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Chimoy Effio
Manual de Prácticas
I.2 INTRODUCCIÒN
Dado que la gran mayoría de reacciones en el organismo dependen del
pH resulta importante medir este valor con gran exactitud.
El pH se define como –Log [H+] = Log 1/ [H+]
En los líquidos corporales el pH se mantiene normalmente dentro de límites
muy estrechos: en el líquido extracelular es aproximadamente de 7.4; y algo
menor en el intracelular.
Otro valor ligado al pH es el pKa cuyo valor se obtiene, en la ecuación
de Herderson – Hasselbach cuando la [Sal]=[Ácido]; la concentración de la
sal es igual a la del acido:
pH = pKa + Log {[Sal]/[ac.]}, l si [sal] = [ac.] entonces pH = pka
El pKa se puede obtener experimentalmente al plotear el valor de Log [sal]
/ [ac.] vs. pH correspondiendo el valor del intercepto al pKa
La medición del pH se realiza por indicadores líquidos coloreados /
incoloros, indicadores de papel y con el pH metro. Sin embargo la forma
estricta de medir el pH es con el pH metro (que es un potenciómetro).
Antes de entrar al detalle de cómo medir el pH, recordemos que en 1909
Sorensen definió que una solución es neutra si el pH es igual a 7. Una
solución es alcalina cuando el pH es mayor que 7 y una solución es ácida si
el pH es menor que 7.
Por otro lado , debemos considerar que un acido es toda sustancia que
dona protones (H+) mientras que una base aquella que acepta protones
(OH-). Las bases y los ácidos pueden ser fuertes (ej. HCl) o débiles (ej. Ac.
Acético). La acidez de una solución está dada por [H+]. La concentración de
[H+] se expresa como la molaridad (M) {(mol de H+/ lt). Ej. Un acido
monoprotónico con 10 -6 M {mol. H+/ lt} tendrá un pH de – Log 10-6 = 6.
El método potenciométrico comprende dos tipos de análisis: a) la
medición directa de un potencial de electrodo y b) los cambios en la fuerza
electromotriz que produce la adición de un titulante.
Los eléctrodos más empleados en los pH metros son: electrodos de vidrio,
electrodos de estados sólidos y precipitados, electrodos de enzimas y
(99%) (1%)
-
[CH3COOH] [CH3COO ] + [H+]
(1%) (99%)
-
[CH3COONa] [CH3COO ] + [Na+]
-
[CH3COOH] + [CH3COO- ] + [Na+] + [OH-] sube [ CH3 COOH ]
El pH de un buffer esta dado por la ecuación de Henderson – hasselbach:
pH = pK+ log[sal]
[ac.]
los meq (volumen x normalidad) del titulante. Las graficas son diferentes,
considerando corresponda a un acido o a una base (fuerte o débil).
PROCEDIMIENTOS
A. Preparación de soluciones: (En todos los casos usar fiolas¡¡¡)
HCl 200 mM
0.73g* de ac. Clorhídrico fumante 38% ( =1.19)
Agua destilada cantidad suficiente para (csp) 100 ml
* Gramos de HCl/mL= (% del ácido)(densidad del ácido)= 0.38x1.19= 0.4522.
1 mL de ácido acético 38% contiene 0.4522 g y 1.614 mL, 0.73g.
HCL 20 mM
Tomar 10ml de HCL 200 mM y agregar agua destilada csp 100ml.
NaOH 200 mM
0.8 g de hidróxido de sólido (pesar rápidamente porque esta sustancia es
higroscópica) y añadir agua destilada csp 100 ml
NaOH 20 mM
Tomar exactamente 10ml de Na0H 200 mM y agregar agua destilada csp 100
ml
B. DETERMINACIÓN DEL pH
B.1 Método potenciométrico
Primero hay que standarizar al equipo: (ver Fig.I.2). El conmutador de
función debe estar en posición (). Colocar las pilas (parte posterior).
Verificar la caída de potencial, haciendo que el conmutador de función (B)
esté en la posición . Luego observar que la aguja se ubique en la
zona negra. Si no ocurre esto cambiar de pilas.
En un beacker de 50 ml, colocar 25 ml de una solución estándar pH
6.86; introducir cuidadosamente el electrodo de vidrio (ES UNA MEMBRANA
MUY DELICADA) y asegúrese que:
El potenciómetro de sensibilidad (A) esté en posición 60 mV/ pH y el rango
del conmutador (C) en 0-14.
Ahora cambie el conmutador de función a posición (I). Con el
potenciómetro de punto cero (D) ajuste el valor de pH a 6.86. Retorne a
la posición ().
Lave el electrodo, séquelo y cambie de solución estándar pH
9.08; si la aguja no marca 9.08 ajustar con A. EL pH METRO YA ESTÁ LISTO
PARA MEDIR pH de cualquier solución.
Electrodo
A B C D
Fig.I.2 pH metro
C. Preparación de Buffers
Buffer acetato 1M pH 3.8
Pesar 6.88 g de ac. Acético glacial ( =1.42) y agregar agua destilada 80 ml,
ajustar, con el pH metro, a pH 4.00 con acetato de sodio (sólido). Finalmente
agregar agua destilada csp 100 ml
pH = pK + Log {[sal]/[ácido]}
Ej. El pK del Ac. Acético es 4.76. Para preparar 100 mL de un buffer acetato
100 mM pH 4.00, preparamos 100 de una solución de Ac. Acético 100 mM y
una solución de Acetato-Na 100 mM. En la ecuación de Henderson-Hasselbach
remplazamos valores pH= 4.00 y pK= 4.76 4 – 4.76= log [Sal/Acido]= - 0.76
antilog (-0.76)= Sal/Acido 0.17= Sal/Acido 0.17 (Acido)= Sal. Por lo
tanto debemos mezclar 50 mL de Acido Acético + 8.5 mL de Acetato-Na.
Verificar el pH con el pH metro. Si el pH es mayor ajustar con gotas (25 µL) de
HCl 5M y si es menor con NaOH 5M, luego completar a 100 mL con agua
destilada. En la siguiente tabla damos los volúmenes de sal y ácido para
obtener los buffers acetato 100 mM pH 4,50, 5.00 y 5.50.
I.4 RESULTADOS
I.6 CUESTIONARIO
1. ¿Que otros procedimientos conoce para determinar el pK a de una
solución? Explique.
2. ¿Qué complicaciones ocurren para medir pH con el electrodo de vidrio?
3. ¿Cuál es el pH del ac. Acético 100 mM y del fosfato mono básico-K 250
mM?
4. ¿Explique como se preparan las varillas para medir pH (Merck o SIGMA?
5. ¿Que otros procedimientos sugiere usted para realizar esta practica?
I.7 REFERENCIAS