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y rtac l e a usted f o a b s t r a c t
Historia del artículo: Altamente agua-dispersable surfactante-estabilizado fe 3O4 Nano magnéticolos portadores (SMNCs)
Recibido el 10 de agosto de 2017 fueron preparados por el uno mismo-montaje del tensioactivador aniónico, sulfato del dodecil del sodio
Recibido en forma revisada 14 octubre (SDS) en hidrofóbico (ácido oleico cubierto) se investigaron las nanopartículas y sus aplicaciones
2017 aceptado 21 noviembre 2017
biomédicas. Estos nanoportadores tienen un promedio tamaño de sobre 10 nm y poseen Tunable
Disponible en línea 22 noviembre 2017
superficie cargo propiedades. La formación de un orgánica capa de SDS era evidente de la espectroscopia
infrarroja, de la dispersión ligera dinámica, del Zeta-potencial y de las medidas termogravic-métricas.
Palabras:
Estos nanoportadores fueron utilizados para la carga de anticanceroso hidrofílico e hidrofóbico agentes
Fe3O4
Entrega de como como doxorrubicina clorhidrato DOX) y curcumina (CUR), respectivamente. DOX fue conjugado en
medicamento la superficie de nanoportadores a electrostático interacción, que CUR fue encapsu-lated en la hidrofóbico
s de capa entre oleico ácido y SDS. La toxicidad y celular la internalización de los nanoportadores cargados de
nanopartícula drogas fue investigada contra la línea de células cancerosas WEHI -164. Específicamente, la droga
s Hipertermia cargamento, lanzamiento de droga sensible del pH y internalizat celularlos estudios iónicos sugieren que
Doxorrubicin estos nanoportadores son conveniente para doble drogas entrega. Además, que Mostrar buena calefacción
a magnética
capacidad bajo CA magnética fiELD, así se puede utilizar como fuente de calefacción eficaz para el
Curcumina
tratamiento de la hipertermia de cáncer.
© 2017 publicado por elSevier B.V.
2. Material y métodos
2.1. Materials
salino (PBS, pH 7,4) se prepararon usando protocolos 2.4.2. Carga y liberación de drogas estudios
estándar. Todos los productos químicos utilizado eran de La contra agentes, DOX y CUR fueron utilizado como modelo
grado ar a menos que de otra manera specified. Todo tél medicamentos para estimar el comportamiento de la carga y
las solu acuosas fueron preparadas usando el agua liberación de drogas de SMNCs. La Unión Isotherm de ambos
desionizada de un sistema de MilliQ, Corporación de fármacos fueron investigados por la solución de temblores (bajo
Millipore, los e.e.u.u. (resistividad ∼ 18 MK cm). Vortex) 1 ml de fármaco y nanoportador con 10 µg droga (10 µl
de una acción de 1 mg/ml, las soluciones comunes fueron
2.2. Síntesis de ácido oleico recubierto de fe 3O4 preparadas en agua y metanol para DOX y CUR, respectivamente)
nanopartículas magnéticas hidrofóbicas (HMNPs) y diferentes concentraciones 0, 20, 40, 60, 80, 100, 120, 140 y
2.4. Caracterizaciones
cultivo, fol-lowed lavándose con PBS. Las células fueron intensidades de pico relativas, se ha confirmed como los picos de
montadas en una diapositiva de cristal en el medio de difracción ISTIC de (220), (311), (400), (422), (511) y (440) enrejado
montaje de la célula (Invitrogen, los e.e.u.u.) que contenían Planes de espinal-estructurado Fe3O4 (JCPDS tarjeta No.: 88-0315).
DAPI para la coloración nuclear. Estas células fueron el cristalito tamaños fueron encontrado ∼ Para ser 10 nm para ambos
entonces imagendas por microscopía fluorescence (Nikon la muestras. TEM micrografía (Fig.. 1b) de SMNCs claramente
eclipse ti, Japón). Las imágenes fueron tomadas usando demostró la formación de aproximadamente esférica
filtro rojo para DOX, filtro verde para CUR y filtro azul para nanopartículas de promedio tamaño 10 nm. La enrejado claro
DAPI. flecos en la HRTEM micrografía (Fig.. 1c y Fig.. S1) con-firmed la
alta grado cristalinidad de nanopartículas. De HRTEM, el
promedio interplanar espaciado fue encontrado Para ser ∼ 0,25
2.4.4. Co-entrega de fármacos (Dox y CUR)
nm, que
Más, que han también estudiado la simultánea carga de
tanto CUR y DOX en Estos nanoportadores Para investigar
la doble capacidad de cargamento de la droga para el
coparto. Para esto, CUR fue primera cargado en la
SMNCs como mencionado encima en escala hasta
experimento y CUR-SMNCs fueron recogidos por
magnética separación. Estos CUR-SMNCs fueron
dispersos en 2,5 ml de desionizada agua y 0,5 ml de DOX
solución (de stock de 1 mg/ml) fue añadido. La encima
solu-Tion mezcla fue reaccionó por temblando y doble
drogas (CUR y DOX) los SMNCs cargados fueron
separados, y lavados cuidadosamente. La carga-Ing
apoyados de ambos drogas fueron evaluado como
mencionado encima. Ambos DOX y CUR cargado SMNc es
llamado como DOX-CUR-SMNC. La pH dependiente doble
drogas liberación estudios fueron a como similares a ese
discutido para individuales drogas cargado partículas.
Embargo, 0,1% de interpolación 80 fue añadido Para búfer
mediuSra. Para facilitar la liberación de CUR a con DOX.
Más, la citotoxicidad de CUR-DOX-SMNCs fue evaluado en
diferentes concentraciones de drogas con la controles de
respec-CIO como se discuten encima.
3. Resultados y discusión
Fig. 1. (a) patrón de DRX, (b) micrografía TEM, (c) micrografía HRTEM y (d) patrón
Saed de SMNCs.
Figura 2. (a) espectros FTIR de SDS, HMNPs y SMNCs junto con sus asignaciones pico
características (el recuadro muestra los espectros FTIR de HMNPs y SMNCs en el rango
corresponde al (311) plano de fe O. El patrón Saed (Fig. 1d) también de 2700 – 3100 cm−1) y (b) la parcela TGA de HMNPs y SMNCs.
34
confirmed la alta estructura del cristalinidad y de la espinal de 588 cm−1 en FTIR espectros de SMNCs puede ser atribuido la Fe-O Bond
SMNCs. vibración de fe3O4 nanopartículas [34]. La introducción acertada de SDS en
La capa de oleico ácido en la superficie Fe3O4 MNPs como bien HMNPs fue más evidente De TGA y medición de magnetización. TGA parcelas
como Self-Assembly de SDS en la superficie de HMNPs fue (Fig.. 2b) de ambos HMNPs y SMNCs Mostrar
explorado por FTIR y TGA medidas. Que es bien conocido que
oleico ácido ha un alto affinity para el fe3O4 a través de la
interacción química entre
el COO− grupos y átomos de fe (Fig.) S2). Como resultado, el ácido
oleico
es chemisorbed sobre la superficie de fe3O4 MNPs como oleato
que sale no polar hidrofóbico colas expuesto hacia. La buena
dispersión coloidal de Estos MNPs en orgánica hexano) medio más
progested la absorción de una sola capa de ácido oleico en la
superficie de partículas. FTIR espectros de SDS, HMNPs y SMNCs
a con sus características pico asignaciones son SHpropia en Fig.
2a. Espectro FTIR de SDS muestra bien resuelto vibracional
modos, que los de SMNCs son amplio y pocos. La aspecto de
vibracional
bandas correspondientes al estiramiento asimétrico y simétrico del S
O a 1230 y 1080 cm−1, respectivamente en el espectro FTIR de
SMNCs sugiere la presencia de SDS en partículas superficie [32].
En Además, C H estiramiento vibraciones de SDS son también
apareció En gama de 2800 – 3000 cm−1 [33]. Que es notable Para
mención que
la intensidad de C H que estira las vibraciones del SMNCs es más
alta que la de HMNPs, que apoya más lejos el uno mismo-montaje
del SDS en superficie de HMNPs (inserción de Fig.. 2a). La
profundo banda en alrededor
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Fig.. 3. un) DLS y b) pH dependiente potencial zeta parcelas de acuosa suspensión de SMNCs y c) esquema representación de Self-Assembly de SDS en la superficie de HMNPs a lo
largo con fotografías mostrando transformación de partículas De hidrofóbico Para hidrofílico medio. Inserción de Fig.. 3b muestra la variación en potencial zeta de SMNCs en
0,01 M PBS (pH 7,4).
hidrofóbico al medio hidrofílico. Mediciones de DLS sugirió que la octadecene) intercalados con la surfactante capa de nanocristal
suspensión coloidal acuosa de la forma SMNCs con el diámetro [40]. Recientemente hemos demostrado la estabilización acuosa
hidrodinámico ponderado intensidad de cerca de 190 nanómetro de laurina ácido revestido hidrofóbico Fe3O4 nanopartículas por
(Fig. 3(a). el diámetro medio observado más alto obtenido por DLS introduciendo con éxito el copolímero de ANFIFILICOS
que por TEM puede ser de la polidispersión en tamaño (d) de la TRIBLOCK, pluronic P123 sobre su superficie [41]. En estos
partículas y la d6 dependencia de la intensidad de dispersión en el Examples, la segunda capa se estabiliza únicamente alrededor la
tamaño de partícula [38, 39]. fiRST capa por hidrofóbico interacciones. Allí-Fore en el presente
FrOM Zeta-medidas potenciales (Fig. 3(b), se ha observado estudio, la formación bicapa se puede explicar como hidrofóbico
que el SMNCs demuestre el comportamiento dependiente del pH interacción entre la alifáticos cadena de oleato capa chemisorbed en
de la carga de la revocación con el punto
∼ ISO-eléctrico de 3,5. La HMNPs y la alifáticos cadena de SDS molécula.
transformación de la carga propiedad De positivo Para negativo Para explorar el uso de SMNCs como portadores del eficaces
sobre increasIng la el pH del medio puede atribuirse a la para la entrega dual de la droga, hemos investigado el
deprotosa dependiente del pH de sulfato grupos Self-Assembled cargamento y el lanzamiento de la droga comportamiento usando
en la superficie de HMNPs. Además, la potencial zeta de SMNCs DOX y CUR como modelo drogas. Fig.. 4 SHisotermas de Unión que
en 0,01 M PBS (pH 7,4) permanece casi constante con el tiempo indican el porcentaje de carga de drogas en diferentes drogas:
(inserción de Fig. 3(b) indicando la repulsión electrostática fuerte SMNCs relación. La carga de drogas en SMNCs se observó a partir
entre las partículas en medio de physic-ological. Cabe mencionar de la disminución de la fluorescence, así como absorbancia de la
que el potencial zeta observado
− de cerca de 25 mV a pH 7 y pH sobrenadante solución después eliminación de drogas cargado
7,4 es propicio para buena coloidal estabilidad de SMNCs bajo SMNCs. La curva de Unión Isotherm (obtenida de fluorescence
neutral y physiolog- iCal condiciones. Más, la coloidal estabilidad inten-dad) medidas) demostró que la porcentaje de drogas carga es
fue también evaluaron en términos de cambios en la absorbancia dependiente en la relación de drogas y SMNCs. La máximo la
de UV-Vis de SMNCs en acuoso y cultura medios como a función carga-Ing apoyados de Dox y de CUR fue encontrada para ser 82
de tiempo FIg.. S4). Inestable col-loidallas ensiones llevarán a la y 68%, respectively en drogas Para SMNCs relación de 1:10. La
sedimentación de las nanopartículas con el tiempo y la carga eficiencia (por escala hasta drogas carga experimentos) fue
consecuente disminución de la absorbancia. Sin embargo, el también confirmed de UV – VIS absorbancia estudios hIgos. S5 y
insignificant cambio en absorbancia de nuestro SMNc suspensión S6), que es en coherencia con el isotermo vinculante. Además, la
con respecto al tiempo sugiere su buena estabilidad coloidal. Así, disminución de la intensidad de color de sobrenadante drogas
creemos que la parte hidrofóbica del SDS, forma la capa robusta soluciones (obtenida después magnética separación de drogas
alrededor de la capa de oleato de HMNPs aunque hidrofóbico cargado partículas) apoya la carga de CUR y DOX Para SMNCs. La
interacción, fotografías revelar color intensidad de CUR y DOX soluciones antes y
mientras que es el grupo de sulfato hidrofílico principal (oso 3−) se después de escalar experimentos de carga de drogas en Para
extiende iONT partícula relación de 1:10 es aparecerá en inserción de Fig.. 4. Que
medio de agua que confiere un alto grado de estabilidad coloidal creer que la positivamente cargado DOX (protonada aminoácidos
a las partículas vía la vinculación del hidrógeno y la repulsión grupos de DOX induce positivo cargo) fue Conjugado en la
electrostática (Fig.. 3c). Este bicapa capa mecanismo en hierro superficie de Nega-bien cargado sulfato Grupo de nanocarrier a
óxido nanocrys-tal fue fiRST desarrollado por PEllegrino et al., interacción electrostática, mientras que el CUR que es hidrofóbico
donde la Alquilo hidrofóbico cadena de ANFIFILICOS polímero, consigue encapsulado en el interfaz hidrofóbico entre el ácido
poli (masculino Anhídrido-Alt-1- oleico y el SDS capas
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pH 5 (DOX)
pH 5 CUR)
70
pH 7,4 (DOX)
60 pH 7,4 CUR)
50
40
30
20
Figura 6. Viabilidad de las células WEHI-164 en presencia de (a) Dox y DOX-SMNCs, y
(b) CUR y CUR-SMNCs en 48 h en cultura condiciones (se es porcentaje célula
10
viabilidad calculada considerando la absorbancia del control como 100%).
0
en ácido condiciones como con Para fisiológica medio, que es
0 10 20 30 40 50 envidiable para cáncer terapia. La más liberación de DOX en pH
5 se podría atribuir al debilitamiento del electrotInterac de ático
entre Dox y grupos de sulfato parcialmente neutralizados en la
Fig. 5. Liberación perfil de drogas de DOX-SMNCs y CUR-SMNCs bajo diferentes
embalses de pH a 37 ◦C.
superficie de SMNCs. Sin embargo, el estudio de liberación del
perro atrapado ha sido realizado usando Tween-80 micelar
solución, debido a su hidrofóbico naturaleza. CUR liberación De la
FIg.. S7). La electrostático interacción de DOX con nanocarrier
surfactante bicapa ocurre principalmente a través del proceso de
también fue evidente De un aumentar en superficie − cargo
− De 25 difusión controlada [42]. Aunque la exacta mecanismo detrás la
Para 10 MV sobre reaccionar 10 µl DOX (1 mg/ml) con 1 ml acuosa
más liberación de CUR en pH 5 de nuestra nanocarrier es no todavía
suspensión de SMNCs (0,1 mg/ml), como observado en varios
claro, que Creo que Este podría se debido a dee interrupción de
otros casos informó anteriormente [9, 18, 19].
bicapa estructura en ácido pH, que acelera la drogas liberación. La
Fig.. 5 muestra la liberación perfil de drogas De DOX-SMNCs y
más liberación de CUR en ácido pH fue también informó en
CUR-SMNCs bajo diferentes depósito pH en 37 ◦C. La liberación
literatura [43, 44]. Para ejemplo, Maiti et al. [43] demonio-strated
de ambos la drogas De SMNCs sigue a tiempo dependiente
liberación Pro- que la pérdida de estabilidad de la partícula en medio ácido
file. La etapa inicial se caracteriza por una liberación rápida de fuerza el más liberación de encapsulado CUR De drogas cargado
fármaco, seguida por a lento y constante liberación de drogas. Que ZnFe2O4 nanopartículas. Zhang et al. [44] atribuido la más
ha sido observó que la tasa de liberación de CUR fue puede menor liberación de CUR al desmontaje de nanopartículas en ambiente
que la de Dox. Sobre 77% de DOX y 46% CUR fueron lanzado De ácido. Cómo-siempre, el lanzamiento de CUR de nanocarriers vía
aEspec. drogas cargado SMNCs en depósito pH 5,0, que sólo 23 y difusión es un proceso mucho más lento que el lanzamiento de
10% de liberación de DOX y CUR, respectivamente fueron DOX por el debilitamiento de Electro-Static interacción.
observado en reser-voir pH 7,4 después 56 h. Más, la liberación Se realizaron estudios de citotoxicidad para determinar los
perfil sugiere que la liberación completa de fármacos no se efectos de la DOX, CUR, DOX-SMNCs y CUR-SMNCs en viabilidad
alcanzó incluso a pH 5,0 sobre la experimental período. Que es de Células WEHI-164. Fig.. 6 muestra la viabilidad de WEHI-164
deseable Para han lento y liberación sostenida de drogas sobre a células en presencia de
largo período de tiempo para largo plazo aplicaciones terapéuticas un) DOX y DOX-SMNCs, y b) CUR y CUR-SMNCs en 48 h en
21]. En ambos casos, más comunicados de drogas son encontrado condiciones de la cultura. Desde el ensayo de torneos multimesa, se
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ha observado que ambos B. Dutta et al. / Coloides y superficies b: biointerfaces 162 (2018) 163 – 171
B. Dutta et al. / Coloides y superficies b: biointerfaces 162 (2018) 163 – 171 173
Fig.. 7. Fluorescencia microscopia imágenes de WEHI-164 células después incubación con DOX, CUR, DOX – SMNCs y CUR-SMNCs bajo cultura condiciones (DAPI fue utilizado para
tinción nuclear, rojo filtro para DOX, verde filtro para CUR y azul filtro para DAPI, Escala bar: 10 µm, magnification: 100 X).
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Reconocimiento
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