml de la muestra de ADN con 5 ML del buffer de carga.
Se cargan las muestras en un pozo de gel, siguiendo un orden predeterminado y se coloca la
tapadera de la cámara de electroforesis y se conecta a la fuente de poder.

Detección por tinción con un agente Transiluminador: permitirá ver el barrido


fluorescente y observación bajo la de las moléculas .
luz ultravioleta
fuente: Biomodel. Electroforesis(s.f.)

2. Indique otros colorantes y métodos de revelado para electroforesis, indicar sus ventajas y
desventajas respecto del bromuro de etidio y si poseen limitantes, y cuándo deben ser agregados
a la muestra

Colorante Ventajas Desventajas Momento de aplicación

Homodímero de · Es más afín al ADN. · Es más costoso. Antes de la


etidio · Se puede utilizar electroforesis.
una menor cantidad
de colorante.
· Es 20 veces más
sensible.

YOYO · Es más afín al ADN. Ninguna reportada Antes de la


· Es 125 veces más electroforesis.
sensible.

GelRed · Es menos tóxico Ninguna reportada Antes de la


electroforesis.
Fuente: Tietz, 2012, pp. 17-18; Susan, 2012, p. 27
3. Explicar ¿Qué es un ácido nucleico, nucleótido y nucleósido? ¿En qué forma tridimensional se
agrupa y por qué? ¿Importancia y carga de las Histonas? ¿A qué se debe la organización de las
bases nitrogenadas? ¿Cuál es la relevancia de estudiar cambios en la secuencia de nucleótidos?
• El ácido nucleico está constituido por acido desoxirribonucleico y acido ribonucleico, que son
los depositarios moleculares de la información genética. Los nucleótidos son moléculas formadas
por tres componentes característicos: una base nitrogenada (que contiene nitrógeno), una pentosa y
uno o más fosfatos. Las moléculas sin el grupo fosfato se denomina nucleósido. (Nelson & Cox, 2013)
• Una histona es una proteína que proporciona soporte estructural a un cromosoma. Las
histonas presentan cargas positivas (+) ayudan a las histonas a unirse firmemente al ADN, el cual
tiene carga negativa (-). (Ecured, 2012)
• Las bases de purina y pirimidina por la forma en que se enlazan, son complementarias entre
sí, es decir, forman parejas de igual manera que lo harían una llave y su cerradura. La
complementariedad de las bases es la clave de la estructura del ADN y tiene importantes
implicaciones, pues permite procesos como la replicación del ADN, la transcripción (generación de
ARN a partir de ADN) y la traducción del ARN en proteínas. (Estructura ADN, s.f.)
• Se denomina mutación molecular o puntual, a los cambios en la secuencia de los
nucleótidos; estas mutaciones en la secuencia del ADN pueden llevar a la sustitución de aminoácidos
en las proteínas resultantes, lo cual puede tener consecuencias severas. (Estructura ADN, s.f.)

4. Investigue sobre el uso de la electroforesis en algún campo asociado a su carrera en un artículo


científico. Haga un resumen del mismo y coloque un screenshot del encabezado del artículo.

(Hernandez,H.,Martinez,L., y Velez, H.2007).

El presente artículo demuestra como con el medicamento presenta el ingrediente farmacéutico activo
(IFA) del medicamento VIMANG® que es un polvo que se obtiene a partir de la decocción acuosa de la
corteza del árbol de mango (Mangifera indicaL.) a escala industrial y se ha empleado como suplemento
nutricional, cosmético y fitomedicamento. Se ha reportado su actividad antioxidante, analgésica y
antiinflamatoria. Por medio del desarrollo de métodos cromatográficos y de electroforesis capilar para
la separación y determinación de éstas desempeñan un papel esencial en el control de calidad de
medicinas herbales que contienen este tipo de componentes. En este trabajo se describe un método
sencillo por electroforesis capilar de zona (ECZ) validado para el análisis de mangiferina y de IFA
VIMANG® Se empleó un capilar de sílice fundida sin relleno de 56,0 cm (47,5 cm de longitud efectiva)
y 50 μm de d.i., termostatado a 25 °C con un PH de 9 a diferentes velocidades. Durante el proceso de
electroforesis no fue necesario evaluar otros parámetros electroforéticos como la adición de
modificadores orgánicos u otros aditivos al electrolito de separación, la temperatura del capilar, el
voltaje aplicado o las dimensiones del capilar, entre otros. Por otra par-te, la detección directa UV a
254 nm mostró separación del pico de mangiferina desde la línea de base, lo que no lograron otros
autores con detección electroquímica
5.
Madre Padre Hijo 1 Hijo 2 Hijo 3 Hijo 4

Gen 1 X X X

Gen 2 X X X

Gen 3 X X

Gen 4 X X X X

El Hijo 2 no es hijo de la pareja porque no contiene ningún gen del padre.

Referencias
1. Hernandez,H.,Martinez,L., y Velez, H.(2007). Determinación cuantitativa por electroforesis
capilar de zona de mangiferina en ingrediente farmacéutico activo VIMANG CENIC,38(2).
2. Susan, C., Miller, H. & Witherdrow, D. (2012). Molecular Biotechnology Techniques: A
classroom laboratory manual. San Diego: Elsevier.
3. Tietz, D. (2012). Nucleic Acid Electrophoresis New York: Springer.
4. Nelson, D. & Cox, M. (2013). Principles of Biochemistry. 6th Edition. New York: W.H.
Freeman and Company.
5. Histona (2012), recuperado el 19 de abril de 2018 de https://www.ecured.cu/Histona.
6. Estructura ADN (s.f.), recuperado el 19 de abril de 2018 de
http://webs.ucm.es/info/genetica/grupod/Estruadn/estruadn.htm#Chargaff
7. Electroforesis(s.f.), recuperado el 20 de abril de 2018 de:
http://biomodel.uah.es/tecnicas/elfo/inicio.htm

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