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… ecuación 1
donde n son los moles de analito absorbidos por la fibra, Vf y Vs son los volúmenes de
fibra y de muestra respectivamente, Kfs es el coeficiente de partición del analito entre
la fibra y la muestra y C0 es la concentración inicial de analito en la muestra. En esta
ecuacion se asume que la matriz de la muestra es una única fase homogénea y no se
considera el efecto del espacio de cabeza
El modelo matemático del proceso de SPME cuando los analitos se extraen del espacio
de cabeza fue desarrollado posteriormente y las ecuaciones y conclusiones a las que
se llega son similares a las de la extracción por inmersión pero teniendo en cuenta una
tercera fase gaseosa.
… ecuación 2
5) Procedimiento de la SPME
Una tercera forma que no ha sido muy aplicada hasta la actualidad es la denominada
SPME con protección de membrana. En este modo de extracción, se coloca una
membrana semipermeable alrededor de la fibra que evita que compuestos de elevado
peso molecular, como ácidos húmicos o proteínas, que pueden estar presentes en la
matriz de la muestra lleguen hasta la fibra y puedan dañarla. El modo de extracción
HS-SPME también permite proteger la fibra de estos compuestos de elevado peso
molecular u otras interferencias no volátiles. Además permite modificar la matriz de
la muestra, como por ejemplo variando el pH, sin dañar la fibra.
Este modo de extracción es muy útil para el análisis de muestras sólidas como
sedimentos o alimentos, o muestras biológicas donde la interferencia de la matriz es
importante, pero está restringido a compuestos volátiles o semivolátiles. En la Figura
2 se muestra una ilustración del proceso de SPME por inmersión y espacio de cabeza.
En lo que respecta a la etapa de desorción, ésta se realiza térmicamente o bien por
adición de un solvente orgánico, dependiendo de la técnica analítica que se utilizará a
continuación. Así, si la SPME se acopla a la GC, la desorción se realiza térmicamente, y
si ésta se combina con la HPLC, se lleva a cabo mediante el uso de un solvente
orgánico y, en general, utilizando una interfase.
Actualmente hay fibras con diferentes recubrimientos de manera que la SPME puede
usarse para determinar un amplio grupo de compuestos. Los primeros recubrimientos
comercializados fueron los de polidimetilsiloxano (PDMS) y poliacrilato (PA) pero los
tipos de recubrimientos han ido aumentando progresivamente y actualmente cubren
un amplio conjunto de aplicaciones.
Además de las fibras comerciales, algunos autores han fabricado otros recubrimientos
para aplicaciones más específicas, como por ejemplo los de carbón, polipirrol [119] o
incluso fibras recubiertas con polímetros de huella molecular (MIPs) [120] de manera
que se consiguen fibras muy selectivas para un determinado compuesto.
Las fibras de PDMS, que es un polímero líquido, son las más utilizadas ya que fueron
las primeras fibras introducidas para SPME
Las fibras de PA, en cambio, son adecuadas para analitos polares y, aunque el
recubrimiento es un polímero sólido, su baja densidad hace que los analitos sean
absorbidos por la fibra al igual que en las fibras de PDMS.
El proceso de SPME se puede ver afectado por una serie de variables experimentales
que pueden ser modificadas para incrementar la eficacia del proceso de extracción.
Entre estas variables se encuentra la agitación de la muestra, que incrementa la
difusión de los analitos desde la matriz de la muestra a la fibra o al espacio de cabeza
por lo que se disminuye el tiempo requerido para llegar al equilibrio. Otros
parámetros importantes son el tiempo y la temperatura de extracción, así como la
modificación de las condiciones de la muestra, y los parámetros que afectan la etapa
de desorción. Estos últimos dependen de la técnica analítica que se utilice a
continuación para llevar a cabo la separación y cuantificación de los analitos.
EL TIEMPO:
Los parámetros que afectan a la etapa de desorción dependen del tipo de desorción
utilizado (térmica o por solvente orgánico). Si ésta se realiza térmicamente en un
cromatógrafo de gases, los parámetros a optimizar son la temperatura y el tiempo de
desorción. La temperatura se recomienda fijarla a la máxima temperatura de uso de la
fibra recomendada por el fabricante y el tiempo debe ser el adecuado para que la
desorción de los analitos de la fibra sea completa y no haya efecto memoria. Esto
puede suceder si el tiempo o la temperatura de desorción no son suficientes para la
desorción completa de los analitos. Cuando la desorción se realiza mediante el uso de
un solvente orgánico y fuera de línea con el cromatógrafo de líquidos, los parámetros
a optimizar son el tipo de solvente orgánico (que debe ser compatible con la fibra y
con la técnica analítica posterior) y el volumen de solvente [59]. En general, debe
utilizarse el menor volumen de solvente orgánico posible sin que se produzca efecto
memoria de forma que el factor de preconcentración sea mayor.
8) CONCLUSIONES: