TÍTULO

ANÁLISIS DE LA ACTIVIDAD NEUROPROTECTORA DE EXTRACTOS ALCOHOLICOS DE ESPECIES

DE PLANTAS DEL PIEDEMONTE DEL CAQUETÁ Y DE LA RESERVA NATURAL UCUMARÍ-
RISARALDA
Autores
Martínez-Cotacio, Cesar A., Mosquera-Martínez, Oscar M., Trujillo-Calderón, William., Arboleda-Bustos, Gonzalo H.
Grupos de Neurociencias y Muerte Celular, Facultad de Medicina e Instituto de Genética, Universidad Nacional de Colombia

INTRODUCCIÓN
Las primeras drogas usadas para tratar condiciones patológicas del sistema nervioso central (SNC) fueron basadas en recursos naturales, especialmente en plantas. En este orden
de ideas, en el grupo de Muerte Celular de la Universidad Nacional en conjunto con el grupo de Biotecnología-Productos Naturales de la Universidad Tecnológica de Pereira se están
analizando la actividad neuroprotectora de cuatro especies de plantas del género Piper provenientes del piedemonte del departamento del Caquetá a las cuales se le han
identificado sus metabolitos secundarios; amidas, cumarinas, saponinas esteroidales, esteroles, terpenos, flavonoides y quinonas. Al igual que otras dos plantas de la familia
Euphorbiaceae extraídas de la Reserva Natural Ucumarí-Risaralda que han demostrado en estudios anteriores una alta actividad antioxidante.

METODOLOGÍA ESSAY MTT CERAMIDE 25uM

* Figure 5. Según estos datos, la C2-
Muestras de plantas. 200
ceramide a 25uM está produciendo
*** CONTROL
-Las plantas del género Piper y de la familia Euphorbiaceae fueron secadas, trituradas fallas en las CAD, reflejado en la
CERAMIDA 25 uM
para póstuma extracción de compuestos con etanol y metanol. 150 disminución de la actividad
5 ug/ml P.P

% VIABILITY
Línea celular mitocondrial a las 6 horas de
2.5 ug/ml P.P tratamiento, y una recuperación con
-La línea celular CAD fue cultivada a 37C en 5% de CO2 con medio DEMEM F-12, 100 1.25 ug/ml P.P el extracto(P.P), aunque disminuye
suplemento 10% SFB y póstuma diferenciación por 48 horas, tratamiento realizado en 5 ug/ml P.P + ceramide 25 uM en razón a la concentración del
cajas de 96 pozos, con 7000cell/pozo. Neurotóxico empleado C2-ceramide. 50 2.5 ug/ml P.P+ ceramide 25uM mismo. Dosis significativa de
1.25 ug/ml P.P+ ceramide 25uM neuroprotección a 2.5 ug/ml.
0
RESULTADOS
Hasta el presente el análisis de la actividad neuroprotectora se ha realizado con dos TREATMENT 6 H. EXTRAC ETHANOLIC P.P- CERAMIDE 25 uM
plantas en células de las línea celular CAD, aplicando C2-ceramida como neurotóxico a
25uM (6 horas),12 uM (24horas), pre-tratamiento (30 minutos) con el extracto etanólico ESSAY LDH 25 uM CERAMIDE
de Piper peltatum Ruiz & Pav (P.P) y del extracto metanólico de Acalypha diversifolia
150
Jacq (A.D) a concentraciones de (5, 2.5, y 1.25ug/ml), (10, 5, y 2.5ug/ml) CONTROL DE MUERTE Figura 6. Los datos sugieren que
respectivamente por un periodo de 6 y 24 horas. Estos ensayos fueron analizados con CONTROL las CAD con un tratamiento por 6
% RELEASE LDH

MTT y LDH. CERAMIDA 25 uM horas de C2-ceramide no está

100
5 ug/ml P.P produciendo muerte. Sin embargo a
2.5 ug/ml P.P las 24 horas si se pudo evidenciar
1.25 ug/ml P.P la liberación de LDH con una
50
5 ug/ml P.P + ceramide 25 uM tratamiento agudo de 12uM de C2-
2.5 ug/ml P.P+ ceramide 25uM cermida, pero no en los
0 1.25 ug/ml P.P+ ceramide 25uM tratamientos donde se aplicaron los
extractos(P.P)+C2-ceramida (dato
no mostrado).
ESSAY FOR 6 H. EXTRACT ETHANOLIC P.P

***
* Figure 7. La C2-ceramide a 25uM
** está produciendo fallas en las CAD,
150 reflejada en la disminución de la
CONTROL
CERAMIDA 25 uM actividad mitocondrial a las 6 horas
de tratamiento, y una recuperación
% VIABILITY

100 10 ug/ml A.D

Figure 1. Piper peltatum Ruiz & Pav (P.P)
Tomada de la zona urbana del Municipio
de Florencia-Caquetá
Figure 2. Acalypha diversifolia Jacq (AD) 5 ug/ml A.D con el extracto (A.D), aunque a lo
Tomada de la Reserva Natural Ucumarí- 2,5 ug/ml A.D contrario a lo que ocurre con el
Risaralda. 50 10 ug/ml A.D + ceramide 25uM extracto de (P.P) la actividad
5 ug/ml A.D + ceramide 25 uM neuroprotectora aumenta a la menor
2,5 ug/ml A.D + ceramide 25uM concentración probada de (A.D).
0 Dosis significativa de
neuroprotección a 2.5 ug/ml.
TREATMENT 6 H. EXTRAC ETHANOLIC A.D- CERAMIDE 25 uM

ESSAY LDH 25 uM CERAMIDE 6 HOURS

150 Figura 8. Los datos sugieren que
CONTROL DE MUERTE
CONTROL las CAD con un tratamiento por 6
% RELEASE LDH

CERAMIDA 25 uM horas de C2-ceramide no está

100
10 ug/ml A.D produciendo muerte. Sin embargo a
5 ug/ml A.D las 24 horas se pudo evidenciar la
50 2,5 ug/ml A.D liberación de LDH con una
10 ug/ml A.D + ceramide 25uM tratamiento agudo de 12uM de C2-
5 ug/ml A.D + ceramide 25 uM cermida, pero no en los
0 2,5 ug/ml A.D + ceramide 25uM
tratamientos donde se aplicaron los
extractos(A.D)+C2-ceramida. (dato
no mostrado).

Figure 3. Rotavapor Figure 4. Células de la linea celular CAD

Utilización de rotavapor para la separación del
etanol y metanol de los compuestos generales
de las Sp. de plantas
Diferenciación celular por 48 horas para inicio CONCLUSIONES
de tratamientos
-Se evidencio neuroprotección a una concentración de 2.5ug/ml en el extracto (P.P) y 2.5ug/ml en el (A.D),
dentro de las primeras 6 horas.
-La actividad neuroprotectora puede ser atribuida a los compuestos fenólicos como los flavonoides y amidas
presentes en los extractos alcoholicos.

Agradecimientos: Al grupo de Muerte Celular UNAL en cabeza del docente Gonzalo Arboleda, al docente Oscar Mosquera del Grupo Biotecnología-Productos Naturales UTP. Al docente
William Trujillo Calderón UNIAMAZONÏA