PRACTICA 3.

BIOQUÍMICAS DE LAS PROTEÍNAS

BEATRIZ EUGENIA MOLINA - 38668202

CRISTIAN ESTEBAN DIAZ URBANO

GUSTAVO CLAVIJO 1113633584

JOHANA DELGADO - 1115066424

JUAN CARLOS VALENCIA PIEDRAHITA - 1112100394

Universidad Nacional Abierta Y A Distancia

Escuela De Ciencias Básicas, Tecnologías E Ingenierías

Noviembre 16 de 2016

Palmira
Resumen

En la práctica de laboratorio, se llevaron a cabo diferentes reacciones (ensayos

cualitativos) como lo son, la reacción de Biuret y la reacción de aminoácidos
azufrados para identificar proteínas.

Abstract

In laboratory practice, different reactions (qualitative tests) were carried out, such as
the Biuret reaction and the sulfur amino acid reaction to identify proteins.

Metodología

Durante la práctica se realizaron

pruebas con muestras que
contenían: solución de albumina,
fenilalanina – leche, aceite de cocina
glucosa tradicional, y glucosa en gel.

REACCION DE BIURET

En el desarrollo de esta prueba se

utilizaron 6 tubos de ensayo los cuales
contenían 40 gotas (3ml) de solución
de albumina de huevo al 1%,
fenilalanina, leche al 1 %, aceite de
cocina, glucosa en polvo y glucosa en
gel. Luego se adiciono a cada tubo de
ensayo 5 gotas Sulfato de cobre
(CuSO4) al 1%, y posteriormente se
añade a cada tubo 2 ml de hidróxido
sódico al 20% se agitaron los tubos de
y se observaron los cambios.

Coloraciones obtenidas en la reacción de Biuret

REACCIÓN DE AMINOÁCIDOS Resultados y análisis
AZUFRADOS.
PRUEBA TUBO TUBO TUBO TUBO TUBO TUBO
Para esta reacción se usaron 6 tubos 1 2 3 4 5 6
de ensayo los cuales contenían 40
Biurtet +++ - + - - -
gotas (3ml) de solución de albumina
de huevo al 1%, fenilalanina, leche al Aminoácidos +++ - - - - -
1 %, aceite de cocina, glucosa en azufrados.
polvo y glucosa en gel. A cada tubo de
Tubo 1 albumina, tubo 2 fenilalanina, tubo 3 leche, tubo 4 aceite de
ensayo se adiciona 2 ml de solución cocina Tubo 5 glucosa en polvo, tubo 6 glucosa en gel.
de hidróxido sódico al 20%, de igual
manera 10 gotas de solución de
acetato de plomo al 5%, al finalizar se Reacción de Biuret
calentaron los tubos hasta la ebullición
se observaron los cambios. La reacción de biuret dio positiva (+++)
para la muestra de solución de
Albumina tornándose de color violeta
intenso, y para la muestra de leche al
1% un poco más tenue, lo que indica
que la prueba la dan positiva todos los
componentes que tengan 2 o más
uniones peptídicas, por lo cual es
propia de proteínas y péptidos. (De
guzman, 1988) La intensidad del color
de la reacción es proporcional, a la
cantidad de proteína en la muestra.
(Rivera, 2005) . Estructura reacción
de Biuret: (H2N-CO-NH-CO-NH2) (De
guzman, 1988)
Reacción de aminoácidos
azufrados.

Para esta reacción dio positiva (+++)

la muestra de solución de albumina la
cual después de someterla ha
ebullición forma un precipitado
negruzco de sulfuro de plomo.
(Giraldo, Chamorro, & Doria, 2010)
Coloraciones obtenidas en la reaccion de aminoácidos
Esto ocurre porque la albumina
azufrados
contiene aminoácidos como la
metionina y la cisteína que son
aminoácidos azufrados (Armstrong &
Bennett, 1982)
Estructura aminoacidos azufrados
Cisteína Metionina
PREGUNTAS
1. ¿Cuáles son los principales
métodos colorimétricos usados
en la determinación de
proteínas?
R// Biuret, Lowry, Bradford Y BCA
(Reyes & Cejudo )
2. ¿Cuál es la reacción de un alfa-
aminoácido y ninhidrina?
R// El grupo amino de los aminoácidos
puede oxidarse con un agente
oxidante suave como la Ninhidrina
para formar amoniaco. CO2 y un
aldehído. Un segundo equivalente de
Ninhidrina reacciona con la Ninhidrina
reducida y el NH3 y se forma un
producto de color azul. La formación
de complejo azul, nos indica la
presencia de α aminoácidos. (De
guzman, 1988)
3. ¿Cuál es la reacción con el
reactivo de Biuret?
R// Se basa en la formación de un
complejo coloreado entre el Cu2+
y los grupos NH de los enlaces
peptídicos en medio básico. 1Cu2+
se acompleja con 4 NH. La
intensidad de coloración es
directamente proporcional a la
cantidad de proteínas (enlaces
peptídicos) y la reacción es
bastante específica (Reyes &
Cejudo )
4. ¿Qué proteínas dan positivas
con la prueba de Hopkins-cole?
R// La reacción es una prueba
estándar y dará positiva para todas
las proteínas que contengan
el triptófano la cual da como
resultado un anillo entre violeta y
rojo en la unión de los líquidos
(Rivera, 2005)
5. ¿Cómo se manifiesta la
desnaturalización de la clara de
huevo?
R// La desnaturalización de las
proteínas consiste en una
modificación de su estructura
tridimensional (conformación
espacial) conservándose los
enlaces peptídicos, pero
 rompiéndose otros enlaces presencia de proteínas y la intensidad
comprometidos en la conformación de coloración es directamente
de dichas estructuras. Y su proporcional a la cantidad de
desnaturalización se puede proteínas presente es la muestra
manifestar a través de agentes (Reyes & Cejudo )
como:

1. La polaridad del disolvente 9. ¿Una proteína coagulada

2. El pH. podría dar la reacción del
3. La temperatura. (De guzman, Biuret?
1988)
R// Si, una proteína coagulada podría
dar la reacción de Biuret, porque el
6. Cuál de los 3 agente utilizados reactivo reacciona con cualquier
tiene mayor poder de proteína, liquida o sólida,
desnaturalización (Rivera, 2005)

R// La temperatura un aumento 10. Si se realiza la reacción del

de la temperatura destruye las Biuret sobre un aminoácido como
interacciones débiles y la Glicina .es positiva o negativa?
desorganiza la estructura de la Porque?
proteína y provoca cambios
irreversibles en las proteínas (De R// porque la glicina está formada por
guzman, 1988) un átomo de carbono central al que se
unen un radical carboxilo (COOH) y un
7. ¿Cómo podríamos saber que radical amino (NH2), y el Reactivo de
una sustancia desconocida es Biuret detecta la presencia de
una proteína? proteínas, péptidos cortos y otros
compuestos con dos o más enlaces
R// Para saber si una sustancia peptídicos en sustancias de
desconocida, es una proteína se composición desconocida.
utiliza el reactivo de Biuret es aquel
que detecta la presencia de proteínas,
péptidos cortos y otros compuestos
CONCLUSIONES
con dos o más enlaces peptídicos en
sustancias de composición Las proteínas son un componente
desconocida. (De guzman, 1988) fundamental de nuestras células , y se
agrupan de acuerdo a su
8. ¿Que coloración da la reacción
comportamiento.
del Biuret?
A través de esta práctica se pudo
R// La coloración de la reacción de
identificar el contenido de
Biuret es violeta indicando la
aminoácidos y proteínas en algunos
alimentos y 2 de las pruebas
cualitativas para identificarlos, como
son la reacción de Biuret y la reacción
de aminoácidos azufrados

BIBLIOGRAFÍA

Armstrong, F. B., & Bennett, T. P. (1982). BIOQUIMICA. Reverte S.A.S. Obtenido de

https://books.google.com.co/books?id=aDPwkniCkRgC&pg=PA71&dq=que+son+aminoaci
dos+azufrados&hl=es&sa=X&ved=0ahUKEwjI47nRl67QAhUBYCYKHbafBoAQ6AEIGjAA#v=o
nepage&q=que%20son%20aminoacidos%20azufrados&f=false

De guzman, C. m. (1988). QUIMICA DE ALIMENTOS. Cali, Colombia: Universidad del Valle.

Giraldo, G. G., Chamorro, N. L., & Doria, C. M. (2010). LABORATORIO DE BIOQUIMICA UNA VISION
PRACTICA. Armenia (Quindio): Ediciones Elizcom.

Reyes , E. F., & Cejudo , A. G. (s.f.). Métodos para la cuantificación de proteínas. Cordoba:
Universidad de Rabanales,. Recuperado el 15 de Noviembre de 2016, de
http://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-
mol/pdfs/27%20M%C3%89TODOS%20PARA%20LA%20CUANTIFICACI%C3%93N%20DE%20
PROTE%C3%8DNAS.pdf

Rivera, E. V. (2005). Practicas de Bioquimica Descriptiva. Mexico: UniSon. Obtenido de

https://books.google.com.co/books?id=xv8LNjwigGQC&pg=PA181&dq=prueba+de+biuret
&hl=es&sa=X&redir_esc=y#v=onepage&q=prueba%20de%20biuret&f=false